大鼠脊髓匀浆上清诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的:观察大鼠脊髓匀浆上清诱导骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)形成的神经元样细胞形态特征.方法:通过贴壁法培养分离大鼠骨髓MSCs,体外扩增纯化后加入正常大鼠脊髓匀浆上清诱导72h,倒置显微镜下观察诱导前后细胞的形态结构.激光共聚焦显微镜观测钙离子细胞形态和荧光强度变化,免疫细胞化学方法鉴定诱导后细胞的表型特征.结果:倒置显微镜下可见MSCs呈纺锤形和多角形,核居中,有1-2个核仁,诱导后细胞呈神经元样,细胞伸出较长的轴突样和树突样突起.免疫细胞化学法显示NSE(神经元特异性烯醇化酶)、NF(神经丝蛋白)阳性,GFAP(神经胶质细胞酸性蛋白)阴性.共聚焦显微镜扫描脊髓匀浆上清诱导前细胞形态呈细长的梭形,细胞核不明显,胞体染色强,突起染色弱,荧光像素值低;诱导后,细胞呈现神经元样形态,胞体大,有多个突起,胞体及各突起染色强,荧光像素值高.结论:大鼠脊髓匀浆上清液可在体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞.     

人体中有哪些神经节

在周围神经系统中,神经元胞体聚集在一起,由一层结缔组织膜包被形成的小结节称作神经节,可分为感觉性神经节和植物性神经节两类。感觉性神经节是感觉神经元胞体所在,内为大小不等的假单极神经元胞体相聚,胞体多呈圆或卵圆形,其周围分布有许多小型的神经节胶质细胞,也称卫星细胞。感觉神经节按其所在位置分为脊神经节和脑神经节。脊神经节位于近椎间孔处,连在脊神经背根上,常称背根节,共31对。大约有一半的人第一颈神经背根及     

肝细胞生长因子在正常大鼠腰段脊髓和背根神经节的表达

目的:观察肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在大鼠脊髓和背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)的表达。方法:取健康成年6只SD大鼠运用免疫组织化学染色技术检测HGF在腰段脊髓、背根神经节内的表达和分布。结果:在L4-6段脊髓,HGF免疫阳性产物可见于各板层神经元,尤以脊髓前角运动神经元明显;在DRG中,HGF免疫阳性物质可见于以大、中型为主的神经元的胞浆及突起中。结论:脊髓和背根神经节内的HGF通过与受体c-Met结合可能在神经再生及突触可塑性方面起一定作用。     

神经肽对体外培养人胚神经组织细胞生长发育的影响

本文成功地体外培养了人胚背根神经节和大脑皮层神经细胞,并首次通过它们研究了神经肽对种经组织细胞生长发育的影响。结果看出,培养液中加入神经肽后,背根神经节突起长度和密度增加;大脑皮层神经细胞存活数增加,分化神经元增多,胞体增大,突起增长,细胞生长加快,衰老减慢。超微结构观察表明,种经肽可增加细胞内的合成代谢和细胞间的相互连接,减少细胞变性损伤．本实验证实神经肽对神经组织具有种经营养作用,这为神经肽在临床上推广应用提供了实验依据。     

新生大鼠下丘脑GnRH免疫反应性神经元的体外发育

应用神经细胞培养、免疫细胞化学、图像分析等技术,研究了新生大鼠下丘脑促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）神经元的体外发育规律。培养１ｄ即可见ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元;１～３ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元生长最快,胞体和突起的平均生长速度分别为４５．５９μｍ２／ｄ和１９．３９μｍ／ｄ,染色加深;培养７ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元的胞体截面积、胞体染色强度和突起长度均达最高峰,分别为１７１．２１±４３．１７μｍ２,０．２８９±０．０３４,８７．０１±２２．３３μｍ;培养１４ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元的胞体大小和突起长度维持在７ｄ时的水平,但染色减弱。结果提示,培养第１周是ＧｎＲＨ神经元体外发育成熟的关键时期,其发育良好状态可维持到第２周末     

脊髓和脊神经节原代分离培养中GABA能神经元的形态观察

选用１２－１４天胚胎小鼠（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ）,取脊髓及脊神经节原代培养。观察神经元的发育并用ＧＡＢＡ抗血清、ＰＡＰ方法显示ＧＡＢＡ能神经元。脊髓神经元呈各种形态大小,随着培养的进行它们的起和胞体不断生长;脊神经细胞有不同大小,其体积在培养中保持恒定。随着神经元的逐渐成熟,它们的核质比不断增大。ＧＡＢＡ免疫细胞化学阳性脊髓神经元大小不等,可分为两类：１．突起和胞体阳性,核不着色而核仁着色;２．只在突     

脊髓和脊神经节原代分离培养中GABA能神经元的形态观察

选用12—14天胚胎小鼠(C 57 BL/6J),取脊髓及脊神经节原代培养。观察神经元的发育并用GABA抗血清、PAP方法显示GABA能神经元。脊髓神经元呈各种形态大小,随着培养的进行它们的突起和胞体不断生长;脊神经节细胞有不同大小,其体积在培养中保持恒定。随着神经元的逐渐成熟,它们的核质比不断增大。GABA免疫细胞化学阳性脊髓神经元大小不等,可分为两类:1.突起和胞体阳性,核不着色而核仁着色;2.只在突起和细胞膜上有阳性反应而胞体及核为阴性(可能为GABA摄取的结果)。有不同大小的脊神经节细胞呈阳性反应,其胞体及核仁着色而核呈阴性反应。证实了培养条件下处于胚胎发育阶段的阳性脊神经节细胞的存在。     

人酸性成纤维细胞生长因子神经营养作用的初步研究

本实验研究了人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)的体外神经营养作用。结果表明,haFGF在体外能明显促进鸡胚(E-8)脊髓组织神经突起的生长,并能明显改变新生大鼠脑星形胶质细胞的形态,使扁平、多角形紧密联接的细胞转化为具有纤维样突起的胶质细胞,同时对胶质细胞DNA合成也有一定促进作用。实验还证明,haFGF可增加体外培养新生大鼠海马神经元的存活,且大大增加神经元胞体体积及突起长度。     

大鼠下丘脑内一氧化氮合酶阳性神经元的分布

用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法观察了大白鼠下丘脑内一氧化氮合酶（ＮＤＳ）阳性神经元的分布及形态特征。结果显示：在视上核、室旁核的大细胞部、环状核、穹窿周核、下丘脑外侧区、下丘脑腹内侧核、下丘脑背内侧核、乳头体区大部分核团均可见一氧化氮合酶阳性神经元聚集成团。在视前内侧区、视前外侧区、下丘脑前区、下丘脑背侧区、下丘脑后区、室周核、室旁核小细胞部及穹窿内可见散在的一氧化氮合酶阳性神经元。室周核内可见呈阳性反应的接触脑脊液神经元的胞体及突起。一氧化氮合酶阳性神经元大多可见突起,有的突起上可见１～２级分支,并可见膨体。下丘脑大部分区域内可见阳性神经纤维。弓状核内可见许多弧形纤维连于第三脑室室管膜和正中隆起。     

人胎大肠氮能神经元发育的研究

用NADPH-d组织化学法对人胎大肠氮能神经元的发育进行了观察.结果表明第5个月胎龄时,肌间神经节处圆形细胞中部分细胞出现一氧化氮合酶(NOS)阳性反应,并分化成氮能神经细胞.第6个月胎龄时,氮能神经元胞体增大,突起伸长,在肌层、粘膜下层和肠腺基部出现氮能神经纤维分布.第7个月胎龄时,氮能神经元生长发育达到高峰,肌间神经节细胞数目增多,环肌层神经纤维分布密度增加,膨体结构明显.第8-10个月胎龄时,氮能神经元染色强度加深,其胞体分布以肌间神经节最多,粘膜下层和内环肌层较少.氮能神经纤维的分布密度以内环肌层最高,粘膜下层和外纵肌层次之,粘膜层较低.本研究揭示了大肠氮能神经元发育的变化规律.     

纽蛋白在原代培养脊髓神经元的分布及其与神经元形态的相关性

目的　用免疫组织化学及形态学等方法对原代培养大鼠脊髓神经元的形态及其纽蛋白 (vinculin)分布进行研究。方法　实验采用原代培养的大鼠脊髓神经元 ,用细胞松弛素 D(cytochalasin D) -丝状肌动蛋白解聚剂处理细胞后 ,用相差显微镜观察细胞形态 ,同时用单克隆抗体免疫组化方法显示细胞内纽蛋白的分布。结果　原代培养的脊髓神经元可见 2～4个细长的突起 ;免疫组织化学方法显示纽蛋白在神经元的胞体及突起均有分布。细胞松弛素 D处理细胞后 ,神经元胞体变大 ,轮廊不清 ,突起增多 ,变短、变粗 ,多分支且分支末端膨大 ;免疫组织化学方法显示纽蛋白在核周的分布明显增加 ,而在突起内的分布则变得不连续 ,呈散在点状。结论　丝状肌动蛋白 (filem ental- actin,F- actin)的完整性对维持神经元的正常形态是必需的 ;神经元形态的变化与纽蛋白分布的变化相关     

紫彩血蛤鳃的组织化学和扫描电镜研究

紫彩血蛤（Ｎｕｔｔａｌｌｉａｏｌｉｖａｃｅａ）的鳃上皮细胞核多为椭圆形，核内染色体呈丝状；结缔组织细胞的核多为圆形，部分核内有块状Ｆｅｕｌｇｅｎ阳性颗粒，ＲＮＡ在鳃丝上皮细胞最丰富，有的形成直径０．５２μｍ的颗粒，结缔组织和鳃丝上皮细胞内均有直径０．６３μｍ左右的ＰＡＳ阳性颗粒，吞噬细胞呈极强的ＡＮＡＥ阳性，鳃丝上皮细胞呈较弱的阳性。ＡＣＰ和ＡＫＰ在吞噬细胞和外缘上皮细胞中的活性较强，其它部位较弱     

嫁神经系统结构的初步研究

嫁神经系统包括一对脑神经节、一对足神经节、一对侧神经节和一个脏神经节。左右脑神经节间有较长的神经联合,脑—足、脑—侧神经节间有较长的连索存在。各神经节均由三部分组成：神经节鞘膜、胞体区和神经纤维网。脑神经节相同类型神经元胞体聚集分布,其余神经节神经元未见有明显分区和分层现象。神经元胞体直径一般不超过２０μｍ,这些特征与已研究的前鳃亚纲种类显著不同,可能与该种螺类处于系统演化中较低等地位有关。     

中国树鼠句伏隔核促肾上腺皮质激素释放激素能神经元免疫组织化学研究

应用免疫组织化学碱性磷酸酶标Ａ蛋白（ＰＡＡＰ）技术在光镜水平研究中国树鼠句伏隔核内促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＦ）能神经元的形态和分布特点。结果显示,该核内ＣＲＦ免疫反应阳性神经元胞体多数呈多边形、圆形或卵圆形,梭形极少;直径多数为１３－１９ｕｍ,少数＜１３ｕｍ;胞质免疫反应强度不等。对左右侧伏隔核内ＣＲＦ免疫反应阳性神经元数目、胞体大小、形态和免疫反应强度进行分析,除免疫反应强阳性神经元计数项（Ｐ＜００１）外,其他项都无显著意义。ＣＲＦ免疫反应阳性神经元在伏隔核内分布不均,主要位于该核的前半段背侧区,核芯区较少     

嫁Qi神经系统结构的初步研究

嫁Ｑｉ神经系统包括一对脑神经节,一对足神经节,一对侧神经节和一个脏神经节,左右脑神经节间有较长的神经联合,脑一足,脑一侧神经节间有较长的连索存在,各神经节均由三部分组成：神经节鞘膜,胞体区和神经纤维网。脑神经节相同类型神经元胞体聚集分布,其余神经神经元未见有明显分区和分层现象,神经元胞体直径一般不超过２０μｍ,这些特征与已确定的前鳃亚钢种类显著不同,可能与该种螺类处于系统演化中较低等地位有关。     

大鼠脑桥背侧被盖区含L-ENK和SP的神经元

本实验用成年雄性Wistar大鼠,以免疫细胞化学法、计算机图象分析法研究了大鼠脑桥背侧被盖区含亮氨酸脑啡肽(L-ENK)和P物质(SP)神经元的分布和形态。含L-ENK的神经元分布于Gudden背侧被盖核的背部和腹部(DDT、VDT),以及外背侧被盖核(LDT)。DDT内含L-ENK的细胞多而密集,周围有深染的神经纤维。胞体形态以圆形和卵圆形为主。随机测量免疫反应阳性细胞,平均等效径为12.18μm。VDT和LDT内含L-ENK细胞少,染色较浅。VDT的胞体为圆形和卵圆形,平均等效径为12.24μm。LDT的胞体为多边形,平均等效径为15.67μm。含SP的神经元仅见于LDT,细胞数量较多,胞体较大,呈多边形,平均等效径是20.39μm。本研究的结果显示:DDT,VDT和LDT各核内含L-ENK神经元的分布密度,细胞形态和大小均有所不同。DDT较密集,LDT细胞较大。LDT内含SP和L-ENK神经元多数可归为两类,含SP的胞体较大含L—ENK的胞体较小。DDT,VDT和LDT不同形态的含肽细胞可能与它们不同的中枢联系和功能有关。     

纽蛋白在原代培养脊髓神经元的分布及其在神经元形态的相关性

目的：用免疫组织化学及形态学等方法对原代培养大鼠脊神经元的形态及其纽蛋白（vinculin)分布进行研究。方法：实验采用原代培养的大鼠脊髓神经元,用细胞松驰素D（cytochalasinD)－丝状肌动蛋白解剖处理细胞后,用相差显微镜观察细胞形态,同时用单克隆抗体免疫组化方法显示细胞内纽蛋白的分布,结果：原代培养的脊髓神经元可见2－4个细长的突起,免疫组织化学方法显示纽蛋白姑神经元的胞体及突起均有分布,细胞松驰素D处理细胞后,神经元胞体变大,轮廓不清,突起增多,变矩,变粗,多分支且分支末端膨大,免疫组织化学方法显示纽蛋白在核周的人布明显增加,而且在突起内的分布则变得不连续,呈散在点状。结论：丝状肌动蛋白（filemental-actin,F-actin）的完整性对维持神经元的正常形态是必需的,神经元形态的变化与纽蛋白分布的变化相关。     

背根切断对脊髓后角Ⅱ板层BDNF,NT-3表达的影响——免疫组织化学研究

目的　采用免疫组织化学技术探讨切断背根 (L1)后脊髓Ⅱ板层脑源性神经营养因子 (BDNF)和神经营养因子 3 (NT 3)表达的变化。方法　将成年雄猫 5只行单侧L1背根切断术 (对侧为非手术侧 )。术后 5天取L1脊髓制作2 0 μm厚冰冻切片 ,用BDNF及NT 3抗体分别进行免疫组化染色。观察BDNF、NT 3免疫阳性反应物在脊髓的分布 ,计数单位面积内Ⅱ板层BDNF阳性膨体密度及NT 3阳性细胞数。结果用t检验进行统计分析。结果　BDNF样免疫反应物在Ⅱ板层主要分布于神经膨体 ,NT 3样免疫反应物在神经元及胶质细胞均有分布。背根切断后 ,手术侧Ⅱ板层BDNF阳性膨体数量明显较非手术侧者减少 (P <0 0 1)。而手术侧Ⅱ板层NT 3阳性神经元及胶质细胞数量则较非手术侧者明显增加(P <0 0 1)。结论　背根切断后脊髓Ⅱ板层BDNF ,NT 3的表达发生不同变化。BDNF减少 ,而NT 3表达增多。提示BD NF和NT 3在脊髓损伤修复中的不同作用。     

中国蛤蜊神经系统显微结构的初步研究

中国蛤蜊中枢神经包括一对脑神经节,一对足神经节和一对脏神经节,各神经节均由神经节被膜,胞体区和中央纤维网三部分组成,脏神经节较腹足类的要复杂,分区现象较明显,脑和足神经节相对较简单,无明显分区和分层现象,神经元胞体可分为大（４０～５４μｍ）,中（２５～４０μｍ）,小（６～２０μｍ）三种类型。     

瞬时外向钾电流的降低介导了慢性压迫背根神经节细胞兴奋性的升高

慢性压迫大鼠背根神经节（chronic compression of the dorsal root,ganglion,CCD）后,背根神经节细胞兴奋性升高,但引起神经元兴奋性改变的离子通道机制还需进一步探索。本实验采用胞内记录以及全细胞膜片钳记录方法,研究急性分离的大鼠背根神经节细胞兴奋性改变与瞬时外向钾电流（A-type potassium current,ⅠA）的关系。结果表明,CCD术后背根神经节细胞兴奋性升高,在急性分离的体外细胞中仍继续存在,表现为对辣椒素敏感的背根神经节细胞产生动作电位的最小电流刺激强度,即阈电流（current threshold）及阈电位（voltage threshold）降低;给予正常对照组神经元（未压迫损伤）瞬时外向钾通道阻断剂4-氨基吡啶,出现了类似CCD术后兴奋性升高的改变。进一步用两步电压钳方法分离ⅠA,研究CCD术后神经元ⅠA的变化,结果表明,CCD组神经元的ⅠA比对照组神经元ⅠA降低,并且与其阈电位的改变一致。以上结果提示,背根神经节压迫受损后,神经节细胞ⅠA降低可能参与介导了神经节细胞兴奋性的升高。