华东四省天目臭蛙分类修订及分布格局

运用形态学比较和12S mt DNA序列比对,对华东4省原记载的花臭蛙Odorrana schmackeri地理种群与天目臭蛙O.tianmuii、黄岗臭蛙O.huanggangensis及花臭蛙模式产地湖北宜昌种群进行比较研究。浙江、安徽、江苏、江西(三清山)花臭蛙形态学特征与天目臭蛙相吻合。基于Kimura 2-parameter模型计算花臭蛙各地理种群与天目臭蛙、黄岗臭蛙及花臭蛙湖北宜昌种群的遗传距离,结果显示,浙江、安徽、江苏、江西(三清山、彭泽)花臭蛙与湖北宜昌种群的遗传距离为0.067~0.069,与黄岗臭蛙的遗传距离为0.027~0.029,与天目臭蛙的遗传距离仅为0~0.001。因此,长江中下游以南、江南丘陵东段安徽南部、江苏、浙江、江西东北部信江以北、鄱阳湖以东的低山丘陵地带,原记录的花臭蛙应修订为天目臭蛙;江西省东北部信江以南的武夷山区为黄岗臭蛙分布范围,花臭蛙则分布于赣江鄱阳湖以西的赣西山地。赣江以东、抚河以西以及闽东丘陵地区花臭蛙的分类归属尚待确定,华东地区花臭蛙复合体的物种分化是否与水系造成的地理阻隔相关,有待深入研究。     

福建省花臭蛙复合体组成及 天目臭蛙分布新记录记述

由于没有明显的地理阻隔,闽浙丘陵地带花臭蛙复合体（Odorrana schmackeri species complex）的物种组成、分布界限、分布格局存在争议。2016年9月至10月对闽浙交界地带福建省宁德市屏南县和南平市浦城县进行野外考察、样本收集,通过扩增样本线粒体12S rRNA和16S rRNA基因并与黄岗臭蛙（O. huanggangensis）、天目臭蛙（O. tianmuii）和花臭蛙（O. schmackeri）的序列进行比对,构建系统发生关系、计算遗传距离,结合形态学鉴定和形态量度分析,对福建省花臭蛙复合体组成进行了研究。结果显示,福建省花臭蛙复合体包括黄岗臭蛙和天目臭蛙,其中黄岗臭蛙分布于武夷山山区、闽江和九龙江流域,天目臭蛙仅分布于衢江（钱塘江主要支流）的次源地——浦城县管厝乡东北部,为福建省臭蛙类分布新记录种。本研究增添了福建省两栖动物多样性并细化了黄岗臭蛙和天目臭蛙在该省分布范围的认识,但是浦城县西北端长江流域的花臭蛙复合体的物种组成仍需进一步确认。水系和流域是否影响花臭蛙复合体物种分化和分布格局以及这些近缘物种的物种形成机制有待进一步研究。     

我国臭蛙属(两栖纲:蛙科)的系统发育

为探讨臭蛙属的种间亲缘关系与其起源和分化,采用PAUP3．1软件对我国的16种臭蛙的29项分类性状进行系统发育关系的研究。结果表明,臭蛙属物种形成1个单系群,可以划分为4个种组;表明了臭蛙属中国物种间的亲缘关系;无指盘臭蛙和云南臭蛙是本属中最原始的物种,鸭嘴臭蛙等是较特化的物种;原始臭蛙可能起源于横断山区和云南西部高原,贵州高原可能是臭蛙的分化中心;各种组内相近种的地理替代呈南北方向更替,而种组间则呈东西方向更替;原始物种多分布于中国西南部,较进化或特化物种多分布于中国东部和东南部及海岛上;其种组亲缘关系与地理分布格局显示出一致性。     

重庆市发现宜章臭蛙

2014年7~8月在重庆市南川区三泉镇采集到5号臭蛙类标本,经形态特征比较和DNA数据比对及遗传距离分析,鉴定为宜章臭蛙(Odorrana yizhangensis),属重庆市新纪录。重庆南川的宜章臭蛙与模式产地标本相比,指关节下瘤雌蛙较雄蛙明显;有外掌突;趾关节下瘤明显,趾间全蹼;后肢前伸贴体时胫跗关节超过吻端。重庆南川区与湖南宜章经度和纬度相距均约5°,为宜章臭蛙已知分布的最西点。宜章臭蛙的形态和遗传分化及分布格局,是否由于我国滇西高山峡谷地区、粤桂湘赣南岭山地和湘渝鄂边境地区特殊地理效应及第四纪冰期气候的反复变化造成的,值得进一步探讨。     

重庆彭水发现务川臭蛙

2022年7月,在重庆市彭水苗族土家族自治县新田镇调查到2只臭蛙,经比较形态特征确认为臭蛙属（Odorrana）物种。基于线粒体16S rRNA基因片段构建的臭蛙属部分物种的贝叶斯和最大似然系统发育树显示,这2只臭蛙和模式产地贵州省务川仡佬族苗族自治县的务川臭蛙（O. wuchuanensis）聚为一支,具有较高的支持率,贝叶斯后验概率为0.99、最大似然超快速引导支持（2 000次重复）自展值为95%。综合形态特征和系统发育分析,确认此2只臭蛙为务川臭蛙,系重庆市首次记录。务川臭蛙分布范围较为狭窄,此前仅记录于贵州省务川县、沿河土家族自治县、荔波县以及湖北省建始县和广西壮族自治区环江毛南族自治县。务川臭蛙在重庆彭水的发现,确认了该物种在武陵山和大娄山脉重庆段的分布。彭水发现的务川臭蛙1雄1雌,雄性体长81.3 mm,大于模式标本的最大体长,大于湖北建始县种群雄蛙体长;雌性体长87.1 mm,在模式标本的体长范围内,小于建始县种群雌蛙体长。线粒体16S rRNA基因的遗传分化分析显示,重庆市彭水苗族土家族自治县的务川臭蛙样本和模式产地的样本没有遗传分化,遗传距离为0。务川臭蛙在重庆市的...     

务川臭蛙皮肤及指趾组织学特征

务川臭蛙仅分布于贵州省务川县溶洞内,属极危物种.以牛蛙为对照,通过形态解剖学和组织学方法对务川臭蛙的皮肤和吸盘结构进行研究,结果显示,务川臭蛙头部背侧、后肢背侧以及躯干腹侧皮肤总厚度分别为372.50 μm±29.7 μm、453.25 μm ± 13.9 μm及237.92 μm±31.8 μm,各部分皮肤真皮层所占比例分别为(88.86±1.41)％、(90.65 ±0.81)％和(86.59±1.77)％,其中分布着大量的颗粒腺和粘液腺;前后肢每个指(趾)末端的吸盘,腹面有明显的柱状凸起表皮结构,其间有小孔和粘液腺,是务川臭蛙在溶洞壁上攀爬捕食的结构基础.务川臭蛙具有的特殊生理结构,是珍贵的遗传资源,应当加强科学保护.     

皖南凹耳臭蛙地理分布格局与生境选择

凹耳臭蛙(Odorrana tormota)是一种小型山溪蛙类,由于叫声独特,种内具有超声通讯功能而引起国内外相关专家的广泛关注。首次针对皖南凹耳臭蛙地理分布、生境选择以及人为干扰强度对种群密度的影响进行了研究。共调查了9县1区32条不同的山溪,发现其中的16个有凹耳臭蛙分布,除黄山区的香溪和浮溪具文献记录外,其余14个分布点均为首次报道。基于现存凹耳臭蛙分布点的水系关系,推测该物种在皖南的分布呈现出以青弋江、新安江和水阳江三大水系为纽带、间断分布的格局。对其中10个分布点222只凹耳臭蛙生境选择的统计结果表明,在夜晚活动周期内,该物种对乔木、灌木丛、草本植物、岩石、沙滩和倒伏朽木等不同生境的选择具有显著差异(F5,54=25.75,P0.001),栖息在草本植物和灌丛中蛙的数量明显多于栖息在其它几种生境类型中的蛙类。暗示溪流沿岸的草本植物和灌丛对该物种的生存和繁衍具有重要意义,乔木对其非活动周期的隐蔽可能具有不可替代的作用。根据人类活动对其栖息地破坏程度,将人为干扰程度划分为强、中和弱3种不同强度,对不同干扰强度下种群相对密度进行单因素方差分析。结果表明,中等干扰强度下的种群密度显著高于其它两种强度下的种群密度(F2,13=8.155,P=0.005)。推测适度的人为干扰可能增加了栖息地内昆虫的种类和数量,对蛙类的生存和繁衍更为有利。但随着人为干扰强度的增强,对溪流沿岸植被的破坏更为剧烈,种群密度显著下降。     

陕西镇坪发现光雾臭蛙

2022年6月在陕西省安康市镇坪县化龙山自然保护区(32°00′01″ N,109°17′05″ E,海拔1 641 m)采集到1号无尾两栖类标本,经形态特征比较确认为臭蛙属(Odorrana)物种,基于线粒体16S rRNA分子片段对臭蛙属35个物种的系统发育进行分析,其与模式产地四川南江的光雾臭蛙(O. kuangwuensis)在最大似然系统发育树中聚为一支,支持率高达99%,且遗传分化较小,应属种内关系。综合形态特征比较和系统发育分析,确定采集到的标本为无尾目(Anura)蛙科(Ranidae)臭蛙属的光雾臭蛙,系陕西省两栖动物分布新记录种,此发现为光雾臭蛙在大巴山脉分布的连续性提供了一定依据。     

中国四川省蛙科一新种——南江臭蛙(两栖纲:无尾目)

对分布于四川、重庆市、贵州、湖北、湖南、安徽和福建的花臭蛙[Odorrana(Odorrana)schmackeri(Boettger,1892)]标本进行了形态比较,结果发现四川省南江和万源县的花臭蛙标本与其他产地的花臭蛙标本在形态特征上存在明显区别,主要是:1)成体雄雌体长之比值较小,约为1∶1.34;2)犁骨齿列短,两内侧间距宽,距内鼻孔远;3)背面深色斑点周围无浅色边缘;4)股后部深色斑大而稀疏;5)趾间蹼较弱,第四趾蹼达远端关节下瘤;6)腹内成熟卵的动植物极均为乳白色。故将四川省南江和万源的标本订为新种--南江臭蛙[Odorrana(Odorrana)nanjiangensis,sp.nov.]。     

湖南桑植天平山发现宜章臭蛙及该物种的遗传分化分析

2012年和2013年在湖南省桑植县天平山采集到6号臭蛙类标本,经形态比较和分子系统学分析,鉴定为宜章臭蛙（Odorrana yizhangensis）,表明天平山为该物种的新分布点。这些标本与宜章臭蛙的主要鉴别特征相符：体型较小;体背面棕色斑大而密,形状不规则;腹面褐色,其上斑纹稀少;股后部色浅,深色斑明显。雄性头体长（52.45 ± 2.54）mm（48.96 ~ 54.92 mm,n = 3）,雌性头体长（73.11 ± 1.43）mm（71.26 ~ 74.74 mm,n = 3）,均比模式标本群体的头体长略大。基于线粒体16S rRNA基因片段（502 bp）的系统关系分析结果表明,分析的天平山臭蛙标本与宜章臭蛙已知种群聚为一支系,天平山种群与宜章臭蛙已知种群间的遗传距离为0.002 0 ~ 0.008 1,远小于宜章臭蛙与其近缘种龙胜臭蛙（O. lungshengensis）之间的遗传距离（0.035 2 ~ 0.043 9）;这表明采自天平山的臭蛙样本属于宜章臭蛙。本文为宜章臭蛙物种的地理分布与系统学提供了新的信息。     

Auditory response characteristics of the piebald odorous frog and their implications

The piebald odorous frog (Odorrana schmackeri), the large odorous frog (Odorrana livida) and the concave-eared torrent frog (Amolops tormotus) are sympatric species living near the same torrent streams in the vicinity of Mt. Huangshan, China. A recent study demonstrated that A. tormotus can use sound signals involving ultrasonic components for communication in a noisy environment, and another sympatric species, O. livida, can also perceive ultrasonic sound. Here we report data on the hearing range of O. schmackeri by studying auditory evoked potentials and single-unit data from the torus semicircularis. This frog exhibits its two most sensitive peaks at 2 kHz and 3.5–4.0 kHz with thresholds <42 dB SPL, with an upper frequency limit of hearing at 8.5 kHz with threshold of 87 dB SPL. The upper limit is much lower than those of O. livida and A. tormotus, at 22 and 34 kHz, respectively. It suggests that sympatric species may respond differently to similar environmental selection pressures sculpting auditory communication systems.     

Bradykinins and their cDNA from piebald odorous frog,Odorrana schmackeri,skin

Bradykinin, (des-Arg(9))-bradykinin and bradykinyl-VAPAS, were identified in the skin secretion of the piebald odorous frog, Odorrana schmackeri. Using 3'- and 5'-RACE reactions, bradykinin precursor cDNA was cloned and found to contain an open-reading frame of 311 amino acid residues. The preprobradykinin was found to consist of a putative signal peptide of approximately 20 amino acid residues, followed by seven tandem repeat coding domains of 43-44 amino acids. Bradykinin and its C-terminal extended molecular form were encoded on this single precursor and could be generated by differential post-translational processing.     

寒露林蛙的核型和Ag-NORs研究

采用常规骨髓细胞制片法对产于湖南省双牌县的寒露林蛙的核型及NORs位点进行了观察和分析.结果表明寒露林蛙与分布于我国南方的其他林蛙相同:2n=26,NF=52,为5+8核型模式.寒露林蛙核型为14M+10SM+2ST,无次溢痕,NORs位于第11对染色体长臂的中部.通过比较分析我国2n=26的6种林蛙的核型等细胞遗传学信息,本文结果支持形态分类和分子系统发生的研究结论,认为寒露林蛙是一有效种.     

湖北省两栖类一新纪录——大绿臭蛙

2009年8～9月及2010年7月,在湖北省宜昌市高家堰镇采集两栖类标本,其中,部分臭蛙标本被鉴定为大绿臭蛙(Odorrana graminea),属湖北省新纪录。要确定中国大绿臭蛙各居群的关系、澄清其分类问题,有必要进行适度的资源考察和深入的系统地理学研究。     

Novel brevinins from Chinese piebald odorous frog (Huia schmackeri) skin deduced from cloned biosynthetic precursors

Antimicrobial peptides represent the most characterized and diverse class of peptides within the defensive skin secretions of anuran amphibians. With an ever expanding database of primary structures, the current accepted rules for nomenclature have become increasingly difficult to apply to peptides whose primary structural attributes are either unique or that fall between those that define existing groups. An additional factor that adds to the confusion is the regular re-classification or revision of existing taxa. In the present study, we have identified five new antimicrobial peptide homologs in the defensive skin secretion of the Chinese piebald odorous frog, Huia schmackeri (formerly Rana (Odorrana) schmackeri), by cloning of their respective biosynthetic precursors. As these peptides are obvious homologs of the brevinin-1 and brevinin-2 families we have named these in accordance: (1) brevinin-1HS1, (2) brevinin-2HS1, (3) brevinin-2HS2, (4) brevinin-2HS3 and (5) brevinin-1HS2. The reasons for adopting these names are discussed. It is clear that with an ever-increasing number of amphibian skin antimicrobial peptides appearing in the literature that a consistent nomenclature scheme needs to be established.     

Novel antimicrobial peptides isolated from the skin secretions of Hainan odorous frog, Odorrana hainanensis

Long time geographical isolation of Hainan Island from the China continent has resulted in appearance of many novel frog species. As one of them, Hainan odorous frog, Odorrana hainanensis possesses some special antimicrobial peptides distinct from those found in other Odorrana. In this study, three antimicrobial peptides have been purified and characterized from the skin secretion of O. hainanensis. With the similarity to the temporin family, two peptides are characterized by amidated C-terminals, so they are named as temporin-HN1 (AILTTLANWARKFL-NH₂) and temporin-HN2 (NILNTIINLAKKIL-NH₂). The third antimicrobial peptide belongs to the brevinin-1 family which is widely distributed in Eurasian ranids, and thus, it is named as brevinin-1HN1 (FLPLIASLAANFVPKIFCKITKKC). Furthermore, after sequencing 68 clones, eight cDNAs encoding antimicrobial peptide precursors were cloned from the skin-derived cDNA library of O. hainanensis. These eight cDNAs can encode seven mature antimicrobial peptides including the above three, as well as brevinin-1V, brevinin-2HS2, odorranain-A6, and odorranain-B1. Twelve different species of microorganisms were chosen, including Gram-positive, Gram-negative and fungi, to test the antimicrobial activities of temporin-HN1, temporin-HN2, brevinin-1HN1, brevinin-1V, and brevinin-2HS2. The result shows that, in addition to their activities against Gram-positive bacteria, temporin-HN1 and temporin-HN2 also possess activities against some Gram-negative bacteria and fungi. However, the two antimicrobial peptides, brevinin-1HN1 and brevinin-1V of the brevinin-1 family have stronger antimicrobial activities than temporin-HN1 and temporin-HN2 of the temporin family. Brevinin-1HN1 possesses activity against Staphylococcus aureus (ATCC25923), Rhodococcus rhodochrous X15, and Slime mould 090223 at the concentration of 1.2 μM.     

湖南珍稀特有植物喜雨草的重新发现及补充描述

喜雨草,湖南珍稀特有植物,属唇形科单型属喜雨草属,自1918年8月韩马迪在湖南西南部武冈云山采到模式标本,并于1936年作为一个新属、新种发表后,其踪迹消失全无。该次报道为喜雨草被发现近100年后,在湖南宁远、通道、道县、新宁被重新发现。根据采集的标本和拍摄的照片,更正修改和补充了原形态描述,重新确定了该种花萼为3/2式,花冠颜色为白色。