截短的人精子特异性乳酸脱氢酶L178X突变体丧失催化活性

精子特异性乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶C4,LDH-C4)是精子能量代谢的关键酶类之一.为了研究前期发现的1个LDH-C4基因突变(L178X)对LDH-C4功能的影响,在已构建的LDH-C4原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC的基础上,利用PCR定点诱变技术,制备了L178X突变体的原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC/L178X,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,诱导其表达.对该载体进行限制性酶切表明,插入的LDHC基因cDNA约1000bp;序列分析表明,该插入片段读框正确,带L178X突变.SDS-PAGE及免疫印迹显示,携带该载体的菌体可表达分子量约25kD的蛋白质,后者可被兔抗LDH-C4血清特异识别.乳酸脱氢酶(LDH)活性测定及活性染色表明,所表达的产物没有LDH活性.本研究成功进行了LDH-C4的1个突变体的原核表达,为研究LDHC基因突变对LDH-C4功能以及男性生育的影响奠定了基础.     

云南主要烟区烟蚜抗药性的监测

采用浸叶法测定了云南省红河弥勒、楚雄东华、昆明寻甸、丽江七河及昭通昭阳共5个烟区的烟蚜Myzuspersicae(Sulzer)种群对7种常用杀虫剂的抗性水平。结果表明,5个烟区烟蚜对甲胺磷均产生了中等或中等程度以上抗性。红河弥勒和昭通昭阳两烟区烟蚜对氧化乐果产生了中等或中等程度以上抗性;楚雄东华、红河弥勒、昭通昭阳和丽江七河烟区烟蚜对硫丹产生了中等或中等程度以上抗性。对其余杀虫剂尚处于低抗以下水平。     

新型数值分类软件X-Cluster的开发及应用

针对目前常用数值分类软件的不足,采用多种设计模式开发了新型数值分类软件X-C luster。该软件具有界面友好、操作方便、体积小、速度快、功能强大、应用范围广等特点,能够满足大多数情况下数值分类研究工作的需求,并在芽孢杆菌分类研究中得到了验证。     

胁迫诱导植物体细胞胚发生中相关基因及蛋白的研究进展

植物体细胞胚发生是一个复杂的发育过程,体细胞胚发生已成为研究植物胚胎发育过程中生理、生化、分子生物学等方面分子机理的模式系统。胁迫被认为是对体细胞胚的诱导有重要作用的因素。植物生长调节物质如2,4-D、ABA等目前认为是与胚性能力获得有关的胁迫物质。在蛋白和转录水平上对基因表达的分析中已鉴定出一些与体细胞胚发生相关的基因和蛋白。该文主要对近年来国内外有关胁迫诱导体细胞胚发生的相关基因及蛋白的研究进展进行综述。     

地胆草与白花地胆草脂溶性成分的GC-MS分析及抑菌活性研究

采用溶剂萃取法提取地胆草(Elephantopusscaber Linn.)和白花地胆草(Elephantopustomentosus Linn.)的脂溶性成分,经GC-MS分析,从地胆草中鉴定出44种化学成分,占总脂溶性成分的93.72%;从白花地胆草中鉴定出25种化学成分,占总脂溶性成分的82.08%。地胆草和白花地胆草在萜类成分含量具有显著性差异。通过滤纸片琼脂扩散法测试其抗菌活性,结果表明地胆草与白花地胆草的脂溶性成分对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和金黄色葡萄球菌均有抑制活性,且白花地胆草的抑菌活性强于地胆草。     

海南产木薯茎化学成分研究

从木薯(Manihot esculenta Crantz)茎的乙醇提取物中分离得到6个化合物,通过波谱分析,分别鉴定为呋喃(1)、肥牛木素(2)、3-吲哚甲酸(3)、3,9,13-megastigmanetriol (4)、穗花杉双黄酮(5)、yucalexin P-21 (6),其中化合物1~5为首次从该植物中分离得到。用滤纸片琼脂扩散法测定了这些化合物的抗菌活性,结果表明化合物1、3、4和6对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和金黄色葡萄球菌均有抑制作用。     

基因突变的教学设计

教学设计围绕基因突变这一核心概念,设计多样化的教学活动,让学生从实例分析入手,按照认知的规律从现象到概念,从宏观到微观来归纳总结出基因突变的概念;利用环环相扣的问题、科研资料引导学生在不断地探究、思考、分析和讨论,理解基因突变特征和基因突变的意义。     

重组斑马鱼 p8蛋白的原核表达及纯化

目的：在大肠杆菌中重组表达斑马鱼p8蛋白并纯化。方法：PCR扩增斑马鱼p8蛋白基因编码区,连接到带有6×His标签的原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-p8并转化大肠杆菌BL21（DE3）,用IPTG诱导表达;优化表达条件后用Ni^2＋柱纯化重组蛋白。结果：构建了pET-28a-p8重组质粒;目的蛋白在大肠杆菌中获得表达,亲和纯化后,SDS-PAGE显示相对分子质量为预期的12．8×10^3。结论：获得了斑马鱼p8融合蛋白,为其生物学功能研究奠定了基础。     

封包联合窄波UVB治疗寻常型银屑病疗效观察及护理体会

目的:探讨封包联合窄波UVB治疗寻常型银屑病疗效及护理方法。方法:自2010年2月至2011年8月到我院治疗的142例寻常型银屑病患者分为两组,治疗组予封包联合窄波UVB治疗并配合精心护理,对照组仅予封包治疗,两组均在治疗6周后观察症状及体征的变化。患者治疗后随访半年。结果:治疗组较对照组第4周PASI评分(4.33±3.23 vs 6.24±3.35)和第6周PASI评分(2.32±2.02 vs 3.68±2.52)明显降低,有统计学差异(P<0.05)。治疗组与对照组有效率分别为85.89%和67.19%,差异有显著统计学意义(P<0.01)。随访半年结果治疗组复发率较对照组少(P<0.05)。结论:封包联合窄波UVB治疗寻常型银屑病并配合精心护理能够取得良好的临床治疗效果。     

西安市MRSA 耐消毒剂基因qacA/B 的检测

目的:了解西安市三甲综合医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)qacA/B基因的携带情况,以便掌握其对消毒剂的耐药情况。方法:收集临床分离的152株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,采用聚合酶链反应检测qacA/B基因,并将qacA/B基因扩增产物进行测序,测序结果进行比对。结果:152株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中有11株检出qacA/B阳性,qacA/B携带率7.2%;测序结果比对发现,4株qacA的基因编码序列同一位点均有一个碱基发生突变(C→T),苏氨酸突变为异亮氨酸。结论:该地区临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中qacA/B携带率相对较低,但也存在抵抗消毒剂的风险,临床应加强消毒剂使用的管理,阻止MRSA的传播,减少感染的发生。