水稻Act1启动子融合的bar基因在转基因燕麦T3代中的表达

以微弹轰击法转化获得的含bar基因燕麦T3代为材料,运用Northernblot方法研究了bar基因在燕麦的不同生育阶段、不同叶位、以及Challenge(0.20%)处理后不同时间的叶片中mRNA水平的变化。结果表明,外源bar基因在燕麦的不同生育阶段、不同叶位、以及除草剂处理后转录水平没有明显差异。由于除草剂喷涂后,植株体内氨含量的变化能够反映bar基因编码的PAT酶活性的变化,因而测定了Challenge处理后不同时间、不同部位的叶片中氨含量的变化情况。结果发现,含bar基因的燕麦植株体内氨含量在除草剂处理后不同时间和不同部位都没有显著的变化,而对照植株体内氨的含量在除草剂处理后能迅速上升。这表明,含bar基因的燕麦植株体内由于PAT酶的稳定表达,而使氨的含量维持在较低水平。从转录和翻译两个层次上反映了水稻Actl启动子融合的bar基因在转基因燕麦T3中能够稳定表达,且表达水平不受叶位和除草剂的影响。     

水稻Act1启动子融合的bar基因在转基因燕麦T_3代中的表达

以微弹轰击法转化获得的含bar基因燕麦T3代为材料 ,运用Northernblot方法研究了bar基因在燕麦的不同生育阶段、不同叶位、以及Challenge(0 .2 0 % )处理后不同时间的叶片中mRNA水平的变化。结果表明 ,外源bar基因在燕麦的不同生育阶段、不同叶位、以及除草剂处理后转录水平没有明显差异。由于除草剂喷涂后 ,植株体内氨含量的变化能够反映bar基因编码的PAT酶活性的变化 ,因而测定了Challenge处理后不同时间、不同部位的叶片中氨含量的变化情况。结果发现 ,含bar基因的燕麦植株体内氨含量在除草剂处理后不同时间和不同部位都没有显著的变化 ,而对照植株体内氨的含量在除草剂处理后能迅速上升。这表明 ,含bar基因的燕麦植株体内由于PAT酶的稳定表达 ,而使氨的含量维持在较低水平。从转录和翻译两个层次上反映了水稻Act1启动子融合的bar基因在转基因燕麦T3 中能够稳定表达 ,且表达水平不受叶位和除草剂的影响     

在哺乳类动物细胞中呈现不同表达水平的T7启动子表达系统构建

将携带有Ｔ７噬菌体ＲＮＡ聚合酶基因的质粒和ｎｅｏ抗性基因质粒共转化ＣＨＯ细胞,经狭缝ＲＮＡ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交实验证实获得表达Ｔ７噬菌体ＲＮＡ聚合酶基因的细胞株。ｐＴ７ＣＡＴ质粒转染未表达和表达的细胞株,实验显示两者都能表达报道基因,但效率不同。实验构建了不同表达水平的Ｔ７启动子表达系统。     

表达barstar基因及bar基因的转基因油菜的研究

从细菌Ｂａｃｉｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ染色体ＤＮＡ中克隆了ｂａｒｎａｓｅ抑制剂ｂａｒｓｔａｒ的基因,构建了带有ＴＡ－２９基因５′调控区（－１３００－＋３）与ｂａｒｓｔａｒ基因编码区、ＣａＭＶ３５Ｓ启动子与除草剂抗性基因ｂａｒ两个表达框架的植物表达质粒ｐＢＢＳ。以“双低”油菜“５－４”的子叶柄为受体,通过农杆菌介导的遗传转化,获得了在含有１０ｍｇ／Ｌ卡那霉素和２０ｍｇ／ＬＰＰＴ的筛选培养基上再生的转基因植株。ＰＣＲ分析结果表明,ｂａｒｓｔａｒ基因已整合到油菜染色体上;Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测表明,ｂａｒｓｔａｒ基因及ｂａｒ基因在转基因植物中得到了正确的调控与表达。以转基因油菜“５－４”为父本授粉给表达ｂａｒｎａｓｅ基因的雄性不育植株,不育株能正常结实。     

人I型胶原基因第一内含子调节转录的研究

人Ｉ型胶原α１（Ｉ）链（ＣＯＬＩＡ１）基因内含子序列在不同细胞内有不同的转录调节活性,报道了含人ＣＯＬＩＡ１基因内含子Ｉ不同区段（＋５４４～＋８５５和＋８２０～＋１０９３）的重组质粒ｐＳＣＥＰ－ＣＡＴ和ｐＳＣＩＰ－ＣＡＴ的构建并转染人胚肌腱成纤维细胞和Ｔｃａ８１１３舌癌细胞,地高辛标记抗ＣＡＴ－ＥＬＩＳＡ检测结果显示：ｐＳＣＥＰ－ＣＡＴ在两种细胞均获表达;ｐＳＣＩＰ－ＣＡＴ在人成纤维细胞未表达,但     

吸湿—回干处理降低番茄种子电解质渗漏的机理研究

对吸湿－回干处理降低番茄种子电解质渗漏的机理进行了研究,结果表明,吸湿－回干处理降低番茄种子电解质渗漏的效应产生于吸湿阶段。随吸湿时间延长,电解质渗漏下降,而ＳＯＤ、ＣＡＴ活性上升。mRNA和蛋白质合成抑制对剂电解质渗漏下降与ＳＯＤ、ＣＡＴ活性上升均无抑制作用,表明吸湿处理降低电解质渗漏、提高ＳＯＤ、ＣＡＴ活性的作用mＲＮＡ和蛋白质合成无关,吸湿和吸湿－回干处理后Ｋ３Ｆe(CN)6还原活显著下降,表明的生理生化状态发生了某种变化。     

不同除草剂对青稞田野燕麦的防除及对青稞生长的影响

为筛选出高寒地区青稞田适宜的除草剂种类,明确不同除草剂对青稞生长、产量及品质的影响。采用单因素随机区组试验设计,研究甘南州高寒地区大田条件下爱秀、燕麦畏、大骠马3种常用除草剂对青稞田主要杂草野燕麦的防效以及对青稞品种黄青1号的生长、产量和品质的影响。3种药剂处理后田间杂草野燕麦株数明显降低,同时部分青稞苗有轻微发黄现象,但半月后可自行恢复正常。于野燕麦三叶期喷施爱秀,防除效果最佳,平均株防效达82%,平均鲜重防效达87%;燕麦畏土壤处理防除效果次之,大骠马防除效果较差。不同药剂处理后青稞株高、穗长、穗粒数、千粒重等均显著或极显著高于对照;爱秀、燕麦畏处理增产效果良好;不同药剂处理的青稞蛋白质含量、水分含量、淀粉含量变化不显著。总体看来爱秀处理对野燕麦的防除效果较好,并有较为明显的增产效应且对青稞的品质无显著影响,认为其是高寒地区青稞田较为适宜的除草剂类型。     

光地拟南芥微管蛋白基因表达的负调节作用

白光处理后拟南芥白化苗中的微管蛋白基因ｍＲＮＡ都有不同程度降低。白地中ＴＵＢ１的ｍＲＮＡ量很高,连续用白光处理白化苗２￣６ｈ,ＴＵＢ１ｍＲＮＡ降低。分析拟南芥幼苗根、下胚轴中的ＲＮＡ发现根中ＴＵＢ１基因转录水平不受白光影响。具子叶的下胚轴中ＴＵＢ１基因转录水平受白光抑制。白光对ＴＵＢ１基因表达的负调节具有组织特异性。     

从带烟草花叶病毒外壳蛋白亚基因组启动子的负链RNA产生正链RNA

克隆了能在植物中表达白喉毒素Ａ链基因（ＤＴＡ）负链ＲＮＡ的基因ＴＣＤＴＡＮ,这个基因的读码框５′端上游带有ＴＭＶ外壳蛋白基因５′端上游６３１个碱基,它的ＤＮＡ和ＴＭＶ－ＲＮＡ共转化烟草原生质体后,能抑制同时导入原生持体的堪因的表达,ＣＡＴ基因表达的抑制,是ＴＣＤＴＡＮ基因产生白喉毒素Ａ链蛋白的结果,ＴＣＤＴＮＡ基因上ＴＭＶ外壳蛋白基因５′端上游片段,是产生白喉毒素Ａ链ｍＲＮＡ的必要条件,只有用多量     

CAAT结合蛋白CBF在转录中的作用

ＣＡＡＴ结构是一种在真核生物启动子中普遍存在的顺式作用元件。ＣＢＦ,又称为ＮＦ -Ｙ、ＣＰ１,是一个ＣＡＡＴ特异性转录因子。在转录过程中 ,ＣＢＦ与ＣＡＡＴ特异性结合 ,共同调控启动子的转录 ,本文综述了ＣＢＦ的结构及其在转录中的作用。１ＣＡＡＴ结构ＣＡＡＴ结构存在于由ＲＮＡ聚合酶Ⅱ所转录的大多数真核生物基因的近端启动子中〔１〕,它与其他的启动子元件相互协调 ,一起控制启动子的转录活性。在高等的真核细胞启动子中 ,ＣＡＡＴ一般位于 -８０区〔２〕。对不同物种的某些基因进行比较 ,发现ＣＡＡＴ结构在启动子上的位置以…     

插入玉米Ds转座因子的水稻转化群体及其分子分析

转座子标签法是一种利用转座因子插入高等植物基因组中造成基因突变,然后通过分离转座因子插入的旁邻顺序,进而克隆出突变基因的策略。这种策略在高等植物功能基因组学的研究中是十分有用的,为此目的,将玉米的Ｄｓ因子及ｂａｒ基因连接至载体ｐＣＡＭＢＩＡ１３００的Ｔ－ＤＮＡ区域中,构建成重组Ｔｉ质粒ｐＤｓＢａｒ１３００。ｐＤａＢａｒ１３００中Ｔ－ＤＮＡ区域中的潮霉素抗性基因可在转化过程中用作水稻转化植株的选择标     

通过基因枪轰击转化获得转基因小麦植株的研究

利用ＪＱ－７００型高速基因枪将ｐＤＭ３０２质粒ＤＮＡ上的ｂａｒ基因即ＰＡＴ酶基因导入了冬小麦品种“农大１４６”的幼胚中。经过在含有的选择培养基上筛选,得到了９块具有ｐｐｔ抗性的愈伤组织。ＰＣＲ电泳检测与ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ发要交结果显示,外源ｂａｒ基因已转化进了由其中４块愈伤组织再生出的转基因的小麦植株中。     

水杨酸对黄瓜叶片抗氧化剂酶系的调节作用

分析了水杨酸（ＳＡ）对黄瓜（ＣｕｃｕｍｉｓｓａｔｉｖｕｓＬ．）叶片抗氧化剂酶系活性及活性氧水平的调节作用。不同浓度的ＳＡ（０．５ｍｍｏｌ／Ｌ、１ｍｍｏｌ／Ｌ、２．５ｍｍｏｌ／Ｌ、５ｍｍｏｌ／Ｌ）均能显著地提高被处理叶片超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化物酶（ＰＯＤ）活性,而且还能诱导同株的非处理叶片中ＳＯＤ和ＰＯＤ活性增加。用１ｍｍｏｌ／ＬＳＡ处理第一片真叶,在处理后６～７２ｈ,ＰＯＤ活性增加了２２％～６７％,同株非处理的第二片真叶ＰＯＤ活性增加了１４％～８６％,但是,在ＳＡ处理后３ｈ之前以及处理９６ｈ之后,ＰＯＤ活性没有变化。ＳＡ能够显著降低超氧物阴离子含量和提高过氧化氢水平,但它对过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性的抑制作用很弱,表明ＳＡ提高体内过氧化氢含量的原因主要是通过提高ＳＯＤ活性而不是抑制ＣＡＴ活性。同工酶分析表明,ＳＡ不能诱导新的ＳＯＤ同工酶,但可以诱导新的ＰＯＤ同工酶。     

冬小麦不同生育时期水分亏缺胁迫对叶片保护酶系统的影响

利用盆栽试验研究了施Ｎ（底肥）与不施Ｎ条件下冬小麦不同生育时期水分有限亏缺对叶片保护酶系统的影响,结果表明,在无底肥条件下,３个生育时期水分亏缺均使保护酶系统活性有所降低,而在有底肥时酶活性多数则升高,各保护酶活性与ＭＤＡ相关分析表明,苗期ＳＯＤ活性与ＭＤＡ呈极显著负相关;拔节却是ＰＯＤ活性与ＭＤＡ呈极显著负相关;在灌浆期ＳＯＤ、ＰＯＤ、ＣＡＴ与ＭＤＡ含量均无显著相关性,但ＭＤＡ在叶片中累积至较高水平。各生育期水分处理叶片绿素含量与ＭＤＡ含量达极显著负相关。这些说明在不同生育时期,受水分亏缺和供的,保护酶系统各酶的变化有明显差异。其生理作用也有差异。     

野生型及启动子区突变的HPFHAγ基因在MEL细胞中的表达

研究了野生型Ａγ珠蛋白基因、中国型胎儿血红蛋白持续存在综合症（ＨＰＦＨ）Ａγ基因（启动子区－１９６Ｃ－Ｔ突变）及希腊型ＨＰＦＨＡγ基因（－１１７Ｇ－Ａ突变）在鼠红白血病（ＭＥＬ）ＧＭ９７９细胞中的表达,比较每个整合的Ａγ基因明显增加的表达水平,而－１１７Ｇ－Ａ１９６Ｃ－Ｔ突变Ａγ基因未显示比野生型Ａγ基因明显增加的表达水平,而－１１７Ｇ－Ａ空变Ａγ基因在未分化的及ＨＭＢＡ或丁酸钠诱导分化的ＭＥＬＧ     

保水剂和微生物菌肥配施对旱作燕麦干物质积累、分配、转运和产量的影响

针对旱作燕麦产量低而不稳的现状,选取旱作农业栽培中应用较广泛的保水剂和微生物菌肥,通过田间试验,设置单施保水剂(A)、单施微生物菌肥(B)、保水剂和微生物菌肥配施(AB)和不施用保水剂和微生物菌肥(CK) 4个处理,探讨配施后对旱作燕麦不同生育阶段干物质积累、分配、转运和水分利用的影响,以期为提高旱作燕麦产量提供有效措施。结果表明:保水剂和微生物菌肥单施和配施均能影响旱作燕麦不同生育阶段不同器官干物质积累量及其分配比例,促进干物质量生育前期由叶向茎转运,生育后期由茎叶向穗、籽粒转运,且在对分配比例影响中仅有配施(AB)在全生育时期与CK达到显著性差异,其中拔节期茎分配比例、开花期和灌浆期穗分配比例、成熟期籽粒分配比例较其余3个处理分别提高13.13%～28.61%、21.46%～36.45%、0.26%～3.94%,同时配施各生育阶段干物质积累量和水分利用效率均保持较高水平,且在播种-拔节和灌浆-成熟2个阶段与CK达到显著差异,干物质积累量提高41.98%～55.14%和2.64%～90.92%,对应水分利用效率提高40.92%～71.04%和4.96%～96.35%;保水剂和微生物菌肥单施和配施均能提高燕麦花后干物质积累量及其对籽粒产量贡献率,最终提高旱作燕麦产量,其中保水剂和微生物菌肥配施后效果显著优于两种单施处理,配施后花后干物质积累量提高8.38%～22.92%,花后干物质对籽粒产量贡献率提高0.18%～2.26%,籽粒产量提高8.40%～20.12%。     

转基因棉花的遗传研究

选用不同来源的转Ｂｔ基因抗虫棉中棉所３０号和新棉３３Ｂ、转ｔｆｄＡ基因抗除草剂棉花材料ＴＦＤ,通过与不同主栽推广品种正反交和回交研究外源Ｂｔ基因和ｔｆｄＡ基因在棉花体内的遗传和分离行为。结果表明,由外源基因提供给转基因的抗虫和抗除草剂性状均是由一对基因控制的显性性状,且该性状不受细胞质效应的影响,符合孟德尔遗传规律。     

钙对水稻幼苗抗冷性的影响

ＣａＣｌ２浸种提高水稻幼苗叶片中结合态钙、内源抗氧化剂（ＧＳＨ、ＡｓＡ）含量和膜保护酶（ＣＡＴ、ＳＯＤ和ＰＯＤ）活性,也增加可溶性蛋白质中煮沸稳定蛋白质（ｂｏｉｌｉｎｇ－ｓｔａｂｌｅｐｒｏｔｅｉｎ）的含量。冷胁迫期间,ＣａＣｌ２并能减少因冷胁迫引起的ＧＳＨ、ＡｓＡ含量,ＣＡＴ、ＳＯＤ和ＰＯＤ活性以及煮沸稳定蛋白质下降的程度。在恢复期间,经ＣａＣｌ２处理的幼苗其ＧＳＨ、ＡＳＡ、ＣＡＴ、ＳＯＤ和ＰＯＤ以及煮沸稳定蛋白质水平均有回升。     

生育阶段小麦冠层的反射光谱特征及其模糊聚类的研究

测量不同生育阶段小麦冠以反射光谱,并使用傅叶滤波及导数法信号处理技术对反射光谱进行处理,找出能最有效区分作物不同生育阶段的波长和波段,用这些波长和波段对应的反射率为指标,用模糊聚类（ＦＣＡ）的方法对不同生育阶段小麦进行区分。     

利用电激法转化小麦幼胚的研究

利用我们实验自制的脉冲放电式电激仪ＨＰＥＳ－３,我们将含ｂａｒ基因即ＰＡＴ酶 ｐＤＭ３０２质粒ＤＮＡ导入了一个春小品种“Ｔ２００３”的幼胚中。经过在含有ｐｐｔ的选择培养基上筛选,得到了抗ｐｐｔ的愈伤组织和再生小苗。