甜菊不同叶龄细胞结构及其甜菊糖甙含量分布的研究

本文报道甜菊(Stevia rebaudiana Bertoni)不同叶龄细胞结构与甜菊糖苷含量分布。应用电镜技术观察表明,现蕾期成叶细胞内具有内含物丰富的巨大液泡,这些内含物呈大小不一的颗粒或小泡。应用差速离心法,对甜菊成叶的叶肉细胞进行亚细胞分离,并对各部分进行甜菊糖苷的提取与微量测定。结果表明,甜菊糖苷主要存在于12000g的上清液(这部分主要包括液泡内含物和可溶性细胞质)。结合细胞结构和细胞化学研究结果,表明细胞质是合成UDPG的主要场所,在甜菊糖苷合成中具有重要作用。对不同叶龄叶片甜菊糖苷测定表明,现蕾期成叶的甜菊糖苷含量最高。从甜菊不同叶龄细胞结构和甜菊糖苷含量测定结果,现蕾期是甜菊叶片收割的最适时期。     

甜菊愈伤组织细胞中的液泡膜内突和液泡内囊泡

对生长在分化培养基上的甜菊愈伤组织分生区细胞的液泡膜内突和液泡内囊泡,进行了超微结构和酸性磷酸酶细胞化学研究。在不同液泡化时期的细胞中,都存在不同大小和形态的液泡膜内突,它们有的缺乏明显的内含物;有的含有许多小泡或复杂膜系;有的含有一个较大的具许多小泡或复杂膜系的膜束缚囊泡。在液泡内还存在一些游离的液泡内囊泡,它们通常具有两层紧贴的界膜或为多层同心膜,推测它们来自液泡膜内突。ＡｃＰａｓｅ定位结果显     

甜菊愈伤组织分生区细胞中膜内含物的超微结构研究

生长在分化培养基上的甜菊（Ｓｔｅｖｉａ ｒｅｂａｕｄｉａｎａ）愈伤组织分生区细胞中存在双膜和多膜内含物。电镜观察表明,这些膜内含物是由一圈或多圈呈同民贺或卷绕状排列的内质网包围部分细胞质而形成的。双膜内含物内外层膜的靠细胞质表面有核糖体附着,而多膜内含物仅在其最外层潴泡的外膜上偶有和量核糖体附着。附着细胞液泡化程度的提高,多膜内含物通过液泡膜内陷而转移到液泡中或通过消化其中被包围的细胞质及内膜而转     

甜菊愈伤组织生长、分化与甜菊糖苷积累的关系

耐菊（Steviarebaudiana）愈伤组织中甜菊糖苷的积累与愈伤组织的生长呈负相关、与愈伤组织细胞的组织化及转绿呈正相关。愈伤组织芽的分化并不是积累较高水平甜菊糖苷的必要前提。绿色、质地致密、生长缓慢的愈伤组织,不论有芽分化或无芽分化时,其甜菊糖苷含量均较高。在电镜下观察到,这两种愈伤组织细胞具有类似的超微结构特征：细胞高度液泡化;叶绿体发育成熟,光合膜系统结构发达,基质浓厚且含有质体小球;微体具有典型的晶格结构,常与叶绿体紧密相靠。黄色、质地致密、生长缓慢的愈伤组织中甜菊糖苷含量较低,其细胞内质体富含淀粉粒,只有少量分散的片层结构,有的质体甚至完全被淀粉粒所充塞。黄色、质地疏松、生长快速的愈伤组织中甜菊糖苷含量最低,其细胞内质体结构简单,片层稀少。质体的发育和液泡的分化与甜菊糖苷的积累密切相关。愈伤组织具有较高的甜菊糖苷含量在于愈伤组织细胞的组织化以及细胞的高度液泡化并具有发育成熟的叶绿体。     

甜菊愈伤组织中的质膜内陷:超微结构和酸性磷酸酶细胞化学定位

对在分化条件下的甜菊 (Stevia rebaudiana)愈伤组织分生区域细胞的质膜内陷进行了超微结构和酸性磷酸酶细胞化学研究。结果表明 ,在不同液泡化状态的细胞中均有质膜内陷存在。在原生质浓密的细胞中 ,质膜呈起伏的波纹状 ,某些部位发生明显内陷 ,大小不等 ,多呈圆球状。在部分液泡化细胞中 ,质膜内陷体积增大 ,内含物增多且结构复杂。在液泡化细胞中 ,质膜内陷嵌入中央液泡 ,但彼此间以一膜间隙隔开。质膜内陷中的内含物以小泡和卷绕的膜结构形式存在。酸性磷酸酶活性定位结果显示 ,质膜及其内陷含高的酶活性。推测质膜内陷在功能上与液泡相似 ,构成了这些细胞水解空间的一部分。     

冬小麦(Triticum aetivum)进入寒冬过程中分蘗节细胞内酸性磷酸酶活性的超微结构定位

冬小麦分蘖节细胞内的酸性磷酸酶活性在麦苗秋季的活跃生长时期,主要定位于液泡膜内侧和液泡内含物周围,核内染色质上,以及细胞间隙周围的细胞壁表面和细胞间隙的内含物上,到寒冬时期,除保持以上各部位的活性外,突出的变化是在质膜上以及质膜和细胞壁分离的间隙内产生该酶的高活性。作者认为,这可能是对植物在寒冬中细胞内水流到细胞外结冰,避免细胞内结冰伤害的一种适应。图版说明图1—2,秋季生长时期(10月20日)的分蘖节细胞。酶活性主要定位于液泡膜上和液泡内含物的周围、染色质以及细胞间隙周围的细胞壁表面和细胞间隙的内含物上。图1,×11500。图2,×10400。V:液泡。Vm:液泡膜。CH:染色质。PL:质膜。N:核仁。Pd:胞间连丝。Is:细胞间隙。W:细胞壁。图3—4,寒冬中(12月9日)的分蘖节细胞。液泡内侧和液泡内含物表面表现酸性磷酸酶的高活性;特别是质膜和细胞壁之间也呈现大量的反应产物。图3,×14400。图4,×12200。图5,仲冬(1月10日)固定的材料。在质膜以及质膜和细胞壁分离的间隙内,突出地显示出酶的高活性反应。图5,×8900。     

在分化条件下甜菊愈伤组织分生区细胞超微结构研究

对甜菊（Ｓｔｅｖｉａｒｅｂａｕｄｉａｎａ）愈伤组织中尚未发生器官分化的分生细胞团进行了超微结构研究．结果表明,在器官分化条件下,愈伤组织中形成的分生区域的细胞体积小,细胞核大,核仁明显,且具核仁泡,部分细胞核中含有核内含物．大量小液泡分布在细胞的边周或散布于整个细胞中．液泡中通常含有陷入的细胞质成分和膜状物．部分液泡的形成与内质网膨大有密切关系．同时也观察到由内质网形成的多圈膜和双层膜包围细胞质成分的同心环结构．高尔基体及其小泡丰富,有时聚集分布在细胞某一区域．核糖体密集,有的聚集成多聚核糖体．因此,愈伤组织中分生区的细胞与分生组织中的液泡化和分裂的细胞类似．分生区细胞的另一明显特征是出现质膜内陷．推测这些超微结构特征可能反映了甜菊愈伤组织器官分化前的某些形态变化。     

甜菊愈伤组织生化,分化与甜菊糖苷积累的关系

甜菊愈伤组织中甜菊糖苷的积累与愈伤组织的生长呈负相关、与愈伤组织细胞的组织化及转绿呈正相关。愈伤组织芽的分化并不是积累较高水平甜菊糖苷的必要前提。绿色、质地致密、生长缓慢的愈伤组织,不论有芽分化或无芽分化时,其甜菊糖苷含量均较高。在电镜下观察到,这两种愈伤组织细胞具有类似的超微结构特征：细胞高度液泡化;叶绿体发育成熟,光合膜系统结构发达,基质浓厚且含有质体小球;微体具有典型的晶格结构,常与叶绿体紧     

冬季沙冬青叶肉细胞液泡中泡状内含物的研究

用透射电镜观察了沙冬青叶肉细胞液泡中泡状内含物的形成。在早期,这种泡状内含物位于细胞质中,它由大小不等、形态各异的小泡组成,后经液泡膜内吞进入液泡。液泡中的泡状内含物主要位于两个正常叶绿体之间,附近的细胞质较多,内有丰富的内质网、高尔基体、质膜管状突起和由它们产生的小泡。也有一些液泡泡状内含物出现在解体叶绿体附近。前者主要来自内质网、高尔基体和质膜,后者则主要起源于解体的叶绿体。这种泡状内含物的形成可能与增强植物的抗冻性有关。     

大鼠垂体细胞液泡内存在黄体生成激素（LH）

研究者普遍认为糖蛋白激素存在于促性腺激素（gonadotrophin,GTH)细胞的颗粒内,目前在生殖内分泌领域内对糖蛋白激素形成与释放的研究也主要集中在细胞内颗粒的变化上,我们近年的研究发现,大鼠垂体GTH细胞内黄体生成激素（luteinizing hormone,LH)的分泌与细胞内液泡的形态变化有密切的关系。铁形态也随液泡的形态变化而变化,因而推测“LH的储存与释放可能与液泡有极大的关系”,为进一步揭示垂体细胞的液泡内是否存在LH和探讨哺乳动物垂体细胞的液泡是否具有储存与释放LH的功能,本研究对大鼠垂体细胞的液泡进行了分离和纯化。用SDS－PAGE,Western immunobloting及Con A/HRP等方法分别对纯化的垂体,大脑皮层及肝脏组织的液泡进行了蛋白质,LH及糖蛋白的分析。结果显示：（1）垂体,皮层及肝脏细胞的液泡内均含有丰富的,分子量大小不等的蛋白质成分,不同组织的细胞液泡内蛋白质成分有许多是相似的;（2）垂体组织及其液泡内均含有LH,而且在相同浓度的蛋白量中,两者LH的水平并无明显差异;（3）垂体,皮层和肝脏组织液泡内均有分子量不同的糖蛋白,但只有垂体细胞的液泡内才有与LH位置相同的糖蛋白染色谱带。上述结果表明：虽然哺乳动物不同组织的细胞液泡内含有许多相似的蛋白质成分,但LH是特异性地存在于垂体细胞液泡内。在这些LH分子中,至少有一部分是已经装配了糖基的完整LH分子。因此,垂体细胞的液泡有可能具有储存与释放LH的功能。     

水稻胚乳细胞质膜内陷的超微结构和磷酸酶的细胞化学定位

对生长分化期水稻胚乳细胞的质膜内陷进行了超微结构和磷酸酶的细胞化学研究。结果表明 ,胚乳细胞内的小泡、内质网常与胞间连丝相连 ;质膜形态多变 ,功能活跃 ,由局部起伏的波纹状发展成明显内陷 ,深浅不一 ,多呈袋状 ,袋中包含着大小不一的泡状物 ;有些内陷脱离质膜成为胞质中的囊泡 ,表现出活跃的内吞现象。除细胞间隙中含有圆球状的内含物外 ,在质膜内陷和囊泡中常含有大量的内含物。H ATP酶定位结果显示 ,质膜及其邻近的泡状物周围有酶的分布 ;而酸性磷酸酶定位在液泡、胞间隙和其中的泡状内含物周围 ;在质膜及其内陷形成的囊泡中有G6P酶的分布。这些结果表明胞间隙和质膜内陷在物质的运输中可能起着重要作用     

减压、低温条件下制样的几种植物液泡图象

样品制作中选用的固定剂不同,在电子显微镜下所得的图象差异甚大。高锰酸钾固定的样品中(Luft 1956,Mollenhauer1959),液泡是一个空泡,核也是一个空泡。用四氧化锇(Palade 1952)和醛类-四氧化锇双固定的样品(Sabatini等1963)核内有物质,但液泡仍是一空泡。所有电子显微技术样品制作都离不开固定、脱水、包埋等过程中化学试剂的反复处理,化学试剂处理细胞会抽去部分细胞内含物;或与细胞某些内含物结合形成络合物。从而     

番茄种子及萌发过程中蛋白体超微结构的研究

对番茄种子蛋白体的结构,类型及萌发过程中的变化进行了详细观察,未萌发种子蛋白体周围由一单层膜包裹,内部为蛋白质基质及分布其中的内含物３部分组成,根据内含物形态和性质上的不同可分为球状晶体,拟晶体和簇晶体３种形式,根据蛋白体所含内含物的不同,将蛋白体划分为５种基本类型：（１）基质蛋白体;（２）球状晶体蛋白体;（３）拟晶体蛋白体;（４）簇晶体蛋白体;（５）复合蛋白体。萌发过程中,蛋白体逐渐降解并液泡化     

皱纹盘鲍消化腺的超微结构

在电镜下研究了大连地区皱纹盘鲍消化腺的超微结构。结果表明,皱纹盘鲍同其它腹足纲软体动物一样,消化腺由消化细胞、排泄细胞和钙细胞三种细胞类型组成。消化细胞呈柱状或锥体形,数量最多,细胞表面具微绒毛,顶端胞质内具顶颗粒,细胞中央区域具有许多“具电子致密核心池”结构,细胞基部胞质内含成簇的脂滴,线粒体球形或不规则,游离核糖体丰富。胞核椭圆形或不规则,位于细胞的基部,染色质多呈块状散布于核内,亦有少量贴核膜分布,核仁一个,十分明显。排泄细胞形状和结构与消化细胞相似,其主要特征是在细胞的在部区域内具有许多含高电子致密物的大液泡。钙细胞呈锥体形,大多分布在消化细胞和排泄细胞的基部,其主要特征是细胞内具有许多呈同心环状的钙粒子。     

红豆草根瘤侵染细胞中液泡内含物的超微结构特征

用透射电镜研究了红豆草（Onobrychis viciifolia）根瘤侵染细胞中液泡内含物的超微结构特征。结果表明,早期发育侵染细胞的液泡中只含有少量的纤维状物质。随着细胞的发育,液泡不断变大,液泡中的纤维状物质和膜状物质越来越多。在中央液泡形成后,液泡中的纤维状物质逐渐减少,类细胞质、泡状和膜状物质明显增多,它们常由一层来自液泡膜的膜包围,其形状一般近似圆形或椭圆形。液泡内含物的大量出现可能与红豆草及其根瘤具有高度的抗旱件有关。     

箭舌豌豆根瘤细胞液泡中一种特殊内含物的研究

用透射电镜观察了箭舌豌豆根瘤侵染细胞。结果表明,有一些小泡出现在细胞质膜和侵入线附近,它们不断向中央液泡运动,并在运动中相互靠近形成小泡团。当其到达中央液泡时,附近的液泡膜产生内吞,形成突起。最后,这些突起脱离液泡膜,在中央液泡中形成一种由管状结构和小泡组成、表面具有一层被膜的特殊内含物。本文还讨论了此种内含物的起源及其与根瘤抗旱和细菌周膜扩增的关系。     

甜菊醇糖苷生物合成关键基因的导入和鉴定分析

甜叶菊（Stevia rebaudiana Bertoni）生产的甜菊醇糖苷因具有高甜度、低热能、不参与人体内代谢兼具保健功能等特点,被誉为最有发展前途的新糖源。从甜叶菊叶片克隆了甜菊醇糖苷生物合成途径中的关键基因SrUGT85C2、SrUGT91D2m和SrUGT76G1,构建植物基因过量表达载体,以单独或组合的形式将这些基因导入到甜叶菊中,获得转基因植株。与野生型对照植株相比,单独导入SrUGT85C2的转基因植株中甜菊醇单糖苷含量提高,总糖苷、莱包迪苷A含量及占比没有明显变化;单独导入SrUGT91D2m的转基因植株中甜菊醇单糖苷含量显著降低,而甜菊醇双糖苷含量显著增加;单独导入SrUGT76G1的转基因植株中,总糖苷含量显著提高,莱包迪苷A含量达到10%以上,比对照提高了2倍,而甜菊糖苷含量减少了一半。3个基因组合同时导入的转基因甜叶菊植株与单独导入SrUGT76G1的转基因甜叶菊植株类似,其总糖苷、莱包迪苷A含量及其占比均显著提高。这些结果为以后通过分子生物学技术来调控甜菊醇糖苷生物合成关键基因的表达,培育莱包迪苷A含量高的高品质甜叶菊新品系提供了理论依据和技术方法。     

甜菊糖苷的应用及生物合成研究进展*

甜菊糖苷是一种从甜叶菊叶片中提取的高甜度、零热量甜味剂,可用作食品添加剂。近年来,甜菊糖苷在国内外市场需求量剧增,引起了广泛关注。概述国际上对甜菊糖苷的安全性研究及评价,从经济价值角度分析甜菊糖苷的市场需求及应用前景,总结甜菊糖苷作为食品甜味添加剂的应用以及其在抗糖尿病、抗心脏纤维化、抗菌等保健功能方面的最新研究成果。综述甜菊糖苷的生物合成研究进展,重点介绍甜菊糖苷的微生物体从头合成以及生物催化低甜度糖苷生成高甜度、口感更优的甜菊糖苷,探讨提高甜菊糖苷产量的关键因素,为高端甜味剂绿色合成工艺的研究与开发提供理论依据。     

日本1973—1979年甜菊栽培简况(译述)

日长对甜菊的反应及其变异甜菊[Stevia rebaudiana(Bertoni)Hemsley]是菊科植物,原产南美洲、其叶片能制造六种糖苷,其中最多的为甜菊苷(Stevioside)比蔗糖甜三百倍,其次为瑞包轴A 苷(Rebaudioside A),比蔗糖甜四百五十倍,还有四种糖苷数量较少,尚未定量析出,这种甜味的新作物近年来已引起大家的注意,可能成为我们新的甜味增甜物。日人在冲绳进行研究,试图找出此植物的基本要求与适应性,务求能在亚热带地区栽种得好,因此进行三种日长反应观察,即11,12.5及14小时处理,并与当地天然日照     

小地老虎蜕皮腺的形态和结构

用电镜和光镜以及组织化学方法研究了小地老虎(Agrotis ypsilon)幼虫蜕皮腺的形态与结构,及其在5龄—6龄幼虫的蜕皮期和预蛹—蛹的变态期的变化,并对蜕皮腺分泌的蜕皮液进行了组织化学分析.结果表明:(1)幼虫期的蜕皮腺共有15对,其中12对位于胸部1—3节和腹部1—9节的背侧面,其余3对位于前、中、后胸基节窝的外侧,至化蛹30小时后逐渐解体;(2)蜕皮腺的分泌细胞均为“液泡型”,在幼虫每次蜕皮期间出现周期性变化,随着蜕皮过程的结束,细胞由分泌状态进入静止状态,体积逐渐变小,色泽由乳白色趋向透明,液泡变小或消失,内质网数量溅少,液泡内含物对PAS反应减弱;(3)蜕皮前蜕皮腺分泌细胞的内含物PAS强阳性,表明蜕皮液是粘多糖或糖蛋白性质的,它通过导管分泌到新旧表皮层之间.