不同杀虫剂选育对家蝇抗药性水平及kdr基因频率的影响

采用杀虫剂（溴氰菊酯和甲基嘧啶磷）筛选及不接触药物自然衰退的方法,研究了家蝇Musca domestica氯氟氰菊酯高抗品系(Cyh-R)对杀虫剂的抗性变化,探讨蝇类抗药性治理的方法。用点滴法测定氯氟氰菊酯对不同家蝇品系的毒力,比较抗药性的变化,结合特异性等位基因PCR扩增（PASA）技术检测了不同家蝇品系的kdr基因频率,探讨kdr基因频率与抗性水平之间的关系。结果表明:甲基嘧啶磷筛选后,氯氟氰菊酯对第2~8代Cyh-R品系的LD₅₀呈递减趋势,从F₀的2.8434 μg/蝇降为F₈的0.4404 μg/蝇,但第8~18代Cyh-R品系的LD₅₀呈逐代递增趋势;溴氰菊酯筛选后,氯氟氰菊酯对Cyh-R品系第2~16代的LD₅₀呈上升趋势,从F₀的2.8434 μg/蝇升至F₁₆的24.3249 μg/蝇;表明了施用有机磷杀虫剂可降低其对氯氟氰菊酯的抗药性,而施用拟除虫菊酯药剂则有助于其对氯氟氰菊酯抗药性的增长;不使用任何杀虫剂也能降低其对氯氟氰菊酯的抗药性,但下降速率低于甲基嘧啶磷。PASA技术检测表明Cyh-R品系的kdr抗性基因频率为88.8%,不经过任何药剂筛选其kdr抗性基因频率下降程度最大,达到69.7%;甲基嘧啶磷筛选后其结果降为78.8%,而经溴氰菊酯筛选后kdr抗性基因频率则明显升高,达到98.9%。通过对kdr抗性基因频率和抗性水平进行相关和回归分析表明kdr抗性基因频率与家蝇对氯氟氰菊酯的LD₅₀呈对数关系,即LD₅₀值高的品系其kdr抗性基因频率相应的也较高。建议在家蝇防治中考虑轮换用药。     

桔小实蝇抗性品系的微卫星DNA分析

用微卫星标记对桔小实蝇 Bactrocera dorsalis(Hendel) 敏感品系和3个抗性品系（敌百虫抗性品系、高效氯氰菊酯抗性品系和阿维菌素抗性品系）进行了基因组筛查。结果表明,抗性品系显示出微卫星DNA多态性,不同的抗性品系已经产生了不同的遗传变异。该结果有利于指导控制桔小实蝇抗药性产生以及抗药性的田间监控,同时在抗药性产生的遗传学机制研究方面有一定的意义。     

家蝇中乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶和多功能氧化酶活性与抗药性的关系

本文对几种抗药性和敏感性家蝇品系的乙酰胆碱酯酶(AChE)、羧酸酯酶及多功能氧化酶(MFO)进行了测定.结果表明:①抗药性品系和敏感性品系的AChE活力差异不大, 有机磷抗性品系的AChE对对氧磷的不敏感性比敏感性家蝇明显增大.②某些抗药性家蝇的羧酸酯酶活力比敏感性家蝇大.③抗药性家蝇的MFO活力(O-脱甲基和环氧化)比敏感性家蝇均有不同程度的增高.④二氯苯醚菊酯抗性家蝇对有机磷有负交互抗性.     

桔小实蝇抗多杀霉素的生物适合度代价

桔小实蝇Bactrocera dorsalis ( Hendel) 是中国南方地区果蔬重要害虫之一,严重威胁农业生产。多杀霉素是防治桔小实蝇的重要药剂之一,近年来由于在农业生产中大量使用,田间防治效果已有所下降,已出现了抗药性现象。为明确桔小实蝇对多杀霉素的抗药性发展规律,本研究比较了桔小实蝇敏感品系和抗性品系的发育、生殖和存活差异。结果显示：抗多杀霉素桔小实蝇品系具有死亡率增加、部分虫态发育历期延长和繁殖力下降等适合度代价。抗性品系的内禀增长率由0.19下降至0.15,相对适合度降至0.62,表明桔小实蝇对多杀霉素存在较低的抗性风险。     

害虫的抗药性:Ⅸ.蚊类抗药性的测定方法

<正> 自从有机合成杀虫剂问世以后,全世界已有80多种蚊虫发生抗药性,成为除害灭病工作的严重障碍。因此,蚊类抗药性研究多年来一直是受到重视的课题。开展抗药性研究,首先要掌握生物测定技术,以了解野外群体对各种杀虫剂发生抗性的程度,作为换用或轮用药物的依据。要深入开展抗性研究工作则必须在实验室内建立抗性和敏感的品系,进行生理、生化、遗传等研究,即使是这些工作,生物测定也是必不可少的辅助手段。     

害虫抗药性适合度与内分泌调控研究进展

本文就害虫抗药性适合度与内分泌调控研究进展作了概述。害虫抗药性品系与敏感品系之间在形态、生理反应和生物学特性等方面存在差异 ,通常被认为是抗性基因适应性代价的表现 ,并可能由抗性基因引起的抗性害虫体内生理代谢平衡发生变化产生的。目前就抗性代价的形成机制存在 2种假说 :资源限制假说和干扰代谢平衡假说。害虫抗性和敏感品系的生物适合度差异与其体内激素水平及调控能力变化有关。激素对抗药性相关酶系表达调控的可能机制可分为三类 ,即直接调控、间接调控和共同调控     

桔小实蝇对多杀霉素的抗药性风险评估

桔小实蝇Bactrocera doralis (Hendel)是华南地区果蔬重要害虫,近年来危害严重,对农业造成巨大的经济损失.本研究采用阈性状分析方法,对桔小实蝇敏感品系对多杀霉素抗性进行选育,计算了桔小实蝇对多杀霉素的抗性现实遗传力,评估了抗药性产生的风险.结果表明:经过16代选育,桔小实蝇对多杀霉素抗性增加了7.05倍(LC50从0.60 mg/L增加到4.23 mg/L),现实遗传力为0.1774.结果显示桔小实蝇对多杀霉素抗性发展较慢.     

高效氯氰菊酯不同汰选频度条件下桔小实蝇高抗品系抗药性发展动态

为了研究高效氯氰菊酯不同施用强度对桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)高抗品系抗药性发展动态的影响,为指导田间科学合理使用高效氯氰菊酯防治该虫提供理论依据,本文以室内培育的桔小实蝇对高效氯氰菊酯高抗品系成虫为研究对象,以高效氯氰菊酯对敏感品系的毒力作为毒力基准线,按高效氯氰菊酯汰选间隔时间长短设置30 d、60 d、90 d、120 d 4个处理,以在不接触药剂常规条件下饲养的高抗品系作对照,采用药膜法进行抗药性汰选和毒力测定,每30天试验1次,共计试验10次,获得致死中浓度(LC_(50))和抗性倍数(R_m),分析抗性发展动态与汰选间隔时间的关系。研究结果表明270 d后,不同间隔时间长度汰选处理,桔小实蝇高抗品系对高效氯氰菊酯的抗药性发展动态存在明显差异,总体表现为汰选间隔时间越短,抗性增长越快。30 d汰选1次处理,高效氯氰菊酯对桔小实蝇成虫的致死中浓度从第1次的582.7 mg/L上升到1133.6 mg/L,抗性倍数从98.0倍上升到190.7倍;60 d汰选1次处理,致死中浓度上升为828.0 mg/L,抗性倍数上升为139.3倍;90 d汰选1次处理,致死中浓度为529.2 mg/L,抗性倍数为89.0倍;120 d汰选1次处理,致死中浓度、抗性倍数分别为511.3 mg/L、86.0倍;未进行汰选的抗性品系致死中浓度由582.7 mg/L下降到368.1 mg/L,抗性倍数也从98.0倍下降到61.9倍。建立了270 d后高效氯氰菊酯汰选间隔时间与桔小实蝇成虫抗药性增长比率之间的关系方程为Y=11.427X~(-0.529)。由实验室模拟实验结果预测当果园中连续两次使用间隔时间在99 d以上时,应可降低桔小实蝇对高效氯氰菊酯的抗性继续上升的风险。     

朱砂叶螨不同抗性品系酯酶同工酶研究

在室内模拟田间药剂的选择压力,用3种不同药剂及其组合(轮用和混用)对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus 进行抗药性选育.经过40余代的筛选,朱砂叶螨对甲氰菊酯、阿维菌素和哒螨·阿维混剂分别产生了68.5、8.7和6.7倍的抗性;甲氰菊酯和阿维菌素混用和轮用分别对甲氰菊酯产生了5.6倍和28.7倍抗性.朱砂叶螨各品系酯酶同工酶电泳结果和同工酶谱谱带密度扫描表明,与敏感品系相比,各抗性筛选品系的酯酶活性均有不同程度增加;阿维菌素抗性品系活性最强,酯酶带迁移距离明显远于其他抗性品系,表明该品系酯酶体系中存在变构酯酶.     

山楂红蜘蛛对内吸磷的抗性研究

1963—1964年在河南省几个果园测定了山楂红蜘蛛对内吸磷的抗药性,并用8种杀螨剂分别对抗性品系和感性品系进行了药效测定。测定结果表明:郑州园艺场的种震对内吸磷的抗性最高,河南省农业科学院的种群已形成抗性的过渡品系。 在测定的几种杀螨剂中效果较好的有K6451,在320和640ppm 浓度下杀卵效果显著,但对抗性品系的成螨和若螨的效果则较差。敌敌畏对抗性品系有交互抗性。三硫磷对感性品系的各虫态均有良好效果,但对抗性品系有交互抗性。AK338对抗性及感性品系各虫态均有高效。三氯杀螨砜对抗性及感性品系的成螨和若螨效果极差,但残效期长且对卵有较好效果。磷胺对抗性品系有交互抗性,对感性品系效果显著。对硫磷对抗性品系有较高的交互抗性,在1280和2560ppm情况下死亡率方达82%和95%,而对感性品系则效果很好。     

茚虫威对不同抗药性品系小菜蛾呼吸代谢的影响

以小菜蛾Plutella xylostella(L.)敏感品系(S)、田间品系(F)及茚虫威汰选抗性品系(T17)幼虫为供试虫源,采用便携式光合作用测定仪测定小菜蛾3～4龄幼虫在受药前后或不同受药剂量等条件下呼吸速率的变化,从能量代谢的角度研究抗药性机制。结果表明,汰选抗性品系、田间品系与敏感品系同龄期小菜蛾幼虫在未受药条件下的呼吸速率差异不显著,表明抗药性的产生并未影响小菜蛾本底的呼吸速率。以各个品系的茚虫威LC20和LC50剂量处理幼虫后,3个品系的呼吸速率均明显提高,汰选抗性品系呼吸速率提高幅度明显大于其他2个品系。在LC20剂量下3个品系呼吸速率峰值均出现在2h前后,10h后恢复到正常水平;在LC50剂量下敏感品系没有明显差异;而田间品系和汰选抗性品系分别在药剂处理后4h和6h达到呼吸高峰,汰选抗性品系保持高水平呼吸速率时间长达9h,分别于药后15h和24h恢复到正常水平。这表明用药后抗性品系呼吸速率的提高幅度与小菜蛾的解毒代谢能力有关,这也揭示了昆虫幼虫中毒后能量消耗会随着抗性水平的提高而增加。     

蝇类染色体制备方法研究

<正> 不少蝇类是医学和农业的重大害虫,研究蝇类染色体,对于研究其种群亲缘关系,种间进化和抗药性的机制等都有重要意义。 本文在参照国外(Wienberg,1977、Leme-uir,et al,1978、Bedo,1980)研究果蝇和绵羊绿蝇染色体一些方法的基础上,结合我们实验室条件,在不同培养液、不同培养时间和不同秋水仙素剂量等方面进行实验研究,探索蝇类染色体的简便制备方法,并获得较好结果,现报     

一个致倦库蚊杀虫剂敏感品系的筛选

化学防治是控制蚊虫传播疾病的主要方法, 抗性监测表明我国蚊虫已对有机磷、 有机氯、 氨基甲酸酯和拟除虫菊酯类杀虫剂产生了不同程度的抗性。蚊虫抗药性的分子机制主要包括靶标抗性和三大解毒酶家族带来的代谢抗性。筛选对杀虫剂敏感的品系是抗性监测和抗性机理研究必不可少的材料。本研究通过从一个致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus野生种群筛选无乙酰胆碱酯酶G119S突变且具有低活性羧酸酯酶、 P450单加氧酶和谷胱甘肽-S-转移酶的单雌系, 建立了一个对杀虫剂敏感的致倦库蚊品系。该品系的羧酸酯酶活性是敏感品系S-lab的2.5倍, P450单加氧酶和谷胱甘肽-S-转移酶的活性与S-lab相当。生物测定表明, 与S-lab相比, 该品系对有机磷杀虫剂有低于2倍的抗性, 对氨基甲酸酯和拟除虫菊酯类杀虫剂没有抗性, 可以作为相对敏感品系用于抗性监测。     

土耳其斯坦叶螨多重抗性品系选育及解毒酶活性的变化

为探索土耳其斯坦叶螨的多重抗药性及其生化机理,在室内对敏感系(SS)土耳其斯坦叶螨分别用螺螨酯、甲氰菊酯和阿维菌素的混剂进行处理,选育出多重抗性品系(Mp-R).结果表明: 选育至15代,土耳其斯坦叶螨的抗性指数达35.74倍.对不同品系的解毒酶活性分析显示,Mp-R品系相对SS品系的羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)的比活力分别是SS品系的1.21、1.53、9.18倍.说明CarE、GSTs、MFO的活性升高可促进土耳其斯坦叶螨对3种杀虫剂多重抗性的形成;MFO的活性升高可能是土耳其斯坦叶螨对3种杀虫剂产生多重抗性的主要原因.测定Mp-R品系和单抗品系(Ip-R)的农药感性和解毒酶活力变化发现,3种杀虫剂的混合使用可能会延缓土耳其斯坦叶螨对甲氰菊酯的抗性形成,加快对阿维菌素的抗性形成.     

北京和云南地区西花蓟马对多杀菌素类药剂产生抗药性

【目的】了解我国西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)对多杀菌素等药剂的抗药性现状,为西花蓟马的有效防治提供参考。【方法】2011—2015年,采用叶管药膜法对北京和云南地区西花蓟马进行了抗药性监测。【结果】与室内敏感品系相比,北京地区西花蓟马田间种群对多杀菌素的抗性倍数达到80~150倍,对乙基多杀菌素抗性倍数高达7 730倍,对乙基多杀菌素的LC50值5年间最高增加了258倍,对甲维盐和噻虫嗪具有中等水平抗性,对阿维菌素和虫螨腈处于敏感或低水平抗性;昆明地区西花蓟马对乙基多杀菌素的抗性水平达到305倍的极高抗水平,对其它药剂相对敏感或处于低水平抗性。【结论】北京和云南地区西花蓟马对多杀菌素类药剂已经产生高水平抗药性,应密切关注抗性发展动态,同时进一步研究其抗性机制。     

不同地理区域桔小实蝇解毒酶系活性及其与抗药性水平关系

昆虫体内的解毒酶活性是反映其抗药性水平的主要生理指标，本文比较了桔小实蝇Bactrocera dorsalis的几种解毒酶活性和抗药性水平关系。测定了9个地理品系和相对敏感品系的桔小实蝇成虫的三种解毒酶，即多功能氧化酶(Mixed function oxidase, MFO)、羧酸酯酶（Carboxylesterase, CarE）和谷胱甘肽Ｓ-转移酶(Glutathione S-transferase, GST)的活性,利用药膜法测定其对敌百虫(Trichlorphon)、高效氯氰菊酯(β-cypermethrin)和阿维菌素(Avermectin)的抗性水平，比较了各地理品系的桔小实蝇这些酶活性和对不同杀虫剂的抗性水平的关系，并作通径分析。结果表明：广东广州地区桔小实蝇体内的MFO-O-脱甲基活性最高，为相对敏感品系酶活性的1.4782倍；而广东茂名地区品系酶活性最低，只有0.8649倍。广东惠州地区桔小实蝇体内CarE活性最高，为相对敏感品系酶活性1.8147倍；而广西南宁地区的桔小实蝇体内酶活性最低，为敏感品系的0.9636倍。广东茂名地区桔小实蝇GST活性最高，是相对敏感品系2.2557倍；而广东广州地区桔小实蝇GST活性最低，只有相对敏感品系的1.1622倍。抗性水平表明：各地理品系对敌百虫的抗性水平为相对敏感品系的2.1552倍至100.2271倍之间，对高效氯氰菊酯的抗性水平在1.0065到26.0026倍之间，对阿维菌素的抗性水平在2.3353倍至29.0688倍之间。相关性分析表明：桔小实蝇体内的GST活性和对敌百虫抗性水平的相关系数为0.41，存在显著性正相关；CarE活性与桔小实蝇对高效氯氰菊酯抗性水平存在极显著正相关，相关系数为0.50。通径分析结果表明：GST活性对敌百虫的抗药性水平的直接通径系数为0.4414，对敌百虫的抗性上升起到正向作用；MFO-O-脱甲基活性、CarE活性和GST活性对高效氯氰菊酯抗性水平的直接通径系数分别为0.3311，0.4946和0.1775，均起到正向作用；GST活性与阿维菌素的抗性水平的直接通径系数很小，为0.0668。结果显示了桔小实蝇的解毒酶与抗药性水平关系密切，在抗性发展中起到了促进作用。     

杀虫双和杀螟丹选育对小菜蛾抗药性的形成及其抗性机制

用杀虫双和杀螟丹在实验室以点滴法处理小菜蛾Plutella xylostella L.四龄幼虫,以连续继代药剂淘汰选育其抗药性。至35代,药剂汰选的小菜蛾对杀虫双和杀螟丹的抗药性较选育前正常品系分别提高了51倍和25倍。其抗药性的形成发展均呈S形,可认为已成为抗性品系。以有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯及有机氮等11种杀虫剂测试抗杀虫双小菜蛾品系和抗杀螟丹小菜蛾品系对常用药剂的敏感度结果表明：对杀虫双、杀螟丹和杀虫环之间有较严重的正交互抗性;对敌敌艮、马拉硫磷和杀螟松有轻微交互抗性产生;对溴氰菊酯、氯氰菊酯、氯菊酯和灭多威、久效威等药剂更加敏感,呈负交互抗性。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法测定表明,抗药性产生与特异性酯酶的形成有一定关系。用比色法和酸度法测定,抗性品系的乙酰胆碱酯酶(AchE)活性降低,羧酸酯酶(CarE)活性无差异。加增效剂Pb和SV₁：于四龄幼虫表皮,对抗杀虫双小菜蛾晶系分别有6.28及1.45倍的增效作用;对抗杀螟丹小菜蛾品系分别有4.85及1.39倍的增效作用,可见多功能氧化酶(MFO)为小菜蛾抗杀虫双和抗杀螟丹的重要因子。     

基因聚合提高了水稻对白叶枯病的抗性

研究了含有单个抗性基因的水稻近等基因系和抗性基因聚合品系对浙江省白叶枯病菌４个主要小种的抗性,单个基因对这些小种的抗性均不高,对新近流行的小种大多感病;基因聚合品系对这些小种的抗性普遍提高,说明基因聚合是培育具有持久抗性品种的有效策略。     

家蝇抗性和敏感品系中的乙酰胆碱酯酶动力学研究(英文)

本文对家蝇抗性和敏感品系中的乙酰胆碱酯酶 (AChE)的催化特性进行了研究。抗性品系中AChE水解ATCh和BTCh的Vmax分别为 4578.50和 1 71 6.0 8;而敏感品系的Vmax则为 1 884.75和864.72nmol/min/mgprotein ;Vmax的比率 (R/S)对ATCh是 2 .2 6倍 ;对BTCh则是 1 .74倍。AChE的Km 值在敏感品系中分别是 0 .0 69和 0 .0 34;而在抗性品系中则分别是 0 .1 56和 0 .0 59mmol/L ;Km 的比率 (R/S)对ATCh是 2 .43倍 ;对BTCh则是 1 .98倍。此外 ,我们还用eserine作为滴定剂测定了AChE的转换数kcat和酶特异性常数kcat/Km,抗性品系中的AChEkcat值均比敏感品系的要高 ;而kcat/Km 值与此相反。本文着重分析了抗性品系与敏感品系间AChE的催化特性以及对残杀威、灭多威、对氧磷的敏感度差异 ,研究结果表明抗性品系中的AChE性质有可能发生变化。同时还观察到某些杀虫剂能增强抗性品系AChE的活力 ,我们认为这种“增强反应”可能与家蝇对有机磷或氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性发展有关     

淡色库蚊对666抗药性遗传的初步研究

从实验室及野外的实验证明,淡色库蚊Culex pipiens pallens Coq.对666形成了不同程度的抗药性。为了了解它们在遗传上的性状,作者在进行淡色库蚊对666抗药性选育实验时,作了此项观察。 材料与方法 蚊虫 用实验室里选育了46个世代对666具有抗药性的淡色库蚊品系(NRB)、培育5年的南京敏感性品系(NS)及选育了32个世代对甲基敌百虫未产生抗药性的品系(NMD)。以