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假单胞菌Pseudomonas fluorescens Pf0-1中转录调控因子SpfB负调控DNA磷硫酰化修饰 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]DNA磷硫酰化修饰是DNA骨架上非桥接的氧原子以序列选择性和R-构型被硫取代的一种新型DNA修饰。目前,磷硫酰化修饰在多种细菌、古生菌以及人类致病菌中多有发现,但其分子调控机制尚不清楚。为了全面解析磷硫酰化修饰的调控机制,本文选择荧光假单胞菌Pf0-1为研究对象,开展了其DNA磷硫酰化修饰的调控机制研究。[方法]首先,构建了spfB基因缺失和回补菌株,使用碘能特异性断裂磷硫酰化修饰DNA的方法,研究了该基因缺失对修饰表型的影响。利用cDNA在相邻同方向的基因间隔区进行PCR,确定了磷硫酰化修饰基因簇spfBCDE内的共转录单元。通过荧光定量RT-PCR,分析了spfB基因缺失突变株中磷硫酰化修饰基因的转录量。利用异源表达并纯化得到的重组蛋白SpfB进行了体外功能研究。通过EMSA实验,验证了SpfB蛋白具有与spfB启动子序列结合活性。通过DNase I footprinting实验,精确定位了SpfB蛋白与DNA结合序列。[结果]spfB基因的缺失加剧了磷硫酰化修饰DNA断裂所致电泳条带弥散的表型,spfB基因的回补能够恢复该表型,证明spfB基因负调控磷硫酰化修饰。鉴定了spf基因簇中只含有1个共转录单元,且该共转录单元在△spfB突变株中转录水平明显上升。通过EMSA和DNase I footprint实验,检测了SpfB蛋白与磷硫酰化修饰基因spfBCDE的启动子区域5''-TGTTTGT-3''相结合。[结论]SpfB作为转录调控因子负调控磷硫酰化修饰基因spfBCDE的表达,为解析磷硫酰化修饰的调控机制和全面理解基因组上的部分修饰特征奠定了基础。 相似文献
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目的:PI3K/Akt信号通路是与胶质瘤发生发展密切相关的核心通路之一,LY294002是该通路的特异性抑制剂。本研究通过探讨PI3K通路抑制剂LY294002对U87胶质瘤细胞系细胞衰老及凋亡的影响,从而为胶质瘤患者治疗的新策略奠定理论基础。方法:将体外培养的人脑胶质瘤U87细胞株分为DMSO处理的对照组和LY294002(100μM)处理的实验组,采用β-半乳糖苷酶染色和流式细胞术的方法,分别检测并比较两组肿瘤细胞衰老和凋亡的情况。结果:LY294002处理组U87胶质瘤细胞的衰老指数(32.20±4.46%)显著高于DMSO对照组(3.40±1.61%,t=6.254,P0.001)。另外,与DMSO对照组相比,凋亡蛋白caspase-3mRNA的表达在LY294002处理组胶质瘤细胞中显著上调(t=8.923,P0.05)。LY294002处理组肿瘤细胞的凋亡指数(80.10±4.832%)明显高于DMSO对照组(4.260±1.073%,t=8.923,P0.05)。结论:LY294002既能够诱导肿瘤细胞衰老,又能够诱导肿瘤细胞凋亡,然而其诱导胶质瘤细胞凋亡的能力占据主导地位,为其发挥抗胶质瘤效应的主要途径。另外,在LY294002的持续作用下,部分衰老的肿瘤细胞或许会发生凋亡。这些结论为为临床增强胶质瘤患者的联合化疗奠定了理论基础。 相似文献
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通过回顾2014年在西非国家流行的埃博拉疫情,分析突发传染病大规模流行的主要原因和应急防控中面临的主要挑战,进一步从复杂系统的视角提出传染病防控体系框架,以及我国加强重大传染病防控能力建设的建议。 相似文献
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固定化微生物处理模拟污染地表水 总被引:1,自引:0,他引:1
以聚乙烯醇和海藻酸钠为包埋剂、驯化后的活性污泥为包埋菌剂,制备固定化微生物颗粒,其中包埋剂与包埋菌剂的比例为2:1。将该固定化微生物颗粒按20%的填充率装填到自制反应器中,用于处理模拟污染地表水,研究该固定化微生物的性能特点及其对模拟污染地表水的净化效果。结果表明:固定化微生物反应器的最佳水力停留时间为10h,最佳进水COD负荷为1.15~1.85g·L-1·d-1。在水温为20~29℃、溶解氧为3~4mg·L-1、水力停留时间为10h的条件下,当进水COD浓度为70.58~91.76mg·L-1、铵氮浓度为13.68~17.82mg·L-1时,COD去除率>62.3%,铵氮去除率>90.6%,表明固定化微生物能够有效地去除污染地表水中的COD和铵氮。 相似文献
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目的:观察并评价改良后一钳式环切法临床应用优势。方法:回顾2009年12月至2012年3月间在我院实施的870例包皮环切术资料,对比分析改良一钳法(470例)、传统一钳法(337例)、袖套切除法(63例)三组术式在手术时间、术中疼痛发生率、系带损伤率、患者对外观满意率及并发症(血肿、水肿、延迟愈合、切口狭窄)等临床指标间的差异。结果:改良一钳法的手术时间(min)、术中疼痛发生率小于传统一钳法及袖套切除法(20.88±4.96 vs 26.6±6.48 vs 56.22±7.09,5.5%vs 28.2%vs 100%,P<0.01),袖套切除法在术后短期水肿发生率方面低于改良一钳法和传统一钳法(1.6%vs 10.9%vs 14.8%,P<0.05),改良一钳法的系带损伤率、血肿发生率、切口狭窄率均低于传统一钳法(0 vs 3.6%,0.4%vs 5.9%,0 vs 0.9%,P<0.01),改良一钳法的外观满意度高于传统一钳法及袖套切除法(98.1%vs 93.2%vs 95.2%,P<0.01),而各组的术后切口延迟愈合发生率无统计学差异。结论:根据患者具体情况选择包皮环切术式。其中改良一钳法因适用范围广、手术时间短,系带安全及外形美观,适用于绝大部分的包皮过长及包茎患者。 相似文献
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杨腊邓月琴黄荣华郑涛刘丰李建明 《现代生物医学进展》2012,12(25):4816-4819
目的:观察雷公藤甲素(Triptolide,TRP)对海人藻酸(Kainic acid,KA)海马内注射后大鼠学习记忆的影响及其作用机制。方法:采用Morris水迷宫筛选空间学习记忆能力正常的SD雄性大鼠90只(200~220g)。将实验动物分成3组:右侧海马注射生理盐水后生理盐水灌胃对照组(NS+NS)、右侧海马注射海人藻酸后生理盐水灌胃干预组(KA+NS)、右侧海马注射海人藻酸后雷公藤甲素灌胃干预组(KA+TRP)。动物存活1天,3天,5天,7天,14天,每个时间点6只,处死前分别于各相应时间点用Morris水迷宫检测各组动物空间位置记忆能力;免疫组织化学方法结合图像分析技术检测海马CA1区神经元COX-2的表达。结果:与NS组(NS+NS)比较,KA组(KA+NS)大鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),跨越原平台次数减少(P<0.05);海马CA1区的神经元COX-2表达升高(P<0.05);TRP组(TRP+KA)与KA组比较,大鼠的平均逃避潜伏期从第5天起缩短(P<0.05),跨越原平台次数增多(P<0.05),海马CA1区神经元COX-2表达在5天,7天时下调(P<0.05)。结论:KA海马内注射,可以导致大鼠学习记忆功能障碍及上调海马CA1区神经元COX-2表达;雷公藤甲素干预治疗,能够改善动物的学习和记忆能力,能抑制KA诱导的海马CAl区神经元COX-2的表达。 相似文献
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目的:探讨痰热清注射液治疗老年慢性支气管炎急性发作的临床疗效,观察患者治疗前后细胞因子的变化。方法:选择我院2011年1月至2012年6月收治的老年慢性支气管炎急性发作的患者80例,随机分为研究组和对照组,各40例。两组均给予常规吸氧、解痉、平喘化痰等药物治疗,同时给予头孢呋辛静脉滴注,2次/d;研究组同时给予痰热清注射液静脉滴注,1次/d,7d为一个疗程,共2个疗程。治疗前后应用酶联免疫吸附法测量两组血清肿瘤坏死因子a(Tumor necrosis factor-a,TNF-a)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-8水平。结果:1研究组患者咳嗽改善时间、呼吸困难改善时间和肺部湿啰音改善时间明显短于对照组(P0.05)。研究组总有效率明显高于对照组(P0.05)。2治疗后两组血清IL-6、IL-8、TNF-a水平明显降低(P0.05);研究组血清IL-6、IL-8、TNF-a水平明显低于对照组(P0.05)。结论:痰热清治疗老年慢性支气管炎急性发作可以有效改善患者临床症状,调节免疫功能,降低炎症反应,治疗效果较好。 相似文献
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为了研究天津于桥水库微囊藻(Microcystis)的遗传多样性及其系统发育关系, 将分离自于桥水库的10株微囊藻的7个管家基因(ftsZ、glnA、gltX、gyrB、pgi、recA和tpi)构建了微囊藻的多位点序列分型(MLST)基因库, 与20个鄱阳湖序列型(STs)和237个日本湖泊的序列型进行比对, 结果发现于桥水库的STs呈独立分支, 说明相对于其他地区的藻株, 于桥水库微囊藻株具有共同祖先。MLST的结果显示本研究10个藻株具有较高的遗传多样性, 平均期望杂合度H值为0.938。基于序列类型构建的系统发育树显示, MLST可以有更精细的分辨率, 有成为种群分子标记的潜在可能性。 相似文献