几种测定植物叶绿素含量的方法比较

植物叶绿素含量的测定大致可分为分光光度计法和活体叶绿素仪法两大类,目前还有人在研究反射型的活体叶绿素仪。本文就这些测定方法作些简要介绍和比较,以供读者参考。 1.分光光度计法由于所用提取叶绿素的溶剂不同,分光光度计法又有多种测定方法。 (1)丙酮法丙酮法是Mackinney(1941)首先     

考马斯亮蓝G-250染色法测定柠条锦鸡儿种子中可溶性蛋白含量

目的:建立快速、灵敏的蛋白质含量测定方法,对柠条锦鸡儿种子中可溶性蛋白质含量进行测定;方法:运用超声与研磨两种方法提取柠条锦鸡儿种子中的可溶性蛋白,采用考马斯亮蓝G-250染色法对其进行测定;结果:超声提取与研磨提取得到可溶性蛋白含量分别为6.91%、6.87%,RSD分别为0.72%,0.67%;结论:考马斯亮蓝G-...     

丙酮和二甲基亚砜法测定植物叶绿素和类胡萝卜素的方法学比较

丙酮和二甲基亚砜作为提取剂测定植物光合色素含量是最为普遍的两种方法,但是对于二者之间的可比性问题探讨很少。本文基于对19中木本植物叶片和树枝内叶绿素含量的测定结果发现如下结果：（1）二甲基亚砜测定叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总量的结果均显著高于丙酮测定结果（而对叶绿素a/b比值的影响较小）,与此相反,丙酮对类胡萝卜素提取测定结果要远高于二甲基亚砜的测定结果。（2）两种方法对叶绿素和类胡萝卜素测定结果之间均存在显著线性相关,可以应用相关线性拟合方程进行不同方法测定结果之间的转换,以减少叶绿素含量、类胡萝卜素含量比较过程中产生的测定方法误差。（3）不同单位表示方法,对两种方法测定结果的相关性存在影响,使用鲜重单位表示的相关程度普遍高于以表面积为单位的相关程度。（4）两种方法对树枝和叶片测定结果的影响存在差异：对于叶绿素含量低的树枝,两种方法测定结果的差异较小,而对于叶绿素含量高的叶片,二甲基亚砜测定结果则远高于丙酮的测定结果,可能原因在于丙酮对于叶绿素的提取效果远低于二甲基亚砜。（5）以二甲基亚砜为浸提试剂,通过不同精确度仪器（0.1和1 nm）检测发现尽管不同仪器之间相关关系达到0.99以上,但二者相比精确度为0.1 nm检测叶绿素a、总叶绿素浓度高出15%~33%,而叶绿素b浓度低4%左右。这些研究发现为不同方法之间的比较提供了依据。     

叶绿素的快速提取与精密测定

Arnon法是叶绿素提取和测定最经典、最常用的方法, 此法虽经多次改进, 但仍存在着检测波长误差大、计算公式有误、提取速度慢、测定结果不够准确以及操作步骤繁琐等缺陷。该文提出了二甲基亚砜(DMSO)高温提取、80%丙酮稀释的两步快速浸提法, 使叶绿素提取和测定过程缩短至3小时以内。通过对提取温度、提取时间、稀释比例及吸收光谱等进行系统分析, 筛选出了叶绿素的最佳提取条件和叶绿素含量的准确计算公式, 并用多种类型的植物材料验证了改进后的提取方法, 证明该方法具优越性和可靠性。具体测定方法是将植物材料切成1 mm宽的细丝或细段, 取50-100 mg材料于10 mL具塞试管中; 加入2 mL DMSO, 使植物材料浸没其中, 65°C高温避光提取至植物材料变白或透明; 冷却后加入8 mL 80%丙酮, 混匀, 测定663.6和646.6 nm处的吸光度。用公式计算叶绿素浓度: C_a (mg∙L^-1)=12.27A_663.6-2.52A_646.6; C_b (mg∙L^-1)=20.10A_646.6-4.92A_663.6; C_T (mg∙L^-1)=C_a+C_b=7.35A_663.6+17.58A_646.6。     

DMF提取微藻叶绿素a方法的改进

叶绿素ａ是估算藻类生物量的重要指标。叶绿素测定的关键环节在于将叶绿素从细胞中有效的提取出来。提取测定微藻叶绿素,传统采用的方法是将藻体浸泡于９０％丙酮中,在低温下过夜浸提。该方法不但耗时较长,且对于小球藻等细胞壁较厚的细胞很难将藻体中的叶绿素提取干净。Ｍｏｒａｎ ａｎｄＰｏｒａｈ［１］等报道用Ｎ,Ｎ－二甲基甲酚胺（ＤＭＦ）提取测定完整植物细胞的叶绿素可取得良好的效果。叶绿素的ＤＭＦ萃取液与丙酮萃取液光学性质极相似,可采用同样的测定条件进行分析［２］。于志刚等［３］的研究表明,丙酮提取液的叶绿素浓…     

叶绿素含量测定的简化

本文介绍一种避免称重、研磨、冲洗和过滤等繁琐步骤,仅将确定面积的叶片细丝用少量80%丙酮浸泡提取后便可比色计算的简便的测定叶绿素含量的方法。此法省时间、省溶剂,不受叶片含水量变化的干扰,适合于大批量叶片样品的测定,而且便于与以单位叶面积表示的光合速率联系起来分析实验结果。同时,指出一些可能影响测定结果的因素。     

福建梅花山57种常绿树叶片叶绿素特征分析

选取福建梅花山海拔1200m和455m地区57种常绿植物为研究对象,测定两海拔的植物叶片叶绿素a和叶绿素b含量,并计算叶绿素a/b、总叶绿素含量。结果表明:(1)植物叶绿素a、b,叶绿素a+b及叶绿素a/b值大多分布在一个相对集中的区域。(2)多数植物新叶叶绿素含量高于老叶,叶绿素a/b值低于老叶,但是新、老叶无显著差异。(3)不同海拔的植物叶片总叶绿素含量和叶绿素a/b值有明显差异,低海拔地区明显高于高海拔地区。植物通过总叶绿素含量和a/b值的变化以适应不同环境条件。     

叶绿素计SPAD-502在林业上应用

叶绿素是植物光合作用的色素,传统方法测定叶绿素一般采用分光光度法.本研究采用便携式叶绿素计SPAD-502测定落叶松人工林下4个主要阔叶树种绿色度（SPAD值）的季节变化,并与分光光度法测定的叶绿素含量进行相关性分析.结果表明,SPAD值与叶绿素含量具有显著的相关性,SPAD值能较好地反映树木叶绿素含量的变化.因此,使用叶绿素计测定树木的叶绿素含量是完全可行的,在一定条件下可代替叶绿素含量的直接测定.由于叶绿素计SPAD-502携带方便、测定简便、迅速,且不损坏叶片,应在林业研究中积极推广使用.     

爬山虎多糖提取与含量的测定

建立石油醚去脂-80%乙醇去杂-热水提取-乙醇沉淀-氯仿、正丁醇去蛋白质-活性碳去色素的提取工艺,从爬山虎中提取多糖,用蒽酮-硫酸法比色测定多糖的含量,研究结果表明,此方法简便、供试液显色稳定、重现性较好,回收率为:99.36%,RSD=5.08%,熟果、茎、叶的多糖含量为:4.68%、22.71%、11.71%.     

青蒿素下脚料功能成分分析及其应用前景

为提升青蒿素产业的发展,对其下脚料进行深度开发,采用挥发油提取器提取青蒿素下脚料中的青蒿挥发油,提取挥发油后的剩余物采用85%酒精处理,分离得到叶绿素和植物蜡。结果显示,青蒿素下脚料中含挥发油约6.0%,叶绿素约56.0%,植物蜡约为30.0%。分析讨论了叶绿素、挥发油、植物蜡用途,并展望了其应用开发前景。     

五爪金龙对其草本伴生种部分生理指标的影响

采用电导率法和分光光度法,测定了5个不同的自然生境中入侵杂草五爪金龙(Ipomoea cairica)的4种草本伴生植物火炭母(Polygonum chinense)、三叶鬼针草(Bidens pilosa)、红花酢浆草(Oxalis corymbosa)、鸡矢藤(Pae-deria scandens)的相对电导率和叶绿素含量等生理指标,并设相同生境中不与五爪金龙伴生的这4种草本植物为空白对照。结果表明:4种伴生草本植物的叶绿素含量与对照相比差异达显著或极显著水平;三叶鬼针草相对电导率差异显著,另外3种伴生植物的相对电导率变化不明显,说明五爪金龙对火炭母、红花酢浆草、鸡矢藤3种草本伴生植物的叶绿素含量影响显著,而对三叶鬼针草的叶绿素含量和质膜透性均有显著影响。     

浮游植物中叶绿素a提取方法的比较与改进

对水质监测中叶绿素a的提取方法进行改进,采用反复冻融-浸提方法提取叶绿素a,即将过滤水样的滤膜于-20℃冰箱内和室温下反复冻融3～5次后,放进90%丙酮溶液中浸提20h。与标准方法中的研磨法对比,该方法具有人为误差小、稳定性好、结果准确及操作简单安全等优点,适合运用于常规的水质监测。采用该方法时过滤水量对湖水水样的测定结果有影响(P<0.01),对于纯微囊藻液影响不明显(P>0.05)。因此,在对不同叶绿素水平或营养水平的水体采样时,应注意水样的水量。通过方差分析表明该方法中采用醋酸纤维滤膜、微孔滤膜和玻璃纤维滤膜对结果没有显著影响,对这3种滤膜可以进行自由选择。     

基于液氮研磨法的流式细胞术检测马铃薯倍性的研究

染色体组倍性鉴定是马铃薯种质资源评价的重要内容,流式细胞仪能够快速、准确地对细胞核DNA含量进行测定,从而广泛用于检测植物染色体组倍性。建立适于马铃薯倍性鉴定的高通量流式细胞术体系,对马铃薯育种工作提供依据。以20份马铃薯合作88孤雌诱导后代为材料,用液氮研磨法制备叶片细胞核悬液,并将其与传统刀片切碎法制备的细胞核悬液进行比较,对已知四倍体马铃薯合作88和二倍体马铃薯IVP101进行染色体倍性测定,结果发现这两种方法在倍性测定结果之间无明显差异,但是液氮研磨法操作简单、耗时少。基于液氮研磨法的流式细胞术可快速、准确检测其倍性。另外,在液氮研磨法中,对细胞核悬液染色时间的长短(从15 min到12 h)并不会影响倍性测定结果,从而方便研究人员在实际操作中灵活选择染色时间。     

基于正交试验法的景观水体叶绿素a 最佳提取条件研究

根据水体初级生产力测定常用方法中叶绿素a 测定法, 采用3 因素3 水平的正交法设计试验((L9(34)), 综合探究某喷泉水池景观水体测定过程中滤膜处理条件、浸提试剂和浸提温度等多因素多水平的共同作用下叶绿素a 提取效果的差异, 改进的正交试验设计规避了单因素控制变量实验的片面性。试验结果表明该喷泉池水的叶绿素a 含量较高,参考湖库景观水体富营养化分级标准已达到富营养化水平。提取过程中不同的正交试验组结果存在差异, 其中冷冻处理滤膜、丙酮乙醇混合溶剂、4 ℃条件下提取值最高, 为62.3 μg⋅L− 1。上述景观水体叶绿素a 提取条件组合(A2B3C1) 为正交试验最优水平组合, 采用正交试验的方法探究叶绿素a 提取最佳条件有利于对传统实验方法改进。     

基于环境因子对叶绿素影响的典型草原植物生活型优势研究

针对环境因子与草原植物叶绿素含量的联动是否关系到植物生活型优势的问题, 该研究以锡林浩特典型草原为研究区, 选取2020年7月实测的11个样地50种植物共185个牧草样品的叶绿素含量, 运用相关分析、单因素方差分析、冗余分析(RDA)、逐步回归分析和通径分析等方法, 系统性地分析了多环境因子对草原植物不同生活型叶绿素指标的影响, 进而分析植物竞争优势形成的潜在驱动机制。研究结果表明: 1)典型草原区植物叶绿素a、叶绿素b含量均与总叶绿素含量呈极显著正相关关系, 相关系数分别为0.807和0.936, 草原植物总叶绿素含量受叶绿素b含量的影响程度更大; 2)草原植物4类生活型的叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量均为小/半灌木>多年生禾草>一/二年生植物>多年生杂类草; 3)环境因子对植物生活型叶绿素含量的解释程度存在差异, RDA显示环境因子对小/半灌木的叶绿素含量解释程度最大(28.0%), 其次为一/二年生植物(18.3%)和多年生杂类草(17.7%), 多年生禾草各项叶绿素指标的解释度最低(12.7%); 4)植物生活型各叶绿素指标受多种环境因子的影响, 回归分析显示小/半灌木的叶绿素b含量受到土壤有机碳含量和大气相对湿度的影响, 总叶绿素含量主要受到大气相对湿度的影响, 多年生杂类草叶绿素b含量主要受到地表温度的影响, 一/二年生植物的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量主要受到土壤pH的影响; 5)在草原生境中, 通径分析的综合研究显示植物叶绿素a含量主要受到土壤环境因子的影响, 植物叶绿素b和总叶绿素含量主要受到大气环境因子的影响, 相比较而言, 多年生禾草不易受环境因子的牵动, 成为更能忍受外界环境变化的植物种类, 因此, 在群落演替进化中这类植物逐渐占据优势地位。     

植物叶绿素含量与大气中SO2浓度相关性研究

本文对厦门市5个样点、6种常见绿化树种及盆栽植物蕹菜的叶绿素含量、叶片含硫量及大气中SO_2浓度分析测定,得出了6种植物叶绿素a、b变化趋势是:鼓浪屿、厦门大学>火车站、后江埭>电化厂;叶片含硫量的变化趋势与叶绿素a、b含量变化相反。表明植物叶片叶绿素含量与大气中SO_2浓度和叶片含硫量呈负相关,并计算蕹菜叶绿素含量与大气SO_2浓度相关模式(y=-0.0138x 0.1958),为大气环境评价提供生物学依据。     

天然色素的超声提取研究

本文主要研究利用超声波提取叶绿素。并且对超声提取法和单纯浸泡法作了比较,同时,分析了叶绿素提取效率对时间的依赖性。实验结果显示,用超声来提取绿色植物中的叶绿素,可以增大提取率,缩短提取时间。     

大鼠肠内容物细菌基因组DNA提取方法的比较

目的比较两种肠内容物前处理和两种提取方法对清洁级SD大鼠肠内容物细菌基因组DNA提取效率。方法分别选用PBS多次离心漂洗、液氮破细胞两种前处理方法和酚/氯仿抽提、试剂盒过柱法两种提取方法进行组合分析,对4份肠内容物和16份含金黄色葡萄球菌肠内容物进行随机提取。结果大鼠肠内容物细菌基因组DNA含量和纯度测定结果显示,与PBS反复离心相比,液氮研磨前处理能显著提高大鼠肠内容物基因组DNA。荧光定量PCR表明,液氮研磨前处理较PBS反复离心能更好地收集细菌基因组DNA,其Ct值最低。结论研究结果表明,采用液氮研磨试剂盒法在大鼠肠内容物DNA提取中是较为优良的方法,该方法为建立实验动物中微生物的定量PCR检测方法打下了基础。     

阔叶十大功劳叶与花总黄酮提取及含量测定

目的:研究阔叶十大功劳叶与花总黄酮的提取方法和含量测定。方法:比较以索氏提取法、超声波提取法和微波辅助提取法3种方法提取阔叶十大功劳叶与花中总黄酮,用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定总黄酮含量。结果:3种提取方法中,微波法提取效率最高,结果重现性好,并测得叶与花中总黄酮含量分别为2.182%和8.155%。结论:阔叶十大功劳总黄酮含量较高,总黄酮在花中的含量明显高于叶。     

叶绿素含量测定中Arnon公式的推导

绿色植物叶绿素的定量测定,是植物生理学的必做实验之一。在测定叶绿素含量时,一般都采用分光光度法,即根据叶绿素对可见光的吸收光谱,在某一特定波长下,测定其吸光度(A),然后利用Arnon公式计算叶绿素含量。关于同一叶绿素溶液,在相同波长下,用不同型号分光光度计测得的吸光度值的误差及用Arnon公式计算所得叶绿素a/b比值的高低,杨善元同志曾在《植物生理学通讯》1983年第4期上作过解释。关于Arnon公式的求解精度及其对实际应用的影响,