无菌猕猴桃种子采集方法研究

无菌的猕猴桃种子是猕猴桃胚乳培养、实生苗微嫁接等技术的基础材料,利用消毒剂灭菌是常用的无菌种子采集手段,应用最广泛的消毒剂为升汞(mercuric chloride)和次氯酸钠(NaClO)。为了避免使用消毒剂,该研究提出了一种新的无菌猕猴桃种子采集方法——无菌搅拌法,同时为探索其准确性和应用性,比较了0.2%升汞灭菌20 min、10%次氯酸钠灭菌20 min、无菌搅拌法三种方式采集无菌猕猴桃种子的效果,并对种子萌发和幼苗形成的影响进行了研究。结果表明:无菌搅拌法、0.2%升汞灭菌20 min是稳定有效的无菌猕猴桃采集方式,10%次氯酸钠灭菌20 min的采集效果不稳定;在相同的时间内,无菌搅拌法的种子发芽率最高,为89.90%,但发芽势较低,均可正常成苗; 10%次氯酸钠灭菌20 min的发芽率次之,与无菌搅拌法的种子无显著差异,发芽势和成苗率最高,分别为47.47%和67.86%,且有打破猕猴桃种子休眠的作用,整体作用类似于赤霉素(GA_3)浸种的效果; 0.2%升汞灭菌20 min对猕猴桃种子的萌发有抑制作用,各项指标均显著低于无菌搅拌法种子,且生长缓慢。此外,无菌搅拌法是物理处理,对种子、操作人员、环境均无害。这证实了无菌搅拌法的实用性和优势,发现了次氯酸钠在打破猕猴桃种子休眠方面的作用,为其它同类型果实的无菌种子采集提供了参考。     

大别山五针松子叶和下胚轴离体培养成苗

植物名称:大别山五针松(Pinus dabeshanensis) 材料类别:子叶和下胚轴。种子冷水浸种24小时,剥去种壳,经0.1％升汞(8分钟)和70％酒精(0.5分钟)表面灭菌后,用无菌水冲洗5遍,接种到MS培养基上发芽。2周后,根长至0.5～1cm,剥去胚乳,切取子叶和下胚轴培养。培养条件:基本培养基为改良的MS(MS无机成分中NH_4NO_3浓度减低到1/4,KNO_3为1/2;有机成分改为VitB_1 0.4mg/L、甘氨酸2mg/L)和     

枇杷幼叶组织培养与植株再生研究

目的:研究枇杷幼叶灭菌条件及愈伤组织的诱导、胚状体的分化及植株再生.方法:用饱和漂白粉上清液和0.1%升汞对枇杷叶进行不同时间的灭菌处理;将幼叶切成小块,接种在附加6-BA、2,4-D、NAA的培养基上,进行愈伤组织的诱导和植株再生.结果:幼叶的灭菌处理以在饱和漂白粉上清液中浸泡15 min、在0.1%升汞中浸泡4 m...     

桂竹香的愈伤组织诱导和植株再生

1　植物名称　桂竹香 (Ｃｈｅｉｒａｎｔｈｕｓｃｈｅｉｒｉ)。2　材料类别　下胚轴 ,子叶。3　培养条件　桂竹香种子用自来水洗净后 ,以 70 %酒精进行表面消毒 30ｓ,再以 0 .1 %升汞溶液消毒 1 2ｍｉｎ ,然后用无菌水洗 4次。将种子接种在ＭＳ基本培养基上 ,1周后切下子叶和下     

喜树种子萌发和幼苗发育过程中喜树碱含量的变化

在喜树种子萌发过程中 ,胚乳中喜树碱含量始终最高 ,但呈降低趋势 ;种皮中喜树碱含量较低 ,呈波动型上升 ;子叶和胚轴中喜树碱含量变化不明显。种子萌发后 ,随着幼苗的发育 ,子叶中喜树碱含量逐渐升高 ,出现最大值后迅速下降 ,胚轴、根和真叶中喜树碱含量持续降低 ,幼苗发育到一定时间后趋于稳定     

脱水敏感的黄皮种子在发育中的可溶性蛋白变化

黄皮种子的子叶与胚轴,在发育前期蛋白质合成速率均高于后期。在发育过程中子叶的可溶性蛋白含量无明显变化,但在后期能新合成少数低分子量的热不稳定蛋白,可能是引起民种子萌发的水解酶类。胚轴中可溶性蛋白单位干重含量高于子叶,而其成分不随发育而变化。ＡＢＡ可促进发育后期黄皮种了胚轴中２０ｋＤ蛋白的合成,但不能改变种子的脱水敏感性。     

脱水敏感的黄皮种子在发育中的可溶性蛋白变化

黄皮种子的子叶与胚轴,在发育前期蛋白质合成速率均高于后期。在发育过程中子叶的可溶性蛋白含量无明显变化,但在后期能新合成少数低分子量的热不稳定蛋白,可能是引起种子萌发的水解酶类。胚轴中可溶性蛋白单位干重含量高于子叶,而其成分不随发育而变化。ABA可促进发育后期黄皮种子胚轴中20kD蛋白的合成,但不能改变种子的脱水敏感性。     

豌豆种子萌发时的含水量对子叶中蛋白酶和淀粉酶活性的影响

不同含水量的豌豆种子在饱和水蒸气中保持7d,在此过程中,当含水量低于萌动临界含水量时,限制了子叶中淀粉酶长寿mRNA的转译;含水量达到或超过萌动临界含水量时,子叶中淀粉酶长寿mRNA的转译得以进行,但转译程度因含水量不同而异,正常生长的轴器官是吸收子叶中蛋白质和淀粉水解产物的动力库,子叶中氨基酸含量的变化灵敏地调节着蛋白酶的活性,从而影响着蛋白质的动员程度,当环境中供水不足时,发现子叶中还原糖积累很快,非还原糖含量几乎没有变化,因此,认为对淀粉酶活性起灵敏调节作用的主要是还原糖。     

大豆幼苗期间不同器官中的葫芦巴碱含量变化

用高效液相色谱法测定大豆幼苗各器官中葫芦巴碱含量的结果表明：子叶期的子叶中葫芦巴碱含量高于根;对生真叶期间,葫芦巴碱含量大小依序为,真叶〉子叶〉根;三出复叶期间,葫芦巴碱含量大小依序为,三出复叶〉真叶〉子叶〉茎和根。     

不同浓度6-BA及KT对马铃薯无菌苗诱导的影响

以‘高原7 号’马铃薯茎尖为外植体,用0.1%升汞和75%酒精消毒,经组织培养获得脱毒马铃薯茎段,在增殖培养中,研究不同浓度6-BA 及KT 对马铃薯茎段诱导增殖效果的影响。结果表明：用0.1%升汞对茎尖消毒8 min 效果最好,灭菌率达96.67%。细胞分裂素对马铃薯茎段增殖的促进作用为6-BA>KT,以1.5 mg/L 6-BA 诱导不定芽及其生长势效果最佳。     

红掌组培苗继代过程中细菌污染的防治试验

针对红掌组织培养过程中易出现细菌污染的问题,进行多种抗菌素处理及二次升汞灭菌处理对细菌污染的防治比较试验。结果表明,用300mg/L青霉素+180mg/L链霉素溶液注射到培养基表面,能有效控制细菌污染,且对组培苗生长影响最小。     

红锥不同外植体消毒技术初探

以红锥种子、茎段为材料,进行外植体消毒试验。结果表明,种子灭菌的条件:75%酒精5~15min+0.1%HgCl230~40min(不剥壳去皮),75%酒精1min+0.1%HgC220min(剥壳去皮),这2种处理污染率均较低,种子发芽率相差不大;茎段用0.1%升汞+20%次氯酸钠组合消毒效果最好,在0.1%升汞+20%次氯酸钠组合消毒时间为8min+5min时污染率最低,平均仅为28.89%。     

兔眼越桔幼苗胚轴、子叶诱导再生植株

植物名称:兔眼越桔(Vaccinium ashei)材料类别:无菌苗胚轴、子叶。无菌苗培养:种子用70％酒精浸泡1分钟后,转移到10％的漂白精片过滤液中灭菌15分钟,再用无菌水冲洗三次,接种于0.5％琼脂上,培养温度为25～28℃,光强为2,000lx,每日光照16小时。培养3～4周后幼苗高约2～3cm,子叶绿色。于无菌条件下取子叶、胚轴(5～7mm)作为外植体进行诱导培养。     

红锥不同外植体消毒技术初探

以红锥种子、茎段为材料,进行外植体消毒试验。结果表明,种子灭菌的条件:75%酒精5~15min+0.1%HgCl230~40min(不剥壳去皮),75%酒精1min+0.1%HgC220min(剥壳去皮),这2种处理污染率均较低,种子发芽率相差不大;茎段用0.1%升汞+20%次氯酸钠组合消毒效果最好,在0.1%升汞+20%次氯酸钠组合消毒时间为8min+5min时污染率最低,平均仅为28.89%。     

离体发育和萌发中花生种子不同部份内源ABA含量的变化

离体发育和萌发中花生种子不同部份的内源ＡＢＡ含量变化存在明显的差异．种皮和子叶内存在ＡＢＡ的Ｃ（４０）生物合成途径,胚轴内恻为Ｃ（１５）生物合成途径．种子内源ＡＢＡ含量变化和种子活力有密切关系．     

西兰花种子及其愈伤组织中萝卜硫素含量比较

采用高效液相色谱法对西兰花种子及其不同器官诱导的愈伤组织中萝卜硫素的含量进行比较。结果表明供试的9个品种的种子中萝卜硫素含量差异显著,"玉皇"含量最高,达942.758μg/g;"中青9号"含量最低,为172.808μg/g。不同器官诱导的愈伤组织中萝卜硫素平均含量子叶>胚轴>胚根,种子中的平均含量分别为各器官获得愈伤组织平均含量的1.45、2.37和2.92倍。     

小金海棠子叶培养和植株再生

植物名称:小金海棠(molus xiaojinensis)材料类别:小金海棠的种子,用冷水浸泡吸胀,经0.1％升汞消毒15分钟后,无菌水冲洗干净,接种子琼脂培养基上,2～3周后发芽(发芽率只有20～30％左右),然后切取子叶进行离体培养。培养条件:每升MS基本培养基,附加6-BAI～2mg/L(单位下同),NAA0.1～0.2,LH100,肌醇100,蔗糖3％,琼脂粉0.5％,培养温度26±2℃,每天光照8～10小时,光照强度2000 lx。生长与分化情况:子叶接种子培养基上4～5周后,子叶长大变厚呈绿色,近轴面诱导出绿色芽点,逐渐分化成丛生芽,每片子叶可得3～10个绿色     

辽东栎幼苗生长对种子大小和子叶去除处理的响应

该文在温室内盆播条件下,设置不去除子叶(对照)、去除1/4子叶(轻度子叶去除)、1/2子叶(中度子叶去除)和3/4子叶(重度子叶去除) 4个处理,研究了种子大小和子叶去除处理对辽东栎幼苗生长及其形态学可塑性的影响。结果表明:(1)大种子幼苗株高、基茎、叶片数、单株叶面积、总干质量和根冠比在所有处理均大于小种子幼苗,除株高外,上述其他参数在轻度子叶去除处理的不同大小种子幼苗间均差异显著(P0.05),前者总干质量在中度子叶去除处理与后者差异也显著(P0.05)。大种子幼苗比叶面积和比根长在各处理均大于小种子幼苗,比枝长则相反。(2)随着子叶去除强度增大,大、小种子幼苗株高、基茎、叶片数、单株叶面积和总干质量等均呈减小趋势,株高、基径、叶片数和单株叶面积在重度子叶去除处理均显著小于对照和轻度子叶去除处理;小种子幼苗对子叶损失反应更为敏感,其株高、叶片数、单株叶面积和总干质量在中度子叶去除处理也显著小于对照(P0.05);小种子幼苗根冠比随子叶去除强度增大而增大,在中度和重度子叶去除处理显著大于对照和轻度子叶去除处理(P0.05)。(3)随着子叶去除强度增大,大小种子幼苗的比叶面积和比根长均逐渐增大,但大种子幼苗比枝长持续减小,轻度子叶去除处理的小种子幼苗比枝长最大。     

鞘蕊花的组织培养

植物名称鞘蕊花(Coleus forskohlii)。材料类别:顶芽、侧芽。培养条件:取鞘蕊花幼嫩的顶芽和侧芽,经自来水冲洗后去叶,用0.1％的升汞灭菌5min,再用无菌水冲洗数次后切成0.5～1.0cm长的带芽茎段,接入诱导培养基上。基本培养基为MS并附加不同浓度的BA,NAA和GA_3(单位mg/L);培养     

低温处理对水稻幼穗愈伤组织再生植株的影响

植物名称:粳稻(Oryza sativa var.japonica)品种牡交17和秋光。材料类别:水稻幼穗分化到第4,5期(幼穗长0.5～1.0cm),将幼穗连同叶鞘同时剪下,95％酒精消毒1分钟,用饱和的漂白粉上清液浸泡15～20分钟,再用0.1％的升汞液灭菌15分钟,最后用无菌水冲洗3～4次,在无菌条件下剥去叶鞘,剪取2～