桂花查尔酮异构酶OfCHI基因的克隆与表达分析

查尔酮异构酶CHI是花青素苷合成途径中的关键酶。为了解桂花花青苷的合成机理,该研究对3个桂花品种的花青苷含量进行了测定。结果显示:(1)‘橙红丹桂’花中的花青苷含量最高,‘金桂’和‘早银桂’中花青苷含量较低。(2)利用RACE和RT-PCR方法获得了桂花查尔酮异构酶基因(OfCHI)的全长cDNA序列1 069bp,该基因编码248个氨基酸,相对分子量为26.85kD,等电点为6.34。(3)多重序列比对显示,OfCHI与金花茶CnCHI、忍冬LjCHI、石榴PgCHI的相似性分别为68.13%、65.86%和63.53%,氨基酸序列中含有CHI蛋白的活性位点Thr47、Tyr108、Met115以及Ser192;系统进化树分析表明,OfCHI与其他物种起源相同,而与油橄榄OeCHI亲缘关系最近。(4)利用qRT-PCR对不同桂花品种、不同组织中OfCHI的表达量检测结果显示,OfCHI在‘橙红丹桂’花中表达量最高,在‘金桂’和‘早银桂’中表达量较低;OfCHI在‘橙红丹桂’、‘金桂’和‘早银桂’的花、茎、叶中均有表达,且表达趋势相同,均为叶中表达量最高。该研究为揭示桂花青素苷的合成机理奠定了理论基础,并为培育不同花色的桂花新品种提供了基因专利。     

石榴4-香豆酸辅酶A连接酶基因的克隆和表达分析

4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate-CoA ligase,4CL)是木质素合成途径的关键酶。该研究以‘红玉石籽’(Punica granatum cv.Hongyushizi)石榴为试验材料,采用RACE和RT-PCR方法获得4CL同源基因Pg4CL。Pg4CL基因cDNA全长2 121bp,编码544个氨基酸;序列比对和功能域分析发现,Pg4CL包含有2个保守域SSGTTGLPKGV和GEICIRG;系统进化树分析显示,Pg4CL与其他物种起源相同,而与赤桉Ec4CL亲缘关系最近。荧光定量PCR分析表明,Pg4CL基因在叶、果皮、种皮和茎等组织中均有表达,其中果皮和叶片中表达量较高,种皮中表达量最低;Pg4CL基因在6个石榴品种的种皮中均有表达,其中在‘突尼斯软籽’中表达较高,‘会理软籽’表达量最低;Pg4CL基因在‘红玉石籽’籽粒的不同时期均有表达,在15~60d相对表达量逐步上升,并在60d时达到最高;75d以后表达量急剧下降,仅维持较低水平表达。     

凝结芽孢杆菌活菌片联合甲硝唑栓治疗细菌性阴道病的临床观察

目的观察凝结芽孢杆菌活菌片(商品名:爽舒宝)联合甲硝唑栓治疗细菌性阴道病的临床疗效。方法选取细菌性阴道病患者108例随机分为观察组和对照组,每组54例。两组患者均以甲硝唑栓放入阴道治疗,观察组在此基础上,口服凝结芽孢杆菌活菌片,首次6片,以后3片/次,3次/d,连用14d。观察两组患者用药后的临床疗效及不良反应,并比较治疗后随访半年内的复发率。结果观察组患者临床总有效率(90.7%)明显高于对照组(74.1%)(P0.05),治疗期间均未见明显的药物不良反应。治疗后随访半年,观察组的复发率(14.3%)明显低于对照组(32.5%)(P0.05)。结论凝结芽孢杆菌活菌片联合甲硝唑栓治疗细菌性阴道病疗效显著,能降低复发率,值得临床推广应用。     

“微生物学”创新实践教学中研究生助教模式的探索

为提高研究生的综合素质,我校在本科生"微生物学"教学中探索了以创新实践为主要内容的教学改革,其中"教师—研究生—创新小组"三级交互的教学模式是以研究生为中心和纽带的交互式技能训练,是创新实践的关键。研究生以其积累的微生物学知识、掌握的实验技能和正在进行的研究项目,承担本科生创新实践"指导者"角色,结果证实这一模式对本科生科学思维的形成、实验技能的提高以及创新意识的培养等都有重要的作用,是研究生助教模式的创新探索,也是提高研究生综合素质的重要途径。     

小腿挤压伤伴撕脱伤23例的临床治疗效果分析

目的:探讨小腿挤压伤伴撕脱伤患者的整体治疗方法,并分析其临床应用价值。方法:回顾性分析我院近5年来收治的23例小腿挤压伤伴撕脱伤患者的临床资料,分别采用行自体皮肤反削回植、异种皮覆盖或封闭负压吸引治疗+二期植皮、知名血管皮瓣转移、单纯清创缝合。结果:23例中,18例Ⅰ期愈合;5例局部皮肤坏死,经换药后Ⅱ期愈合2例,残余创面行植皮后Ⅱ期愈合1例;骨外露者经皮瓣转移修复后Ⅱ期愈合2例。随访3-16月,临床效果满意。结论:对于小腿挤压伤伴撕脱伤,依具体情况采用自体皮肤反削回植、异种皮覆盖或封闭负压吸引治疗+二期植皮、知名血管皮瓣转移、单纯清创缝合等方法修复创面对患者肢体功能恢复有较大的作用,临床效果较好,利于患者康复,具有一定的推广应用价值。     

两类嗜碱细菌产生环状糊精葡糖基转移酶的条件和酶性质的比较

从土壤里分离到两类在碱性培养基中生长并产生环状糊精葡糖基转移酶的细菌,一类与国外已在工业生产中使用的芽孢杆菌相似,另一类为无芽孢的杆状细菌,尚未见报道。两类细菌的代表菌株,芽孢杆菌32—2要求的产酶因子以酵母膏最好;无芽孢杆菌52—2号则用玉米浆最好。碳源和氮凉也有所不同。52—2产酶过程比32—2稍晚,酶反应条件基本相近。     

海拔和植被对三峡库区梨香溪消落带土壤酶活性的影响

消落带土壤生态环境对水库水质及坡岸稳定性具有较大影响，土壤酶活性具有驱动土壤物质循环进而影响生态系统的功能。本文以三峡库区梨香溪消落带土壤为研究对象，研究了四个海拔梯度和五种植被样地的土壤蔗糖转化酶、脲酶、碱性磷酸酶和蛋白酶的活性及相关环境因子。结果表明，在不同海拔样地中，表层土壤的有机质、总氮、总磷和有效磷的含量均高于土壤下层，并且有效磷和总磷含量随海拔高度的增加而增大。四种土壤酶活性随高程的增加均总体呈现出增大的趋势。除脲酶外，167~180 m样地的下层土壤的土壤酶活性均高于165 m样地。在不同植被样地中，苔藓结皮样地的表层土壤中，蔗糖转化酶、碱性磷酸酶和蛋白酶的活性均为最大。有植被覆盖的样地土壤酶活性和土壤有机质、总氮、总磷和有效磷含量均高于裸地，其中虎杖和藻结皮植被对土壤的养分和土壤酶活性影响作用高于狗压根和苔藓结皮。四种土壤酶的酶活性与土壤总氮、总磷、有效磷和有机质含量大体都呈现正相关关系。以上结果表明，消落带土壤酶活性和土壤肥力供给能力受水淹影响，藻类结皮和苔藓结皮对消落带土壤肥力具有促进作用。     

赣江水系大型底栖动物多样性与受胁因子初探

赣江是长江的第七大支流, 孕育了极为丰富的大型底栖动物多样性, 而相关的研究明显不足。基于文献调研和2016-2017年现场调查, 本研究系统评估了赣江水系大型底栖动物多样性及其受胁因素。共记录底栖动物5门10纲27目95科204属330种(历史记录138种, 2016-2017年记录267种)。历史记录中国特有软体动物计48种(腹足类17种, 双壳类31种), 目前记录32种。优势种主要是一些耐污种和广布种。中游支流的密度、生物量和丰富度指数要高于赣江干流、上游支流和下游支流。典范对应分析结果表明, 底栖动物的分布主要受海拔、基质、流速、浊度、挖沙等环境因子以及不同尺度空间因子的驱动。偏CCA结果显示, 环境过滤对群落结构的影响高于空间过程。本研究结果可为赣江流域水生生物的保护和管理提供科学依据。     

腹腔镜与宫腔镜联合治疗输卵管性不孕症患者的疗效观察

目的：探讨腹腔镜与宫腔镜联合治疗输卵管性不孕症的临床效果。方法：收集2012 年1 月-2014年1 月我院收治的68 例输 卵管性不孕症患者,按照随机字数表法将患者随机分为观察组（腹腔镜联合宫腔镜治疗）与对照组（单纯宫腔镜治疗）各34例。对 比两组临床指标及术后一年输卵管再通率、妊娠率及并发症发生率。结果：两组各临床指标对比,差异无统计学意义（P>0.05）;观 察组输卵管再通率和妊娠率分别为91.17%,85.29%,显著高于对照组的73.53%、52.94%,而并发症发生率为11.76%,低于对照组 的32.35%,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论：腹腔镜联合宫腔镜治疗输卵管性不孕症切口小,术后恢复快,能有效提高卵管 再通率和妊娠率,减少术后并发症,值得临床推广。     

盐酸氨基葡萄糖联合非甾体抗炎药治疗中度膝关节骨关节炎的临床研究

目的:探讨盐酸氨基葡萄糖联合非甾体抗炎药治疗中度膝关节骨关节炎的临床疗效。方法:收集2010年5月至2013年9月我院中度膝关节骨关节炎患者214例,随机分为实验组和对照组各107例,对照组单独给予盐酸氨基葡萄糖治疗,实验组给予盐酸氨基葡萄糖联合非甾体抗炎药治疗,于用药后2、4、8、12周对比两组Lequesne评分、治疗效果和不良反应。结果:两组治疗前Lequesne评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。实验组用药后2、4、8、12周Lequesne评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且两组Lequesne评分均于用药后2、4周达到最低;用药12周后,两组有效率均有所下降,实验组用药后2、4、8、12周有效率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且两组有效率均于用药后2、4周达到最高;实验组不良反应发生率为6.54%(7/107),显著高于对照组的3.74%(4/107),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 :盐酸氨基葡萄糖联合非甾体抗炎药治疗中度膝关节骨关节炎短期疗效较好,长期服用副作用大,临床应推荐2-4周内短期服用。