普氏立克次氏体的组织培养I.鼠胚肺单层细胞培养普氏立克次氏体

本文报告了用含有10％牛血清的#199综合培养基,培养了经垃胰蛋白酶分散的鼠胚肺组织细胞。 用普氏立克麦氏体鼠啼毒株感染了单层细胞,不加抗菌素在340C培养,立克次氏体的繁殖开始于48—96小时,高举在4--7天,约有80％的细胞受到感染。立克次氏体的发育过程是：丝状体一链状体一长杆状一短杆状。有时在丝状体的前一阶段时间内先有始体出现。在油浸接物镜下看到的细胞病变是：1)梭形及多边形上皮细胞被极端增殖的立克次氏体所胀破;2)这两种上皮细胞的退化和碎解;3)游离到细胞外的立克次氏体。至于星状上皮细胞内立克灾氏体的培殖较其他类型的上皮细胞中的增殖为早。巢形细胞在感染的早期出现室泡性变化,后期细胞脱落,立克夹氏体寄生于鏖泡之间的间隙中。组织培养收获物(细胞)经鼻腔感染小白鼠证明有致病力,且可在鼠肺涂片上找到大量的立克我氏体。据估计,普氏立克六氏体在鼠胚肺组织培养中的增殖量至少为原接种量的十几倍。因此,可以考虑用本法制备立克交氏体抗原和进行疫苗的研究。     

动物实验感染恙虫病立克次氏体后对变形桿菌OXK血清学反应的观察

近年来,许多人以动物血清对OXK菌株之凝集反应作为恙虫病自然疫源地调查或作为立克次氏体分离的指征之一。本文选择浙江株恙虫痈立克我氏体2株,感染小白鼠、大自鼠、豚鼠及家兔。在感染后每隔l星期取血l幺,共血清对立克次氏体补体结合试验均呈阳性反应,而对变形杆菌0xK菌株凝集反应则为阴性。根据上述结果,我们认为外斐氏(oxK菌株)反应用于恙虫病自然疫源地动物宿主的调查,或作为分离立克次氏体的一种初步指征的价值十分有限,井且还是可疑的。     

恙虫热立克次体(宫崎地区分离株)在BSC—1细胞中的增殖

恙虫热立克次氏体的致病性有多种类型。从宫崎地区的恙虫病患者中分离出的立克次氏体对小白鼠致病性弱,小白鼠虽可感染发病,但不死亡,很难在腹腔内细胞或脾中发现立克次氏体。在一般恙虫热立克次氏体的研究中常用的鸡胚卵黄囊和细胞培养法中几乎不繁殖,这就使立克次     

Q热立克次氏体免疫学检查法的进一步研究

应用免疫学的方法,检查Q热立克次氏体已证实具有很高的敏感性。它比常用的血清学方法补体结合试验能检出更少量的立克承氏体,而且得出的结果快。更大的特点是,做一次检查可以了解感染过程,有助于区别感染的早期或晚期,或辨别现症感染或过去感染,这是血清学方法所不能比拟的。     

恙虫病立克次氏体引起宿主细胞的组织化学改变

本文叙述应用RNA及DNA染色方法,观察恙虫病立克次氏体感染兔睾丸单层细胞后的核酸染色改变。随着感染后日数的增加,在胞浆内细胞核旁可见有规律地出现堆状排列的鲜红色RNA小颗粒,这些颗粒与恙虫病立克次氏体的排列位置一致,出现时间亦与立克次氏体的繁殖曲线平行;同时感染后的细胞浆RNA染色往往也较对照深。此外,感染后的_细胞核及核仁有时亦可见到一些不规律的改变。     

干扰素及其基因工程

1　概述Ｚｓｓａｃｓ和Ｌｉｎｄｅｎｍａｎｎ于 185 7年首先发现受到病毒感染的细胞能产生一种物质 ,可以保护其它细胞抗御多种病毒的感染 ,并命名为干扰素。现定义为 :由干扰素诱导剂作用于活细胞后 ,由活细胞产生的一种蛋白质 ,当它再作用于其他细胞时 ,使其它细胞立即获得抗病毒和抗肿瘤等多方面的免疫力。病毒、细菌、立克次图 1　干扰素的作用机制氏体、真菌以及原虫等都能诱导细胞产生干扰素。细菌的内毒素、外毒素、放线菌素Ｄ(ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎＤ)等也能诱导产生干扰素。人工合成的物质如聚次黄嘌呤核苷酸 (聚肌苷酸 ) :聚胞…     

重庆市斑疹伤寒病原体的分离

本文报告1963年3—4月份重庆市某单位斑疹伤寒流行当中,从4例典型病人分离出3株立克次体。该3株立克次体不适应于鸡胚而能使豚鼠产生典型的发热反应,发烧期间多数感染豚鼠出现轻微的暂时性阴囊反应,并在睾丸涂片中查到少量的典型立克次体,感染豚鼠的血清补体结合试验,普氏滴度高于莫氏2倍以上,证明这3株病原系普氏立克次体。除此,由病人体虱戚染豚鼠试验,亦证明体虱确携带了普氏立克灰体。由此说明重庆市此次所发生的斑疹伤寒确系流行性斑疹伤寒。     

普氏立克次体的组织培养II．培养普氏立克次体单层细胞的选择

本文报告了从9种组织培养中选出3种,即鼠胚皮肌细咆、鼠胚肺细胞及Detroit-6传代细胞均能使普氏立克次体发育良好。较详细地描述了此病原体在这些细胞中生长繁殖的规律,并发现其在传代细胞中增殖高峰时,能使受染细胞产生特异性的形态学变化。进一步证明普氏立克次体在细胞中的生长特点是在胞浆内繁殖,在组织培养中不能长期传代。     

胶体金渗滤法检测贝氏柯克斯体的研究

本文建立一种快速、敏感、适于基层应用的贝氏柯克斯体（俗称Ｑ热立克次体）的检测方法。将Ｑ热立克次体多克隆抗体点于硝酸膜上,用以捕获待检标本中的Ｑ热立克次体抗原,通过胶体金标记的鼠抗Ｑ热立克次体单克隆抗体直接显色,阳性者出现红色斑点。结果表明,用该法检测Ｑ热立克次休实验感染豚鼠血液,小鼠肝或脾,蜱血淋巴等标本取得了较满意的结果,整个过程仅需５－６分钟。与其他病原体无交叉反应,敏感度不低于５０ｎｇ立克次     

实验性巨细胞病毒持续感染小鼠的干扰素诱生反应

C57BL/6小鼠经腹腔感染MCMV后,唾液腺可持续分离出病毒102天以上。在感染后6小时至32天内,血清中未能测到>1:4的干扰素活性。然而,MCMV感染小鼠的脾细胞在体外仍具有产生干扰素的能力。除MCMV感染后第5天对NDV诱生干扰素滴度略有低下外,其他感染组与对照组小鼠脾细胞对NDV诱生α/β干扰素与Con A诱生γ干扰素的滴度均无显著差异。感染鼠脾细胞与经紫外线灭活后的MCMV感染的同品系鼠胚细胞共培养也能产生干扰素,其高峰在MCMV感染后第9天。此种干扰素不耐pH2处理,经抗干扰素血清中和试验鉴定为γ干扰素。此外还进一步证明,尽管在感染后第5天的鼠脾平皿贴壁细胞(主要为巨噬细胞)中仍能分离到MCMV,但此细胞组分在体外用NDV诱生后产生的α/β干扰素滴度都与对照组无显著差异。因此认为:C57BL/6小鼠持续感染MCMV后,血清中未能测到干扰素,并非由于MCMV感染直接抑制鼠脾细胞产生干扰素反应的能力。整体动物在MCMV感染后干扰素反应低下可能与体内存在其他免疫调节性体液因子或细胞有关。     

微生物防治农林害虫的研究与进展

近十多年来,由于农业和林业上长期大量使用化学农药,破坏了大自然的生态平衡,污染了环境,给人类造成了灾难.所以世界上绝大多数国家对生物防治普遍重视起来.利用昆虫病原微生物防治农林害虫,是生物防治工作中的重要组成部分.昆虫病原微生物包括病毒、立克次氏体、细菌、真菌和原生动物等.目前国内外研究和应用的主要对象是细菌、真菌和病毒三大类.立克次氏体还在试验阶段. 细菌治虫目前,已分离到的昆虫病原菌的菌种和变种约有100种,其中研究最多、效果最好的是芽孢杆菌属的苏云金杆菌类和日本金龟子芽孢杆菌. 1.苏云金杆茵苏云金杆菌类是广谱杀虫细菌.1902年     

干扰素β对内皮前体细胞诱导的肿瘤血管生成作用的研究

目的:证实通过基因改造骨髓来源的内皮前体细胞(EPCs)可以使有抑瘤作用的分子靶向肿瘤部位,抑制肿瘤的生长.方法:我们用病毒载体将人干扰素β基因转入EPCs中,转入人干扰素β基因的EPCs与非小细胞性肺癌细胞SPC-A1的共培养,观察SPC-A1的死亡情况;将SPC-A1细胞与离体培养的EPCs在基因鼠中共同荷瘤测量肿瘤的生长.结果:转染了人干扰素β基因的EPCs能诱导共培养的SPC-A1细胞的死亡;当SPC-A1细胞与离体培养的EPCs在基因鼠中共同荷瘤时肿瘤的生长加速,而干扰素β抑制了EPCs的促瘤作用,并且EPCs与肿瘤细胞共同荷瘤后引起的肿瘤组织中血管密度的增加也在干扰素β的作用下受到抑制.结论:基因改造的EPCs能成为将抑瘤因子靶向肿瘤部位的传输媒介,达到抑制肿瘤的生长目的.     

查菲埃立克体的抗原分子

查菲埃立克体(E.chaffeensis)是埃立克体属第1基因群中的1个种,主要侵犯单核细胞系统,所致人的感染称为人单核细胞埃立克体病(HME).它有7种主要抗原蛋白,相对分子质量(Mr)分别为120×103、65×103、58×103、44×103、29×103、28×103和22×103,其中120×103蛋白是查菲埃立克体的种特异抗原;28×103蛋白是一家族蛋白,与同属的犬埃立克体有高度同源性,具基因群特异性,是潜在的保护性抗原;58×103和65×103蛋白与致病性有关;44×103蛋白为HME分子流行病学的研究提供了基础.     

青蒿琥酯治疗肺烟曲霉感染自噬机制

目的探究青蒿琥酯在鼠肺感染烟曲霉后,对鼠肺自噬相关蛋白的表达影响。方法用一定量的烟曲霉的活化孢子感染鼠肺,建立肺烟曲霉病模型。同时用青蒿琥酯注射一组鼠肺,两性霉素B注射一组鼠肺,剩余的作为感染组。24h后,取各组鼠肺进行病理切片染色,观察各组病理情况;取各组鼠肺的组织并匀浆,收集各组的孢子,用真菌活性检测试剂盒检测孢子活性并将肺巨噬细胞进行分离、裂解,离心取上清,用Western-blot法检测上清液中的Dectin-1、ROS、LC3Ⅱ的表达水平。结果青蒿琥酯注射组的鼠肺病理切片中的孢子比感染组数量少且聚集在一起,未长出菌丝,而体外分离的真菌孢子,青蒿琥酯组的活性明显受到抑制。经Western-blot显示青蒿琥酯具有增强肺巨噬细胞Dectin-1、ROS、LC3Ⅱ的表达。结论青蒿琥酯可通过抑制烟曲霉的活性和增强鼠肺巨噬细胞的自噬水平,对抗鼠肺烟曲霉感染。     

中朝边境地区林区鼠类几种重要蜱媒病原体感染的血清学调查

为了解东北林区啮齿动物蜱媒传染病感染状况,采用间接免疫荧光法对吉林省集安、辽宁省宽甸林区捕获的野鼠进行7种蜱媒病原体Ig G抗体检测,检测鼠血清75份,斑点热立克次体、粒细胞无形体、查菲埃立克体、伯氏疏螺旋体、蜱媒脑炎病毒、新布尼亚病毒、土拉弗菌抗体阳性率分别为13.33%、8.00%、14.67%、4.00%、1.33%、6.67%、1.33%,统计学处理差异非常显著(χ2=19.83,P=0.003)。不同鼠种对7种蜱媒病原体抗体检出阳性率各不相同,但差异无统计学意义。75份野鼠标本中,复合感染率为8%。调查地区野鼠中7种蜱媒病原体感染比较普遍,以斑点热立克次体和查菲埃立克体阳性率为高。     

乙型肝炎病毒感染Babl/c乳鼠动物模型的研究

目的:目前HBV感染动物模型各有局限,无法全面研究HBV。拟建立人HBV血清感染Babl/c乳鼠的动物模型,以便于研究HBV感染与乳鼠免疫力低下的相关性。方法:将20只Babl/c乳鼠随机分为实验组、对照组、PBS组及空白组,通过高压水动力尾静脉注射法将人HBV血清、正常人血清、PBS注入各组乳鼠体内,记录接种后乳鼠体温及体质量。于接种后第7、15、30 d采集血清标本,应用ELISA检测HBs Ag、HBe Ag的表达情况,实时荧光定量PCR检测HBV DNA浓度。结果:接种后各组小鼠体温及体质量均无明显变化。实验组中共4只乳鼠可检测到HBs Ag为阳性且维持时间长达30 d,但HBe Ag均为阴性,HBV DNA浓度均未达500 IU/ml;余下各组检测HBs Ag、HBe Ag均为阴性。结论:通过高压水动力尾静脉注射法接种人HBV血清,可成功使Babl/c乳鼠感染HBV。本实验证实乳鼠免疫力低下,HBV血清进入体内未能有效清除,对HBV存在易感性,为建立HBV感染动物模型提供实验依据,可用于研究HBV对免疫状态的影响。     

昆虫共生菌研究进展

昆虫与微生物的共生是一种普遍存在的现象,与昆虫共生的微生物从形态学或生活史上可大致分为三大类:细菌、酵母和立克次氏体.     

什么是疫苗、菌苗和类毒素,它们有何不同?

答:疫苗、菌苗、类毒素均属于生物制品。所谓生物制品是指人们利用微生物本身(例如病毒、细菌、立克次氏体、衣原体、螺旋体等等),或是它们产生的毒素、酶,它们的提取成分,或是利用人或动物的细胞、血清等制成的各种制剂。这些生物制剂常用于疾病的预防、治疗和诊断。生物制品的种类很多,其中包括疫     

流行性出血热病原学的研究——Balb/c乳鼠感染病毒后鼠脑、鼠肺超微结构的观察

Balb/c乳鼠用标准病毒(EHF)H8278感染后取鼠脑、鼠肺进行电镜观察,结果证明:在鼠脑及鼠肺细胞内均发现有病毒,病毒特点:呈园形或椭园形,单位膜结构清楚,内含有比较疏松的丝状或颗粒状结构,单位膜外有微突。病毒的大小在90～120mm之间。此外在细胞浆内并发现有包涵体。     

DNA双链密码对使用的不对称性

目的：分析基因组组分极其偏向的厌氧性粘菌和立克次氏体基因中密码对的使用,研究DNA双链密码对使用的不对称性。方法：生物统计学。结果：发现脱卤厌氧粘菌和立克次氏体基因组中分别有17%和21%的密码对在DNA双链上的使用偏好性正好相对,这表明它们的前导链与滞后链上密码对的使用偏好存在差异。因此,影响密码对搭配的重要原因之一是基因所在链的特性。这些特性可能包括：基因方向性偏好、密码子使用偏好、密码子的前后文关系等。结论：造成上述两物种DNA双链间密码对使用不对称的原因可能是DNA链特异的突变偏好性和在复制、转录、翻译水平上的自然选择约束。