MS-275联合平阳霉素对Tca-8113细胞生长和凋亡的影响

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)MS-275联合抗生素类化疗药物平阳霉素(PYM)对口腔鳞状癌细胞Tca-8113的生长及凋亡的影响。方法:以体外培养的口腔鳞状细胞癌Tca-8113细胞为研究对象,应用MTT法检测不同浓度(0、1、2、4、8μmol/L)MS-275、(0、0.05、0.1、0.2、0.4μmol/L)平阳霉素(PYM)单独和联合用药对Tca-8113细胞增殖活性的影响;Annexin-V-FITC/PI双染流式细胞术定量检测细胞的凋亡情况。结果:不同浓度(1、2、4、8μmol/L)MS-275和(0.05、0.1、0.2、0.4μmol/L)PYM均可显著抑制Tca-8113细胞的增殖,并促进其凋亡,且呈浓度依赖性(P0.05)。4μmol/L MS-275和0.2μmol/L PYM联合应用时,其抑制Tca-8113细胞增殖和促进其凋亡的作用均显著高于单独应用MS-275或PYM(P0.05)。结论:MS-275能有效增强口腔鳞状细胞癌Tca-8113细胞对平阳霉素(PYM)的敏感性,体外实验中呈现较好的抗肿瘤效应。     

MMP14单克隆抗体对口腔鳞状细胞癌增殖、凋亡的影响

[目的]探究MMP14单克隆抗体对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响。[方法]构建MMP14敲低(Kd-TCa8113)、过表达(Kd-TCa8113)细胞株，与野生型TCa8113(Wt-TCa8113)对比，考察MMP14对TCa8113细胞增殖、凋亡的影响。用不同浓度的MMP14单克隆抗体与TCa8113共培养，以探讨MMP14单克隆抗体对TCa8113细胞增殖、凋亡的影响。[结果]以Wt-TCa8113为对照组，Kd-TCa8113组、Kd-TCa8113组的细胞培养48 h的增殖率分别为74.55%、114.79%,P均<0.05。流式细胞术结果显示，Wt-TCa8113、Kd-TCa8113和Oe-TCa8113培养48 h后的细胞凋亡率分别为3.47%±0.36%、33.68%±7.33%和1.60%±0.22%,P均<0.05。用50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL浓度的抗体处理TCa8113细胞24 h后，以PBS处理组为对照，细胞增殖率分别为93.52%、90.75%和87.61%,P均<0.05。流式细胞术结果显示，PBS组和上述抗...     

TGF-β1对卵巢癌细胞A2780增殖及迁移侵袭的影响

目的:探讨TGF-β1对卵巢癌细胞A2780增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:以体外培养的卵巢癌细胞A2780为研究对象,给予不同浓度(0、2、4…20 ng/m L)TGF-β1处理不同时间(12、24…72 h)。采用CCK-8法检测不同的浓度TGF-β1处理不同时间对卵巢癌细胞A2780增殖的影响。根据增殖实验结果选择合适的TGF-β1作用浓度及处理时间,采用细胞划痕实验测定细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞的侵袭及迁移能力。结果:相较于空白对照组,TGF-β1可以剂量和时间依赖性显著促进卵巢癌细胞A2780的增殖(P0.05)。细胞划痕实验结果显示TGF-β1处理组ΔS%/h明显高于空白对照组(P0.05);Transwell迁移实验结果显示:TGF-β1处理组OD570明显高于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。Transwell细胞侵袭实验结果显示:与空白对照组相比,TGF-β1处理组OD570明显升高(P0.05)。结论:TGF-β1可以明显促进卵巢癌细胞系A2780的增殖、迁移及侵袭能力,其促增殖效应呈剂量/时间依赖效应。     

喜树碱诱导甜菜夜蛾细胞凋亡线粒体途径的MPTP依赖性

【目的】线粒体通透性转换孔(MPTP)的开放可以导致线粒体膜通透性改变,与细胞凋亡关系密切。本研究旨在探索MPTP在喜树碱诱导的昆虫细胞凋亡中的作用,以进一步揭示喜树碱(CPT)诱导昆虫细胞凋亡的机制。【方法】环孢菌素A(CsA)为MPTP开放抑制剂,通过预加入20μmol/L CsA,应用流式细胞仪测定其对CPT和羟基喜树碱(HCPT)诱导的甜菜夜蛾Spodoptera exigua细胞(IOZCAS-SPEX-Ⅱ)凋亡作用的影响,包括细胞内Ca~(2+)浓度变化,线粒体膜电位变化以及活性氧簇(ROS)变化,从而分析MPTP在CPT和HCPT诱导细胞凋亡的作用。【结果】结果显示,10μmol/LCPT和HCPT处理IOZCAS-SPEX-Ⅱ细胞6 h和12 h时,与0.1%DMSO对照组相比,甜菜夜蛾细胞发生凋亡,胞质Ca~(2+)浓度增大,线粒体膜电位降低或丧失,ROS增加,即CPT和HCPT诱导甜菜夜蛾细胞发生凋亡,为线粒体内途径。但经过20μmol/L CsA预处理2 h后再加入CPT和HCPT处理6 h,与0.1%DMSO组相比,细胞凋亡率、胞质Ca~(2+)浓度、线粒体膜电位及ROS产生均无显著差异(P0.05),即CsA抑制了MPTP的开放,从而抑制了CPT和HCPT诱导的甜菜夜蛾细胞凋亡;而加入CPT和HCPT处理12 h时,CsA对MPTP开放的抑制作用显著降低,与单CPT和HCPT处理组相比,细胞凋亡率、胞质Ca~(2+)浓度、线粒体膜电位及ROS差异不显著,即CPT和HCPT诱导的细胞凋亡如常发生。【结论】本研究证实喜树碱和羟基喜树碱诱导甜菜夜蛾细胞凋亡线粒体途径具有MPTP开放依赖性,且首次明确这种依赖性具有时间性。     

牙本质基质蛋白1在口腔鳞癌细胞中的表达

目的:观察牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)在舌鳞癌细胞Cal-27、Tca-8113以及人永生化表皮细胞Hacat中的表达情况,初步探讨DMP1与口腔鳞癌的相关性。方法:免疫荧光染色用于人永生化表皮细胞Hacat与舌鳞癌细胞Cal-27中,于共聚焦显微镜下观察DMP1在两组细胞的染色情况;采用Western blot方法,分别提取Hacat,Cal-27和人舌鳞癌细胞Tca-8113中DMP1蛋白并检测其含量。结果:通过免疫荧光实验观察到DMP1在Cal-27细胞及Hacat细胞中都表达于细胞质,同时发现DMP1在Hacat细胞中的荧光强度为41.2,高于Cal-27细胞荧光强度26.5;Western blot实验结果显示Hacat细胞中DMP1蛋白的灰度分析值为100和109,明显高于Cal-27和Tca-8113细胞的40.8和37.6。结论:DMP1在口腔鳞癌细胞和Hacat细胞中的表达存在差异,提示DMP1可能与口腔鳞癌的发生相关。     

沉默BCAT1对肺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:研究BCAT1在肺癌细胞A549的增殖、迁移及侵袭能力中的作用。方法:通过小干扰RNA(si RNA)沉默A549细胞中BCAT1的表达,细胞分为对照组(Con)、BCAT1基因沉默组(si RNA-BCAT1)和si RNA阴性对照组(si RNA-NC)。利用Western blot检测si RNA对BCAT1的沉默效果;划痕愈合实验检测沉默BCAT1后A549细胞迁移能力的改变;Transwell小室侵袭实验检测沉默BCAT1后A549细胞侵袭能力的变化;MTT实验检测沉默BCAT1对A549细胞增殖能力的影响。结果:与Con组相比,si RNA-BCAT1组的BCAT1蛋白表达明显降低(P0.05),细胞划痕愈合率明显降低(P0.05),能够穿膜的细胞数明显减少(P0.05),而Con组和si RNA-BCAT1组细胞的增殖能力比较差异无明显统计学意义(P0.05)。结论:沉默BCAT1抑制A549细胞的迁移和侵袭能力,而对其增殖能力无影响。     

水飞蓟宾对人肝癌HepG2细胞迁移的作用研究

目的观察水飞蓟宾对人肝癌(HCC)HepG2细胞迁移的作用。方法采用MTT法观察水飞蓟宾对HepG2细胞的增殖抑制作用,采用细胞划痕实验和Transwell小室法观察水飞蓟宾对HepG2细胞迁移的作用,通过RT-PCR方法检测迁移相关基因Twist、Snail和Slug的表达水平;采用单因素方差分析方法比较不同浓度水飞蓟宾对细胞活力、细胞迁移距离的和迁移细胞个数的影响,并比较各组间Twist、Snail和Slug的转率。结果 MTT检测结果显示不同浓度(0,30,60,120,240,480μg/ml)水飞蓟宾可以不同程度地抑制HepG2细胞增殖,同时呈现剂量依赖和时间依赖(P0.05);与对照组相比,HepG2细胞在划痕24 h后,水飞蓟宾组(60,120,240μg/ml)的迁移距离分别为(1.50±0.24)cm(P=0.046)、(1.20±0.33)cm(P=0.037)和(1.05±0.24)cm(P=0.029);Transwell实验中水飞蓟宾组(60,120和240μg/ml)细胞迁移个数分别为(100.00±4.25)个、(30.00±5.34)个和(6.00±2.28)个(P均0.05);PCR结果显示,水飞蓟宾不同程度的降低HepG2细胞Snail、Slug和Twist基因的转率。结论水飞蓟宾可抑制人HCC HepG2细胞的迁移。     

五步蛇毒AAVC-I对人口腔鳞癌细胞的增殖抑制作用

目的观察祁门五步蛇毒抑瘤组分I(Agkistrodon acutus venom component-I, AAVC-I)对人口腔鳞癌Tca8113细胞的增殖抑制及凋亡的影响。方法以离子交换和凝胶过滤法从安徽祁门五步蛇粗毒中分离纯化五步蛇毒AAVC-I。常规培养口腔鳞癌Tca8113细胞,观察正常细胞形态学。实验分为对照组(加入等量细胞培养液)和实验组(分别加入AAVC-I 2.5、5.0、10.0μg/ml)。采用MTT法检测不同浓度(2.5、5.0、10.0μg/ml)的AAVC-I对Tca8113细胞24、48及72 h的增殖抑制率,倒置显微镜观察不同浓度AAVC-I处理后的细胞形态变化,透射电镜及AO/EB双荧光染色观察AAVC-I对细胞凋亡的影响,并与对照组进行比较。结果与对照组比较,实验组AAVC-I对Tca8113细胞增殖具有明显抑制作用(P0.05);AAVC-I处理后,倒置显微镜下可见明显细胞凋亡现象,电镜下可见细胞核染色质、胞质浓缩及凋亡小体;AO/EB双荧光染色可见细胞膜完整,细胞核致密浓染,染成黄绿色荧光的早期凋亡细胞及细胞膜破损,细胞核浓聚及偏移,呈橘红色荧光的晚期凋亡细胞。结论祁门五步蛇毒AAVC-I能抑制人口腔鳞癌Tca8113细胞生长增殖,诱导其凋亡。     

下调脂肪酸合成酶表达对膀胱癌UMUC3细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响*

目的: 研究脂肪酸合成酶(FASN)表达对膀胱癌UMUC3细胞增殖、迁移、侵袭的影响,探讨其内在可能机制。方法:免疫组化法检测30例膀胱癌和15例正常膀胱组织FASN蛋白的表达;用脂质体2000分别转染FASN siRNA和无义siRNA至UMUC3细胞,筛选、鉴定siFASN和siControl稳定的细胞,siFASN组细胞设为实验组,siControl组设为对照组;采用蛋白印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法分别检测siFASN组和siControl组细胞FASN蛋白及mRNA的表达,MTT法检测siFASN组和siControl组细胞增殖情况,划痕试验、Transwell试验分别检测siFASN组和siControl组细胞迁移、侵袭能力。结果:FASN蛋白在膀胱癌组织中过表达,且与病理分期、分级密切相关(P＜0.05)。与siControl组相比,siFASN组细胞FASN mRNA及蛋白表达下调(P＜0.05),细胞增殖活力明显下降(P＜0.05),迁移能力明显下降(P＜0.05),穿膜细胞数量明显减少(P＜0.05)。结论:FASN过表达在膀胱癌发生、发展中发挥重要作用,下调FASN表达能抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,抑制FASN表达有望成为一种新的膀胱癌治疗方法。     

miRNA-145-5p调控FMNL2基因对口腔鳞癌干细胞增殖、迁移的影响

摘要 目的：分析miRNA-145-5p调控形成素2（formin-like 2,FMNL2）基因对口腔鳞癌干细胞增殖、迁移的影响。方法：按照脂质体2000说明书对细胞进行转染miRNA-145-5p inhibitor及miRNA-145-5p mimics,按照实验设计,将其分为空白组、沉默组（miRNA-145-5p inhibitor）及过表达组（miRNA-145-5p mimics）。荧光定量PCR法检测miRNA-145-5p、FMNL2表达量,MTT检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用Western blot法检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达量。结果：过表达组miRNA-145-5p、Bax蛋白表达量,凋亡率,细胞G0/G1比例高于沉默组,具有统计学差异（P＜0.05）;过表达组口腔鳞癌干细胞增殖率,FMNL2表达量、MMP-13、β-catenin、Bcl-2、APC蛋白表达量低于沉默组,具有统计学差异（P＜0.05）;过表达组口腔鳞癌干细胞迁移能力弱于沉默组,具有统计学差异（P＜0.05）。结论：miRNA-145-5p通过靶向调控FMNL2,作用于Wnt/β-catenin信号通路调控口腔鳞癌干细胞,进而抑制细胞增殖、迁移。     

健康青少年口腔正常菌群的初步研究

本文采用非选择性培养基对22名健康青少年的唾液、沟裂菌斑、龈上菌斑及龈下菌斑中的需氧菌、兼性厌氧菌及专性厌氧菌进行了分离培养,并计算其在不同标本中占可培养菌的百分比及检出率。结果共分离到包括18个菌属的35种细菌。其中,链球菌、放线菌、奈瑟氏球菌、二氧化碳噬纤维菌、类杆菌、梭杆菌,奴卡氏菌及棒状杆菌在口腔4个部位的检出率及所占比例均较高,是健康青少年口腔中的优势菌群.通过比较还发现,其中一些菌在口腔4个部位的分布存在一定差异.本文还采用刚果红负性染色涂片法,镜下观察龈上、龈下菌斑中的螺旋体,并计算其相对比例.结果龈下菌斑中螺旋体的相对比例明显高于龈上菌斑.     

Ovalbumin encapsulation into liposomes results in distinct degrees of oral immunization in mice

Oral administration of protein antigens, such as ovalbumin, may result in induction of either tolerance or immunization. To avoid oral tolerance, there are new strategies to protect the antigens from degradation within the gastrointestinal tract and to allow them to reach inductive immunological sites. One such strategy is the usage of liposomes. Different parameters may influence the stability of liposomes in the gastrointestinal tract. Herein, we studied the immunological consequences of oral administration of liposome-encapsulated ovalbumin in different strains of mice using different liposomes. Our data demonstrated that ovalbumin liposomes improved the induction of oral immunization and the degree of improvement depended on the liposome type and on the strain of mice used. The mechanism responsible for this differential effect of liposomes depended on the site of antigen release and absorption. Therefore, some liposomes might be suitable as adjuvants for oral immunization, others for oral tolerance induction.     

口腔微生态失衡导致口腔异味的研究

目的介绍口腔微生态失调与口腔疾病的关系,口腔疾病出现口腔气味异常的机制。综合分析口腔微生态与口腔健康的研究动态及意义。展望口腔微生态调整在口腔疾病治疗中的作用研究,尤其在消除口腔异昧的积极作用。方法由第一、二作者应用计算机通过pubmed检索NCBI数据库1992年至2007年相关文献,检索词为“Micro ecology”,限定语言种类为“English”;同时检索CNKI全文数据库、维普全文数据库1995年至2007年相关文献,检索词为“微生态”,限定语言种类为中文。纳入标准：文章内容与口腔微生态相关的研究、以及在口腔疾病研究领域有关。排除标准：较陈旧的文献和重复研究。结果共收集到106篇相关文献,21篇文献纳入本文,其中,19篇为综述和述评类文献,19篇为中文杂志,2篇为外文杂志。结论致病菌大量生长繁殖,口腔微生态失调,菌斑内微生物之间以及机体与菌斑之间相互作用分解蛋白产生硫化物,这些代谢产物包括H2S、CH3SH、CH3SCH3、吲哚、甲基吲哚、挥发脂肪酸和聚胺等发出刺激性气味,产生口腔异味。治疗口腔异味应该考虑平衡口腔微生态,调整口腔菌群。口腔异味的治疗又有利于口腔菌群平衡。提示我们治疗口腔疾病应该考虑口腔微生态平衡。     

低功率氩离子激光治疗口腔癌前病变的临床研究

目的对氩离子激光治疗口腔癌前病变的治疗机理、照射功率、方法及疗效差异进行探讨。方法 对５３例口腔白斑和扁平苔藓患者应用Ａｒ＾＋激光治疗,检查比较患者治疗前后的临床变化。结果 口腔白斑３１例全部治愈,治愈率１００％;口腔扁平苔藓２２例治愈１３例,显效７例,无效２例,治疗有效率９０．９％,总有效率达９６．２％。结论 氩离子激光治疗口腔白斑和扁平苔藓等清表的口腔慢性病损,不仅疗效显著,操作简便,并发症少     

大学生口腔保健知识态度行为调查与研究

目的:评价大学生口腔保健知识、态度、行为情况,为实施口腔健康指导计划提供基线资料。方法:采用随机抽样的方法,对314名青岛大学新生进行了口腔保健知识、态度、行为的问卷调查;其中男生151名,占总数的48%,女生163名,占总数的52%。结果:大学生对龋病知识的知晓率高,但牙周知识及牙周状况差。大学生认为定时拜访牙医有助于口腔疾病预防,口腔健康与全身健康密切相关,但约一半学生害怕就医或推迟就医。只有55.7%的大学生一天刷牙两次,25.5%的大学生没有接受过专业刷牙指导。在口腔保健知识、态度及行为方面,女生优于男生。结论:大学生缺乏牙周方面基础口腔保健知识,缺少专业的口腔卫生指导。结构合理的口腔健康教育系统亟需实施。     

正常口腔细菌与拔牙创干槽症的关系

本实验就11名非腐败坏死型拔牙创干槽症与8名腐败坏死型干槽症患者的拔牙创口的细菌进行了分离鉴定。结果表明两种类型的干槽症均为口腔正常菌群的混合感染,但在与某些特殊细菌的关系上却有较明显的差异,特别是与口腔专性厌氧菌增加的关系较大。本文提示患区各种细菌的比例与正常菌群的比例差异越大,则病变越重。本文的结果也说明了一些破坏正常生理结构的外科手术最终都将导致微生态失调或菌群失调,引起手术部位的病变。     

口腔白斑抑癌基因DAPK和TIG1高甲基化表达研究

摘要 目的：探讨抑癌基因DAPK、TIG1高甲基化在口腔白斑中表达状态及其对口腔癌发生发展中的作用。方法：取77例口腔白斑、32例口腔鳞癌、32份正常口腔黏膜组织,用实时定量甲基化特异性PCR技术检测组织中DAPK、TIG1高甲基化表达并进行统计学分析。结果：DAPK在口腔鳞癌组织中高甲基化表达率为46.9%,表达量为（0.0728±0.1617）,明显高于其在口腔白斑组织（19.5%,0.0070±0.0172）和口腔正常组织（18.8%,0.0021±0.0050）中的表达,差异有统计学意义（P<0.05）。DAPK高甲基化表达与口腔白斑组织上皮异常增生程度相关,上皮增生高风险组相对于低风险组DAPK高甲基化表达风险增加（OR,1.013;95% CI,1.004-1.023;P=0.004）。TIG1高甲基化在正常组织中未表达,在口腔鳞癌组织和口腔白斑组织表达为（28.1%,0.0174±0.0440）和（27.3%,0.0035±0.0076）,与正常组织相比具有统计学意义（P<0.05）。结论：抑癌基因 DAPK、TIG1高甲基化有望成为口腔黏膜癌变早期标志物。     

口腔微生物与全身健康研究进展

口腔微生物是定植于人体口腔的微生物集合。众多研究证实,口腔微生物与多种口腔感染性疾病及系统性疾病紧密相关。随着“人类微生物组计划”及其他微生物宏基因组学相关项目的开展,人们对口腔微生物群落的认识不断深入。本文基于最新研究进展,就口腔微生物的组成、演替特点、与口腔和全身系统性疾病的关系及与肠道微生物的交互作用进行综述。     

Isolation and identification of the oral bacteria and their characterization for bacteriocin production in the oral cavity

Oral cavity is a diverse ecosystem which harbors immense diversity of microorganisms like fungi, virus and bacteria. Some of these microorganisms are involved in causing multiple infections. Oral flora is continuously changing due to connection with the external environment and produce bacteriocin against each other to compete for nutrient in this mini ecosystem. Current study was aimed to explore and compare the bacterial fauna of both healthy and non-healthy dental samples, by isolation and identification with biochemical tests to characterize the bacteriocin production. During study 120 swabs were taken from both healthy and unhealthy subjects. Samples were collected from the dental clinics of Makkah City, in sterile eppendorfs containing 1 ml nutrient broth, and were incubated overnight using shaking incubator. Bacteria were isolated following identification through Gram staining, microscopy and biochemical test. Total 15 strains of bacteria were isolated during the study amongst which 8 strains were gram positive and 7 strains were gram negative. The most dominant species of the gram positive strains was Streptococcus pneumoniae (n = 26). On the other hand, Escherichia coli (n = 26) was the prominent specie amongst the gram negative strains. Overall, the dominated family was Enterobacteriaceae (19.36%) followed by Streptococcaceae with 13.83% abundance. One of the most cariogenic strain Klebsiella pneumoniae (n = 14) was also isolated. The bacterial strain diversity between these two type of ecosystem was approximately the same, with slight variation in Shannon (HS:2.627187, NHS:2.653594) and Simpson diversity (HS:0.923461, NHS: 0.92684) index. The current research revealed that bacteriocin production in the Enterobacter species was prominent against Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae. Apart from this other strains like Klebsiella pneumoniae and Exiguobacterium spp were also able to produce bacteriocin against Enterobacter species and Bacillus cereus respectively.     

益生菌对口腔微生物的影响

益生菌(Probiotic)是添加入食物的能够增加营养摄入并改善人体肠道菌群平衡的活菌。大量研究认为益生菌有促进人体健康的作用,目前研究主要集中在益生菌促进人体肠道菌群平衡的作用。口腔是消化道的起始端,最先接触到益生菌并且也有其特有的微生态系统,近年来越来越多的研究关注益生菌对口腔微生物的作用。本文主要从益生菌在口腔的定植,益生菌对口腔微生物群落的影响,益生菌对口腔细菌作用机制三个方面对近年来益生菌对口腔微生物的影响进行综述。