两相分配法制备玉米根质膜及其纯度鉴定

用ＤｅｘｔｒａｎＴ５００,ＰＥＧ３３５０两相体系制备玉米根质膜．首先在高盐浓度（２２ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）下选用五种不同的聚合物浓度（５．８％、６．０％、６．２％、６．３％、６．４％,Ｗ／Ｗ）,研究了玉米根质膜在两相体系中的分配情况,在此基础上进一步研究了Ｎａ－Ｃｌ浓度（２、４、５、１１、２２ｍｍｏｌ／Ｌ）对玉米根质膜的纯度及得率的影响．结果表明,制备玉米根质膜选用６．２％（Ｗ／Ｗ）聚合物浓度,７．５ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的两相体系比较合适．标志酶鉴定及低ｐＨ值磷钨酸染色电镜检测均表明获得了高纯度密实的正向型的质膜囊泡,质膜标志酶ＶＯ３－４－ＡＴＰａｓｅ的活性潜势达８８．９％．     

等渗NaCl和KCl胁迫对高粱幼苗生长和气体交换的影响

本文比较研究了等渗ＮａＣｌ和ＫＣｌ胁迫下,高粱幼苗生长及叶片离子含量、质膜相对透性和有关气体交换参数的变化。结果表明,在低浓度ＮａＣｌ和ＫＣｌ胁迫７天时,高粱生长、含水量和质膜相对透性与对照相比没有明显变化,而净光合速率、蒸腾速率和气孔导度已明显下降,叶肉细胞间隙ＣＯ２浓度明显增加。ＮａＣｌ胁迫下叶片Ｎａ＋含量成倍增加,而Ｋ＋和Ｃａ２＋含量无明显变化。ＫＣｌ胁迫时叶片Ｋ＋含量明显增加,Ｃａ２＋含量明显下降,而Ｎａ＋含量没有明显变化。随着ＮａＣｌ或ＫＣｌ浓度的增加,幼苗生长和叶片含水量明显下降,质膜透性和细胞间隙ＣＯ２浓度明显增加,净光合速率、蒸腾速率和气孔导度进一步下降。ＮａＣｌ胁迫下叶片Ｎａ＋含量进一步增加,Ｋ＋和Ｃａ２＋进一步下降,而ＫＣｌ胁迫下叶片Ｋ＋含量进一步增加,Ｎａ＋和Ｃａ２＋含量进一步下降。ＫＣｌ对高粱生长抑制、质膜透性、Ｃａ２＋含量下降及光合气体交换参数的影响均明显大于等渗的ＮａＣｌ。     

两相法分离地被菊叶片质膜的研究

以地被菊(Dendranthema×grandiflorum Kitamura)叶片为材料,通过水溶性聚合物Dextran T-500和PEG 3350所构成的两相分配体系制备质膜。在一定盐浓度（5 mmol.L-1 NaCl）下选用5种不同的聚合物浓度（5.8%、6.0%、6.2%、6.4%、6.6%,W/W）,研究了地被菊叶片质膜在两相体系中的分配情况,在此基础上进一步研究了不同盐浓度（2、4、5、10、20 mmol.L-1 NaCl）对地被菊叶片质膜的纯度及蛋白产率的影响。标志酶鉴定及磷钨酸染色电镜检测的结果表明,地被菊叶片选用6.2%（W/W）聚合物浓度和7 mmol.L-1 NaCl组成的两相分配体系可获得较高纯度的密实正向型质膜囊泡。     

盐胁迫下Ca^2＋对小麦根无机离子分布和膜脂脂肪酸的影响

用扫描电镜、Ｘ－射线能谱仪和等离子耦合吸收光谱分析发现,培养在含ＮａＣｌ培养液中,小麦根吸收大量Ｎａ＾＋和Ｃｌ＾－,Ｋ＾＋和Ｃａ＾２＋的吸收降低、质膜相对透性提高,Ｋ＾＋,Ｎａ＾＋和Ｃｌ＾－的相对外渗百分率增加,培养在补充ＣａＣｌ２含ＮａＣｌ培养液的,Ｎａ＾＋和Ｃｌ＾－含量明显减低,Ｋ＾＋和Ｃａ＾２＋提高,质膜相对透性下降,Ｋ＾＋,Ｎａ＾＋和Ｃｌ＾－相对外渗百分率减少。由气相色谱分析可知,用含Ｎａ     

两相分配法制备南极红酵母质膜

用葡聚糖 T-500(Dextran T-500)和聚乙二醇(PEG-3350)两相体系制备南极红酵母(Rhodotorula sp.)菌株 NJ298 的质膜.首先在 2 mmol/L KCl 浓度下,选用5种不同的聚合物浓度(5.6%、5.8%、6.0%、6.2%、6.4%,W/W),研究了 NJ298 质膜在两相体系中的分配情况,在此基础上进一步研究了 KCl 浓度(2 mmol/L、4 mmol/L、6 mmol/L、8 mmol/L、10 mmol/L)对 NJ298 质膜的纯度及得率的影响.结果表明,选用6.0%聚合物浓度,4 mmol/LKCl 的两相分配体系,分离3次可得到相对纯度在 78.2%的南极红酵母质膜组分,标志酶鉴定及磷钨酸染色电镜检测均表明获得了高纯度密实的正向型的质膜囊泡.这为进一步研究该菌株的南极极端环境适应机制奠定了基础.     

两相法分离地被菊叶片质膜的研究

以地被菊(Dendranthema×grandiflorum Kitamura)叶片为材料,通过水溶性聚合物Dextran T-500和PEG 3350所构成的两相分配体系制备质膜.在一定盐浓度(5mm01·L-1NaCl)下选用5种不同的聚合物浓度(5.8%、6.0%、6.2%、6.4%、6.6%,W/W),研究了地被菊叶片质膜在两相体系中的分配情况,在此基础上进一步研究了不同盐浓度(2、4、5、10、20mm01·L-1NaCl)对地被菊叶片质膜的纯度及蛋白产率的影响.标志酶鉴定及磷钨酸染色电镜检测的结果表明,地被菊叶片选用6.2%(W/W)聚合物浓度和7mm01·L-1NaCl组成的两相分配体系可获得较高纯度的密实正向型质膜囊泡.     

两相分配法制备南极红酵母质膜

用葡聚糖T-500(Dextran T-500)和聚乙二醇(PEG-3350)两相体系制备南极红酵母(Rhodotorula sp.)菌株 NJ298的质膜。首先在2 mmol/L KCl浓度下, 选用5种不同的聚合物浓度(5.6%、5.8%、6.0%、6.2%、6.4 %, W/W), 研究了NJ298质膜在两相体系中的分配情况, 在此基础上进一步研究了KCl浓度(2 mmol/L、4 mmol/L、6 mmol/L、8 mmol/L、10 mmol/L)对NJ298质膜的纯度及得率的影响。结果表明, 选用6.0%聚合物浓度, 4 mmol/L KCl的两相分配体系, 分离3次可得到相对纯度在78.2%的南极红酵母质膜组分, 标志酶鉴定及磷钨酸染色电镜检测均表明获得了高纯度密实的正向型的质膜囊泡。这为进一步研究该菌株的南极极端环境适应机制奠定了基础。     

盐胁迫对高粱根质膜离子通道通透性的影响

用１００ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ、２００ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ、３００ ｍ ｍ ｏｌ／ＬＮａＣｌ依次处理萌发后３ ｄ 的高粱（Ｓｏｒｇｈｕｍｖｕｌｇａｒｅ Ｐｅｒｓ．）幼苗，分离纯化根质膜。将质膜嵌入预先涂制好的平面脂双层，然后用电学方法测定该脂双层的离子选择通透性。膜的两测分别加入ＮａＣｌ和ＫＣｌ，在电压钳位下测定不同膜电位时的膜电流，通过ＧＨＫ 电压等式计算膜的离子选择通透性。结果表明质膜的离子选择通透性在盐胁迫下发生显著变化，对照的Ｋ＋ 、Ｎａ＋ 通透比（ＰＫ∶ＰＮａ）＝ ３．５，处理后ＰＫ∶ＰＮａ＝ １．５。讨论了这一变化的含义     

NaCl、Na_2SO_4和Na_2CO_3胁迫对小麦叶片自由基含量及质膜透性的比较研究

分别用浓度为２５ｍｍｏｌ／Ｌ、５０ｍｍｏｌ／Ｌ、１００ｍｍｏｌ／Ｌ和２００ｍｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ、Ｎａ２ＳＯ４和Ｎａ２ＣＯ３的营养液培养小麦４ｄ,较之不含盐的营养液,其自由基含量上升,产生速率增加,叶片质膜透性增加。不同盐的影响也不同,在低浓度时,ＮａＣｌ的影响大于Ｎａ２ＳＯ４,高浓度时,ＮａＣｌ影响小于Ｎａ２ＳＯ４,Ｎａ２ＣＯ３的影响最为显著。实验结果也表现出小麦叶片自由基含量和质膜透性呈现较好的相关性。因此可认为,盐胁迫促使自由基含量增加,自由基通过过氧化作用影响质膜透性,从而影响植物的生长。     

席藻盐适应培养的研究

用０．２ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ作选择因子,可直接筛选得到耐０．２ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ席藻。在０．２ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ培养液中,席藻细胞逐日降解,到第３ｄ达最低点,３ｄ后细胞数上升。细胞降解随ＮａＣｌ浓度提高而加剧。在等渗浓度或等渗浓度以下,席藻能保持慢速增殖。维生素Ｂ１、吲哚乙酸、玉米素、赤霉素都未能提高席藻对盐类的培养适应能力。席藻对不同的盐溶液培养适应性有差异,而对多种盐复合溶液最能适应。     

小麦根质膜H^＋—ATPase的部分纯化

以小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）根为材料,采用不连续蔗糖密度梯度离心法制备高纯度质膜微囊。质膜经ＴｒｉｔｏｎＸ１００和ＫＣｌ处理后,再用Ｚｗｉｔｅｒｇｅｎｔ３１４增溶Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ,最后用硫酸铵沉淀得到部分纯化的质膜Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ。ＳＤＳＰＡＧＥ结果表明,经过上述步骤纯化,分子量为９４ｋＤ的膜蛋白组分得到富集;与质膜相比,其含量提高１５．７倍。部分纯化的质膜Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ可以水解ＡＴＰ,受Ｋ＋刺激,并被Ｎ,Ｎ′ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｍｉｄｅ（ＤＣＣＤ）抑制;ＡＴＰ水解活力被Ｎａ３ＶＯ４抑制９５％,但不被ＮａＮ３、ＮａＮＯ３和Ｎａ２ＭｏＯ４抑制。     

NaCl对水稻谷氨酸合酶和谷氨酸脱氢酶的胁迫作用

在ＮａＣｌ的胁迫下,水稻幼苗根和叶的谷氨酸合酶和谷氨酸脱氢酶的活性随着营养液中的ＮａＣｌ浓度的升高而降低;游离ＮＨ４＾＋在叶中积累,在根中未见明显变化。与根相比,叶对ＮａＣｌ的胁迫作用更为敏感。叶的ＮＡＤＨ－ＧＯＧＡＴ和ＮＡＤＨ－ＧＤＨ活性在ＮａＣｌ胁迫降低的程度明显大于根。无论是否有ＮａＣｌ存在,根的ＮＡＤＨ－ＧＤＨ活性明显高于叶。ＧＳ／ＧＤＨ比值分析提示,对对照下,根中的ＮＨ４＾存在,根的ＮＡ     

甜菜碱对NaCl胁迫下小麦细胞保护酶活性的影响

本文以小麦为材料,研究甜菜碱对ＮａＣｌ胁迫下小麦幼苗细胞保护酶系统的影响。结果表明,外源甜菜碱能够提高ＮａＣｌ胁迫下小麦幼苗超氧化物歧化酶、过氧化物酶等细胞保护酶的活性,抑制过氧化作用产物丙二醛的积累,降低叶片质膜透性和盐害对细胞膜的伤害。所有这些变化都有利于提高ＮａＣｌ胁迫下小麦幼苗细胞膜的稳定性、完整性和对ＮａＣｌ胁迫的适应性     

NaCl诱导大麦细胞微核及异常有丝分裂的研究

大麦幼苗生长在含ＮａＣｌ的介质中「ｃ（ＮａＣｌ）＝０,０．０５,０．１０,０．１５,０．２０,０．２５ｍｏｌ／Ｌ」,其根尖细胞有丝分裂指数下降,各ＮａＣｌ处理组的微核率均有不同程度地增加,并诱发产生了如染色体断片、后期染色体桥及“不均等分裂”等异常分裂。诱发微核及异常分裂细胞的比率与ＮａＣｌ浓度和作用时间呈正相关,浓度提高或作用时间延长则微核千分率与异常分裂细胞比率增高。     

盐分对碱蓬幼苗离子含量,甜菜碱水平和BADH活性的效应

研究了盐生植物碱蓬（Ｓｕａｅｄａ ｓａｌｓａ）生长在不同浓度的ＮａＣｌ和ＫＣｌ溶液中体内Ｎａ＋ 、Ｋ＋ 含量、甜菜碱水平和甜菜碱醛脱氢酶（ＢＡＤＨ）活性的动态变化。ＮａＣｌ处理９６ 小时后,碱蓬地上部Ｋ＋ 含量低于对照,而Ｎａ＋ 明显高于对照,并分别随外界盐度增加而升、降;ＫＣｌ处理的植株,Ｋ＋ 、Ｎａ＋ 含量变化与ＮａＣｌ处理的相反;甜菜碱水平和ＢＡＤＨ 活性随外界ＮａＣｌ浓度增加而升高,甜菜碱水平随处理时间延长而增大,ＫＣｌ对甜菜碱水平和ＢＡＤＨ 活性的效应类似ＮａＣｌ。证明ＮａＣｌ和ＫＣｌ均能促进盐生植物碱蓬体内甜菜碱的积累,初步证明ＢＡＤＨ 与甜菜碱的积累有关     

NaCl胁迫对玉米和滨藜叶片中内源多胺含量与幼苗生长的影响（？…

ＮａＣｌ胁迫下玉米内源腐胺和钠含量明显增加,亚精胺,精胺和钾含量显著降低,生长受到抑制,高浓度ＮａＣｌ胁迫下,滨藜内源多胺,钠和钾含量变化情况与ＮａＣｌ胁迫下的玉米有相同的趋势。     

两相法分离纯化橡胶树树皮质膜

橡胶树树皮质膜H~+-ATPase在橡胶树产排胶过程中扮演着重要角色,制备高纯度及高活性的质膜是研究质膜H~+-ATPase特性和功能的必要条件。该研究以一年生巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)树皮为材料,利用差速离心法获得粗膜微粒体,通过两相分配法分离纯化质膜,并研究两相体系中不同浓度聚合物(5.9%、6.1%、6.3%、6.5%、6.7%,W/W)和KCl(2、5、8、11、14 mmol·L~(-1))对质膜蛋白得率和纯化效率的影响。通过Bradford法对质膜蛋白得率进行检测,同时采用酶活性检测法对质膜纯度进行检测,分析结果表明选用6.4%(W/W)聚合物浓度和5mmol·L~(-1)KCl组成的两相体系可获得较高纯度和得率的橡胶树树皮质膜。通过电镜观察法在形态学上对质膜纯度进一步评价,利用铅铀能侵染全部膜组分使其染色,而磷钨酸只能专一性地侵染质膜并使其染色这一特性,分别使用铅铀和磷钨酸对切片进行染色,并通过透射电镜对切片染色程度进行直接观察,结果表明提取的粗膜微粒体中质膜组分较少,存在大量的细胞器膜污染,而纯化后的质膜膜组分较单一,其他膜组分污染较少,而且质膜大小较均一,可以用于进行后续橡胶树树皮质膜H~+-ATPase特性和功能的研究。     

根对矿质元素离子的交换吸附现象的对比研究

本文以洋葱、小麦、玉米、蚕豆根为实验材料,以０１％亚甲基蓝为染色剂,分别以０１％、１％、１０％浓度的ＮＨ４Ｃｌ和ＣａＣｌ２为离子交换溶液,进行了不同植物根系材料,交换溶液不同种类与浓度的对比研究。结果发现,用小麦、玉米、蚕豆根作实验材料比用传统的洋葱根作实验材料效果更为明显,其中以蚕豆根最好,其次为小麦根。实验结果还表明,同浓度的ＣａＣｌ２比ＮＨ４Ｃｌ作交换溶液效果更好,适当提高交换溶液浓度实验效果也增强     

酿酒酵母3——磷酸甘油脱氢酶的诱导,提纯和性质

在ＹＥＰＤ培养中添加ＮａＣｌ,可以诱导酿酒酵母细胞内３－磷酸甘油脱氢酶的形成,当ＮａＣｌ浓度达５％时,酶比活从０．０５Ｕ／ｍｇ提高到０．５Ｕ／ｍｇ;若再限制培养基中葡萄糖浓度在１００ｍｇ／Ｌ以下,酶比活可达到０．８９Ｕ／ｍｇ。酶比活与培养基中的ＮａＣｌ浓度的函数关系式为：Ｓａ＝０．１２９Ｃ＾３－０．０３８Ｃ＾２＋０．０３４Ｃ＋０．０６３。粗酶液经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５凝胶过滤,Ｂｌｕｅ Ｓｅｐ     

抗旱性不同的小麦幼苗对水分和NaCl胁迫的反应

分别测定抗旱小麦的８１３９（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．ｃｖ．８１３９）和干旱敏感品种甘麦８号（Ｔ．ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．ｃｖ．Ｇａｎｍａｉ Ｎｏ．８）在２０％ＰＥＧ６０００和１．２％ＮａＣｌ胁迫下的生长、光合作用、蒸腾作用及抗氧化保护系统的变化。结果表明,抗旱小麦８１３９对ＰＥＧ６０００有较强的抗性,但对ＮａＣｌ胁迫的抗性较差。ＮａＣｌ胁迫下,两种小麦根的生长均受到严重抑制,而在ＰＥ