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DNA印迹(Southern blot)杂交法是研究DNA分子结构,变异及其组成的一种分子生物学技术。自1975年闻世以来,在分子生物学,遗传学及分子病毒学等研究领域得到广泛应用,对这些学科的发展起了重要作用。由于该技术均需要首先将电泳后已变性的DNA从琼脂糖凝胶转移至支持膜上,因此,实验结果的好坏很大程度取决于吸印的效果,同时也受支持物 相似文献
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本文报道一种能对HPV进行较为准确分型的DNA杂交程序和方法,它具有如下特点,1.由于简化了实验程序,标本消耗减少,因此该方法尤其适用于小组织活检标本(1-2mg)中DNA同源序列检测。2.敏感性高。由于标本消耗减少,使HPV检出率大为提高,与斑点杂交技术相比,敏感性提高1、6倍;3.型别特异性强,由于改变了实验条件及在实验过程中实行严格的质量控制,明显减少了不同HPV型别的交叉反应,甚至在部分再 相似文献
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将反义GST-πRNA通过逆转录病毒载体介导的基因转移技术,导入人肺腺癌阿霉素耐受株细胞中,经G418筛选,克隆出抗性克隆,测定GST总酶活性,对活性最低的一株克隆,进行阿霉素药敏分析和GST-π基因表达的原位杂交分析.结果发现,GST-π基因表达受到明显抑制,总酶活性也大大降低,对阿霉素的抗药性下降了20%. 相似文献
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InhibitionofGST-πExpressionbyRetrovirus-mediatedAntisenseRNATransfection¥ZHOUZhong-jun(周中军);JINShun-qian(金顺钱);LUOXian-mao(罗贤懋... 相似文献
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人乳头瘤病毒HPV16 E7蛋白基因在沙门氏菌疫苗菌株X4072中的表达 总被引:5,自引:0,他引:5
采用PCR方法,从HPV16型质粒中分离出HPV16E7基因片段,用EcoRI和Sall双酶解后,定向插入到表达质粒pYA3332(asd+)的Ptrc启动子下游,构建成pYA3332-HPV16-E7重组表达质粒。在大肠杆菌X6212上筛选出重组质粒后,通过中间菌株X3730的转化过渡,将重组质粒导入鼠伤寒沙门氏减毒疫苗菌株X4072(asd-),构建成宿主和载体之间具有平衡致死结构的HPV16 相似文献
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本文作者采用基因克隆手段,以pAt153为载体,从一份山西襄坦宫颈癌高发区宫颈癌患者的手术标本中,成功地克隆到2株与HPV16同源的基因片段。经PstI、KpnI、TaqvI、PvuII等16种限制性内切酶酶谱分析及其部分基因序列的鉴定,证明这是在国内首次克姓到一株分子量约为8.0kb完整的HPV16型全序列DNA及一株分子量为5.4kb的HPV6基因片段。经实验证明:该基因片段E6、E7及部分LI基因丢失,在750单核苷酸处发生变异,产生一新的BamHI酶切位点。该完整的HPV16基因组被命名为HPV16Z,HPV16基因片段被命名为HPV16F。用新分离到的HPV16Z作分子探针,检测襄坦337份宫颈癌及阴道活检标本的HPV16型同源序列的结果显示,慢性阴道炎阳性率为17.28%(14/81);宫颈炎为11.89%(17/143);宫颈癌前病变46.81%(22/47);宫颈癌为72.73%(48/66)。证明山西宫颈癌高发区宫颈癌前病变及宫颈癌组织中主要为HPV16Z感染。 相似文献
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CD44的变异性表达和肿瘤转移 总被引:29,自引:0,他引:29
跨膜蛋白CD44具有多种结构形式,功能复杂,其基因组中的V区外显子能以变异方式发生拼接,不含有V区外显子的转录子称为标准CD44s,含有V区外显子的转录子称为CD44v变异体。研究表明具有转移能力的癌细胞主要表达CD44v,而非转移的癌细胞和正常组织细胞则主要表达CD44s. 相似文献
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本文报道一种能对HPV进行较为准确分型的刚A杂交程序和方法。它具有如下特点:1.由于简化了实验程序,标本消耗减少。因此该方法尤其适用于小组织活检标本(1-2mg)中DNA同源序列检测;2.敏感性高。由于标本消耗减少,使HPV检出率大为提高,与斑点杂交技术相比,敏感性提高1.6倍;3.型别特异性强。由于改变了实验条件及在实验过程中实行严格的质量控制,明显减少了不同HPV型别的交叉反应,甚至在部分出现交叉反应的标本中,仍可通过强度对比来最后判定HPV感染型别。应用该技术对143份宫颈炎标本、17份宫颈不典型增生标本及25份宫颈癌标本进行了HPV16型检测,阳性率分别为50.05%(73/143)、57%(27/47)及76%(19/25),并与Dotblot方法进行了比较。该方法在HPV感染与宫颈癌关系的分子流行病学研究中具有重要意义和广阔的应用前景。 相似文献