利用RAPD-PCR方法鉴定我国烟粉虱的生物型

收集了国内北京、山东、广东和海南等14个省市23个地区的蔬菜、园林花卉和杂草上的23个烟粉虱Bemisia tabaci (Gennadius)种群,根据报道合成了一个随机引物H₁₆,运用RAPD-PCR技术对所收集的烟粉虱种群进行了生物型鉴定。结果表明在23个烟粉虱种群中,有17个种群同属于危害严重的“B生物型”,这些种群主要分布在交通便利的城市或沿海地区,而非B生物型则主要分布在交通不便的山区或内陆。对烟粉虱B生物型的分布与寄主植物和环境条件进行了初步的探讨。     

林氏果蝇种群间mtDNA的比较研究

运用１０种限制性内切酶分析了林氏果蝇来自不同地区的２２个单雌系的线粒体ＤＮＡ限制性片段长度多态性。采自台湾省的ＴＡＷ３１４６．１与大多数采自广东的品系相同,而广东省品中则存在一定度的分化,ＤＨＳ３０７、３１５和ＮＫＳ９２３４仅在ＨｉｎｄⅢ的酶切位点上与其余单雌系不同;ＴＡＷ３１４６．１与来自缅甸中部的ＭＭＹ３０７,ＭＤＭＹ３２６之间的遗传距离为０．００２７４;ＭＭＹ３０７与ＭＭＹ３２６之间无差异。     

黑腹果蝇抗真菌肽基因Drs和Drs-lC 的原核可溶性表达及抗真菌活性测定

Drosomycin （Drs）是第1个从黑腹果蝇Drosophila melanogaster体内鉴定发现的昆 虫抗真菌肽因子。它对细菌无明显的抗性,但对丝状真菌具有高效广谱的抑杀作用。此外, 在黑腹果蝇基因组还存在着Drs的另外6个同系物的基因序列,其中同系物Drosomycin-lC（Drs-lC）的抗真菌谱仅次于Drs。将Drs抗真菌肽基因(Drs)和同系物Drs-lC基因（Drs-lC）进行可溶性表达,对果蔬等农产品防腐保鲜的研究有应用前景。本实验将Drs和Drs-lC分别克隆到硫氧还蛋白（Trx）融合表达载体pThiohis A中,转化宿主菌TOP10,进行可溶性表达,并从诱导表达的菌液起始浓度、IPTG的诱导浓度及诱导时间等方面进行了表达条件的优化。结果表明2种融合蛋白Trx-Drs和Trx-Drs-lC大部分以可溶形式表达,可溶性表达的Trx-Drs在上清液中约占菌体总蛋白的22％。2种融合蛋白的表达产物经 Ni-NTA亲和层析得到纯化。生测结果表明, 2种融合蛋白分别对8种供试真菌中的5种真菌显示明显的抗性。     

黑腹果蝇抗真菌肽Drosomycin同系物的免疫原性和抗真菌活性

通过黑腹果蝇 Drosophila melanogaster抗真菌肽Drosomycin（Drs）及其同系物Drs-lC和Drs-lE的抗体制备及Western blotting 结果,分析了Drs同系物的免疫原性与其抗真菌活性的关系。研究采用了2种技术路线,分别将Drs、Drs-lC和Drs-lE 基因构建成与细胞生长因子基因 afgf 融合的重组表达质粒 pET-afgf-Drs、pET-afgf-C和pET-afgf-E,以及通过基因同向串连获得重组表达质粒 pRSET-2Drs、4Drs、6Drs 和 pRSET-2E、4E、6E,并将这些重组表达质粒转化到BL21（DE3）plysS受体菌进行诱导表达。分离纯化后的融合蛋白afgf-Drs、afgf-C和afgf-E 以及串连蛋白 4 Drs、4 Drs-lE分别免疫小白鼠获得相应的抗血清。Western blotting免疫原性检测结果表明,Drs及其同系物与各自的抗血清具有强的免疫反应,同时相互间也有交叉免疫反应,提示它们具有相似的主要抗原决定簇,这些抗原决定簇可能与抗真菌活性无关。同系物之间抗真菌活性的差异可能来源于某些细微结构上的差异。     

褐家鼠线粒体DNA遗传多态性的研究

通过碱变性法提取线粒体ＤＮＡ,用地高辛标记的探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交限制性酶切多态性（ＲＦＬＰ）分析,研究中国家鼠Ｒａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ遗传多态性。采用ＡｐａⅠ、ＡｖａⅠ、ＢａｎＨＩ、ＢｃｌⅠ、ＢｇｌⅠ、ＣｌａⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ｈｉｎｄⅢ、ＰｖａⅡ、ＳｃａⅠ和ＸｂａⅠ等１２种限制性内切酶分析来自我国８个地区２６只褐家鼠的线粒体ＤＮＡ,共检出２０种限制性态型和１１种ｍｔＤＮＡ单倍     

赤眼蜂属系统进化研究进展

赤眼蜂是一类重要的天敌昆虫,该属包括的种类达180多种,并且广泛地分布于世界各地。通过对形态特征的分析,赤眼蜂属的系统发育研究在不同的研究者中得到不同的分类系统。由于赤眼蜂的个体微小,仅04mm左右,现有的化石记录稀少,并且可用作系统发育研究的形态特征很少,导致该类群的系统发育研究仍有许多不清楚的地方。同时,近年来分子生物学的发展为赤眼蜂系统发育研究提供了很好的途径,也取得了一些共识。但仍然未能提出一套精确的、更可靠的分类系统。作者对近年来的赤眼蜂属系统进化研究进行了综述。     

一种适用于昆虫痕量DNA模板制备的方法

近年来分子生物学技术在昆虫学各领域中得到了广泛地运用 ,从昆虫样品中有效地获得DNA模板是实验成功的前提。但是由于许多昆虫体形微小 ,许多研究需要取单个个体的样品 ,用传统的酚∶氯仿抽提法难以从痕量样品中获得总DNA ,而某些生物公司的试剂盒相对而言价格昂贵。该文介绍一种快速简便、广泛适用于不同种类昆虫、各种不同保存方法保存的昆虫样品和标本的微量DNA模板制备方法     

分子标记在烟粉虱蚜小蜂分类中的应用

本对分子标记技术在烟粉虱寄生蜂——蚜小蜂分类中的应用进行了概述,包括利用随机扩增多态性DNA、限制性片段长度多态性和DNA测序等技术对蚜小蜂进行分子鉴定;利用核糖体28s rDNA D2与D3扩展区、线粒体细胞色素氧化酶、核糖体内转录间隔区等DNA序列分析研究蚜小蜂的系统进化等。对分子标记在蚜小蜂分子鉴定和系统进化研究中取得的进展进行了简述。     

果蝇抗微生物肽基因的免疫诱导模式

果蝇作为一种模式昆虫,为研究昆虫和人类的先天免疫发挥了重要作用。目前对果蝇体内免疫诱导产生的抗微生物肽多基因家族在分子进化、抗菌功能的分子特征和免疫诱导表达的信号传递机制等方面的研究进展,进一步加深了人们对昆虫乃至其他动物和人类先天免疫模式的认识,为研究其他昆虫特别是作为主要农林害虫的鳞翅目昆虫的先天免疫机制发挥了重要作用。本文集中对黑腹果蝇Drosophila melanogaster抗微生物肽及其免疫模式的研究结果和最新进展进行了介绍,其中包括作者近几年的研究结果。     

林氏果蝇的生殖隔离研究

本文以果蝇科的林氏果蝇不同种群间交配后的生殖隔离机制进行了研究。这些种群包括源产于我国台湾省的ＴＡＷ３１４６．１,采自广东两地区的６个单雌系ＤＨＳ３１５,ＤＨＳ４０１,ＤＨＳ４１０,ＤＨＳ５０１,ＮＫＳ９２１２,ＮＫＳ９２３１,采自广东两地区的６个单雌系ＤＨＳ３１５,ＤＨＳ４０１,ＤＨＳ４１０,ＤＨＳ５０１,ＮＫＳ９２１２,ＮＫＳ９２３１,采自缅甸两个地区的４个单雌系ＭＭＹ３２６,ＭＭＹ３０７,Ｒ