正常猕猴与人视网膜血管的比较

目的比较正常猕猴与人视网膜血管的异同,为进一步利用猕猴建立动物模型来研究视网膜血管打下基础。方法取健康成年猕猴眼球6只和人角膜移植供体剩余眼杯8只的视网膜,用ADP酶法进行血管染色,对两者视网膜血管的走行、血管分级、毛细血管分层以及黄斑区血管拱环等进行比较,测量结果进行统计学检验。结果猕猴与人的视网膜铺片经ADP酶法染色后见视网膜血管自穿出视盘后的一级血管逐渐分支变细,直至五级血管即毛细血管;在视盘旁、赤道部、周边部两者血管面积百分比没有差异;视盘旁血管分为多层,赤道部有两层,且深浅层间相互交通,周边部仅见一层毛细血管且较稀疏;两者黄斑区毛细血管均较密集,有形态完整呈不规则状的血管拱环,血管面积百分比以及血管拱环的面积、周长和直径没有差异。结论猕猴与人在视网膜血管走行、分级、毛细血管分层以及黄斑区血管拱环等多方面有良好的相似性,可用作人类视网膜血管、尤其是黄斑区视网膜血管研究的良好动物模型。     

正常有色素家兔眼的视网膜功能研究

目的通过分析正常有色素家兔的mfERG的特征,了解其视网膜的功能特性。方法对9只兔18眼正常有色素家兔同时检测mfERG,并与正常成人的18只眼的检测结果对照分析。结果正常有色素家兔mfERG的P1波振幅密度三维地形图特点,可见黄斑区高峰,但较人黄斑区高峰为低,其他部分呈颞侧高鼻侧低的斜坡状,象限野mfERG颞侧半可见P1波振幅密度、P1波振幅、N1波振幅比鼻侧增高;也高于正常成人眼的颞侧值。五个环形野mfERG,P1波振幅密度,第1环最大,由1环到5环依次递减,P1和N1波振幅以4环和5环最大;与人相比环1的P1波振幅密度和振幅降低,环4和环5增高。结论兔眼颞侧视网膜功能高于鼻侧。兔眼视网膜存在类人黄斑区,但其黄斑中心视功能不如人眼,中心外视功能高于人眼。     

Beagle狗的视网膜电图

视网膜电图是视网膜对光刺激的综合电反应,是目前眼科临床评价视网膜早期功能障碍具有代表性的电生理指标,它主要由 a、b 两个波组成。本文观察了21只清醒 Beagle 狗眼睛的正常ERG 波形,在暗适应条件下,38只眼 a,b 波的峰时值分别为11.3±1.3毫秒和33.7±1.7毫秒,振幅为74.5±32.5微伏和159.5±48.2微伏。左右眼间未见明显差别。     

糖尿病性视网膜病变早期mfERG的研究

目的:探讨糖尿病患者糖尿病性视网膜病变早期多焦视网膜电图(multifocal electroretinogram,mfERG)的特点。方法:应用德国ROLAND公司RETIscan系统对24例40眼糖尿病患者,同时对27例40眼正常对照眼记录mfERG。按机器的默认值一阶反应进行记录。整个记录过程中可以分为12个时段,每个时段记录为时间47秒。结果:mERG测得的糖尿病患者组1～5环所在位置的P1波的振幅密度随离心度的增加而降低,P1波和N1波幅值降低和潜伏时延迟。各象限的P1、N1波振幅密度、波幅值降低,潜伏时延迟。结论:糖尿病性视网膜病变受累的区域多发生在黄斑部,功能上的改变早于形态学的变化;病变的早期功能改变最先出现于视网膜的后极偏颞上方;糖尿病患者在未出现眼底改变时各个象限视网膜的外层已经严重受累。     

眼科常用实验动物视网膜血管的比较

目的比较眼科常用实验动物视网膜血管尤其是视网膜毛细血管的情况,为实验时正确选择动物模型提供基础。方法取猕猴、家猪、新西兰大白兔、犬、猫、SD大鼠、C57小鼠以及豚鼠的正常眼球数个,完整剥离整个视网膜,用ADPase法进行血管染色,对视网膜血管进行形态学的比较。结果猕猴视网膜大血管从视盘穿出,分成四支分别供应视网膜四个象限,每条血管逐级分支最后成为毛细血管,其毛细血管呈网状分布,在赤道处分成两层,至周边变成一层,且有发育良好的黄斑区毛细血管拱环结构。家猪视网膜大血管由视盘发出后放射状走行,毛细血管也呈网状分布,无黄斑拱环结构。兔仅视盘两侧部分视网膜可见血管,毛细血管网状不明显。犬的视网膜血管也放射状走行,但迂曲明显,毛细血管不成网状。猫、大鼠、小鼠的视网膜大血管均由视盘发出,猫的分成上、鼻下、颞下三支,大鼠、小鼠的各方向均有,区域性不明显,三者的毛细血管网均发育良好,至周边部仍很密集,呈两层分布。豚鼠视网膜无可见的血管。结论用于研究人视网膜血管尤其是毛细血管时,可选用猕猴、家猪、猫、大鼠和小鼠作为动物模型;但要研究人黄斑区血管时,仅可选用猕猴等灵长类动物。     

多能成体祖细胞培养条件促进人脂肪干细胞的视网膜神经保护功能

目的：检测多能成体祖细胞（MAPC）的培养条件对猴骨髓间充质细胞（BMMSCs）和人脂肪干细胞（hADSCs）生长的影响,旨在获得更适合治疗视网膜变性疾病的供体细胞。方法通过细胞形态观察、MTT实验、克隆形成率、PCR检测、以及成脂、成骨、成软骨分化潜能检测等,研究MAPC培养条件下猴BMMSCs和hADSCs的特征,并用DMEM/LG和MAPC培养条件培养的hADSCs进行RCS大鼠视网膜下腔移植,通过视网膜电图（ERG）和TUNEL检测,判断细胞移植治疗对视功能及视网膜细胞凋亡的影响。结果与常规培养基相比,MAPC培养条件能促进猴BMMSCs增殖,细胞变小,但传2代后,细胞变得宽大扁平,出现衰老征象;然而,MAPC培养条件下的hADSCs细胞增殖能力及克隆形成率均增强,形成的克隆较大可稳定传10代以上,且具有成脂、成骨、成软骨的多向分化潜能,细胞表面标记物及细胞因子出现差异表达：CD140b、CD90、CD47、HGF和PEDF显著上调,CD73、CD105和IL-6显著下调。与对照组相比,移植DMEM/LG和MAPC培养条件培养的hADSCs（P4）3周后,RCS大鼠的B波波幅明显升高,外核层细胞凋亡明显减少。结论 MAPC培养条件培养的hADSCs显示出更好的视网膜神经保护作用,适合用于治疗视网膜退行性疾病。     

兔眼孔源性视网膜脱离手术复位后视功能以及超微结构的变化

目的对比研究兔眼视网膜脱离后选择不同时期手术复位视功能的变化情况,为临床手术时机的选择及预测术后视功能的恢复情况提供理论与实验依据。方法利用家兔制备孔源性视网膜脱离模型,成模后1 d、7 d1、4 d时经手术达解剖复位,采用多焦视网膜电流图检测复位后视网膜的功能,数据处理应用SPSS软件。制备组织病理学切片。结果多焦视网膜电流图显示1 d、7 d、14 d的RRD手术复位后P1波平均象限反应密度(QAP1,nV/deg2),P1波幅值(AP1,μV),N1波幅值(AN1,μV),P1波潜伏期(TP1,ms),N1波潜伏期(TN1,ms)各项数值差异有显著性(P<0.05)。光镜电镜显示视网膜脱离复位后组织病理学改变。结论视网膜脱离手术复位后视网膜细胞功能的恢复与脱离时间有明显的负相关性;多焦视网膜电流图对于局部视网膜功能的评价有重要意义;组织病理学研究提供了解释视功能变化的重要依据。     

玻璃体腔联合注射赖氨酸－纤溶酶原和瑞替普酶诱导兔眼玻璃体后脱离的有效性

目的:探讨兔眼玻璃体腔联合注射赖氨酸-纤溶酶原和瑞替普酶诱导玻璃体后脱离(PVD)的有效性。方法:选取30只健康的新西兰白兔,以白兔右眼作为实验眼,左眼作为对照眼。随机分为A、B、C三组(每组10只),三组实验眼分别联合应用1万U瑞替普酶+125μg赖氨酸—纤溶酶原、2万U瑞替普酶+125μg赖氨酸—纤溶酶原、3万U瑞替普酶+125μg赖氨酸—纤溶酶原进行玻璃体腔内注射,对照眼均注射平衡盐溶液。应用视网膜电图、扫描电镜及光镜观察、比较各组诱导PVD的效果。结果:三组实验眼均形成不同程度PVD。A组实验眼注药前与注药后24 h、注药后2周的最大混合反应a波振幅、b波振幅比较均无明显差异(P0.05);B组实验眼注药后24 h的a波振幅、b波振幅均有轻度下降,2周后均恢复正常,注药前后的a波振幅、b波振幅比较均无明显差异(P0.05)。C组实验眼注药后24 h的a波振幅、b波振幅均明显低于注药前和对照眼,注药后2周的b波振幅均明显低于注药前和对照眼(P0.05)。光学组织切片观察显示:A组实验眼及所有对照眼、B组实验眼、C组实验眼的视网膜组织细胞形态正常,结构清晰,但B组神经节内核层、细胞层细胞略有减少,C组神经节内核层及细胞层细胞明显减少。结论:玻璃体腔内联合注射赖氨酸-纤溶酶原和瑞替普酶能有效诱导PVD,1万U瑞替普酶+125μg赖氨酸-纤溶酶原可诱导实现完全性PVD,不会对视功能、视网膜结构造成损害。     

暗视条件下鲫鱼视网膜电图的单变量分析

本工作研究了暗视条件下鲫鱼视网膜电图(ERG)的特性。ERG 波形没有波长特异性。不同波长的 b 波振幅-强度曲线平行性良好。b 波不同时相(上升相、峰值、下降相)的光谱敏感性甚为一致。进而,对颜色混合刺激的 b 波幅值与基于单变量原理所作的预测几乎完全一致。基于这些结果,我们的结论是:在暗视条件下,鲤属鱼 ERG b 波仅反映了杆细胞系统的活动,并非象有些研究所认为的也有明视系统的贡献。     

大鼠视网膜变性相关组织形态及功能研究

目的　探讨视网膜变性RCS (RoyalCollegeSurgeon)大鼠的视网膜形态及功能特点。 方法　应用HE染色、免疫组化染色和眼电生理技术 ,对比研究正常和变性两组大鼠视网膜特点。结果　 1 RCS大鼠在 3月龄时 ,视网膜外核层和感光细胞内外节完全消失 ;突触素免疫组化染色显示外丛状层不着色 ;视紫红质免疫组化染色显示原视网膜外层部位有阳性反应 ;胶质纤维酸性蛋白染色显示原视网膜外层部位有强阳性反应。 2 RCS大鼠的闪光视网膜电图 (flashelectronicretinogram ,FERG)a、b波振幅较正常Wistar大鼠明显降低 (P <0 0 1)。结论　在形态和功能上 ,3月龄RCS大鼠视网膜与人类晚期视网膜色素变性极为相似 ,因此可用于视网膜联合移植研究。     

急性眼高压后大鼠视网膜GLT-1的表达变化

目的:检测急性眼高压后大鼠视网膜GLT-1的表达变化。方法:成年大鼠左眼眼压升高至闪光视网膜电图b波消失的临界眼压且维持缺血60min。实验动物分别存活1、3、7或14d后通过免疫组织化学检测大鼠视网膜GLT-1的表达变化,尼氏染色检测节细胞的变化。结果:急性眼高压后视网膜随着再灌时间的延长,内层视网膜厚度逐渐变薄,节细胞层细胞数目进行性下降。GLT-1阳性产物主要表达于OPL和IPL。急性HIOP后再灌1天时,与正常组相比,此时GLT-1表达增加(P＜0．05)。再灌3天时, GLT-1表达量继续增加。第7天时GLT-1表达开始下调,至14天时,GLT-1表达明显低于3天组,但仍高于正常组(P＜0．05)。结论:急性眼高压可导致视网膜GLT-1表达增加,其机制可能与其自身的保护反应有关。     

糖尿病性黄斑水肿3D-OCT与mERG检查结果的相关性研究

目的:探讨糖尿病性黄斑水肿的三维光学相干断层扫描技术(3D-OCT)与多焦视网膜电图(m ERG)检查结果的相关性。方法:随机选择糖尿病性黄斑水肿患者40人60只眼,经荧光造影检查示黄斑部有持续性的荧光渗漏、囊样水肿,3D-OCT示黄斑中心凹厚度大于170um,对黄斑中心凹旁上、下、鼻、颞约750um处视网膜神经上皮层处厚度进行OCT自带软件的分析测量。随机选择18人35只年龄相配的正常眼为对照组以同样方法行3D-OCT黄斑旁四个方位的神经上皮厚度测量。两组用同种方法行常规黄斑部m ERG检查。所有数据应用SPSS13.0统计软件进行处理,分析3D-OCT与m ERG在影像学方面的相关性。结果:两组被检查者检查结果经统计学处理后对比发现:被检查者黄斑中央5°、10°区域N1、P1波反应密度绝对值与黄斑中心凹神经上皮层厚度具有显著的相关性(P0.05)。结论:糖尿病性黄斑水肿的神经上皮厚度的改变与黄斑区m ERG的改变具有显著相关性,主要表现为黄斑中央5°和10°区域m ERG各波反应密度的改变,且有神经上皮厚度增加的越大,m ERG各波反应密度的降低的幅度也随之变大的趋势。     

雷珠单抗玻璃体内注射对早产儿视网膜病变患儿临床疗效及视网膜功能发育的影响

目的:探讨雷珠单抗玻璃体内注射对早产儿视网膜病变(ROP)患儿临床疗效及视网膜功能发育的影响。方法:收集2014年6月～2018年6月我院收治的80例ROP患儿,随机分为对照组和观察组各40例,对照组患儿采用激光治疗方案,观察组患儿采用雷珠单抗玻璃体内注射治疗方案。比较治疗后两组疗效和复发情况;随访6个月,采用闪光视网膜电图(F-ERG)检查治疗后视网膜功能的发育状况。结果:治疗后,观察组病变控制率明显高于对照组,病变进展率和复发率明显低于对照组(P0.05);F-ERG检查结果显示,对照组视杆细胞系统反应振幅较观察组明显降低,潜伏期较观察组明显延长,最大混合反应a、b波振幅明显低于观察组(P0.05);两组间最大混合反应波振幅比值b/a、潜伏期比较差异无统计学意义(P0.05)。两组间视锥细胞反应a波潜伏期及a、b波振幅比较差异无统计学意义(P0.05);对照组视锥细胞反应b波潜伏期明显比观察组延长,震荡电位(Ops)比观察组明显降低(P0.05)。结论:雷珠单抗玻璃体内注射治疗ROP患儿,疗效确切,操作简单且快速,视网膜功能的发育比激光治疗更趋向正常,适用于ROP患儿。     

糖化血红蛋白与糖尿病视网膜病变黄斑区厚度的关系

目的:研究早期糖尿病视网膜病变患者黄斑区视网膜厚度与相关生化指标糖化血红蛋白(HbA1C)的关系。方法:糖尿病组20例40眼,男12例,女8例;糖尿病病程为5~10年;对照组20例40眼,男14例,女6例,应用光学相干断层扫描(OCT)测量黄斑区视网膜厚度,应用相关生化仪检测糖尿病组的糖化血红蛋白比(HbA1C)。比较两组黄斑区视网膜的厚度,包括黄斑中央厚度(CPT),黄斑中心凹下厚度(SCMT),黄斑容积(TMV),分析糖尿病组黄斑区厚度与相关生化指标的HbA1C关系。结果:糖尿病组所选患者黄斑区厚度比正常组大t=4.0772(P0.01),黄斑区视网膜厚度与糖化血红蛋白(HbA1C)比呈正相关t=3.927(P0.05)。结论:对于糖尿病视网膜病变的患者,检测糖化血红蛋白(HbA1C)变化,有利于预测早期糖尿病视网膜病变并发症的发生。     

猫冠状动脉缺血与再灌注对房室传导的影响

急性下壁心肌梗塞常引起房室传导功能障碍,然而这种障碍与心肌缺血的内在联系并不很清楚,本实验在去植物性神经传出纤维的猫上进行,通过模板匹配方法从Ｈｉｓ束电图检测Ａ,Ｈ,Ｖ波并测量两心房间期（ＡＡ）,心房波与Ｈｉｓ波间期（ＡＨ）,Ｈｉｓ波与心室波间期（ＨＶ）和心房波与心室波间期（ＡＶ）。结果如下：结扎右冠状动脉后,２０只动物的ＡＨ间期１４只出现增加（Ａ组）６只未出现增加（Ｂ组）对Ｂ组进行快速心房起博和     

下体负压对家兔血液动力学的影响

观察了家兔在-20、-40、-60mmHg下体负压下心输出量、心搏量、心率、血压以及心电图、脑电图、视网膜电图的变化。实验结果表明:心搏量与心输出量明显减少,在-60mmHg下作用10分钟两者可下降到负压前对照值的15％。心率大多数加快,以代偿心输出量的下降。如出现持续性心率过缓和心律不齐,标志代偿失调。收缩压、舒张压、平均动脉压、脉压均呈规律性下降。根据血压反应可将动物分为耐力良好、尚好、较差三种类型。心电图变化主要表现为冠脉供血不足,心肌缺氧特征,并伴有高尖状P波。脑电图出现缺氧性慢波、波幅降低。视网膜电图的b波波幅逐渐下降,持续期缩短,80％以上有b负波,这些变化可能与脑部及视网膜供血不足有关。     

正常人和某些病变性眼的平均视网膜电图及振荡电位

本工作用全视野闪光刺激器结合微处理机平均技术对人视网膜电图(ERG)进行了记录和分析。正常人的 ERG 主要由 a 波、b 波和振荡电位组成。正常人的振荡电位的峰值时间及其间隔相当恒定,但在糖尿病性视网膜病和视神经萎缩病人,振荡电位减小或消失。本文对这种改变的可能原因进行了讨论。     

猕猴前列腺增生动物模型的建立

利用猕猴（Macaca mulatta）建立前列腺增生动物模型,并探讨丙酸睾酮（TP）诱导猕猴前列腺增生模型的最佳剂量及给药时间。雄性猕猴12只,随机分为3个剂量的实验组和对照组共4组,每组3只。去势8周后,皮下注射给药。实验组按低、中、高剂量分别给予丙酸睾酮（TP）0.8、2.5、7.5 mg/(kg?d),对照组给予等体积溶剂,连续8周。B型超声探测去势前、去势后8周及TP干预4周、8周时猕猴前列腺体积,并采集分离各个实验阶段的血清备用。给药8周后处死动物,取前列腺,称量湿重,测量体积,计算前列腺重量指数及体积指数,H.E染色切片观察前列腺增生情况,并进一步测量腺腔面积及腺上皮细胞高度。同时,采用ELISA方法测定血清及前列腺组织中二氢睾酮（DHT）水平。B型超声结果显示,去势8周时,各组猕猴前列腺体积均明显小于去势前（P < 0.05）。TP干预4周及8周时,各剂量组猕猴前列腺体积均显著大于对照组（P < 0.05）,且在干预4周TP中剂量组达到最佳效果（P < 0.01）。而TP干预4周与8周相比,各组间并无显著性差异（P > 0.05）。解剖结果显示,各实验组猕猴前列腺湿重、体积及脏器指数均明显大于对照组（P < 0.05）,且在中剂量组达到最大值。而显微图像分析结果显示,实验组猕猴前列腺上皮细胞增生,与对照组比较,各剂量组猕猴前列腺腺腔面积明显增加（P < 0.01）,腺上皮细胞高度明显增高（P < 0.01）。二氢睾酮（DHT）水平检测结果显示,与对照组相比,药物干预后各实验组猕猴血清中DHT含量明显增高（P < 0.01）,且在中剂量组达到最大值。TP干预4周与8周相比,各组间并无显著性差异（P > 0.05）。同时,各实验组前列腺组织中DHT含量相较于对照组也明显增高,但剂量-效应关系不显著,中剂量组优于高、低剂量组。TP药物干预去势猕猴可成功建立猕猴前列腺增生模型,初步判定较为适宜的造模条件为丙酸睾酮给药剂量2.5 mg/(kg?d),给药时间4周。     

氩激光光凝建立兔视网膜静脉阻塞模型及其评价

目的制备视网膜中央静脉阻塞的动物模型,为视网膜中央静脉阻塞疾病的研究提供稳定的模型。方法采用氩激光直接光凝法封闭兔眼视网膜静脉建立视网膜静脉阻塞模型,利用HE染色法观察正常兔及造模后3周兔视网膜组织中视网膜新生血管的增生情况,利用免疫组化法观察正常兔及造模后3周兔视网膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,并检测造模前及造模后3周闪光视网膜电流图(flash electroretinogram,FERG)。结果兔视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)眼可见明显的视网膜新生血管增生,缺血视网膜及新生血管组织中VEGF不同程度表达增强,FERG-b波的振幅明显下降(P<0.01)。结论采用氩激光直接光凝法建立视网膜静脉阻塞模型是成功的。     

视网膜静脉阻塞与颈动脉狭窄的相关性研究

目的:探究视网膜静脉阻塞与颈动脉狭窄的相关性研究,并为其临床检测、治疗与预后提供参考。方法:选择我院55例视网膜静脉阻塞患者(55只眼)为研究组,对其裸眼视力、矫正视力、眼压、眼底血管荧光造影(FFA)等检查资料进行分析,并进行多普勒彩超检查,记录其颈动脉狭窄情况,并对两种疾病之间的关系进行分析。同时选取55例健康人作为对照组。结果:研究组55例患者确诊为视网膜静脉阻塞(RVO),多普勒结果显示患者患侧与健侧劲动脉血流动力学各项差异不明显(P0.05);其IMT值较之对照组显著增高(P0.05);其PSV与EDV值有所降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:视网膜静脉阻塞患者大多存在颈动脉狭窄,因此检测颈动脉血流动力学对于诊断与预防视网膜静脉阻塞有着重要作用。