大鼠肠道内NOS与AChE、VIP阳性神经元的分布关系研究

应用一氧化氮合酶 (NOS)、乙酰胆碱酯酶 (ACh E)组织化学及血管活性肠肽 (VIP)免疫组织化学方法 ,光镜下比较观察大鼠肠道内 NOS、ACh E、VIP阳性神经元的形态学特征。结果显示 ,肠肌间丛 NOS阳性神经元胞体大小不等 ,形态不一 ,NOS、ACh E和 VIP阳性神经元的分布密度为 ACh E>NOS>VIP,在不同的肠段和层次分布密度有差异 ,NOS与 ACh E存在共染。在肌间丛和粘膜下丛 ,少数 VIP与 NOS共染。在粘膜下丛 ,三种阳性神经元的分布密度为 ACh E>VIP>NOS。在肌间丛和粘膜下丛 ,可见 VIP阳性末梢环抱 NOS阳性神经元胞体 ,两者呈终扣样接触。上述结果提示 NOS阳性神经元与 ACh E、 VIP阳性神经元有密切的形态学联系。在消化道功能调节上 ,它们可能起协调作用。     

人小肠粘膜内神经元的组织化学与免疫组织化学观察

使用ＮＡＤＨ黄递酶组化法,我们观察到小肠的固有层和粘膜肌层内的神经元和小神经节。粘膜内神经元经ＮＡＤＨ黄递酶组化与ＮＳＥ免疫组化法联合染色,由蓝色转变为黑色;在同一切片内粘膜下丛和肌间神经丛的神经元具有相同的染色性。粘膜内一些ＡＣｈＥ阳性反应神经元,胞体呈校形,两端伸出较长的突起;另一些神经元胞体呈卵圆形或不规则形,可见突起伸入肠膝下部,参与腺周丛。粘膜内神经元的类型和性质有待进一步研究。     

甘草对大鼠小肠动力功能影响的实验研究

目的:初步探讨甘草对大鼠小肠动力的作用,及其作用与胃肠激素的相关性.方法:观察甘草组与空白组移行性综肌电(MMC)周期持续时间、Ⅲ相持续时间、Ⅲ相每分钟快波数(FM)和每簇的快波数(FC)的变化;采用免疫组织化学法结合显微图像定量分析扫描系统检测十二指肠、空肠嗜铬细胞及其肌间神经丛中5-羟色胺(5-HT)、P-物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)的相对含量.结果:①甘草组与空白组比较MMCⅢ相FM和FC明显减少,MMC周期明显延长,Ⅲ相持续时间明显缩短,统计有显著性差异(P＜0.05).②甘草组十二指肠、空肠粘膜及肌间神经丛内5-HT表达明显较空白组减少,比较有显著性差异,小肠粘膜无明显SP、VIP阳性免疫反映物表达,但小肠肌间神经丛内SP含量明显减少、VIP含量明显增加,组间比较有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).结论:甘草对大鼠小肠动力有抑制作用,这种抑制作用与5-HT、SP、VIP分泌失调密切相关.     

人小肠粘膜内神经元的组织学与组织化学观察

一般认为,胃肠道粘膜内不存在神经元,粘膜神经丛仅由神经纤维组成。本文使用常规组织学方法和 NADH 黄递酶组化法证明在人小肠粘膜内可见到单个的神经元或由2～5个神经元组成的神经节。神经元胞体大小不等,形态多样,除梭形、卵圆形和不规则形外,还有呈扁平形的。粘膜内神经元多数位于固有层内,常紧贴粘膜肌;粘膜肌层内也可见到神经元。我们认为,小肠粘膜内神经元是肠神经系中粘膜神经丛的一部分。     

豚鼠小肠神经节丛的NADPH—黄递酶组织化学观察

目前已知,ＮＡＤＰＨ－－黄递酶组化法可选择性地显示－－氧化氮合成酶（ＮＯｓｙｎｔｈａｓｅ,ＮＯＳ）神经元。因此,我们以ＮＡＤＰＨ－黄递酶组化法,观察了豚鼠小肠肌间神经丛和粘膜下神经丛的神经网格以及ＮＯＳ神经元。结果表明,三段小肠肌间神经丛的神经网眼大小和形态有明显差异,与对应的粘膜下神经丛相比,差异更显著。在肌间神经丛中,ＮＡＤＰＨ－黄递酶阳性神经元胞体大小不等;其长突起伸入节间束,而短突起较多,并可见短突起彼此连接．构成节内偶见的局部神经元回路。从小肠上段到下段,ＮＯＳ神经元数量呈下降趋势。在粘膜下神经丛,我们也观察到少数ＮＯＳ神经元。     

大鼠小肠神经激肽A免疫反应（NKA－Ⅰ）物质分布特征的研究

本实验采用免疫细胞化学ＰＡＰ法,将切片与铺片技术相结合,全面研究了Ｗｉｓｔａｒ大鼠（ｎ＝２０）小肠神经激肽Ａ免疫（ＮＫＡ－Ｉ）阳性物质的分布特征。结果提示：ＮＫＡ－Ｉ神经元单个或多个散在分布于粘膜下和肌间的神经节内,粘膜下神经节处多见。ＮＫＡ－Ｉ神经纤维广泛分布于小肠各段的各层结构中。在小肠粘膜上皮和腺上皮中可见散在分布的ＮＫＡ－Ｉ强阳性细胞,推测为ＮＫＡ－Ｉ内分泌细胞。本文还对ＮＫＡ－Ｉ的形态学特点及生理功能进行了讨论。     

豚鼠膀胱内Cajal样间质细胞的分布情况研究

目的:观察Cajal样间质细胞(ICCs)在成年豚鼠膀胱的分布情况.方法:取5只成年豚鼠膀胱,制作全层冰冻切片,行ICCs特异性标志物c-kit免疫荧光染色,按粘膜层、粘膜下层和肌层进行统计分析.结果:豚鼠膀胱内可见c-kit免疫阳性细胞,胞体呈梭形,两端伸出长的突起,其形态与肠壁肌层Cajal细胞相似.且肌层和粘膜下层多于粘膜层.结论:豚鼠膀胱存在Cajal样间质细胞,并在肌层高表达,可能参与膀胱自主节律性运动的调控,调节逼尿肌的运动,为"神经-Cajal样间质细胞-肌肉"单元的形成提供组织学基础.     

实验性先天性巨结肠症大鼠结肠神经节细胞中PHOX2B的免疫组织化学表达特征

目的探讨配对同源异型盒蛋白2B(paired-like homebox 2B,PHOX2B)在先天性巨结肠症(Hirschsprung’s disease, HD)的表达意义及其在HD发病机理中可能起到的作用。方法构建40只SD乳鼠HD动物模型,取其狭窄段和移行段与40只正常乙状结肠段进行比较。分别在HD狭窄段、移行段、对照组肠壁组织切片对PHOX2B、calretinin和S-100的进行免疫组织化学染色,判定在各组肠组织黏膜下神经丛中阳性细胞计数。结果 HD的移行段和对照组正常段经PHOX2B、calretinin和S-100免疫组织化学染色,均证实神经节细胞存在;HD狭窄段未见神经节细胞;PHOX2B定位于细胞核,着色强阳性,较定位于细胞质的calretinin和定位于神经纤维及施旺细胞的S-100,更具有特异性,具有神经节细胞标记"有或无"的特点;在对照组正常段内和HD移行段内PHOX2B免疫阳性标记的节细胞数量均多于calretinin和S-100标记的节细胞数量。结论 PHOX2B特异性定位于神经节细胞胞核、具有标记清晰、着色背景干净、无假阳性表达等特点,可成为一种优于calretinin和S-100的HD新诊断标志物。     

棕色田鼠小肠肌间神经丛NOS的组织化学观察

用NDP-黄递酶组织化学法研究了NOS在棕色田鼠（Microtus mandarinus)小肠肌间神经丛的分布,同样的方法对大白鼠进行了实验比较。结果发现,棕色田鼠小肠肌间祖辈 经丛NOS阳性神经元形态各异,大小悬殊数倍;在神经节和阳性神经纤维中可见阳性神经元呈“串珠”状和“U”型排列。10倍镜下记数100个视野,观察到阳性神经元平均密度为42.8个/mm^2,每个视野内平均有神经节12.4个,每个神经节内平均有NOS阳性神经元8.5个,占其神经节内神经元总数的27.2%,棕色田鼠为野生草食性动物,其NOS在小肠肌间神经丛的分布与其他杂食性啮齿类有相同之处,但也存在着种属差异。     

卵黄抗体经滴鼻途径引起动物免疫反应的研究

研究鸡卵黄免疫球蛋白 (IgY)经滴鼻途径是否引起动物的粘膜免疫反应以及反应的程度。制备抗H3 N2 型流感病毒特异性IgY ,以滴鼻方式免疫实验家兔和豚鼠。实验动物在免疫后不同时期采血 ,检测特异性抗IgY抗体水平。豚鼠以相同IgY静脉攻击 ,观察动物的反应。实验结果表明 ,豚鼠和实验家兔均产生了特异性粘膜免疫反应 ,应慎重采用IgY以滴鼻方式来预防和治疗疾病。     

人胚胎肠道肽能神经发育的定量研究

采用免疫细胞化学 PAP 技术,对不同胚胎龄(8～40周)的53例人胚胎小肠的亮氨酸—脑啡肽(L-ENK)、降钙素基因相关系肽(CGRP)、神经肽 Y(NPY)、P 物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)等五种肽能神经的发生发育过程进行了观察,并应用形态计量方法和显微分光光度计对阳性神经元及神经纤维进行了定量测定,发现肽能神经元属“小神经元”,肽能神经发育的峰值在胚胎期四～六月。     

心内神经元血管加压素的基因表达-原位杂交与免疫组织化学结合法研究

取中华蟾蜍心房后壁腔静脉窦部位组织作冰冻切片（30μm）,以原位杂交和免疫组织化学双标法进行心内神经节细胞的血管加压素mRNA(VPmRNA)及血管加压素免疫反应（VP-IR）染色观察,结果在心内神经节发现了3种标记细胞;（1）VP-IR阳性神经元;（2）VPmRNA阳性神经元;（2）VPmRNA和VP-IR双阳性神经元,VPmRNA和VP-IR双标记神经元证明部分心内神经节的细胞元内既有血管加压素（VP）的基因表达,又储存VP,从而说明VP系心内神经节的一种内源性神经递质,为心内神经节以VP为递质直接参与血液循环的调节提供了直接的分子生物学和化学神经解剖学证据。     

嫁Qi神经系统结构的初步研究

嫁Ｑｉ神经系统包括一对脑神经节,一对足神经节,一对侧神经节和一个脏神经节,左右脑神经节间有较长的神经联合,脑一足,脑一侧神经节间有较长的连索存在,各神经节均由三部分组成：神经节鞘膜,胞体区和神经纤维网。脑神经节相同类型神经元胞体聚集分布,其余神经神经元未见有明显分区和分层现象,神经元胞体直径一般不超过２０μｍ,这些特征与已确定的前鳃亚钢种类显著不同,可能与该种螺类处于系统演化中较低等地位有关。     

大鼠脊神经节内交感神经支配的荧光组织化学与HRP示踪观察

本研究应用乙醛酸诱发儿茶酚胺（ＣＡ）荧光技术观察大鼠肾上腺素（ＮＡ）能神经在脊神经节内的分布;并应用ＨＲＰ顺、逆行追踪技术对脊神经节内ＮＡ能神经纤维的起源及其与脊神经节神经元的关系进行了探讨。荧光组织化学观察发现、有些神经节神经元胞体周围分布有带膨体的ＮＡ能神经末梢;有的紧密围绕脊神经节细胞——卫星细胞复合体。颈上交感神经节内注射霍乱毒素Ｂ亚单位结合ＨＲＰ（ＣＢ┐ＨＲＰ）,在同侧Ｃ３～６节段脊神经节内可见标记的点状纤维末梢紧邻于节细胞旁。Ｔ１１～Ｌ２节段脊神经节内注射ＨＲＰ后,在同侧椎旁交感链（Ｔ９～Ｌ１）内可见标记的交感节后神经元胞体。上述实验结果表明,交感节后神经元发出节后纤维可直接到达脊神经节内,与节细胞发生接触。本研究提示、交感神经在脊神经节水平可能参与躯体初级传入信息的调制     

哺乳动物交感神经系统内发现类加压素多肽

最近,英国的Hanley等发现,在哺乳动物交感神经系统中,广泛分布着一种有加压素(VP)生物活性和免疫反应性的类加压素多肽(VLP),它存在于神经节的去甲肾上腺素(NE)神经元中,也存在于这些神经纤维支配的组织中。应用精氨酸加压素(AVP)的高特异抗血清测出,腹腔神经节中VLP含量只有颈上神经节的1/4,提示VLP在交感链内的水平可能同VIP一样,也有头端高于尾端的差异。在垂体不能分泌AVP的Brattleboro大鼠的颈上神经节也发现VP样免疫反应性,说明这种VP不是垂体分泌的VP。     

豚鼠小肠粘膜下层内神经节丛与血管的伴行现象

本文应用NADH黄递酶联合Karnovsky-Roots乙酰胆碱酯酶组化技术研究了豚鼠小肠粘膜下层铺片上神经节丛与血管的关系,结果发现,由肌层穿入粘膜下层的小动、静脉及其分支互相伴行,环绕肠壁;动、静脉两侧有大致平行走向的伴行神经节丛,并从伴行的神经节丛发出分支终止于动、静脉壁上以及连接动、静脉两侧的神经节丛之间有纤维束相连。这种伴行现象在小动、静脉起始段和第一级分支段最为明显。伴行的神经节多数呈长梭形,其长轴与血管长轴平行。在血管“人”字形分支处,可见到“人”字形神经节,常位于静脉叉内。上述结果提示,伴行的神经节丛可能调节粘膜下层和粘膜的血流,从而影响小肠的吸收功能。     

大鼠小肠5-HT免疫活性内分泌细胞的角蛋白免疫细胞化学定位

本文作者用免疫组化双色反应,对大鼠小肠5-HT免疫活性内分泌细胞进行表皮角蛋白免疫细胞化学定位。结果表明,5-HT免疫活性内分泌细胞含有表皮角蛋白阳性颗粒,提示胃肠的正常内分泌细胞和其它粘膜上皮细胞一样含有角蛋白中间丝,它们可能也和其它粘膜上皮细胸一样共同起源于内胚层。     

血管活性肠肽的新作用

血管活性肠肽(VIP)可刺激培养的神经母细胞进行有丝分裂,促进突起的萌生、加强细胞的存活。用从大鼠15.5日胚的颈上神经节(SCG)分离出的胚胎神经母细胞进行细胞培养,发现VIP可使每份培养细胞的~3H-TdR掺入增加一倍,说明神经母细胞的DNA合成增加。这种增加是由于大量神经母细胞转     

嫁（虫戚）神经系统结构的初步研究

嫁虫戚神经系统包括一对脑神经节、一对足神经节、一对侧神经节和一个脏神经节.左右脑神经节间有较长的神经联合,脑-足、脑-侧神经节间有较长的连索存在.各神经节均由三部分组成:神经节鞘膜、胞体区和神经纤维网.脑神经节相同类型神经元胞体聚集分布,其余神经节神经元未见有明显分区和分层现象.神经元胞体直径一般不超过20μm,这些特征与已研究的前鳃亚纲种类显著不同,可能与该种螺类处于系统演化中较低等地位有关.     

嫁神经系统结构的初步研究

嫁神经系统包括一对脑神经节、一对足神经节、一对侧神经节和一个脏神经节。左右脑神经节间有较长的神经联合,脑—足、脑—侧神经节间有较长的连索存在。各神经节均由三部分组成：神经节鞘膜、胞体区和神经纤维网。脑神经节相同类型神经元胞体聚集分布,其余神经节神经元未见有明显分区和分层现象。神经元胞体直径一般不超过２０μｍ,这些特征与已研究的前鳃亚纲种类显著不同,可能与该种螺类处于系统演化中较低等地位有关。