甘草多糖的抗肿瘤活性及对免疫功能的影响

从甘草残渣中提取分离得到甘草多糖,采用血清溶血素及抗体生成细胞水平实验、碳粒廓清实验、S180荷瘤小鼠实验测定其免疫和抗肿瘤作用.结果表明,甘草多糖能促进小鼠血清溶血素IsM和ISG的生成,提高抗体生成细胞水平和胸腺、脾脏指数,增强巨噬细胞的吞噬活性,抑制肿瘤细胞S180的生长,与对照组比较均有显著性差异,提示甘草多糖具有免疫增强和肿瘤抑制作用.     

北虫草复合制剂对小鼠免疫功能的影响

探讨北虫草复合制剂对小鼠免疫功能的调节作用。建立小鼠免疫力降低的动物模型,实验分6组:对照组、衰老/免疫抑制模型组、白介素-2(IL-2)和北虫草复合制剂的不同剂量组。采用称重法测定免疫器官重量,计算胸腺指数和脾指数。小鼠溶血素抗体生成采用绵羊红细胞致敏法。北虫草复合制剂对小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响:实验组(50.2±2.4与27.6±3.6)明显高于模型组(45.6±4.8与23.6±3.6),单位:(mg/10 g体重),差异有显著性(P<0.05)。对小鼠溶血素抗体生成的影响:实验组(53.53±7.8)高于药物对照组(36.50±7.3)。北虫草复合制剂能恢复衰老小鼠的胸腺指数和脾脏指数,增强免疫抑制小鼠血清溶血素含量,因此,对免疫功能低下的小鼠模型具有免疫调节作用。     

双歧杆菌发酵果蔬汁对小鼠免疫功能的影响

目的研究双歧杆菌发酵果蔬汁对小鼠免疫功能的影响。方法将小鼠随机分成纯净水对照组与发酵果蔬汁低、中和高3个剂量组,饮水法喂饲小鼠,测定小鼠胸腺和脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素测定、皮肤迟发型超敏反应(DTH)程度。结果与对照组比较,3种果蔬汁能显著增强巨噬细胞吞噬功能,增加血清溶血素抗体水平和DTH程度。结论双歧杆菌发酵果蔬汁能提高机体的免疫功能。     

胶原蛋白肽增强小鼠免疫力的实验研究

目的 探讨用生物酶提取的胶原蛋白肽增强小鼠免疫力的作用及相关机制.方法 80只清洁级昆明小鼠被随机分成正常对照组、胶原蛋白肽低剂量组[3 g/(kg·bw)]、中剂量组[7.5 g/(kg·bw)]和高剂量组[12 g/(kg·bw)],每日给药2次,连续2周.检测免疫器官重量、抗体生成细胞数(Jerne改良玻片法)、半数溶血值(HC50)的测定及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验.结果 高剂量组可提高脾脏指数、胸腺指数、半数溶血值及吞噬细胞吞噬率和吞噬指数、可增加抗体生成细胞数;中剂量组可提高胸腺指数、增加抗体生成细胞数、提高小鼠半数溶血值及吞噬细胞吞噬率和吞噬指数;低剂量组可增加抗体生成细胞数、提高吞噬细胞的吞噬率和吞噬指数.结论 三种剂量胶原蛋白肽对正常小鼠的细胞免疫、体液免疫均有显著的增强作用,高剂量组效果最强.     

罗汉果多糖对环磷酰胺所致的免疫 抑制小鼠免疫功能的影响

该研究将小鼠随机分成正常组,模型组,罗汉果多糖低、中、高剂量组(25、50、100 mg·kg~(-1))和左旋咪唑组,采用腹腔注射环磷酰胺(20 mg·kg~(-1))建立免疫抑制小鼠模型,连续灌胃给药14 d后,测定各组小鼠的免疫器官指数、廓清指数(K)、吞噬指数(α)、T和B淋巴细胞增殖水平、耳肿胀度、半数溶血值(HC50)以及免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α的含量,并观察脾组织病理形态变化,考察罗汉果多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果表明:罗汉果多糖各剂量组(25、50、100 mg·kg~(-1))均能显著提高免疫抑制小鼠的免疫器官指数、半数溶血值(HC_(50))、B淋巴细胞增殖能力,明显降低耳肿胀度,显著增加IgG、IgM、IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α的含量。罗汉果多糖中、高剂量组(50、100 mg·kg~(-1))能显著增强T淋巴细胞增殖能力,明显增加廓清指数(K)、吞噬指数(α)。脾组织病理学观察结果表明,罗汉果多糖可以减轻免疫抑制小鼠脾脏的病理损伤。这表明罗汉果多糖能明显增强环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的免疫功能。     

凝结芽胞杆菌对小鼠免疫功能和粪便胺含量及肠道中氨含量的影响

目的研究凝结芽胞杆菌对小鼠的免疫功能,粪便胺含量及肠道中氨含量的影响。方法采用碳粒廓清法,免疫器官指数和血清溶血素测定法,分别考察药物对正常小鼠,免疫低下小鼠的非特异性免疫功能,特异性体液免疫功能的影响。同时观测药物对小鼠的盲肠内容物的氨含量和粪便中胺含量的影响。结果凝结芽胞杆菌对正常小鼠碳粒廓清指数和脂器指数没有明显影响,左旋咪唑则能显著提高其吞噬指数但对脏器指数没有影响,凝结芽胞杆菌和左旋咪唑均能显著提高免疫功能低下小鼠血碳廓清指数的胸腺指数,增加血清溶血素的生成。服用凝结芽胞杆菌后的小鼠排出的粪便胺含量和肠道中氨含量,均比正常对照组显著降低。结论凝结芽胞杆菌能显著提高免疫功能低下小鼠的免疫功能,减少正常小鼠肠道中胺和氨的含量,增强机制抵抗力和保护机体。     

沙棘Vp对辐射损伤小鼠的保护及免疫功能作用研究

本文探讨了沙棘Vp对X射线辐射损伤小鼠的保护作用。将150只昆明种小白鼠分为正常对照组、阳性对照组、辐射对照组、沙棘Vp高、中、低剂量组,雌雄各半,除了正常对照组外,其余各组小鼠接受5Gy的X射线一次性的全身均匀照射。检查各小组小鼠外周血中红细胞数、白细胞数,血小板数,测定超氧化物歧化酶的活力,丙二醛水平,小鼠单核巨噬细胞吞噬功能,小鼠血清溶血素生成能力,计算胸腺和脾脏的脏器指数。结果显示沙棘Vp对辐射后的小鼠血象有明显回升(P0.05),超氧化物歧化酶的活力显著增强(P0.05),丙二醛水平下降(P0.05),胸腺和脾脏的脏器指数升高(P0.05),并且显著提高小鼠血清溶血素生成能力,增强小鼠单核巨噬细胞吞噬功能。本研究说明,沙棘Vp对X射线辐射损伤小鼠具有一定的增强免疫及保护作用。     

水解南珠片对免疫低下小鼠免疫功能的影响

本实验以腹腔注射环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,灌胃给予水解南珠片高、中和低剂量(2.04 g/kg,1.02 g/kg和0.51 g/kg)30 d,观察水解南珠片对免疫低下小鼠免疫功能的影响。结果显示,水解南珠片高剂量(2.04 g/kg)能显著提高免疫低下小鼠单核巨噬细胞系统碳粒廓清指数K(p0.05);水解南珠片高、中、低剂量(2.04 g/kg,1.02 g/kg,0.51 g/kg)能显著提高免疫低下小鼠外周血T淋巴细胞相对数量(p0.01);水解南珠片高、中剂量(2.04 g/kg,1.02 g/kg)能显著提高免疫低下小鼠血清溶血素吸光度值(p0.01)。上述结果表明,水解南珠片对免疫功能低下小鼠的固有免疫、细胞免疫和体液免疫功能均有一定的增强作用。     

黄精多糖对力竭运动小鼠胸腺胸腺指数、脾脏指数、T淋巴细胞亚群、巨噬细胞吞噬功能的影响

为了探讨黄精多糖对力竭训练后小鼠胸腺指数、脾脏指数、T淋巴细胞亚群、巨噬细胞功能的影响,本研究以100昆明雄性小鼠,随机分为安静对照组、运动训练组、运动垣低剂量给药组、运动垣中剂量给药组、运动垣高剂量给药组,每组20只,在实验结束前3 d后,每组小鼠随机分为M、N两个组,M组用于胸腺指数、脾脏指数、T淋巴细胞亚群的测试,N组用于巨噬细胞功能的测定。除安静对照组外,其余各组小鼠进行为期20 d,隔天一次的无负重力竭游泳训练,三个给药组小鼠同时按50 g/kg·d、100 g/kg·d、150 g/kg·d三种剂量灌胃。测定各组小鼠胸腺指数、脾脏指数、T淋巴细胞亚群、巨噬细胞功能。结果表明运动后小鼠胸腺指数、脾脏指数、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、巨噬细胞吞噬率、吞噬指数明显下降。运动垣中剂量给药组、运动+高剂量给药组胸腺指数、脾脏指数、CD+3、CD+4、CD+4/CD+8、巨噬细胞吞噬率、吞噬指数显著或及显著高于运动训练组,运动垣低剂量给药组CD+3、CD+4、CD+4/CD+8显著高于运动训练组。运动运动垣高剂量给药组腺指数、脾脏指数、CD++3、CD+4、CD+4/CD8、巨噬细胞吞噬率、吞噬指数显著高于运动垣低剂量给药组。研究提示,黄精多糖可提高长期力竭训练小鼠的免疫能力,具有显著免疫增强效应,其中以高剂量黄精多糖免疫效果最佳。本研究为黄精多糖在运动免疫领域的应用提供新思路。     

球花石斛多糖免疫调节作用的研究

本研究目的为评价球花石斛多糖对正常小鼠免疫功能的影响。球花石斛采用碱提醇沉法得到球花石斛多糖,分别以400、600、800mg/kg小鼠灌胃给药连续10d。通过免疫器官重量检测,碳廓清试验,脾脏T、B淋巴细胞转化试验来观察其对免疫功能的影响。结果显示低、中剂量组的脾脏指数与对照组比较有显著性差异(P<0.01),中、高剂量组的吞噬指数、校正吞噬指数和B淋巴细胞增殖能力与对照组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05),表明球花石斛多糖可显著增加脾脏重量,增强巨噬细胞的碳廓清能力和B淋巴细胞的增殖能力。提示球花石斛多糖具有免疫增强作用,是一种良好的免疫调节剂。     

Immunization with Temperature-Sensitive Mutants of Actinobacillus pleuropneumoniae Induces Protective Hemolysin-Neutralizing Antibodies in Mice

The immunogenicity and protective potential of three temperature-sensitive mutants of Actinobacillus pleuropneumoniae were evaluated in mice with respect to antibodies against the capsular polysaccharide, lipopolysaccharide, outer membrane proteins, and hemolysin protein. Antibodies to the capsular polysaccharide and lipopolysaccharide could not be correlated with protection in the mice; there were no significant differences among the anti-capsular and anti-lipopolysaccharide antibody titers regardless of the severity of infection. Sera from mice immunized with the mutants and challenged with the wild type contained antibodies that reacted in immunoblots to four major outer membrane proteins (66, 39, 29, and 16 kDa) regardless of the severity of infection after challenge. Both the tight and coaster mutants synthesized and secreted the 105-kDa hemolysin protein exotoxin in vitro and in vivo; hemolysin protein neutralization titers and the blotting intensity of the sera, however, varied inversely with the severity of infection. Sera from mice surviving challenge with little to no lung involvement stained the hemolysin band more intensely and had significantly higher neutralization titers (P < 0.05) than sera from mice that either died or survived with severe pulmonary hemorrhage. These results confirm the importance of the hemolysin in pathogenesis and the need for including it in any vaccine preparation. Received: 26 August 1996 / Accepted: 3 September 1996     

肺炎球菌表面蛋白A(PspA)及其荚膜多糖交联物的免疫原性和交叉保护作用

分别采用肺炎球菌表面蛋白A(PspA)和PspA-荚膜多糖交联物免疫小鼠,研究PspA及其交联物的免疫特性.用酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗原的免疫原性,用动物保护试验检验抗原对肺炎球菌6B,5,1,23F,19F型的交叉免疫效果.实验结果表明:肺炎球菌表面蛋白A及其多糖交联物表现出一定的交叉保护作用,具有较好的应用前景.     

Chemical characterization and radioprotective effect of polysaccharide from <Emphasis Type="Italic">Monostroma angicava</Emphasis> (Chlorophyta)

Polysaccharide from the green alga Monostroma angicava was extracted with boiling water and was purified by ion-exchange and size-exclusion column chromatography. The radioprotective effect of the polysaccharide was investigated in mice. The results show that polysaccharide from M. angicava has a different chemical composition to other Chlorophyta having a high rhamnose – containing sulfated polysaccharide. The sulfate ester content was estimated to be 21.8%. When the polysaccharide was applied to BALB/c mice following whole-body X-ray irradiation the counts of leukocytes, thrombocytes and erythrocytes recovered more rapidly in the polysaccharide treated mice after irradiation. In the irradiated mice, the polysaccharide significantly increased the spleen index, natural killer cytostatic activity and the transformation response of splenic lymphocytes. The present observations suggest that polysaccharide from M. angicava led to leukocytogensis and hematopoetic activation in mice after irradiation and that the biological response might be caused by immune activation.     

23种中草药的体外抗菌活性筛选研究

为考察中草药抗菌物质基础筛选出活性提取物,该研究通过80%乙醇冷浸和95%乙醇回流提取制备23种中草药的提取物,采用琼脂扩散法测量抑菌圈直径,用微量液体培养基倍比稀释法测定最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal/fungicidal concentration,MBC/MFC),并测定了提取物对临床4种常见病原菌体外抗菌活性。结果表明:紫珠草、千斤拔、黄龙尾等9种中草药对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌活性,其MIC/MBC值除个别菌是12.5 mg·mL~(-1)外,其他都在0.09～3.12 mg·mL~(-1)之间;千斤拔、大红袍、过江龙等5种中草药对铜绿假单胞菌有较强抑菌活性,其MIC/MBC值在3.12～12.5 mg·mL~(-1)之间;紫珠草、千里光、石楠等13种中草药对大肠埃希菌有较强的抑菌活性,其MIC/MBC值在0.09～6.25 mg·mL~(-1)之间;八角对白色念珠菌有较强抑菌活性,其MIC/MFC值在0.78～12.5 mg·mL~(-1)之间。23种中草药的抗细菌活性较好,尤其是千斤拔、大红袍、过江龙、八角、黄药子对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌都具有较好的抑菌活性,具有广谱抗菌活性;但对真菌抑菌效果不明显,仅有八角对白色念珠菌有抑菌活性。此外,提取溶剂浓度、提取温度和提取时间对中草药的提取率和活性均有影响,冷提稍优于热提。     

甜荞FeFUL2基因的克隆与表达分析

为了探索甜荞FUL同源基因参与花与籽粒发育调控的分子机制,该文采用同源克隆的方法从甜荞(Fagopyrum esculentum)长花柱和长雄蕊突变体(lpls)中克隆到1个长837 bp的FeFUL2基因(GenBank登录号为MG779493.1),其包含长690 bp的完整开放阅读框,编码1个由229个氨基酸残基组成的MADS-box转录因子。通过对FeFUL2进行分子系统发生、同源蛋白比对与转录因子结构分析,结果显示FeFUL2与核心真双子叶植物AP1/FUL亚家族转录因子中的euFUL进化系聚于1个进化分支,属甜荞euFUL型MADS-box转录因子,且包含1个57个氨基酸残基长的高度保守的MADS结构域、1个69个氨基酸残基长的次级保守的K结构域,其C末端转录激活区在序列长度和氨基酸残基组成上与其他euFUL型转录因子差异较大,但仍含有2个euFUL型转录因子特有的保守基元:FUL motif和paleo AP1 motif。用qPCR检测基因表达的组织特异性显示:FeFUL2基因在甜荞lpls突变体的根、茎、叶、花被片、雄蕊、雌蕊和发育4 d的幼果中均有表达,但其在花被片中表达量极显著高于该基因在其他器官中的表达量(LSD,P0.01)。综合转录因子的结构与基因的表达模式推测,FeFUL2基因与其他euFUL型基因的功能可能存在一定差异,其在花发育过程中可能主要参与甜荞花被片的发育调控。     

发酵天山雪莲粗多糖的菌株筛选及护肤功效研究

【目的】利用微生物发酵植物可以提高多糖的产量,并且能够将原有的植物多糖转化成活性更高的新型发酵多糖,本研究围绕天山雪莲的粗多糖,基于发酵后的活菌数、多糖产量和护肤功效进行发酵菌种筛选,旨在获得适宜发酵天山雪莲粗多糖的优良菌株。【方法】利用不同菌株发酵天山雪莲粗多糖,通过平板菌落计数法测定活菌数,采用蒽酮比色法测定发酵液的多糖含量;采用细胞屏障损伤和抗炎模型,利用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活率,利用格里斯法检测NO含量,评价发酵多糖在细胞模型中的护肤功效;利用特应性皮炎小鼠模型,分析发酵多糖对皮肤组织表观及经皮失水率、皮肤组织病理及表皮厚度变化和皮肤组织屏障蛋白-丝聚合蛋白的影响,评价发酵多糖在动物模型中的功效。【结果】不同菌株发酵天山雪莲粗多糖后的活菌数和多糖产量差异较大,其中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CCFM1162和165-M1、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei) CCFM1073、罗伊氏乳杆菌(L. reuteri) CCFM8631、清酒乳杆菌(L. sakei) GD17-9的活菌数较高,均不低于2.0×108 CFU/mL;而酿酒...     

牛源致病性蜡样芽孢杆菌溶血素BL亚基的原核表达及其生物学活性分析

蜡样芽孢杆菌属于革兰氏阳性菌,分布广泛,具有一定的致病性。不同的蜡样芽孢杆菌携带有不同的毒力因子,这直接决定了蜡样芽孢杆菌株致病性的差异。研究和探讨毒力因子分布以及具体毒素的生物活性有助于对蜡样芽孢杆菌病采取更科学的防控。本研究通过原核表达系统将溶血素BL三亚基重组表达,并对表达蛋白进行了纯化和部分生物学活性的检测。研究结果表明,牛源致病性蜡样芽孢杆菌溶血素BL可以在原核表达系统中成功表达和纯化,牛源致病性蜡样芽孢杆菌溶血素BL拥有溶血性、细胞毒性、很好的免疫原性以及对小鼠具有一定的免疫保护性。本研究表达了溶血素BL三亚基,并探究了牛源致病性蜡样芽孢杆溶血素BL的生物学活性。本研究为进一步揭示蜡样芽孢杆菌溶血素BL的致病作用机制和建立针对牛源致病性蜡样芽孢杆菌病的检测方法奠定了理论基础。     

陕甘花楸果实多糖的结构表征及抗氧化活性研究

陕甘花楸(Sorbus koehneana)是我国西北地区特有的灌木之一,主要被用于观赏和制作家具,但对其有效成分的研究却鲜见报道,从而限制了陕甘花楸产业的进一步开发和利用。该研究以陕甘花楸果实为原料,经石油醚脱脂后,采用超声辅助水提醇沉法提取、Sevag法脱蛋白,得到了较纯的花楸果实多糖(SSP),并对其进行结构表征和抗氧化活性研究。结果表明:(1)经苯酚-硫酸法测得多糖纯度为65.8%;FT-IR检测官能团,发现在3 420 cm~(-1)、2 929 cm~(-1)和1 733 cm~(-1)处存在多糖的典型吸收峰;用SEC-LLS测得重均分子量(Mw)为1.739×105,数均分子量(Mn)为5.052×104,多分散系数为3.443,表明分子量分布较为均一;经三氟乙酸酸解、糖腈衍生化等处理及气相-质谱联用法测定SSP的单糖组成,表明SSP由甘露糖、葡萄糖和未知单糖等3种单糖组成,摩尔比为2.2∶1.4∶6.4。(2)体外抗氧化活性实验表明:SSP具有很好的DPPH清除活性、超氧阴离子清除活性以及较强的还原力;当SSP浓度为2 mg·mL-1时,SSP对DPPH自由基的清除能力相当于BHT的96%,对超氧阴离子自由基清除能力为Vc的76.07%,还原能力等价于Vc的92%。以上表明该多糖可以用于抗衰老和抗炎等方面,是一种优良的天然抗氧化剂,为花楸资源的进一步开发利用提供了更为广阔的前景。     

连作花魔芋软腐病株与健株根域丛枝菌根真菌群落多样性

【目的】解析不同连作年限花魔芋软腐病株、健株根域的丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)群落多样性。【方法】使用AMF 18S SSU rRNA基因特异引物AMV4.5NF/AMDGR对正茬及连作2年和3年的软腐病株、健株魔芋根系和根际土壤DNA扩增建库,通过高通量测序和生物信息学分析探究魔芋软腐病与其根域AMF群落多样性的关系。【结果】魔芋根系具有明显的AMF菌丝、泡囊和丛枝等结构。在相同连作年限条件下,健株根系AMF总侵染率、侵染强度和孢子密度均显著高于病株(P<0.05);在不同连作年限条件下,病株根系AMF总侵染率和侵染强度随连作年限延长而降低。从所有样品中共鉴定到9属53种AMF,其中有49个已知种和4个新种。球囊霉属(Glomus)和类球囊霉属(Claroideoglomus)是AMF群落的优势属,其AMF种分别占总AMF种数的41.5%和26.4%;丰度最高的Paraglomus sp.VTX00308是所有样品的共有种。连作、软腐病及二者的交互作用显著影响根系AMF群落的Shannon指数和Simpson指数及根际土壤AMF的Chao1指数(P<0.05)。通过丰度差异分析发现6个在连作软腐病发生后丰度差异显著的AMF种(P<0.05);NMDS分析表明,不同连作年限的魔芋软腐病株与健株之间的根域AMF菌种组成、相对丰度和群落结构存在差异。相关性分析表明,软腐病发病率和病情指数与魔芋根系和根际土壤AMF的Shannon指数、根系AMF的Chao1和Simpson指数以及AMF总侵染率、侵染强度和孢子密度极显著负相关(P<0.01)。【结论】比对健株,连作魔芋软腐病株根际土壤AMF孢子密度以及根系AMF侵染率、种数和多样性均降低,其群落结构显著改变。     

Effects of microsite light availability on the survival and growth of oak seedlings within a grassland

Effects of microsite light availability on the growth and survival of transplantedQuercus serrata Thunb. seedlings in aMiscanthus sinensis Anderss. grass canopy were investigated by a “plant's eye view” approach. Diffuse site factors, i.e., the fractional transmissions of diffuse photosynthetic photon flux density, were estimated at 15 cm aboveground in 108 microsites where the seedlings grew. Microsite diffuse site factors were significantly different between surviving and dead seedlings during the experiment period from April to October (F_[1,14]=10.9, P<0.01). Relative growth rate of dry weight for individual seedlings positively depended on the diffuse site factors (r²=0.482, P<0.001 in May; r²=0.312, P<0.001 in October). Only 16 seedlings produced their second stem flush within the grass canopy. The ratio of height to dry weight of the second stem flush was significantly higher for the seedlings grew in shady microsites than for those in less shady microsites (r²=0,471, P<0.01 in May). This study suggests that the microsite heterogeneity of light availability is one of the important factors affecting the establishment of tree seedlings in patchy grasslands.