原油微生物群落构成及降解菌降解特性的研究

为分离得到高效原油降解菌,直接向原油中加入营养物刺激,培养一段时间后原油乳化降解。气相色谱法、红外光谱法和紫外吸收均表明降解菌体系具有较强的降解原油烃的能力。采用细菌16S rDNA通用引物和PCR扩增等方法,构建原油降解菌体系16S rDNA克隆文库,并对所构建的文库进行分析。同时,从降解菌体系中分离得到一株降解菌,鉴定结果表明所分离的细菌为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。采用气相色谱技术对降解过程中的原油烃的变化进行分析,结果显示原油烃类组分会随着降解时间的变化而发生变化,降解菌表现出其对烷烃类物质的降解能力。     

原油微生物群落构成多样性及降解菌DYL-1降解原油的研究

为分离得到高效原油降解菌,直接向原油中加入营养物刺激,培养一段时间后原油乳化降解,傅里叶红外光谱显示,2957cm-1、723cm-1处吸收峰消失;2855cm-1、1377cm-1处吸收峰减弱;880cm-1以及800cm-1吸收峰几乎消失,表明原油发生降解,效果明显。同时分离得到一株降解菌,经分子鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),红外光谱法和紫外吸收法分析表明其具有较强的降解原油烃的能力。根据传统分子生物学的方法,构建原油菌16S rDNA克隆文库,限制性酶切片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)分析了原油中的细菌多样性。结果表明此方法有效地评估了原油中的细菌群落和多样性。     

宁波港压载水的细菌多样性研究

为揭示宁波港压载水的微生物群落结构在人类活动影响下的分布差异及对环境因子变化的响应趋势。该课题从压载水中分离细菌,通过微生物自动鉴定系统(Sherlock MIS)、分子生物学16S rRNA基因的PCR扩增及RFLP技术,对宁波港压载水的细菌结构特征进行比对和分析,并通过16S rRNA基因文库解析研究压载水中微生物群落多样性。结果表明印度洋水样中存在假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.)、交替单胞菌属(Alteromonas sp.)、海杆菌属(Marinobacter sp.)和玫瑰杆菌属(Roseobacter sp.)、肠杆菌属(Enterobacter sp.);新加坡水样中存在人苍白杆菌属(Ochrobactrum sp.)、甲基杆菌属(Methylobacterium sp.)、鞘鞍醇单胞菌(Sphingomonas sp.)、嗜冷杆菌属(Psychrobacter sp.)、假单胞菌(Pseudomonas sp.)、伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)和葡萄球菌属(Staphylococcus sp.)假单胞菌属(Pseudomonas sp.);而美洲水样中存在弧菌属(Vibrio sp.)、军团菌属(Legionella sp.)、莫拉氏菌属(Moraxella sp.)和不动杆菌属(Acinetobacter sp.)。压载水中含有大量的潜在致病菌。     

链状亚历山大藻共附生细菌多样性

采用非分离培养分析方法,直接提取链状亚历山大藻（Alexandrium catenella）共附生细菌总DNA,以之为模板进行PCR扩增获得细菌16S rDNA基因片段,并构建16S rDNA克隆文库。通过16S rDNA限制性酶切片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism,RFLP）和测序方法对链状亚历山大藻共附生细菌的多样性进行了研究。84个16S rDNA克隆片段经限制性内切酶HaeⅢ酶切分析,得到30种不同的酶切指纹类型。挑选50个克隆子进行测序获得其16S rDNA部分序列,并对16S rDNA序列进行聚类分析构建了系统进化树。结果表明,链状亚历山大藻共附生的细菌多样性较强,优势细菌类群为变形菌α亚群（α-Proteobacteria）和拟杆菌（Bacteroidetes）,其中玫瑰杆菌（Roseobacter sp.）在α-Proteobacteria中占绝对优势。     

皱纹盘鲍消化腺的超微结构

在电镜下研究了大连地区皱纹盘鲍消化腺的超微结构。结果表明,皱纹盘鲍同其它腹足纲软体动物一样,消化腺由消化细胞、排泄细胞和钙细胞三种细胞类型组成。消化细胞呈柱状或锥体形,数量最多,细胞表面具微绒毛,顶端胞质内具顶颗粒,细胞中央区域具有许多“具电子致密核心池”结构,细胞基部胞质内含成簇的脂滴,线粒体球形或不规则,游离核糖体丰富。胞核椭圆形或不规则,位于细胞的基部,染色质多呈块状散布于核内,亦有少量贴核膜分布,核仁一个,十分明显。排泄细胞形状和结构与消化细胞相似,其主要特征是在细胞的在部区域内具有许多含高电子致密物的大液泡。钙细胞呈锥体形,大多分布在消化细胞和排泄细胞的基部,其主要特征是细胞内具有许多呈同心环状的钙粒子。     

噬菌体脱毒机理的研究Ⅰ

用噬菌体处理河流弧菌Ⅱ的时间不同,细菌菌落的透明度和超微结构也不一样。在吸附后７ｈ开始菌落出现透明度的变化,首先是不透明（乳黄色）的菌落占绝对优势,但已出现半透明和透明菌落,培养到４８ｈ时,几乎全部变为透明菌落。透明菌落不再能与其噬菌体吸附而产生噬斑,也不会再感染鲍而产生脓疱病。透射电镜观察发现,透明菌落的菌细胞形状和结构大都发生变化。细胞壁薄,细胞质浓缩集中在细胞的一侧或一端。不透明菌落细胞形状正常,细胞壁完整,细胞质外延使细胞横切面呈指环状。电镜观察不同时间取样发现,１号样品细胞结构无明显变化。２号样品多数细胞产生外膜泡。３号样品许多细胞结构与１号相似,但在一些细胞的附近出现成簇的外膜泡和噬菌体。４号样品细胞结构变化较大,细菌的核区被破坏,在细胞的周围发现许多噬菌体。５号样中发现许多菌细胞被破坏,也在一些细胞内发现噬菌体。６号样中透明菌落和不透明菌落细胞结构变化明显。７号样几乎所有菌落都变为透明状,许多细胞破裂等。     

三疣梭子蟹卵子发生的研究

１９８９年９月－１９９１年１月、作者利用透射电镜在超微结构水平研究了浙江舟山沿海的三疣梭蟹的卵子发生过程。实验结果得自于１２次取得的１５０号样品。根据核和胞质的变化我们把该蟹的卵子发生分为五期；卵原细胞分裂转化为卵原细胞；卵母细胞发育早期；卵母细胞发育中期；卵母细胞发育晚期；卵子形成期。     

皱纹盘鲍脓疱病的组织学和超微结构研究

１９９３年９月以来,大连地区许多养鲍厂的皱纹盘鲍都发生了严重的脓疱病。通过病理组织切片研究证明,脓疱病的病灶是从鲍足下表面开始逐渐扩展向足的深部,由于该病的唯一病原菌－河流弧菌Ⅱ的大量繁殖瞳的结缔组织、肌纤维坏死瓦解或破碎,病灶中只剩下鲍的血淋巴细胞、弧菌及细胞碎片。     

蟹类精子超微结构的比较研究

应用光镜和电镜,比较研究了三疣梭子蟹,中华绒螯蟹和长江华溪蟹的成熟精子。揭示３种蟹精子都是不能游动的无鞭毛精子,呈球形,前后略扁,精子前端出现一光滑的小圆面,圆面四周有内陷的沟环。沟环之后,精子表面凹凸不平,并伸出多数辐射臂。３种蟹精子均为高度特化的细胞,外被质膜,内含细胞核,顶体及退化的细胞质。