一则研究性实验教学的探索

研究性实验教学是为了培养学生的独立性、自主性、创造性和实践能力的一种实验教学手段 ,它改变传统的验证性实验的教法 ,不局限于教材中规定的内容 ,可根据需要课内、课外结合 ,拓展一些研究性的范围。研究性实验 ,教师只提出课题 ,或摆出某一事物的现状、困难和问题 ,让学生去设计实验方案 ,分析观察方法 ,提出假设问题 ,记录过程数据 ,归纳结论成果 ,完成实验目标。这样可充分挖掘学生的丰富想象力和创造力的潜能 ,教师在共同参与的前提下 ,只作启发、引导 ,防止不必要的失误 ,绝不包办代替。1　研究性实验课题的提出经常发现学生很喜欢…     

土壤微生物总DNA的提取和纯化

本文建立了从土壤中提取总DNA的方法,并通过改进使适合于对革兰氏阳性菌的提取。用9种性质不同的土壤进行验证,均提取到了DNA,每克干土的DNA提取量从3.30μg～13.41μg,通过透析袋回收进行纯化,纯化回收率达到65.34%,纯化后的土壤DNA可以直接扩增出16S rDNA。9种土壤的提取率从60.51%～93.45%,可以从每g干土添加362个菌体的土壤中扩增到目的条带。     

甘氨双唑钠联合苦参注射液治疗食管癌术后复发患者的临床疗效分析

目的:探究甘氨双唑钠联合苦参注射液治疗食管癌术后复发患者的临床疗效和安全性。方法:选取经食管癌术后复发62例患者,随机分成对照组与联合组,每组31例。对照组给予甘氨双唑钠治疗,联合组在对照组基础上给予苦参注射液治疗。观察并比较两组患者治疗前后血清肿瘤标记物CEA、CA19-9、Cyfra21-1及SCC水平、1年和3年生存率、临床疗效及不良反应的发生情况。结果:与治疗前比较,两组患者治疗后血清CEA、CA19-9、Cyfra21-1及SCC水平均降低(P0.05);且与对照组比较,联合组治疗后血清CEA、CA19-9、Cyfra21-1及SCC水平均较低(P0.05),3年生存率较高(P0.05),不良反应如恶心、呕吐、腹泻、肌酐升高、转氨酶升高及白细胞降低发生率更低(P0.05)。结论:甘氨双唑钠联合苦参注射液可有效提高食管癌术后复发患者的临床疗效,延长患者生存时间,且安全性较高。     

酮古龙酸菌WB0104中L-山梨糖脱氢酶的分离和性质研究

从两步法生产维生素C重要前体2-酮基-L-古龙酸(2-Keto-L-gulonic acid, 简称2-KLGA)的第二步转化菌酮古龙酸菌Ketogulonigenium sp.WB0104的细胞质中,经SP- Sepharose Fast Flow、DEAE-CL6B和凝胶过滤的方法,分离到了L-山梨糖脱氢酶(L-Sorbose Dehydrogenase , 简称SDH),质谱测定该酶分子量为60.499kd,而用凝胶过滤法测定其分子量为139.053±4.96kd,由此推测该酶为具有两个相同亚基的二聚体;辅基分析表明SDH含有辅基pyrroloquinoline quinone(PQQ).以L-山梨糖(L-Sorbose)为底物,2, 6-Dichlorophenolindophenol(DCIP)为电子受体,SDH具有明显的脱氢酶活性;以L-Sorbose为底物的Km值为23.94mmol/L.在无细胞体系中,在phenazine methosulfate (PMS)存在的情况下,SDH能将底物L-Sorbose直接转化为2-KLGA.     

RP-HPLC法测定茜草中1,3,6-trihydroxy-2-methylanthraquinone-3-O-[3-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside]的含量

首次采用反相高效液相色谱法测定茜草根中1,3,6-trihydroxy-2-methylanthraquinone-3-O-[3-O-acetyl-αL-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside]的含量.色谱柱为Purospher star RP C18色谱(250 mm×4.6mm,5 μm),流动相为甲醇:水:四氢呋喃(65:34.7:0.3),流速为1.0 mL/min,检测波长为276 nm,柱温为25℃.该方法的线性范围为0.020～0.160μg,r=0.9998,平均回收率为101.5%,RSD为2.0%(n=6).该方法测定1,3,6-trihydroxy-2-methylanthraquinone-3-O-[3-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside]含量灵敏、准确、重现性好.     

陕西韩城寒武系张夏组和三山子组三叶虫动物群

陕西韩城寒武系出露良好,化石丰富,从下寒武统上部至奥陶系为连续沉积,底部平行不整合覆盖厚约20m的霍山组石英砂岩之上。本区寒武 系主要以紫色和黄色泥页岩、泥灰岩、灰岩和白云质灰岩为主,张夏组主要以鲕状灰岩为主,夹生物碎屑灰岩,三叶虫主要有Changqingia chalcon,Changqingia luia sp.nov.,Manchuriella macar,Lianglangshania hueir ensis,Crepicephalia convexus,Eilura quadrata,Eilura(?)hanchengensis sp.nov.,Anmocarella chinensis,Dorypyge pergranosa,Dorypyge richthofeni,Liopeishania lubrica,Liopeishania marginata和Damesella paronai等。三山子组以白云质灰岩和灰质白云岩为主,在底部的白云质灰岩中产三叶虫Blackwelderia sp.,Damesops convexus和Cyclolorenzella acalle等,其中、上部未采到化石。     

人晶体膜内蛋白MPl9基因（LIM2）启动子上一个晶体特异顺式元件的鉴定

使用重叠和变异的寡核苷酸作为探针,凝胶迁移分析和竞争实验分析了LJM2转录起始位点上游-47至-32的区域,与其高度亲和结合的一个蛋白复合体看来仅仅结合到这个DNA双链区域的“敏感”位点。这个位点的序列由4个G核苷,接着7个其他核苷酸(AACCTAA)及连着另外4个G核苷组成,即GGGGAACCTAAGGGG;我们称其为Hsu元件。使用含有这个元件或相应的变异元件所构建的uM2基因启动子-CAT质粒的活性分析表明：Hsu元件是位于LJM2基因启动子之内,它是LJM2基因表达所必须的。结合到Hsu元件的反式因子存于晶体发育期间,看来是晶体特异性的。由于LIM2基因启动子并不包含一个经典的TATA盒,这个Hsu元件可能充当RNA复制酶复合体结合的位点。     

厚壳贻贝McCaspase 3-4基因的克隆及其在幼虫变态中的作用

为进一步了解细胞凋亡及其效应基因caspase-3在海洋贝类厚壳贻贝(Mytilus coruscus)变态中的作用, 研究通过RACE技术克隆并鉴定了一个厚壳贻贝caspase-3基因的cDNA全长, 并对该基因在幼虫变态中的作用进行了研究。碱基序列和氨基酸序列特征分析显示, 该基因编码的蛋白质具有典型的caspase P20和P10结构域, 但核心半胱氨酸活性位点QACXG五肽保守序列发生了突变。系统进化分析结果显示该基因与无脊椎动物Caspase-3聚在一起, 并与地中海贻贝(Mytilus galloprovincialis)caspase 3/7-4相似度最高, 因此将其命名为McCaspase 3-4。随后, 通过实时荧光定量PCR技术对该基因在成贝不同组织及幼虫变态不同时间点的表达水平进行了分析。结果显示, McCaspase 3-4在成贝外套膜和唇瓣中的表达量显著高于其他组织。肾上腺素诱导眼点幼虫变态12h后, McCaspase 3-4的表达水平出现显著上升, 并在刺激24h后达到最高, 表明该基因可能在幼虫变态早期发挥作用。利用RNA干扰技术敲降眼点幼虫McCaspase 3-4基因表达后的结果显示, 肾上腺素对眼点幼虫变态的诱导作用显著下降, 表明该基因在调控厚壳贻贝变态过程中具有重要作用。研究结果有助于理解细胞凋亡在厚壳贻贝幼虫变态中的作用及贝类变态的分子机制。     

粤西海域浮游植物群落结构特征的多元分析与评价

根据1998-1999年对粤西海域浮游植物的周年调查资料,本文采用主成分分析和聚类分析等多元统计分析方法研究该海域浮游植物的主要种类组成和群落结构的基本特征。研究结果表明,中肋骨条藻（Skeletonema costatum）、伏氏海毛藻（Thalassiothrix fauenfeldii）、小舟形藻（Navicula subminuscula）、颤藻（Oscillatoria sp．）、菱形海线藻（Thalassionema nitzschioides）、细弱海链藻（Thalassiosira subtilis）、齿角毛藻（Chaetoceros denticulatus）、北方劳德藻（Lauderia borealis）、中华盒形藻（Biddulphia sinensis）、纺锤角藻（Ceratium fusus）、翼根管藻（Rhizosolenia alata）、斯氏根管藻（Rhizosolenia stolterforthii）、短角弯角藻（Eucampia zoodiacu）、笔尖形根管藻（Rhizosolenia styliformis）、拟弯角毛藻（Chaetoceros pseudocurvisetus）等种类构成了粤西海域浮游植物的主体。春季、夏季和秋季该海域浮游植物可明显划分为近岸类群和近外海类群2个群落,冬季群落结构分化不显著,不形成明显的类群。各主要种类的季节演替现象十分明显。