Pax3对神经细胞中的转录调控作用的实验研究

摘要 目的：探讨Pax3的过表达对Neuro-2a细胞中转录本的表达影响,初步分析Pax3对Neuro-2a细胞可能的转录调控作用。方法：反复冻融裂解法获取Pax3过表达腺病毒后将神经瘤母细胞系Neuro-2a传代培养,而后将Pax3过表达腺病毒和传代培养后的Neuro-2a细胞加入到同一培养皿中,蛋白质免疫印迹（Western blot）检测过表达Pax3蛋白的Neuro-2a细胞（Pax3过表达组）和对照组（NC组）Neuro-2a细胞的Pax3蛋白表达水平,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测Pax3过表达组和NC组Neuro-2a细胞的Pax3mRNA水平,Trizol法提取Pax3过表达组和NC组Neuro-2a细胞的总RNA,然后进行全转录本测序,最后将选出的有差异性的基因使用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）验证。结果：与NC组相比,Pax3过表达组的Pax3蛋白和Pax3mRNA表达水平明显升高（P＜0.05）;Pax3过表达组中发现了1045个基因表达上调,1313个基因表达下调。通过qRT-PCR验证发现在Pax3过表达组中Nppb和Chrna5表达水平上升（P＜0.05）,Arhgap5、Rock1、Rif1、Brca2、Prkg2和Stag2表达水平下降（P＜0.05）。结论：Pax3过表达腺病毒感染Neuro-2a细胞后,其蛋白和mRNA表达水平均升高,Rock1、Rif1和Stag2可能作为Pax3的下游靶点参与调控Neuro-2a细胞周期和干细胞特性。     

Pax基因功能及其选择性剪接的研究进展

Pax基因家族编码的蛋白是一组极为重要的转录调控因子,在胚胎发育的器官形成中扮演重要角色,其主要功能包括：调控细胞增殖、促进细胞自我更新、诱导前体细胞定向转移以及改变特异细胞系的分化方向。目前已知,Pax基因的非正常表达是多种先天性疾病的主要诱因。Pax基因的选择性剪接体通常具有一定的空间特异性,每种剪接体都有其主要作用的靶位和信号通路。文章简述了Pax基因的相关背景知识,详细介绍Paxl—Pax9调控在胚胎组织发育中的各项功能,并列举了现已确定的Pax基因在不同物种中的选择性剪接产物。     

四川槭属一新种

<正> 短瓣械 新种 图1 Acer brachystephyanum T. Z. Hsu, sp. nov. Sect. Macrantha Pax Ser. Micrantha Pojark. Species affinis Acer maximowiczii Pax, differt folio integro subtusdense flavescenti-pubescenti petala sepalis paulo breviora, disco longi-villoso. Arbor 5—6 m alta. Cortex brunneus. Ramuli robusti, fumidi, glabri. Folia chartacea, rotundata, 4.5—6 cm longa, 5—8 cm lata, integra volrepan-     

四川槭属一新种

短瓣械 新种 图1 Acer brachystephyanum T. Z. Hsu, sp. nov. Sect. Macrantha Pax Ser. Micrantha Pojark. Species affinis Acer maximowiczii Pax, differt folio integro subtusdense flavescenti-pubescenti petala sepalis paulo breviora, disco longi-villoso. Arbor 5—6 m alta. Cortex brunneus. Ramuli robusti, fumidi, glabri. Folia chartacea, rotundata, 4.5—6 cm longa, 5—8 cm lata, integra volrepan-     

桩蛋白与肾脏

桩蛋白(paxillin,Pax)作为细胞骨架蛋白的关键调节蛋白之一,具有对细胞外刺激发应的潜能,在多种信号转导途径中起到结构和信号转导的承接作用.近年来有关Pax在细胞黏附与迁移中的作用备受关注,同时与肾脏发育及肾脏疾病发生的关系也日渐受到重视,现将目前相关研究作简单综述.     

世界孩儿参属（Pseudostellaria Pax）的分类纲要及地理分布

在标本和文献综合分析的基础上,对世界范围内孩儿参属( Pseudostellaria Pax)植物的主要形态特征进行了总结,依据Mizushima的分类系统编制了孩儿参属的分类检索表,对5个存疑种进行了初步分类处理,并对孩儿参属各种类的分布状况进行了绘图和分析。结果表明：具有肉质块根、绝大多数种具有闭锁花以及开放花花瓣常呈2浅裂是孩儿参属区别于石竹科( Caryophyllaceae)其他属的典型特征。初步确认全世界的孩儿参属植物共22种,被分成Sect. Pseudostellaria和Sect. Mamillatae 2个组,其中,前者仅包含石生孩儿参﹝P. rupestris ( Turcz.) Pax﹞1种,而后者则被进一步分成Ser. Mamillatae和Ser. Distantes 2个系。本研究结果不支持将P. sierrae Rabeler et R. L. Hartm.和P. oxyphylla ( B. L. Rob.) R. L. Hartm. et Rabeler归入孩儿参属的观点,并建议将矮小孩儿参﹝P. maximowicziana ( Franch. et Sav.) Pax﹞、须弥孩儿参﹝P. himalaica ( Franch.) Pax﹞和异花孩儿参﹝P. heterantha ( Maxim.) Pax﹞分别独立成种。从分布区域看,孩儿参属呈北温带间断分布,由北美洲、地中海地区和东亚3个相互隔离的地理区域组成,并且,东亚为其多样化分布中心。     

Pax7基因在C 2C12细胞内的表达及诱导失活(简报)

配对框(Paired box)首先是在果蝇的分节基因中发现的一段DNA保守序列,编码能与DNA特异结合的一个蛋白质结构域。这些序列在进化中有一定的保守性,在许多种生物基因组内存在,其中包括小鼠和人。至今为止,在小鼠中分离到九个含配对框的Pax基因,按基因发现时序,分别定名为Pax 1至Pax 9。Pax 7是其中的一个成员,它不但含有配对框,还含有八肽结构(Octapeptide)和     

发育中的重要调控基因——Pax9

Pax9是Pax基因家族的一员,广泛地参与脊椎和无脊椎支物胚胎发育过程中众多器官的形成,基因的部分缺失或完全缺陷皆可导致个体众多器官的发育缺陷甚至个体死亡。Pax9是多种组织的标志物,在间充质而非上皮细胞中起重要调控作用。     

盐胁迫下大麦根系多胺代谢与其耐盐性的关系

研究了0～300mmol/LNaCl对大麦(Hordeum-vulgare-L.)幼苗生长速率、根系游离和结合态多胺含量以及多胺生物合成关键酶活性的影响。结果表明,在0～200mmol/L NaCl处理下精氨酸脱羧酶（ADC）、多胺氧化酶(PAO)以及转谷酰胺酶(Tgase)活性明显提高,而在300 mmol/L NaCl处理下活性下降。与之对应,游离腐胺（Put）含量随处理盐浓度的提高一直呈上升趋势,亚精胺(Spd)和在根系内检测到的未知多胺(Pax)在低浓度盐处理时含量上升,随盐浓度的提高含量下降。盐处理前后精胺(Spm)含量变化不明显。低浓度盐处理时游离态（Spd+Pax）/Put上升,随盐浓度的提高比值明显下降。结合态Put、Spd和Pax含量以及结合态多胺总量均在低浓度盐处理时上升,随盐浓度的提高含量明显下降。统计分析显示,大麦相对生长速率与游离态（Spd+Pax）/Put和结合态多胺含量间均呈极显著正相关关系,与游离态多胺和结合态多胺的比值间均呈显著负相关关系,上述结果说明盐胁迫下大麦体内游离态Spd、Pax与Put以及结合态形式之间的平衡与大麦耐盐性关系密切,游离态Put向Spd 、Pax以及结合态形式转化均有利于大麦耐盐性的提高.     

Pax2在肾脏发育和肾疾病中的调控作用

配对盒基因2(Paired box2,Pax2)是肾脏发育中重要的转录因子,在前、中、后肾发育的全过程表达,集中分布在发育的各级小管和间充质成分,具有特定的时空特性。研究表明Pax2与多种调节肾脏发育的因子Gdnf、Ret、SHH、Wnt4及Fgf等相互作用,共同精准诱导生肾索形成,前/中肾管的形成及分化,输尿管芽的发生及分支,肾单位的诱导分化。Pax2的变异导致多种先天性肾脏及输尿管发育畸形,最易发生在肾-视神经盘缺损综合征。在肾细胞癌、Wilms瘤和多种肾小球及肾小管获得性疾病中存在Pax2的异常表达,其诊断和治疗价值将是今后研究的重点。文章主要对Pax2的分子结构、在肾脏发育和肾疾病的表达及调控进行了综述。     

中国地枸叶属小志（大戟科）

本文记载地枸叶属3种,其中云南地枸叶Speranskia yunnanensis S.M.Hwang为新种,将S.pekinensis Pax et Hoffm.归并为S.tuberculata(Bunge)Baill.的异名。     

Pax基因家族在果蝇发育过程中的调控作用

Pax是一个在进化上相当保守的基因家族, 它们编码的产物是一组极为重要的转录调控因子, 并存在于从果蝇到人类的各种生物体中, 参与细胞内信号传导通路的调控, 在胚胎发育过程中对细胞分化、更新、凋亡起重要的调控作用, 影响器官和组织的形成。果蝇中已发现10个Pax基因家族成员, 它们对果蝇胚胎发育及成虫组织器官的分化有非常重要的调控作用。文章结合最新的研究进展, 就果蝇中Pax基因的结构、表达模式和主要功能做一简要综述。     

太子参生物学特性的研究

报道了江苏地道药材太子参Pseudostellaria heterophylla (Miq.)Pax ex Pax et Hoffm的生物学特性,包括形态特征、主要分布区和主产区、生态特性、种子萌发特性、生长发育特性等,为进行太子参的规范化栽培提供科学依据。     

湖南野桐属一新种

本种近似小果野桐M.microc arpus Pax et Hoffm.,区别在于：叶卵形或长圆状卵形,羽状叶脉,基部楔形,下延,两面密被星状绒毛。     

pcDNA3.1-Pax6载体的构建及其对胶质瘤细胞增殖的影响

目的:构建pc DNA3.1-Pax6过表达质粒并观察其对胶质瘤U251细胞增殖的影响。方法:以K562细胞c DNA为模版,采用RT-PCR的方法扩增Pax6基因,将扩增产物酶切回收后与同样酶切回收的真核表达载体pc DNA3.1连接、转化,构建pc DNA3.1-Pax6重组质粒,再经菌落PCR、酶切及测序鉴定重组质粒;利用脂质体lipofectamine 2000转染重组质粒至U251细胞。Real-time PCR检测Pax6 mRNA的表达水平,Western blot检测PAX6蛋白的表达,MTT法检测U251细胞增殖。结果:PCR扩增获得长度为1 131 bp的阳性产物,经pc DNA3.1真核表达载体克隆、酶切鉴定及序列分析后,证实真核表达质粒pc DNA3.1-Pax6构建成功;Real-time PCR结果显示,Pax6过表达后的U251细胞Pax6 mRNA表达水平明显高于正常对照组;Western blot结果显示,PAX6蛋白表达亦明显高于正常对照组,差异具有统计学意义(P0.05);MTT结果显示,与正常对照组细胞比较,转染pc DNA3.1-Pax6组的细胞,细胞增殖能力明显降低,差异亦具有统计学意义(P0.05)。结论:成功构建人Pax6基因的pc DNA3.1-Pax6重组质粒,过表达Pax6基因抑制U251细胞的增殖。     

太子参脱病毒技术研究

采用茎尖分生组织法、热处理结合茎尖法、病毒唑处理结合茎尖法对6个不同产地的太子参[Pseudostellaria heterophylla (Miq.) Pax ex Pax et Hoffm.]组培苗进行了脱病毒研究. 经生物检测、 ELISA法和电镜检测表明, 热处理结合茎尖法脱病毒效果最好,脱毒率高达 100%;病毒唑处理结合茎尖法和茎尖分生组织法脱毒率分别为 79.64%和74.29%.不同产地太子参的脱病毒效果不同.根据实验结果提出了太子参的脱病毒繁育程序,其中复壮培养基中PP333的最适浓度为0.5～1.0 mg·L-1,最适生根培养基为1/2 MS 0.3 mg·L-1 NAA.     

小鼠内耳发育核心转录因子的保守性及调控网络的比较分析

在脊椎动物内耳发育中, Six1、Six4、Pax2、Pax8、Foxi1、Dlx5、Gbx2、Irx2/3、Msx1等基因作为核心调控基因参与听基板的诱导过程。文章通过生物信息学方法, 对小鼠内耳发育的核心转录因子进行保守性分析并研究其相互调控关系, 得到小鼠内耳发育过程中核心转录因子的基因调控网络。与文献中已知的小鼠内耳发育基因调控关系相比, Pax2、Pax8、Foxi1、Dlx5基因在内耳发育中仍然起主要调控者的角色, Six1则处于被多个转录因子调节的地位, Gbx2、Irx2/3、Msx1在调控网络中也起到重要作用。对出现的差异进行了合理的分析, 同时结合构建的调控网络预测了可能存在的Msx1对Six1、Gbx2的调控作用。序列预测结果也发现了一些新的调控关系, 所涉及的转录因子包括Sox5、Lhx2、Rax、Otx1、Otx2、Pitx1、Pitx2、Nkx2-5、Irx4、Irx6、Dlx2、Hmx1/2/3、Pou4f3、Pax4、Tlx2。文章为深入了解内耳发育调控机制提供了基础信息。     

雷州黑鸭胚胎期骨骼肌发育表达与功能分析

为保护雷州黑鸭优异的肉用性能,并开发利用这一珍贵的种质资源,研究选取雷州黑鸭为实验素材,对其胚胎期胸腿肌进行组织切片观察,并采用q RT-PCR与Western blot试验方法检测了Pax3、DCN和MSTN等基因在8、13、18、23和28胚龄胸腿肌中的发育性表达规律。同时用q RT-PCR法检测了雷州黑鸭28胚龄时Pax3、DCN和MSTN基因在各组织中m RNA的差异性表达量。胸腿肌组织切片观察雷州黑鸭胚胎期腿肌的发育明显早于胸肌;荧光定量PCR结果显示,雷州黑鸭Pax3、DCN和MSTN基因在各阶段胸腿肌中的相对表达量在23和28胚龄期最高,显著高于其它胚龄(P0.05);雷州黑鸭28胚龄时各组织中Pax3、DCN和MSTN基因在胸肌和腿肌中的表达显著高于其他组织(P0.05);Western blot结果表明,在胸腿肌中Pax3、DCN和MSTN蛋白的表达量在8胚龄期最低,在23胚龄时表达量显著高于其它胚龄(P0.05),达到高峰。结合切片图对比表达模式的分析表明在肌纤维的形成以及生长发育过程中,Pax3、DCN和MSTN基因对骨骼肌的生理特性起到决定性作用,在雷州黑鸭胚胎期骨骼肌发育过程中的不同阶段调控着早期胚胎中前体肌细胞的分化、增殖、促进肌纤维的形成。     

峨眉山槭属一新种

峨眉槭 新种 图1 Acer emeiense T.Z.Hsu,sp.nov. Acer tienchuanense Fang et Soong in Acta Phytotax.Sin.11(2):187—188(1966)quoad specimen K.H.Yang 54576. (Sect.Trifoliata Pax Ser.Mandshurica Pojark.) Species flores 6-numero,in Acer L.adbuc minus cognita.     

贵州槭属二新种

<正> Acer guizhouense Y. K. Li, sp. nov. (Sect. Integrifolia Pax, Set. Penninervia Metc.) Species affinis A. oligocarpo Fang et L. C. Hu, differt foliis base cuneatis, venulis reticulatis in sicco utrinsecus manifeste elevatis; infruetescentiis paniculatis; etiam a A. foveolato C. Y. Wu, petiolis brevibus 6—8mm longis,