红桂木凝集素受体在大鼠消化组织的表达

为探索红桂木凝集素(Artocarpus Lingnanensis Lectin,ALL)受体在正常生理情况下大鼠消化系统的分布情况,本研究首先经Gal-Sepharose 6B亲和层析,从红桂木种子中分离纯化获红桂木凝集素,并进行辣根过氧化物酶(HRP)标记。其次从健康的大鼠中取出胃、肝、小肠、大肠,经固定、石蜡包埋、切成4μm的片段,再用HRP标记的红桂木凝集素进行染色,观察ALL受体的分布情况。结果发现ALL受体主要分布于肝脏组织的肝血窦,而在胃、大肠、小肠等组织中无ALL受体的分布。结论:ALL受体几乎不表达在消化系统的组织细胞。     

ALL受体在大鼠重要组织器官的表达

为探讨大鼠体内重要组织器官红桂木凝集素(Artocarpus lingnanensis lectin,ALL)受体的表达情况,本研究利用亲和层析法将红桂木凝集素进行分离纯化,并标记上辣根过氧化物酶,最后将大鼠各重要组织器官的石蜡切片进行凝集素组化分析。结果发现大鼠各重要组织器官都分布有不同程度ALL受体。在肺、心、脾和肾组织,ALL受体阳性率分别为:63%、54%、29%和24%。ALL受体主要分布在肺泡上皮细胞、心肌微血管内皮细胞、脾脏红髓区和肾脏的肾小球内皮细胞。     

红桂木凝集素受体在肺癌组织的表达及意义

为探讨肺癌中红桂木凝集素(ALL)受体的表达及其临床意义,本研究应用凝集素亲和组化法检测45例原发性肺癌(鳞癌25例,腺癌20例),阴性对照采用20例癌旁正常肺组织。凝集素组化显示,28例(62.2%)肺癌和3例(15%)癌旁正常肺组织的红桂木凝集素受体表达阳性,差异具有显著性。红桂木凝集素受体表达与肺癌TNM分期、淋巴结转移、分化程度有关,但与年龄、性别、肿瘤大小、病理类型无关。     

几种哺乳动物精子膜伴刀豆球蛋白A受体的观察

凝集素(Lectin)可与某些糖基特异性结合,其中伴刀豆球蛋白A(简称Con.A)可与a-D-甘露糖或a-D-葡萄糖特异性结合。精子膜表面凝集素受体的种类、分布与数目在精于的成熟、获能与受精过程中有规律性的变化。我们同时用异硫氰酸荧光素盐及辣根过氧化物酶标记的Con.A(FITC-及HRP-Con.A)观察了正常成年雄性大鼠、小鼠及家兔的附睾尾精子与公牛射出精子膜表面Con.A受体的分布。 1.材料 正常成年雄性Wistar大鼠、C57BL小鼠及非近交系杂种家兔各十只。取出附睾尾组织,剪碎后置于盛有精子培养液(配方见saling and Storey 1979)的培养皿中,37℃静置15分钟,待精子充分游出后去除组织碎块。离心(2,000转/分)三次,最后配成约含10~7个精子/毫升的附睾尾精子悬     

牛精细胞表面凝集素受体的研究

外源凝集素能与细胞表面相应的受体特异性的结合,并导致细胞凝集,因而外源凝集素可用作细胞膜结构的探针,用来研究细胞膜的结构与功能。近年应用外源凝集素对精细胞膜上糖蛋白和凝集素受体的数目与功能状态的研究已取得很大进展,采用异硫氰基荧光素(FITC)或辣根过氧化物酶等标记凝集素来测定膜上凝集素受体的定位与分布,研究认为精细胞膜上受体与受精作用有密切关系。本文报道用具有血型专一性或无血型专一性或FITC标记的凝集素研究牛精细胞膜上凝集素受体的分布结果。     

胃癌survivin基因mRNA和蛋白的表达与临床病理关系

目的　研究胃癌组织中survivin基因的mRNA和蛋白表达情况及其与临床病理参数的关系。方法　应用原位杂交方法和免疫组化SP法检测 5 4例胃癌 ,34例胃良性病变 ,2 0例胃正常组织标本中survivin基因mRNA及蛋白的表达。并对其与临床病理因素和二者的关系进行分析。结果　Survivin蛋白表达阳性率在胃癌、良性疾病组织和正常组织分别为 87 0 % (47/ 5 4 )、 2 3 5 % (8/ 34)和 15 % (3/ 2 0 ) ;SurvivinmRNA阳性率为 79 6 % (43/ 5 4 )、 2 3 5 % (8/ 34)和2 0 % (4/ 2 0 )。胃癌组远大于正常胃组织和良性疾病组 ,而正常胃组织与胃良性疾病组之间差异无显著性。SurvivinmRNA与蛋白在胃癌中的表达呈正相关 (rs=0 6 79,P <0 0 5 )。且其阳性率高低与性别、年龄、组织学类型无关 ;而与淋巴结转移、TNM分期、组织学分级有关。结论　SurvivinmRNA与蛋白在胃癌中表达较高 ,且与淋巴结转移、TNM分期、组织学分级有关 ,它可作为评估胃癌生物学行为和判断预后的生物学指标。     

DNA修复酶(MGMT)在人胃肠癌中表达的临床意义

目的探讨MGMT在胃肠癌中表达的临床意义。方法93例胃肠癌(其中胃癌53例,大肠癌40例)利用SABC免疫组织化学方法检测MGMT。结果在胃肠癌中MGMT阳性率为49.46%(46/93),在胃癌和大肠癌中阳性率分别为45.28%(24/53)和55.00%(22/40)。66岁以上老年组MGMT阳性率明显低于其他年龄组(P<0.05),癌组织浸润深度达浆膜组和有淋巴结转移组MGMT阳性率高。MGMT在胃肠癌中的表达与性别和癌组织类型、分化程度相关性不明显(P>0.05)。结论MGMT在胃肠癌中的表达与年龄、浸润深度和淋巴结转移有关。     

SNFYMPL荧光探针和共聚焦显微内镜在胃癌诊断中的应用

目的:探讨荧光探针SNFYMPLGGGSK-FITC与胃癌组织的结合能力,预测其在胃癌诊断中的应用价值。方法:收集我院2015年6月至10月收治的48例胃癌患者手术切除的肿瘤和癌旁组织,使用异硫氰酸荧光素FITC标记的线性七肽SNFYMPL及无关序列肽探针对其冰冻切片进行荧光染色,通过共聚焦激光扫描显微镜CLSM检测其结合能力,并与组织病理结果对比。结果:SNFYMPLGGGSK-FITC对胃癌组织荧光染色的阳性率为81.25%(39/48),明显优于无关序列肽探针的14.58%(7/48),差异有统计学意义(P0.001)。SNFYMPLGGGSK-FITC对癌旁组织荧光染色的阳性率为27.08%(13/48),明显低于对胃癌组织荧光染色阳性率,差异有统计学意义(P0.001)。结论:FITC标记的SNFYMPL短肽探针与胃癌组织较强结合能力,图像组织分辨率好,可以作为共聚焦激光显微内镜在胃癌诊断的潜在靶向分子进一步研究。     

Ezrin在胃癌组织中的表达及与Hp-L型感染关系的探讨

目的通过检测胃癌组织中幽门螺杆菌L(Helicobacter pyloriL-form,Hp-L)型感染以及Ezrin的表达情况,探讨Hp-L型、Ezrin在胃癌组织中的表达及临床意义。方法 (1)应用革兰染色法和免疫组织化学Elivision法检测80例胃癌组织和40例对照组织中的Hp-L型感染情况。(2)应用免疫组织化学Elivision法检测上述各组织中Ezrin蛋白的表达。(3)应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测30例新鲜胃癌组织及与其相对应的30例远端切缘正常组织中Ezrin mRNA的表达。结果 (1)胃癌组中革兰染色L型的检出率为80.00%(64/80)、免疫组化Hp-L型阳性率81.25%(65/80),两种方法检测的结果具有一致性(P0.05)。80例胃癌组织中Hp-L型阳性(即革兰染色L型检出阳性和免疫组化Hp-L型抗原表达同时阳性)的病例数为56例,其阳性率为70.00%;对照组中革兰染色L型检出率为22.50%(9/40),免疫组化Hp-L型阳性率40%(16/40)二者检测结果也具有一致性(P0.05)。40例对照组织中Hp-L型阳性例数为9例,其阳性率为22.50%。胃癌组与对照组的Hp-L型阳性率相比,差异具有统计学意义(P0.05);(2)胃癌组Hp-L型感染阳性率仅与胃癌的淋巴结转移有关(P0.05),而与其他临床病理因素无关;(3)RT-PCR法和免疫组织化学Elivision法显示胃癌组中Ezrin mRNA及Ezrin蛋白的表达均高于对照组(P0.05),且经统计学分析发现Ezrin表达水平与胃癌细胞的分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(P0.05),而与临床分期、患者的年龄及性别无关(P0.05);(4)胃癌中Hp-L型阳性组的Ezrin蛋白表达阳性率71.43%(40/56)高于Hp-L阴性组54.17%(13/24)(P0.05),且Hp-L型阳性和Ezrin蛋白阳性呈正相关(r=0.456,P0.05)。结论 Hp-L型感染阳性率和Ezrin表达阳性率在胃癌中均较高,二者可能协同促进胃癌的发生发展及浸润转移。     

FAK在胃癌组织中的表达及与Hp-L型感染的关系

目的探讨局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)在胃癌组织中的表达意义及与幽门螺杆菌L型(Helicobacter pylori-L,Hp-L)感染的关系。方法 (1)应用免疫组织化学Elivision法检测120例胃癌组织及40例切缘正常胃粘膜组织(对照组)中FAK蛋白的表达情况,采用免疫组织化学和革兰染色法检测Hp-L型的感染情况;(2)采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测40例新鲜胃癌组织及对应切缘正常胃黏膜组织(对照组)中FAK的mRNA表达。结果胃癌组FAK蛋白的表达阳性率高于对照组(P0.05),且FAK的高表达与分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(P0.05),与年龄、性别、肿瘤大小无关(P0.05);RT-PCR显示,肿瘤组织、远端正常对照组织的FAK表达量差异明显(P0.01)。胃癌组Hp-L型检出率72.5%(87/120)与对照组37.5%(15/40)有显著性差异(P0.05),与免疫组化Hp-L型抗原表达率65.0%(78/120)无显著性差异(P0.05),Hp-L检出阳性率为69.2%(83/120);胃癌组中Hp-L型感染阳性组的FAK表达阳性率高于Hp-L型阴性组(P0.05),且Hp-L型阳性率和FAK蛋白的表达呈正相关(r=0.291,P0.05)。结论FAK蛋白和mRNA在胃癌中的表达增加,且与胃癌的浸润、转移相关,其机制可能与幽门螺杆菌L型(Hp-L型)感染有关。     

胃腺癌组织中GDF-15和p53表达特征及其临床意义

目的探讨胃腺癌及癌旁正常组织中生长分化因子15(growth differentiation factor-15,GDF-15)和p53表达的特征及临床意义。方法采用免疫组织化学Polink-1两步法检测91例胃癌手术标本,相应91例癌旁正常组织、64例肠化腺体及36例淋巴结转移癌组织中GDF-15和p53的表达特征,并结合临床资料分析其表达与临床病理参数的关系。结果 GDF-15在肠上皮化生腺体、胃腺癌和淋巴结转移癌组织中的阳性表达率均显著低于癌旁组织。GDF-15的阳性表达率与患者年龄、浸润深度、淋巴结转移及p TNM分期呈正相关,而与其它临床病理参数无关。p53在癌旁正常胃粘膜腺体和肠上皮化生腺体中均不表达,在胃腺癌和淋巴结转移癌组织中的过表达阳性率均高于癌旁组织和肠上皮化生腺体。p53过表达的阳性率与患者年龄、Lauren分型(肠型与弥漫型)和分化程度呈正相关,而与其它临床病理参数无关。GDF-15与p53免疫反应性在胃癌组织中呈正相关。结论 GDF-15可作为胃腺癌的胃壁浸润能力、淋巴结转移能力及临床病理分期的重要评价指标,而p53过表达可能与Lauren分型的肠型胃癌有关。尤其在老年患者中,GDF-15和p53过表达在胃腺癌的发生、进展中扮演重要角色,并起协同作用。     

EZH2在胃癌组织中的表达及与Hp-L型感染关系的探讨

目的探讨EZH2在胃癌组织中表达的意义及与幽门螺杆菌L型(Helicobacter pylori-L,Hp-L)感染的关系。方法 (1)应用免疫组织化学Elivision法和革兰染色法检测80例胃癌组织及30例癌旁组织(对照组)中EZH2蛋白的表达和Hp-L型的感染情况;(2)采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测30例新鲜胃癌组织及对应切缘正常胃黏膜组织(对照组)中EZH2的mRNA表达。结果胃癌组EZH2蛋白表达的阳性率高于对照组(P<0.05),且EZH2表达水平升高与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05),与性别、年龄无关(P>0.05);RT-PCR显示,肿瘤组织、远端正常对照组织的EZH2表达量差异明显(P<0.01)。胃癌组Hp-L型检出率78.8%(63/80)与对照组23.3%(7/30)有显著性差异(P<0.05),与免疫组化Hp-L型抗原表达率73.8%(59/80)无显著性差异(P>0.05),Hp-L检出阳性率为71.3%(57/80);癌组中Hp-L型感染阳性组的EZH2表达阳性率高于Hp-L型阴性组(P<0.05),且Hp-L型阳性率和EZH2蛋白的表达呈正相关(r=0.250,P<0.05)。结论 EZH2蛋白和mRNA在胃癌中的表达增加,且与胃癌的浸润、转移相关,其机制可能与幽门螺杆菌L型(Hp-L型)感染有关。     

组胺H4 受体在胃腺癌组织中的表达及临床意义

目的:研究胃癌腺癌(gastric adenocarcinoma,GAC)中组胺H4受体的表达水平及其临床意义。方法:60例GAC组织(病例组)与配对癌旁组织(adjacent normal tissue,ANT)中应用免疫组织化学技术检测组胺H4受体的表达,应用实时荧光定量RT-PCR方法检测组胺H4受体mRNA的表达,统计分析组胺H4受体表达与临床病理特征之间的关系。结果:①胃腺癌组织中组胺H4受体蛋白的阳性表达率(11.7%)显著低于癌旁正常组织(96.7%)。②胃腺癌组织中组胺H4受体mRNA水平较癌旁组织明显降低(p<0.001)。③组胺H4受体蛋白和mRNA表达异常和肿瘤的病理分级有相关性(p=0.0027和p=0.0011),也与有无胃周淋巴结转移有关(p<0.001和p=0.0049)。结论:组胺H4受体在胃腺癌组织有表达异常,表达量与病理分期相关。组胺H4受体表达异常和组胺水平紊乱可能在胃癌发生发展过程中有重要作用。     

MDM2在胃癌组织中的表达及与Hp-L型感染关系的研究

目的研究MDM2在胃癌组织中的表达意义及其与幽门螺杆菌L型(Helicobacter pylori-L,Hp-L)感染在胃癌发生中的关系。方法 (1)应用革兰染色法和免疫组化学法检测100例胃癌及对应的40例癌旁正常胃黏膜组织(对照组)中Hp-L型感染和MDM2蛋白的表达情况;(2)应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测MDM2的mRNA在30例新鲜胃癌组织及其对应的癌旁正常胃粘膜组织(对照组)中的表达情况。结果 100例胃癌组织及对应的40例癌旁正常胃粘膜组织中MDM2阳性表达率为71.0%(71/100)和42.5%(17/40),可见MDM2在胃癌组织中高表达和在非胃癌组中低表达具有统计学意义(P0.05),且MDM2表达水平升高与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(P0.05),与性别、年龄无关(P0.05);RT-PCR显示,肿瘤组织MDM2的表达明显高于远端正常胃黏膜对照组织的表达量且差异明显(P0.01)。革兰染色和免疫组化两种方法检测Hp-L型结果具有一致性(P0.05),胃癌组织中Hp-L型感染阳性组的MDM2表达阳性率高于Hp-L型阴性组(P0.05),且Hp-L型阳性率和MDM2蛋白表达呈正相关(r=0.447,P0.05)。结论 MDM2蛋白在胃癌中呈高表达,且与胃癌的浸润、转移有关,其机制可能与Hp-L型感染有关。     

转醛醇酶在胃癌组织中的特异性表达

目的:在胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织之间比较转醛醇酶(TAL)的活性与表达的变化,探讨转醛醇酶活性或表达变化与肿瘤发生机制的可能联系.方法:转醛醇酶活性测定,Western免疫印迹测定TAL蛋白表达.结果:胃癌组织中TAL活性明显高于癌旁组织及正常皮肤组织(p＜0.05).癌旁组织中TAL活性低于正常组织(p＜0.05).TAL在胃癌组织和正常胃组织中的蛋白水平没有显著性差异.结论:转醛醇酶的活性升高参与胃组织癌变过程.     

Cyclin G1、MDM2和p53在胃腺癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨细胞周期蛋白G1(cyclinG1)、鼠双微体基因(MDM2)和p53在胃腺癌组织中的表达意义及相关性。方法采用免疫组织化学方法(SP法)检测54例胃腺癌组织中cyclinG1、MDM2和p53的表达,以20例正常胃粘膜组织作为对照。结果cyclinG1、MDM2、p53在胃腺癌组织中的阳性表达率分别为62.96%、53.70%、44.44%,而在正常胃粘膜组织中的阳性表达率分别为0%,15.00%,0%,两者比较差异均有显著性(P均<0.05),cyclinG1、MDM2在胃腺癌中的表达与肿瘤的分化程度相关(P均<0.05)。胃癌组织中MDM2蛋白的表达与p53的表达呈正相关(r=0.307),而cyclinG1蛋白的表达与p53的表达无明显相关性。结论CyclinG1、MDM2、p53的阳性表达在胃癌的发生、发展过程中起着重要的的作用。MDM2可能是通过调控p53的活性而促进胃癌的发生、发展,cyclinG1可能以不依赖p53的途径发挥作用。     

胃癌中CDC4和cyclin E的表达及临床意义

检测胃癌中CDC4/Fbxw7、cyclin E的表达,分析其与胃癌临床病理特征的关系和临床意义.采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测部分胃癌和胃正常组织中CDC4、cyclin E mRNA的表达;免疫组化(SP法)检测60例胃癌组织及对应正常组织中CDC4/FBXW7、cyclin E蛋白的表达,探讨两者的临床病理特征之间的关系.胃癌中CDC4蛋白表达显著低于正常组织(P<0.05),而cyclin E蛋白的表达在胃癌组织中显著增高,阳性率与癌旁正常组织比较,差异有统计学意义(P<0.01).CDC4、cyclin E蛋白和mRNA表达均与胃癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移及浸润深度有关.CDC4、cyclin E在mRNA表达水平上呈负相关.CDC4的表达缺失可能导致cyclin E的过表达.CDC4的低表达可能是胃癌诊疗及预后判断的重要生物学指标.     

胃癌组织中ENO1、M2-PK 蛋白表达及其临床意义

目的:探讨胃癌组织中烯醇化酶-α(enolase-α,ENO1)、肿瘤型丙酮酸激酶(tumor M2 pyruvate kinase,M2-PK)的表达、相互关系及临床病理学意义。方法:应用免疫组织化学SP染色方法分别对55例胃癌组织和23例胃良性病变组织切片染色,观察胃癌组织和良性病变组织ENO1、M2-PK的表达情况及分析两者临床病理关系。结果:胃癌组织中ENO1阳性表达率为67.3%(37/55),明显高于胃良性病变组30.4%(7/23)(P<0.01),其表达与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均显著相关(均P<0.05)。M2-PK在胃癌组织中的阳性表达率为78.2%(43/55),明显高于胃良性病变组织39.1%(9/23)(P<0.01),其表达与胃癌分化程度、浸润深度均显著相关(均P<0.05)。胃癌组织中ENO1与M2-PK的表达呈正相关(r=0.5729,P<0.05)。结论:ENO1和M2-PK的表达上调与胃癌的发生、发展可能有关,联合检测两种蛋白在肿瘤组织中的表达,对临床判断胃癌的预后有一定的指导意义。     

PTEN和EGFR在胃癌中的表达及相关性研究

目的:检测第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因PTEN及表皮生长因子受体EGFR在胃癌组织中的表达,探讨两者与胃癌肿瘤行为的关系及意义。方法:采用免疫组织化学染色法(S-P法)检测105例胃癌组织及癌旁正常胃组织中EGFR和PTEN蛋白的表达水平,并将检测结果与临床病理参数进行综合分析。结果:胃癌组织PTEN的表达56.19%明显低于正常组织中的表达的表达92.3%,而胃癌组织EGFR的表达46.67%明显高于正常组织7.62%,(P<0.01)。二者的表达与性别和年龄无相关性(P>0.05),与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期有相关性(P<0.05)。结论:PTEN在胃癌组织中呈低表达,EGFR在胃癌组织中存在高表达,与胃癌的发生、发展有一定关系,并与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期密切相关,二者呈负相关。     

PKCβⅡ和EGFR在胃癌中的表达及意义

目的:检测蛋白激酶CβⅡ亚型(PKCβⅡ)、表皮生长因子受体(EGFR)在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌临床病理特征的关系.方法:应用免疫组化(S-P法)检测105例癌旁正常胃组织和手术切除胃癌标本中PKCβⅡ、EGFR的表达状况,并将检测结果与临床病理特征进行综合分析.结果:癌组织和癌旁正常胃组织PKCβⅡ阳性表达率分别为62.86%和44.76%,二者之间有显著性差异(P<0.05);EGFR阳性表达率分别为46.67%和7.62%二者之间亦具有显著性差异(P<0.05).PKCβⅡ和EGFR的表达呈正相关(P<0.05),它们的表达与胃癌组织学类型、浸润深度、淋巴结转移、组织学分级、临床TNM分期相关(P<0.05),与患者的性别,年龄无关(P0.05).结论:PKCβⅡ和EGFR在胃癌组织中均存在高表达,与胃癌组织类型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移以及临床TNM分期有一定关系.联合检测两种指标有望对胃癌发生发展的研究、判断预后及靶向治疗提供依据.