大鼠肝移植肝上下腔静脉不同缝合方式及手术体会

目的:探讨肝上下腔静脉不同缝合方式对大鼠原位肝移植的影响。方法:选取雄性SD大鼠60对,以SD大鼠为供体和受体,随机分成A、B两组,每组30对。两组均采用改良Kamada"二袖套法"进行大鼠原位肝移植,A组采用双定点连续缝合方式吻合肝上下腔静脉,B组采用单定点连续缝合方式吻合。比较两组肝上下腔静脉吻合时长、无肝期时长以及术后并发症及存活率等情况。结果:A组供体取肝、修肝、无肝期、肝上下腔静脉(SHVC)吻合时长分别为28.5(27.0-31.1)min、9.5(9.0-10.6)min、20.6±1.3 min、8.5(8.0-9.0)min,B组分别为30.0(27.8-32.0)min、9.0(8.6-10.0)min、18.1±1.4 min、7.0(6.5-7.4)min,其中两组的无肝期、SHVC吻合时长具有统计学差异(P<0.05)。A组SHVC吻合口出血4/30例、其他并发症6/30例,B组吻合口出血1/30例、其他并发症5/30例,术后2天以及术后2周存活率以及术后并发症方面,两组均无显著差异(P>0.05)。结论:单定点连续缝合SHVC比双定点连续缝合更有效地缩短无肝期时长,并降低开放后吻合口漏血发生几率,两种吻合方式均能成功建立稳定可行的大鼠肝移植模型。     

单人建立大鼠原位肝移植模型的手术体会

目的:探讨单人建立稳定大鼠原位肝移植模型手术中的难点及对策。方法:单人及双人裸视下采用改良二袖套法制备大鼠原位肝移植模型各50例。结果:单人及双人组供体手术时间、无肝期、受体手术手术时间分别为:(39.16±2.89)min和(38.36±3.04)min、(19.92±1.36)min和(19.70±1.40)min、(61.98±3.46)min和(58.65±3.94)min;单人及双人组手术成功率、1周存活率、一月存活率分别为:94.0%(47/50)和92.0%(46/50)、86.0%(43/50)和88.0%(44/50)、86%(43/50)和84%(42/50)。结论:通过改进手术方法,简化操作,单人即可建立稳定的大鼠原位肝移植模型。     

大鼠肝移植急性排斥反应模型的建立与评价

目的：建立大鼠肝脏移植急性排斥反应模型,并对所建模型进行评价。方法：采用改良Kamada“二袖套”法,以近交系大鼠Dark Agouti（DA）为供体、Lewis（LEW）为受体（A组）建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型,通过观察手术情况、生存情况及肝功能和病理学检查对此模型进行评价,同时以LEW→LEW作为对照组（B组）。结果：手术成功率为91.3%;手术时间为（90.70±5.68）min;无肝期时间（9.96±1.19）min;平均存活时间A组为（12.44±3.43）d,B组超过100d;A组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及血清总胆红素术后不断升高,在第10～14d最为明显,血清白蛋白在术后第3d开始逐渐降低,在相同时相点,与B组相比差异显著;A组移植肝脏病理检查有明显的排斥反应,而B组没有。结论：DA→LEW为稳定、强烈的大鼠肝移植急排模型,是研究肝移植排斥及免疫耐受的理想动物模型。     

不同灌注方法对原位肝移植麻醉的临床效果分析

目的:观察下腔静脉逆灌注法与常规门静脉正向灌注法应用于经典非转流原位肝移植手术的临床效果,并比较两种灌注法对新肝期再灌注后综合征的影响。方法:回顾性分析我院行经典非转流肝移植手术的患者60例,按照灌注方法的不同分为两组:A组(30例)采用下腔静脉逆灌注法;B组(30例)采用门静脉正向灌注法。比较两组患者围手术期的血流动力学指标、体温、内环境的改变等情况。结果:①分别在新肝开放即刻、新肝期5分钟及15分钟观察两组患者的平均动脉压、肺动脉压楔压、心率变化程度及心脏指数,A组均小于B组,差异有统计学意义(P0.05);②分别于新肝期5分钟及15分钟观察两组患者的中心静脉压,A组低于B组(P0.01);③观察开放时两组患者的最低温度,A组高于B组(P0.01);④观察血管活性药物用量,A组少于B组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:经典非转流肝移植术中,采取逆灌注方法可减少术后再灌注综合征的发生。两种灌注方式均需要加强对血流动力学、体温、酸碱平衡的监测与调整,做到针对性的麻醉管理。     

彩色多普勒超声对原位肝移植术后血流动力学研究

目的:探讨彩色多普勒超声(CDI)在原位肝移植术后对移植肝血流动力学变化的诊断价值。方法:应用CDI连续观察6例原位肝移植患者移植肝脏形态学变化,肝动脉峰值流速(HAmax)、门静脉及肝静脉平均流速(PVmean,HVmean)等指标,并以30例健康成人男性肝脏的血流动力学参数作为正常对照组。结果:在术后2周内肝脏移植组的HAmax低于正常对照组,1周内表现更为明显;术后1周内移植肝脏组的PVmean高于正常对照组,1周后表现不明显;移植肝脏组的Hvmean与正常对照组相比无明显差异。2周后,HA、PV和HV的血流速度基本上趋于正常。结论:CDI技术对了解肝移植术后移植肝的灌注情况,及早发现肝移植术后早期的并发症有重要意义。     

彩色多普勒超声对原位肝移植术后血流动力学研究

目的：探讨彩色多普勒超声(CDI)在原位肝移植术后对移植肝血流动力学变化的诊断价值。方法：应用CDI连续观察6例原位肝移植患者移植肝脏形态学变化,肝动脉峰值流速(HAmax)、门静脉及肝静脉平均流速(PVmean,HVmean)等指标,并以30例健康成人男性肝脏的血流动力学参数作为正常对照组。结果：在术后2周内肝脏移植组的HAmax低于正常对照组,1周内表现更为明显;术后1周内移植肝脏组的PVmean高于正常对照组,1周后表现不明显;移植肝脏组的Hvmean与正常对照组相比无明显差异。2周后,HA、PV和HV的血流速度基本上趋于正常。结论：CDI技术对了解肝移植术后移植肝的灌注情况,及早发现肝移植术后早期的并发症有重要意义。     

硬膜外导管在大鼠肾移植血管吻合中的应用

目的建立一种手术难度低,成功率高的大鼠肾移植模型。方法 Wistar大鼠作供体,SD大鼠作受体,将供体腔静脉与受体肾静脉端端吻合,供体腹主动脉与受体腹主动脉端侧吻合,供体膀胱瓣与受体膀胱吻合。根据血管吻合时应用硬膜外导管与否,将受体分为有支架组和无支架组两组。结果有支架组共进行肾移植30次,成活26只;无支架组共进行肾移植20次,成活10只。有支架组的成活率86.7%（26/30）较无支架组50.0%（10/20）明显提高（P〈0.05）,血管吻合总时间（22±2）min较无支架组（32±2）min明显缩短（P〈0.05）。结论硬膜外导管应用于大鼠肾移植血管吻合,降低了手术难度,减少了吻合口出血,提高了手术成功率。     

小鼠左肺原位移植模型的建立

目的通过显微外科技术建立小鼠原位肺移植模型,为肺移植研究提供动物模型。方法采用C57BL/6小鼠作为供、受体,行同基因小鼠原位左肺移植,使用Cuff套管法进行气管及血管吻合。术后7、14、21、28 d取移植肺及原肺,行HE染色,评价肺移植后效果。结果学习曲线后,共30例小鼠移植,手术成功率89%,小鼠成活率100%。供体手术时间:(35.2±9.81)min,受体手术时间:(24.6±7.42)min,冷缺血时间是:(46.6±8.92)min,热缺血时间是:(17.2±3.08)min。同基因移植物大体及病理无明显改变,病理显示与原肺无差别。结论本技术能够方便快捷建立小鼠肺移植模型,成功率高,可重复性强,符合原位肺移植临床生理,是研究肺移植发病机制和治疗的良好动物模型。     

肝移植术后营养治疗

近30多年来,肝移植技术已逐步成熟,并迅速发展成为治疗终末期肝病的首选方法。随着肝移植例数的增加,手术经验的积累,手术技巧的提高,与手术相关的并发症逐渐减少。而许多围手术期因素成为影响肝移植成败的关键。适宜的肝移植围手术期营养治疗,可以提高手术成功率,降低术后并发症,促进受体和移植肝功能的恢复,从而改善预后,提高受体与移植肝的近远期存活率。     

肝脏移植术前受体64 排CT 血管成像临床应用价值

目的:探讨肝脏移植术前受体64排螺旋CT血管成像(computed tomography angiography CTA)在临床的应用价值。方法:对28例晚期肝病患者进行64排增强后动脉期、门脉期及静脉期扫描,使用多种重建方法,由两名以上有经验的医师对肝脏血管进行分析评价,并与18例移植术后结果比较,探讨64排CT血管成像对肝移植术前准备的意义。结果:发现肝动脉变异6例,腹腔干起始部狭窄2例,腹腔干动脉瘤1例,脾动脉瘤2例,肝脏主要供血动脉直径<3mm 3例,肝门静脉海绵样变3例,肝外门静脉主干栓塞5例,伴有肝内门静脉栓塞3例,肝外门静脉主干栓塞伴肠系膜上静脉广泛栓塞2例,下腔静脉癌栓3例,其中癌栓达右心房2例。结论:64排CT血管成像无创、可靠,通过多种重建方法,能清晰显示肝脏血管,对肝脏移植术前血管做出评价,具有可靠的临床指导意义。     

Articular cartilage reconstruction using xenogeneic epiphyses slices

Reconstruction of articular cartilage defects using adult osteochondral allografts is an established clinical procedure, whose principal drawback is lack of lateral integration of the grafts to the surrounding tissue. Autologous chondrocytes transplantation is a sophisticated technique requiring cell culture and a staged operation. Its main draw back is the lack of mechanical strength early on. This study was conducted in order to evaluate the possibility of using embryonal epiphyses as a cartilage reconstruction tissue. A xenogeneic human to rabbit sub-acute osteochondral defect model was designed to evaluate the possibility of allogeneic implantation in humans. The following procedures were perfomed (n = 5): transplantation of 1. live epiphyses 2. live epiphyses with autogeneic periosteum 3. de-vitalized epiphyses and 4. devitalized epiphyses with autogeneic articular chondrocytes. A fifth control group did not receive any implant. Animals in groups 1 and 2 had a viable reconstruction of the articular surface with little evidence of rejection and without pannus formation. Animals in groups 3 and 4 became severely arthritic and the graft was resorbed. Nitric oxide synthase accumulation was reduced in group 1 and 2 as compared to groups 3, 4, and 5, indicating a joint preserving function of the epiphyseal grafts. Epiphyseal grafts appear to be a feasible procedure for reconstruction of articular cartilage defects even in a xenogeneic model. This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date.     

肝脏再生的动物模型

肝细胞移植相对于全肝脏移植有其优越性,包括低致死率,低耗费,技术可行,有克服器官短缺的可能性,具有临床应用的潜能。目前关于移植肝细胞再生的研究大多数关注在选择最佳的移植位点、移植细胞数、移植细胞类型。然而,临床应用的最大障碍是移植细胞在受体扩增能力有限。移植细胞在多种动物实验模型中能大量替换肝实质细胞。通过对这些模型的探讨初步探索了移植细胞再生的相关条件 。     

卵巢冷冻保存和移植的研究进展

卵巢冷冻保存和移植是建立卵子库的一项有效技术,近年来取得了很大进展。本文介绍了卵巢组织冷冻保存和移植的方法及近年来的研究情况。     

神经干细胞脑内移植后的存活、迁移和分化

从胚胎或成体大鼠脑组织、人胚脑组织均能分离到神经干细胞 ,将它们进行体外原代培养扩增或永生化后植入脑内 ,均能观察到其在脑内的迁移和分化现象。其分化能力主要取决于移植部位的脑内微环境 ,但这种影响作用是相对的。同时 ,体外培养环境如培养时间和细胞融合程度、维甲酸类诱导分化剂处理、NGF转导处理再移植或与嗜铬细胞 (分泌NGF)共移植等 ,也能决定神经干细胞脑内移植后向神经元方向分化的能力。神经干细胞移植为中枢神经系统功能重建和神经再生带来新的希望。     

Artificial Cornea and the Future of Eye Banking

A report on the construction of functional human corneal equivalent reflects a step towards creation of an artificial cornea. We discuss the current status of supply and demand for corneas for transplanation, and wonder if the creation of an artificial cornea will have an effect on corneal transplantation in the near future     

Reformation of organized epidermal structure by transplantation of suspensions and cultures of epidermal and dermal cells

Summary The development of epidermis and epidermal appendages from dissociated cells of neonate mouse skin was examined by transplantation of cell suspensions to subdermally prepared, protected graft beds. Using Ficol gradients and culture procedures, we prepared subfractions of primary cell suspensions consisting of essentially pure epidermal cells or fibroblasts.Reformation of an epithelium structurally similar to the epidermis was observed from transplanted epidermal-cell suspensions, but formation of hair follicles and development of normal epidermal microarchitecture was observed only when epidermal cells were transplanted together with cells of dermal origin. This pattern was observed following transplantation of either fresh-cell isolates or cells cultured up to 7 days prior to transplantation.Part of the work was performed when one of us (I.C. Mackenzie) was guest scientist at the DKFZ.     

置管溶栓联合自体外周血干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎

目的观察置管溶栓联合自体外周血干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎（TAO）的疗效。方法回顾性分析昆明医科大学第四附属医院血管外科2009年4月至2013年4月期间收治的64例TAO患者（68条患肢）,随机均分为两组,其中32例行置管溶栓联合自体外周血干细胞移植术（A组）,32例单纯采用自体外周血干细胞移植术（B组）,采用主观指标包括患肢疼痛、冷感以及客观指标包括跛行距离、踝肱指数、足部溃疡变化、皮温、截肢率进行疗效评价。采用t检验和Х^2检验分析两组疗效指标的差异。结果移植1个月后,两组64例患者（68条患肢）小腿疼痛均不同程度缓解,小腿冷、凉感觉消失;干细胞移植3个月后,A、B组两组间歇性跛行距离[（311.24±124.56）m,220.38±45.53）m,t=6.01,P=0.01],下肢皮温[（30.29±0.42）℃,（29.50±0.46）℃,t=28.05,P=0.00]、ABI（0.64±0.02,0.51±0.02,t=26.00,P=0.00）差异均具有统计学意义。A组中2例（2条患肢）,B组中4例（4条患肢）术后3个月由于小腿中段以下出现坏死导致膝下截肢,截肢率A组为：5.9﹪（2/34）;B组为：11.8﹪（4/34）;所有患者经肿瘤标记物、B超或CTA检查,均未发现恶性肿瘤、视网膜增生、动脉瘤等并发症。结论置管溶栓联合自体外周血干细胞移植治疗TAO是一种可供选择的新的治疗途径。     

成人胰岛细胞移植25例次临床研究

目的 建立新型成人胰岛细胞分离纯化方法,观察成人胰岛细胞移植的安全性与有效性.方法 对14例1型糖尿病(T1DM)患者进行PFC与UW液双层冷藏胰腺,Liberase酶消化,COBE 2991型专用胰岛细胞分离机分离及连续密度梯度纯化,获取高纯度与高活性的胰岛细胞.采用外科方法,将短期培养的胰岛细胞经门静脉移植到肝脏内...     

Maintenance of regionally specific patterns of cell proliferation and differentiation in transplanted skin and oral mucosa

Summary Specimens of mouse ear, footpad and tail skin and palatal, buccal and lingual mucosae were transplanted to protected sites prepared in histocompatible hosts either as intact tissues or recombined after separation of epithelial and connective tissue components using EDTA. Despite maintenance in a protected ectopic site for up to 9 weeks, transplants maintained regionally specific differences in histological appearance and rates of mitotic activity. A diurnal variation in mitotic activity comparable to host control tissues was reestablished.This work was supported by NIH/NIDR Grant 1R01DEO5190.     

免疫耐受在胰岛移植中的研究进展

胰岛移植已经被公认为治疗胰岛素依赖型糖尿病(IMDD)的有效手段,而现如今胰岛移植的最大障碍是移植排斥反应。目前控制胰岛移植的免疫抑制治疗因其对胰岛细胞的毒性作用及长期应用带来的全身并发症而无法在临床推广,诱导移植术后受体的免疫耐受是防止排斥反应的最理想方法。本文综述了诱导免疫耐受的途径及胰岛移植的最新实验进展。随着研究的深入和免疫学的发展,相信在未来的胰岛移植治疗糖尿病领域,移植排斥现象将能得到高效可靠的解决。