肿瘤相关巨噬细胞极化的研究进展

肿瘤相关巨噬细胞是肿瘤组织局部浸润的巨噬细胞,在肿瘤组织微环境中,这些巨噬细胞发生M2型极化,从而发挥免疫抑制效应,促进肿瘤增殖。而M2型极化的肿瘤相关巨噬细胞也能够被再次诱导逆向极化形成具有抗肿瘤效应的M1型肿瘤相关巨噬细胞,激发机体产生特异性抗肿瘤免疫应答。促进肿瘤相关巨噬细胞M1型极化由此成为当前抗肿瘤免疫防治研究的热点。将对有关肿瘤相关巨噬细胞极化的新进展进行综述,为抗肿瘤免疫研究提供新的思路。     

靶向肿瘤相关巨噬细胞免疫治疗的研究进展

肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)存在于肿瘤微环境中,分为经典活化的M1型和交替活化的M2型。M1型巨噬细胞通过释放促炎细胞因子来抑制肿瘤的生长,而M2型巨噬细胞通过促进肿瘤的增殖、血管生成和转移来促进肿瘤的进展。由于巨噬细胞对肿瘤的影响具有双重性,TAMs一直是肿瘤研究的热点。本文就TAMs的异质性和可塑性、TAMs与其他免疫细胞之间的串扰和TAMs对肿瘤的作用等问题进行了综述,并对TAMs的多种靶向治疗策略进行了总结和讨论。这些治疗策略包含抑制TAMs的招募、消耗TAMs以及调控TAMs的极化等方法和手段。这些研究有助于深入理解TAMs与肿瘤相互作用的机理,并为肿瘤的联合治疗提供借鉴和参考。     

血小板反应蛋白4通过诱导肿瘤相关巨噬细胞M2型极化促进肝癌细胞转移

血小板反应蛋白4 (thrombospondin 4, THBS4) 属于THBS家族成员,是细胞外基质分泌的蛋白质,参与调控细胞增殖、黏附及血管生成等多种生理过程。近来研究表明,机体在炎症刺激下加速产生THBS4并诱导巨噬细胞粘附与积累。我们的前期研究证实,THBS4在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中发挥促癌作用,但THBS4对肝癌免疫微环境的影响尚不明确。本文旨在分析THBS4通过诱导肿瘤相关巨噬细胞M2型极化,促进肝癌细胞转移的作用。通过肝癌条件培养基(HCC conditioned medium,HCM)模拟肿瘤微环境,发现在HCM作用下巨噬细胞中THBS4表达呈时间依赖性升高(P＜0.05);下调THBS4促使M1型巨噬细胞标志物IL-1β、CD86的表达升高(P＜0.01),而M2型标志物 IL-10和CD206表达降低(P＜0.01)。进一步通过Transwell共培养实验检测THBS4诱导的M2型巨噬细胞对肝癌转移的影响。将下调THBS4的M2型巨噬细胞(M2-TAMs)与HepG2肝癌细胞进行共培养。结果显示,下调THBS4的M2-TAMs明显抑制了HepG2细胞的侵袭和迁移能力(P均＜0.01)。综上所述,肿瘤微环境促进巨噬细胞中THBS4表达,THBS4可能通过诱导巨噬细胞M2型极化促进肝癌细胞侵袭转移。本文为探究THBS4诱导肝癌免疫微环境的建立提供了一些新的实验依据。     

肿瘤相关巨噬细胞的研究进展

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages, TAMs)在肿瘤微环境中扮演着重要的角色,TAMs的大量存在与不良预后密切相关。近年来,TAMs的相关问题成为研究的热点,该文就TAMs的募集、TAMs的极化状态及TAMs与肿瘤之间的相互作用问题进行了综述。该文对经典活化的M1型和替代活化的M2型巨噬细胞对肿瘤影响研究的最新进展进行了总结。此外,对TAMs的多种靶向治疗策略进行了总结和讨论。这些治疗策略中包含抑制TAMs的募集、直接清除TAMs、将M2型TAMs极化为M1型TAMs以及提高TAMs的吞噬能力等方法和手段。这些研究有助于深入理解TAMs与肿瘤相互作用的机理,并为肿瘤的联合治疗提供借鉴和参考。     

维生素D3对黄颡鱼头肾极化分型的巨噬细胞影响

研究以黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)头肾巨噬细胞为研究对象,通过细菌脂多糖(LPS)和环磷酸腺苷(cAMP)分别诱导M1型和M2型极化,200 pmol/L维生素D₃孵育后对其形态学特征、生物学功能及极化相关基因的表达进行分析鉴定来确定维生素D₃在巨噬细胞极化中的调节作用。结果表明,维生素D₃能降低诱导后M1型和M2型巨噬细胞的死亡率,并增强巨噬细胞的吞噬活性。在M1型巨噬细胞中维生素D₃能够抑制活性氧(ROS)和炎症介质一氧化氮(NO)的产生,降低超氧阴离子自由基的活力,白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平显著降低(P<0.05);在M2型细胞中能够增加精氨酸酶的活性,显著增加白介素10(IL-10)和转化生长因子(TGF-β)的表达水平(P<0.05),最终抑制巨噬细胞向M1表型极化,促进巨噬细胞向M2表型极化,发挥抗炎作用;黄颡鱼头肾巨噬细胞中Nos-2和Arg-2分别是M1和M2巨噬细胞的生物标记基因。研究结果为进一步研究鱼...     

MiRNA与肿瘤相关巨噬细胞

肿瘤相关巨噬细胞(TAM)是由血液循环中的单核细胞募集进入肿瘤微环境后分化而成的巨噬细胞,它与肿瘤的形成、发展、侵袭和转移密切相关。miRNA是一种内源性非编码小分子RNA,参与多种肿瘤的发生、发展进程。研究表明,特定miRNA在控制TAM的极化方向和功能表型中发挥重要作用,有可能成为抗肿瘤靶向治疗的潜在分子靶点。本文综述了本领域的研究新进展。     

MiRNA与肿瘤相关巨噬细胞CSCD

肿瘤相关巨噬细胞(TAM)是由血液循环中的单核细胞募集进入肿瘤微环境后分化而成的巨噬细胞,它与肿瘤的形成、发展、侵袭和转移密切相关。miRNA是一种内源性非编码小分子RNA,参与多种肿瘤的发生、发展进程。研究表明,特定miRNA在控制TAM的极化方向和功能表型中发挥重要作用,有可能成为抗肿瘤靶向治疗的潜在分子靶点。本文综述了本领域的研究新进展。     

CSF1与肿瘤微环境

肿瘤微环境是肿瘤细胞的复杂生态环境,细胞与环境共同进化,环境为细胞的恶性转化提供支持。在被招募到肿瘤发生位点的细胞中,巨噬细胞的数量最多,在肿瘤发展的各阶段都存在,人们将其称为肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAM)。CSF1(macrophage colony-stimulating factor 1)是目前公认的经典的促肿瘤细胞因子,它可招募巨噬细胞到肿瘤区域,并促进肿瘤细胞与巨噬细胞的相互作用,进而导致微环境中释放各种促肿瘤发展的生长因子,从而促进肿瘤的发生发展。本文主要阐述了CSF1在肿瘤微环境中发挥的功能作用,为针对CSF1/CSF1R信号而发展的肿瘤治疗策略提供更好的理论基础。     

即早基因c-fos在THP-1单核巨噬细胞亚型极化中的差异表达*

目的:探讨即早基因c-fos在THP-1巨噬细胞亚型极化过程中的表达变化。方法:运用PMA刺激诱导THP-1单核细胞极化为巨噬细胞,观察c-fos在单核细胞极化过程中的表达变化;在PMA刺激的基础上,分别运用LPS和IL-4诱导THP-1巨噬细胞向M1及M2亚型极化,实时定量PCR及Western blot技术分析刺激24 h时,细胞亚型标记物CD274、CD86和CD163的表达变化,并动态观察诱导极化过程中,c-fos的表达情况。结果:c-fos在PMA刺激THP-1单核细胞分化为巨噬细胞过程中蛋白和mRNA水平显示上调;LPS诱导THP-1巨噬细胞极化为M1型过程中,c-fos蛋白和mRNA水平表达降低,其特异性标记物在24 h呈现出M1型极化的特点(CD86蛋白表达升高,CD274、CD163蛋白表达降低);IL-4诱导THP-1巨噬细胞极化为M2型过程中,c-fos蛋白和mRNA水平表达升高,其特异性标记物在24 h表现出M2型极化的特点(CD86蛋白表达降低,CD274、CD163蛋白表达升高)。结论:c-fos参与了THP-1单核细胞向巨噬细胞极化的过程,并且可能通过抑制巨噬细胞M1亚型形成,促进巨噬细胞向M2亚型极化的作用参与巨噬细胞的亚型极化及其功能调节中。     

CSF1与肿瘤微环境CSCD

肿瘤微环境是肿瘤细胞的复杂生态环境,细胞与环境共同进化,环境为细胞的恶性转化提供支持。在被招募到肿瘤发生位点的细胞中,巨噬细胞的数量最多,在肿瘤发展的各阶段都存在,人们将其称为肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAM)。CSF1(macrophage colony-stimulating factor 1)是目前公认的经典的促肿瘤细胞因子,它可招募巨噬细胞到肿瘤区域,并促进肿瘤细胞与巨噬细胞的相互作用,进而导致微环境中释放各种促肿瘤发展的生长因子,从而促进肿瘤的发生发展。本文主要阐述了CSF1在肿瘤微环境中发挥的功能作用,为针对CSF1/CSF1R信号而发展的肿瘤治疗策略提供更好的理论基础。     

JNK通路对M2巨噬细胞极化及其肿瘤效应的影响

探究了JNK通路对M2巨噬细胞极化及M2介导的促肿瘤效应的影响。构建单核细胞THP1来源M2 巨噬细胞模型(THP1-M2),将细胞分为3组: 用PMA 诱导的未活化巨噬细胞组(M0),用PMA、IL-4处理及阴性干扰(DMSO)的M2型巨噬细胞组(M2),用特异性抑制剂阻断JNK通路的M2 型巨噬细胞组(M2-JNKI)。实时荧光定量PCR检测M2 表型marker基因的表达;免疫蛋白印迹法检测M2 表型marker蛋白水平;细胞划痕试验检测巨噬细胞迁移能力;流式细胞数检测786O及OSRC2凋亡。结果与THP1-M2组相比,阻断JNK通路的M2组M2表型marker表达明显下降,同时其细胞迁移能力也呈下降趋势。且阻断JNK通路后,M2巨噬细胞抑制肾癌细胞凋亡的能力减弱。结果表明,抑制JNK通路后,M2巨噬细胞极化状态受损,其促肿瘤效应可转变为抗肿瘤效应。     

磁性纳米粒介导沉默PI3Kγ基因调控肿瘤相关巨噬细胞抗小鼠肺癌细胞效应的研究

为了探讨超顺磁性Fe3O4纳米粒子(superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPIONs)介导的磷脂酰肌醇3激酶γ(phosphatidylinositol 3 kinaseγ,PI3Kγ)抑制表达调控的肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)对小鼠Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma,LLC)增殖和凋亡的影响,该研究构建了能启动巨噬细胞(macrophage,MФ)特异性表达PI3Kγ催化亚基p100 siRNA的pSilencer-EGFP-SP-p110质粒,通过SPIONs负载成磁性纳米质粒复合物(SPIONs-DNA),在强磁作用下转染MФ,通过普鲁士蓝染色法检测SPIONs-DNA在细胞内的分布,Real-time PCR和Western blot检测细胞PI3Kγp110亚基的表达水平。建立M1、M2型MФ模型,将SPIONs-DNA在强磁作用下转染M2型MФ,通过Real-time PCR和Western blot鉴定细胞表型,明确M2型MФ转化为M1型的强度。采用Transwell系统建立SPIONs-DNA转染的M2型MФ与小鼠LLC细胞的共培养模型,通过锥虫蓝染色法检测LLC细胞的活细胞数并绘制细胞生长曲线,CCK-8法检测LLC细胞增殖情况,硝酸还原酶法检测共培养液上清中NO含量,流式细胞术检测LLC细胞凋亡情况。结果显示,制备的SPIONs-DNA在强磁作用下成功转染MФ并大量分布在细胞胞核周围,SPIONs-DNA转染组细胞PI3Kγp110 mRNA和蛋白表达水平显著低于空白细胞对照组(P<0.05)。建立的M1型MФ高表达iNOS(P<0.001),M2型MФ高表达ARG-1(P<0.001)。M2型MФ转染SPIONs-DNA后细胞iNOS mRNA和蛋白的表达显著增加(P<0.001),ARG-1 mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.01)。在共培养组中,SPIONs-DNA转染的M2型MФ组能大量分泌NO,LLC细胞生长和增殖能力显著降低(P<0.05),凋亡率显著增高(P<0.01)。结果表明,磁性纳米粒负载pSilencer-EGFP-SP-p110重组质粒能够特异性靶向抑制巨噬细胞PI3Kγp110的表达,诱导M2型MФ转化为M1型;其转染的M2型MФ可显著抑制LLC细胞的生长和增值,促进细胞凋亡,这与其大量分泌NO有关。该磁性纳米质粒复合物可诱导TAM发挥抗肿瘤作用,为研究开发有效的抗肺癌基因治疗措施奠定基础。     

极化过程影响巨噬细胞的铁代谢

本文旨在研究巨噬细胞极化过程对自身铁代谢调节的影响。用20 ng/mLγ干扰素(interferon gamma, IFN-γ)刺激猪肺泡巨噬细胞(3D4/2细胞) 24 h,诱导其为M1型巨噬细胞,另外用10 ng/mL白细胞介素4 (interleukin-4, IL-4)联合10 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor, M-CSF)共同刺激3D4/2细胞24 h,诱导其为M2型巨噬细胞,用实时定量PCR、免疫荧光染色法和Western bolt检测巨噬细胞炎症因子和铁代谢相关蛋白的表达。收集M1/M2型巨噬细胞培养液上清液与猪肠上皮IPEC-J2细胞共培养,用CCK-8法检测IPEC-J2的增殖能力。给M1/M2型巨噬细胞外源添加柠檬酸铁铵(ammonium ferric citrate, FAC),用异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(fluorescein isothiocyanate-dextran, FITC-dextran)及流式细胞术检测3D4/2细胞吞噬能力。结果显示,和对照组相比,M1型巨噬细胞铁调素、铁蛋白重链、轻链和脂质运载蛋白-2 mRNA表达水平上调,胞内铁含量增加,显示出铁保留的表型,并且铁可增强M1型巨噬细胞的吞噬能力;M2型巨噬细胞上述基因mRNA表达水平无显著变化,而铁转运蛋白和转铁蛋白受体mRNA表达水平上调,胞内铁含量减少,显示出铁释放的表型,并且其培养液上清液能促进IPEC-J2细胞增殖。上述结果提示,M1型巨噬细胞倾向于将铁保留在细胞内,减少胞外铁含量,从而抑制胞外菌的增殖;而M2型巨噬细胞倾向于释放铁,有助于周围细胞的增殖,从而促进组织修复。     

M2型巨噬细胞极化及相关疾病的研究进展

巨噬细胞是固有免疫的重要成员,在机体防御病原微生物感染、肿瘤、过敏性疾病、代谢类疾病、组织损伤修复等发生发展过程中发挥着极其重要的作用。在微环境,尤其是多种细胞因子的影响下,巨噬细胞极化成M1/M2型巨噬细胞,表达相应的特异性基因,行使不同的功能。M1型巨噬细胞主要发挥促炎、杀菌及呈递抗原的功能,M2型巨噬细胞主要起抑炎、抗寄生虫感染和组织修复的作用。现总结人们对巨噬细胞极化的认识过程、M2型巨噬细胞的分类和其形成过程中起重要调控作用的信号分子,并着重讨论M2型巨噬细胞在相关疾病中的功能。     

仿刺参多糖抗肿瘤及对荷瘤小鼠免疫调节作用

目的 观察仿刺参多糖(AJPS)抗肿瘤及免疫调节作用.方法 采用MTT法检测AJPS对人肝癌HepG-2细胞抑制率;以Hca-F肝癌小鼠为模型,采用MTT法、放免法测定荷瘤小鼠细胞免疫指标.结果 AJPS抑制HepG-2细胞生长,抑制小鼠移植瘤生长;增强脾淋巴细胞和巨噬细胞活性,促进TNF-α和IL-2的产生.结论 AJPS具有对HepG-2细胞的直接杀伤作用;AJPS对荷瘤小鼠有免疫调节活性,在肿瘤的免疫治疗中发挥作用.     

肿瘤相关成纤维细胞与成纤维细胞活化蛋白在肿瘤免疫治疗中的研究进展

除了依赖于肿瘤细胞自身的恶性增殖以外,肿瘤的发生和发展还依赖于肿瘤细胞与肿瘤间质微环境的相互作用。肿瘤间质中存在的肿瘤相关成纤维细胞（tumor-associatedfibroblasts,TAF）能够诱导免疫抑制,是肿瘤免疫治疗中的一大障碍。在TAF上存在一种成纤维细胞激活蛋白（fibroblast activationprotein,FAP）,它在细胞表面发挥作用,是一种膜丝氨酸肽酶,是Ⅱ型丝氨酸蛋白酶家族成员之一,具有二肽肽酶及胶原酶活性,在肿瘤微环境中表达FAP的肿瘤相关成纤维细胞是最早被鉴定的一种肿瘤间质细胞类型。它由肿瘤问质中的成纤维细胞与癌细胞相互作用而活化,是肿瘤微环境中最主要的宿主细胞,具有促进肿瘤细胞生长、侵袭及免疫抑制的作用,而且基因组稳定不易耐药,有望成为肿瘤免疫治疗的新靶标。就靶向TAF和FAP在肿瘤免疫治疗中的研究做一综述,为基于肿瘤间质微环境的免疫治疗提供参考。     

骨髓间充质干细胞培养液促进STAT3磷酸化诱导Raw264.7细胞向M2型极化

炎症性疾病的发生是当今临床医学攻克的重点。M1型巨噬细胞分泌炎症因子产生炎症,而M2型巨噬细胞分泌抑炎因子抑制炎症的发生。M1型巨噬细胞向M2型极化,则是从炎症状态转变成抑制炎症发生的状态,因此研究巨噬细胞向缓解炎症的M2型极化将有利于炎症性疾病的治疗。本研究利用骨髓间充质干细胞(BMSC)培养液处理已被脂多糖(LPS)诱导呈M1型的Raw264.7巨噬细胞,探究骨髓间充质干细胞培养液(BMSC-CM)对巨噬细胞向M2型极化的影响及其分子机制。提取来源于3周龄C57BL/6鼠的骨髓间充质干细胞;再收集BMSC-CM处理M1型的Raw264.7巨噬细胞;半定量PCR检测M1型标记基因[肿瘤坏死因子α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(INOS)]和M2型标记基因[精氨酸酶1(ARG-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)]mRNA表达以及白介素10(IL-10)mRNA表达水平;Western蛋白质印迹法检测信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)和磷酸化STAT3(p-STAT3)的表达。本研究发现,经过BMSC-CM培养后的M1型的Raw264.7巨噬细胞,其M2型相关指标ARG-1和TGF-β1 mRNA水平明显上升,并且IL-10 mRNA水平和p-STAT3蛋白水平也明显上升。这些结果说明,骨髓间充质干细胞培养液通过IL-10/STAT3信号通路促进STAT3磷酸化,诱导巨噬细胞Raw264.7细胞向M2型极化。     

前列腺癌细胞来源的外泌体诱导巨噬细胞极化

外泌体(exosome)是直径约30～150 nm的由细胞分泌的一种具有生物学活性的囊泡。有些来自癌细胞的外泌体可以将巨噬细胞(macrophages,Mφ)极化为M2亚型,但前列腺癌细胞来源的外泌体在巨噬细胞极化中的作用仍缺乏研究。本研究采用超滤法提取前列腺癌细胞PC-3M-2B4和PC-3M-IE8条件培养基中的外泌体(PCa-exo)。分别用透射电子显微镜、纳米粒径分析及Western印迹对外泌体形态、颗粒大小和表面的特异性分子标志进行分析鉴定。用PKH67标记外泌体,观察PCa-exo能否被巨噬细胞吸收。免疫荧光分析PCa-exo处理巨噬细胞后,M2型巨噬细胞表面分子标志CD206的表达差异。用q-PCR观察PCa-exo诱导后的巨噬细胞中IL-10、IL-1β等细胞因子的表达。电镜、Western印迹和纳米粒径分析的结果显示,PCa-exo形态多为圆形,直径约为40～150 nm,PCa-exo能被巨噬细胞大量吸收。PCa-exo诱导后,巨噬细胞中CD206荧光表达显著增高,IL-10、IL-1β及IL-12等炎症因子的表达水平与M2/TAM亚型巨噬细胞的表达谱一致。本研究表明,前列腺癌细胞来源的外泌体能诱导巨噬细胞极化为M2表型。     

巨噬细胞能量代谢与动脉粥样硬化

巨噬细胞通过细胞表型转换与内环境的变化相适应。M1型巨噬细胞具有促炎作用,而M2型巨噬细胞具有抗炎和促纤维化作用。进展的易损动脉粥样硬化斑块内以M1型巨噬细胞为主。糖酵解是M1型巨噬细胞主要的供能途径,伴随细胞内大量活性氧的生成和炎性细胞因子的分泌。而稳定动脉粥样硬化斑块内以M2型巨噬细胞为主,M2型巨噬细胞以氧化磷酸化为主要供能途径,通过抑制巨噬细胞糖酵解,促进巨噬细胞氧化磷酸化,能够减轻动脉粥样硬化病变。本文综述了与巨噬细胞表型转换相适应的细胞能量代谢变化及其对动脉粥样硬化斑块进展和斑块稳定性的影响及其作用机制。     

巨噬细胞游走抑制因子在肿瘤中的作用研究进展

巨噬细胞游走抑制因子是一种具有多种生物学效应的糖蛋白,可以调节不同的下游信号如ERK/AKT、NF-κB等通路参与肿瘤细胞增殖、侵袭、转移、血管形成和自噬等生物学过程。临床相关研究表明巨噬细胞游走抑制因子与肿瘤发生发展关系密切,且在乳腺癌、肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、结肠癌等多种肿瘤中高表达,因此以巨噬细胞游走抑制因子为靶点的相关肿瘤治疗逐渐受到重视。有关巨噬细胞游走抑制因子拓扑异构酶活性抑制剂及巨噬细胞游走抑制因子中和抗体在肿瘤治疗中的研究越来越多。本文对巨噬细胞游走抑制因子在肿瘤发生发展中的作用以及针对巨噬细胞游走抑制因子进行的肿瘤治疗研究作一综述。