脱落酸及其类似物对玉米线粒体异柠檬酸脱氢酶活性的影响

用（＋）ＡＢＡ及其两种ＲＣＡ系列类似物（ＲＣＡ．７ａ,ＲＣＡ．７ｂ）处理主米黄化芽提取的离体线粒体,三者均能促进线粒体上异柠檬酸脱氢酶（ＩＣＤＨ）的活性,另外,（＋）ＡＢＡ、ＲＣＡ．７Ａ及ＲＣＡ．７ｂ分子都有一个环己烯酮环（ｃｙｃｌｏｈｅｘｅｎｏｎｅ ｒｉｎｇ）,差别仅在侧链的不同,这提示,此环己烯酮环是ＡＢＡ表现此种促进作用所必需的。（＋）ＡＢＡ处理离体线粒体之前,先经抗ＡＢＡ结合蛋白的抗体（ａ     

盐分对碱蓬幼苗离子含量,甜菜碱水平和BADH活性的效应

研究了盐生植物碱蓬（Ｓｕａｅｄａ ｓａｌｓａ）生长在不同浓度的ＮａＣｌ和ＫＣｌ溶液中体内Ｎａ＋ 、Ｋ＋ 含量、甜菜碱水平和甜菜碱醛脱氢酶（ＢＡＤＨ）活性的动态变化。ＮａＣｌ处理９６ 小时后,碱蓬地上部Ｋ＋ 含量低于对照,而Ｎａ＋ 明显高于对照,并分别随外界盐度增加而升、降;ＫＣｌ处理的植株,Ｋ＋ 、Ｎａ＋ 含量变化与ＮａＣｌ处理的相反;甜菜碱水平和ＢＡＤＨ 活性随外界ＮａＣｌ浓度增加而升高,甜菜碱水平随处理时间延长而增大,ＫＣｌ对甜菜碱水平和ＢＡＤＨ 活性的效应类似ＮａＣｌ。证明ＮａＣｌ和ＫＣｌ均能促进盐生植物碱蓬体内甜菜碱的积累,初步证明ＢＡＤＨ 与甜菜碱的积累有关     

灵芝多糖对人脐血LAK细胞活性的影响

本文研究了灵芝多糖（ＧＬＰ）对人脐血ＬＡＫ（ＣＢ—ＬＡＫ）细胞活性的影响,结果发现,单独ＧＬＰ能刺激人脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）增殖,但不能诱导ＬＡＫ活性,当与５０ｕ／ｍｌｒＩＬ—２伍用时,可增殖ＣＢ—ＬＡＫ细胞诱导活性,不同剂量ＧＬＰ（０．５—１００μｇ／ｍｌ）影响作用不同,以１０μｇ／ｍｌ浓度最好．在不同浓度ｒＩＬ—２（１０—１００ｕ／ｍｌ）诱导ＣＢ—ＬＡＫ细胞过程中加入ＧＬＰ（１０μｇ／ｍｌ）,可明显提高细胞增殖能力,减少ｒＩＬ—２用量。ＧＬＰ亦能促进效应阶段ＣＢ—ＬＡＫ细胞对Ｒａｊｉ肿瘤靶细胞的杀伤作用（Ｐ＜０．００１）。由此看出,ＧＬＰ具有增强ＣＢ—ＬＡＫ细胞活性的作用,是一很好的生物反应调节剂（ＢＲＭ）,有必要进行深入的研究。     

测量细胞内吞过程中膜受体流动性的新方法

本文首次提出用ＡＢＣ（ＡｖｉｄｉｎＢｉｏｔｉｎＣｏｍｐｌｅｘ）法标记细胞膜受体,通过ＦＲＡＰ（ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＲｅｃｏｖｅｒｙＡｆｔｅｒＰｈｏｔｏｂｌｅａｃｈｉｎｇ）技术,测量细胞内吞过程中受体流动性变化的方法。实验选择巨噬细胞ＣｏｎＡ受体,比较了用ＣｏｎＡ－Ｂｉｏｔｉｎ＋Ａｖｉｄｉｎ－ＦＩＴＣ（ＡＢＣ法）和ＣｏｎＡ－ＦＩＴＣ（直接法）标记的膜表面ＣｏｎＡ受体荧光强度和内吞过程中受体的流动性测量结果。结果显示ＣｏｎＡ－Ｂｉｏｔｉｎ＋Ａｖｉｄｉｎ－ＦＩＴＣ标记的巨噬细胞膜受体的平均荧光强度比用ＣｏｎＡ－ＦＩＴＣ标记的平均荧光强度高大约３倍;ＡＢＣ法标记的受体,测量结果误差小、灵敏度高;ＣｏｎＡ刺激１５ｍｉｎ后,巨噬细胞膜表面ＣｏｎＡ受体的扩散系数和荧光恢复率较静息状态时明显下降。讨论了两种标记方法对测量结果的影响     

膜去极化与cAMP在胰岛细胞株HIT中诱导CBP片段的转录活性

为了研究 Ｃ Ｂ Ｐ在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中调节基因转录的机制,将不同的 Ｃ Ｂ Ｐ片段瞬时转染到细胞中,观察其转录活性．实验表明,在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,膜去极化及 ｃ Ａ Ｍ Ｐ 均可诱导 Ｃ Ｂ Ｐ３０（ Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ结合功能区）转录活性增强,并有协同效应． Ｐ Ｋ Ｃ对 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 的转录活性无影响;与 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ有更强结合力的 Ｃ Ｂ Ｐ Ｋ Ｉ Ｘ Ｓ／ Ｂ（氨基酸序列短于 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 的 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ结合功能区）其基本转录活性及膜去极化、ｃ Ａ Ｍ Ｐ诱导下的转录活性均比 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 更强．反义 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ 的过度表达可降低 ｃ Ａ Ｍ Ｐ诱导的 Ｃ Ｂ Ｐ的转录活性．提示在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,膜去极化及 ｃ Ａ Ｍ Ｐ对共转录因子 Ｃ Ｂ Ｐ转录活性的调节作用通过 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ介导．     

GABA和孕酮对人及豚鼠精子的体外获能作用

为了探讨γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）是否参与人及豚鼠精子体外获能的调节,将生育男子和豚鼠清子分别悬浮于ＢＷＷ和低Ｃａ＾２＋最小获能培养基（ＬＣａ＾２＋－ＭＣＭ）中,加入ＧＡＢＡ、孕酮（Ｐ４）、ＧＡＢＡＡ受体激动剂及其拮抗剂,在５％ＣＯ２孵箱３８．５℃培养２ｈ。然后用ｉｏｎｏｐｈｏｒｅ Ａ２３１８７激发精子顶体反应（ＡＲ）和超激活运动（ＨＡＭ）。以精子与金霉素（ＣＴＣ）荧光结合类型、ＡＲ和ＨＡＭ为指标来     

巨噬细胞细胞内吞过程中膜受体流动性的测量——两种标记受体…

本文首次实现了细胞内吞过程中膜受体流动性的测量。实验选择巨噬细胞膜和伴刀豆凝集素Ａ（ＣｏｎＡ）。分别用ＣｏｎＡ－Ｂｉｏｔｉｎ＋Ａｖｉｄｉｎ－ＦＩＴＣ（ＡＢＣ法）和ＣｏｎＡ－ＦＩＴＣ（直接法）两种方法标记巨哓细胞膜ＣｏｎＡ受体，比较了这两咱方法标记的巨噬细胞ＣｏｎＡ受体的荧光强度，利用ＦＲＡＰ技术。分别用两种标记方法测量了巨细胞ＣｏｎＡ受体的流动性。结果显示ＣｏｎＡ－Ｂｉｏｔｉｎ＋Ａｖｉｄｉｎ－ＦＩ     

人GRY-RBP基因的表达及其RNA结合活性的初步鉴定

ＲＲＭ ＲＮＡ 结合蛋白在基因的转录后调控中起着重要作用．人ＧＲＹ－ＲＢＰ 是我们实验室最近克隆的一个新的全长ｃＤＮＡ,编码一个ＲＲＭ ＲＮＡ 结合蛋白．ＧＲＹ－ＲＢＰ 的全编码区用ＰＣＲ扩增后,克隆到ｐＥＴ３０ａ＋ 表达载体中,在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得了高效表达,表达的ＧＲＹ－ＲＢＰ重组蛋白占细菌总蛋白的２１％ ．利用融合在ＧＲＹ－ＲＢＰＮ 端的Ｈｉｓ．Ｔａｇ,采取亲和层析的方法纯化了表达的重组蛋白．为了检测ＧＲＹ－ＲＢＰ的ＲＮＡ 结合活性及其所结合的ＲＮＡ 性质,将表达的蛋白与ｐｏｌｙ（Ａ）－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ结合,发现ＧＲＹ－ＲＢＰ能与ｐｏｌｙＡ （Ａ）结合,结合活性能被可溶性的ｐｏｌｙ（Ａ）、ｐｏｌｙ（Ｃ）减弱．改变ＮａＣｌ浓度和加入不同浓度的酵母ｔＲＮＡ竞争物后,ｐｏｌｙ（Ａ）结合活性不变．     

有氧运动对高胆固醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体活性调节的影响

本文研究了实验性高胆固醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体（ＬＤＬＲ）活性变化及有氧运动时ＬＤＬＲ活性调节的影响。发现,高脂（ＨＣ）组肝组织匀浆ＬＤＬＲ活性较正常对照（ＮＣ）组降低３７％（Ｐ＜０．０５）,同时血清总胆固醇（ＴＣ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬＣ）及血清载脂蛋白Ｂ（ＡｐｏＢ）均显著高于ＮＣ组（Ｐ＜０．０１）;高脂＋运动（ＨＥ）组ＴＣ、ＬＤＬＣ及ＡｐｏＢ均明显低于ＨＣ组,而ＬＤＬＲ活性则较ＨＣ组增高２６％（Ｐ＜０．０５）。结果提示：（１）高胆固醇负荷时细胞可通过下行调节影响ＬＤＬＲ活性;（２）运动可能通过增加对细胞内胆固醇利用和降解,反馈作用于下行调节过程影响ＬＤＬＲ的合成,增加对ＬＤＬＣ摄取而显著改善血脂水平。     

有氧运动对高胆固醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体活性调节…

本文研究了实验性在醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体（ＬＤＬ－Ｒ）活性变化及有氧运动时ＬＤＬ－Ｒ活性调节的影响,发现,高脂（ＨＣ）组肝组织匀浆ＬＤＬ－ＲＩ自古以来生较正常对照（ＮＣ）组降低３７％（Ｐ〈０．０５）,同时血清大醇（ＴＣ）、低密度脂收白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）及血清栽脂蛋白Ｂ（ＡｐｏＢ）均显著高于ＮＣ组（Ｐ〈０．０１）;高脂＋运动（ＨＥ）组ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ及ＡｐｏＢ均明显低于ＨＣ组,而ＬＤＬ－Ｒ     

脱落酸及其类似物对玉米线粒体异柠檬酸脱氢酶活性的影响

用(+)ABA及其两种RCA系列类似物(RCA．7a,RCA．7b)处理从玉米黄化芽提取的离体线粒体,三者均能促进线粒体上异柠檬酸脱氢酶(ICDH)的活性,另外,(+)ABA、RCA．7A及RCA．7b分子都有一个环己烯酮环(cyclohexenonering),差别仅在侧链的不同,这提示,此环己烯酮环是ABA表现此种促进作用所必需的。(+)ABA处理离体线粒体之前,先经抗ABA结合蛋白的抗体(anti-ABBPPAbs)处理,则(+)ABA促进ICDH活性的效应被显著抑制。暗示,线粒体上可能存在具有受体功能的ABA结合位点。     

水分胁迫对甘蔗叶片线粒体膜流动性的影响及其与膜脂过氧化的关系

用荧光探剂ANS对抗旱性不同的甘蔗品种在水分胁迫下叶片线粒体膜流动性的变化进行的研究表明,水分胁迫降低了线粒体膜的流动性,抗旱性强的甘蔗品种Co 617和F.Y.79-9的下降幅度分别小于抗旱性弱的Co 740和M.T.77-208;水分胁迫下线粒体膜流动性的下降与膜脂过氧化产物丙二醛含量的增加有密切关系。外源自由基处理试验也表明,甘蔗叶片线粒体膜流动性的下降与膜脂过氧化作用有关。     

外源氯化胆碱可提高小麦线粒体膜的流动性

分别用ANS、DPH及16 -NS三种不同的标记物标记小麦黄化苗的线粒体 ,研究氯化胆碱 (cholinechloride,CC)对线粒体膜的荧光光谱、平均微粘度 (η )及ESR图谱的影响。结果表明 ,0.21 -1.79mmol·L-1 的CC均能显著降低线粒体膜的荧光强度、η 值及ESR图谱的序参数 (S)和旋转相关时间 (τc) ,表明CC可增加线粒体膜的流动性。为揭示CC的提高植物抗冷机制提供依据     

呼吸链底物和抑制剂对线粒体内膜流动性的影响

用DPH和ANS标记大鼠肝线粒体内膜,以稳态荧光偏振法,研究了呼吸链底物和抑制剂对内膜流动性的影响。1.苹果酸+谷氨酸、琥珀酸分别为底物,均能引起内膜流动性增加。2.琥珀酸对含心磷脂的脂质体的膜流动性无影响。3.在鱼藤酮存在的条件下,苹果酸+谷氨酸对内膜流动性的增加作用消失,但琥珀酸的作用仍然存在。有氰化钾时则琥珀酸的作用消失。4.不论外加底物存在与否,鱼藤酮使内膜的流动性下降,而氰化钾则使之增加。抗霉素A亦可使内膜的流动性增加。上述结果表明:线粒体内膜流动性与其功能密切相关。电子沿呼吸链传递使线粒体内膜流动性增加,这种变化可能与呼吸链成分的氧化还原态有关。     

没食子酸丙酯和没食子酸异丁酯对人红细胞膜结构与功能的影响

本文应用荧光探剂ANS(1—苯胺—8萘磺酸)、NPN(N—苯基—1—萘胺)和DPH(1.6—二苯基—1.3.5—已三烯)观察没食子酸丙醋和没食子酸异丁酯对人红细胞膜流动性和相变温度以及Na~ -K~ ATP酶活性的影响.实验结果指出该两种化合物均能:(1)降低与膜结合的荧光探剂强度但不改变探剂在水相与膜相的分配比例:(2)降低膜脂的相变温度,增加膜的流动性;(3)抑制红细胞膜Na~ -K~ ATP酶活性;(4)标记红细胞膜的DPH偏振度随化合物浓度的增加而降低,膜的流动性增加.在给定的浓度范围内,两种化合物的效应表现为明显的量效关系与构效关系.从上述结果推测该两种化合物可能是通过改变膜脂结构、膜蛋白的脂类环境而调节膜的功能,成为其治疗疾病的机理之一.     

膜融合剂对脂质体及血影膜膜流动性的影响

本文用荧光探针ANS,DPH与A研究了几种膜融合剂对脂质体与血影膜流动性的影响.蔗糖使PS脂质体的脂双层流动性降低,探针越是在极性区流动性越小,说明蔗糖主要作用于脂双层的极性区;蔗糖也使血影膜流动性降低,此作用是可逆的.油酸甘油脂(GMO)使PS脂质体的流动性增加,且越是在疏水区内部,流动性增加得越大,说明GMO主要是作用于脂双层的非极性区:GMO也使血影膜流动性增加,此作用是不可逆的.二甲亚砜(DMSO)对血影膜的作用,两种不同荧光探针不一样,对DPH的作用出现双相让,低浓度与高浓度的作用结果分别与蔗糖和GMO的作用一致.     

A study of carbachol-atropine interaction on intestinal smooth muscle vesicles, using a fluorescent probe.

Plasma membrane vesicles were prepared from guinea pig ileum longitudinal muscle. The vesicles were characterized by electron microscopy and analysis of lipid and protein content. They were shown to be free of gross contamination from actomyosin, sarcoplasmic reticulum, and mitochondria. 8-Anilino-1-naphthalene sulphonic acid (ANS) binding characteristics were similar to those found in other membranes. Both carbachol and atropine increased the fluorescence of ANS bound to this membrane, the maximum increase for atropine being greater than that for carbachol. Since neither drug effected the apparent affinity constant for the ANS-membrane interaction. It may be assumed that the increased fluorescence was due to an increase in the number of ANS binding sites. The carbachol-dependent increase in ANS fluorescence was blocked noncompetitively by atropine but not by tubocurarine or diphenhydramine. These latter two antagonists also increased ANS fluorescence but at much higher concentrations than either carbachol or atropine. Neither atropine nor carbachol increased ANS fluorescence on either erythrocyte ghosts or liposomes (prepared from a lipid extract of the muscle membrane).     

外源H_2O_2和·OH对大麦幼苗根系线粒体膜脂和流动性的伤害

以大麦 (H ordeum vulgare L.)为材料 ,研究了外源 H2 O2 和· OH对大麦根系呼吸速率、线粒体膜流动性和膜脂脂肪酸组成的影响。结果表明 ,1 0 mmol/L H2 O2 或· OH处理 4d,大麦幼苗根系呼吸速率和线粒体膜脂不饱和脂肪酸含量及脂肪酸不饱和指数下降 ,线粒体膜脂荧光强度增加 ,膜流动性下降 ,且 H2 O2 或· OH处理浓度 (在 0 .1～ 1 0 mmol/L范围内 )越高 ,膜脂流动性下降越明显。 H2 O2 和· OH处理的同时加入同浓度的抗坏血酸 (As A)和甘露醇 ,膜流动性明显增强或恢复     

Fluorescence study on the interaction of salicylate with rat small intestinal epithelial cells: possible mechanism for the promoting effects of salicylate on drug absorption in vivo

The water-soluble drug, salicylate, was rapidly taken up by rat small intestinal epithelial cells. Salicylate, known to enhance the absorption of poorly absorbable drugs by rectum and small intestine, caused a significant decrease in the fluorescence polarization of 1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene (DPH) and a slight increase in the fluorescence polarization of 8-anilino-1-naphthalene sulfonic acid (ANS) in the isolated rat small intestinal epithelial cell suspension. An increase in the membrane fluidity of epithelial cells may possibly contribute to the enhancement of drug absorption by salicylate.     

Effect of ABA on the Activity of Mitochondrial Membrane Bound Na+-K+ ATPase

Effect of ABA on the activity of mitochondrial membrane bound Na+-K+ATPase during isolation of mitochondria from soybean cotyledons, there was an increased activity of the mitochondrial membrane bound Na+-K+ATPase if abscisic acid (ABA) was added to the medium when soybean seedling were grown at 27 ℃ or 16℃, 40 mol/L ABA could change the turning point temperature of Arrhenius the activation energies (Ea) of Na+-K+ATPase from 36.6℃ or 22.7℃ decreased to 30. 3℃ or 17.8℃ respectively. The Km value and S0.5 value for this enzyme with ABA was higher than that without ABA. Hill coefficient (n) of this enzyme with ABA was 1.01 and without ABA was 1.89. The o2 uptake of mitochondria also increased. These results showed that the temperature of phase transition of mitochondrial membrane were decreased by ABA treatment.