SelS高表达保护人脐静脉内皮细胞免于H2O2诱导的细胞损伤

采用以下方法探讨SelS在内皮细胞中的表达和作用：将SelS基因克隆到真核表达载体pLNCX2，RT-PCR、XhoⅠ/ClaⅠ双酶切以及DNA序列分析验证目的基因；利用脂质体转染技术将pLNCX2-SelS或pLNCX2转染至人脐静脉内皮细胞(ECV₃₀₄细胞)，RT-PCR检测重组基因SelS的表达；MTT方法检测转染后过氧化氢(H₂O₂)对内皮细胞增殖能力的影响；硫代巴比妥酸法测定暴露于H₂O₂中不同转染组细胞脂质过氧化产物丙二醛含量. 结果表明：成功构建真核表达载体pLNCX2-SelS；转染后重组SelS mRNA表达水平是内源性水平的1.76倍；H₂O₂对ECV₃₀₄细胞损伤后，高表达SelS组细胞活性增强、H₂O₂诱导产生的丙二醛减少. 上述结果表明，高表达SelS可保护内皮细胞免于H₂O₂诱导的细胞损伤，其作用机制与抗氧化有关.     

骨保护素(Opg)基因敲除小鼠发生高转换型骨质疏松和动脉钙化

骨质疏松以及动脉钙化均是危害极大的临床常见病变，骨保护素 (OPG) 可能是联系两者的分子之一. 构建替换型载体pXpPNT-OPG，利用同源重组，将编码前3个蛋白质结构域的小鼠Opg基因组第二外显子序列剔除掉. 通过胚胎干细胞 (ES) 基因打靶获得了正确重组的ES细胞克隆，ES细胞显微注射后获得嵌合体小鼠，交配传代获得杂合子和纯合子小鼠. RT-PCR和蛋白质印迹实验结果显示，纯合子小鼠没有Opg基因的表达. 纯合子小鼠骨量丢失明显，骨生物力学指标明显下降，发生严重的骨质疏松，此外，还有50%以上的纯合子小鼠在早期出现动脉中层钙化. 小鼠破骨功能亢进，与此同时，成熟成骨细胞数量增加，矿化功能强于野生型. Opg基因缺失小鼠骨中钙和磷大量流失，而血清中水平没有变化，这提示钙磷代谢异常不是OPG缺失导致动脉钙化的原因. 对建立的Opg基因敲除小鼠模型进一步深入的研究，将有助于说明动脉钙化和骨质疏松症相互联系的分子机制，为防治骨质疏松症和动脉钙化的并发提供理论基础支持.     

表皮葡萄球菌SarA对atlE、lipA和zinC基因表达调控的研究

表皮葡萄球菌 (Staphylococcus epidermids) 是一种条件致病菌，SarA(Staphylococcal accessory regulator A)是该菌中一个全局性调控因子，它控制着细胞中许多与毒性相关的基因表达. 报道了SarA在转录水平直接调控atlE、lipA和zinC基因的表达. RT-PCR和lacZ报告基因的分析结果显示，在表皮葡萄球菌ATCC35984中，SarA对atlE (自溶酶基因) 表达起负调控作用，而对lipA (脂肪酶基因) 和zinC (膜相关锌金属蛋白酶基因) 的表达则有正调控作用. 生物信息学分析表明，SarA控制atlE，lipA和zinC 3种基因表达可能是通过与被调控基因上游的特定DNA序列的结合来实现的，该DNA结合区保守并富含AT碱基. 根据已报道的金黄色葡萄球菌中SarA的结合位点序列，利用Omiga软件分析并推测了SarA结合atlE，lipA和zinC的可能区域. 基于SarA是一种多功能的毒素相关调控因子，结果提示，SarA能调控众多因子，可以作为防治表皮葡萄球菌感染的一个药物筛选靶点.     

2007-2010年大兴区人民医院细菌耐药情况调查分析

目的调查分析北京大兴地区细菌耐药情况。方法选取我院2007-2010年度门诊及病房患者的尿液910例和痰液5471例，样本手工接种后，选取优势菌或高致病性菌使用细菌鉴定和药敏全自动分析仪进行全自动分析。结果细菌检出率排在前三位依次为铜绿假单胞菌（15．73％）、大肠埃希菌（14．18％）、肺炎克雷伯菌（10．11％）；金黄色葡萄球菌的耐药性最为突出。结论根据细菌耐药情况，选取合适的抗菌药物进行科学治疗，提高患者治愈率。     

传导式干燥机引入红外技术的探讨

传导式干燥机广泛应用于农副土特产品的干燥过程，干燥时辐射能量仅占总传递能量的５％。经计算，引入红外加热技术后，辐射能量所占比例由５％提高至１８％，从而降低了干燥介质（饱和水蒸汽）的消耗量。     

植物叶片中过氧化氢含量测定方法的改进

Ti（Ⅳ）-H₂O₂比色法因背景物质干扰而测得的植物叶片内H₂O₂含量偏高，5％三氯乙酸抽提，活性炭脱色，Ti（Ⅳ）-4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)比色法测得的H₂O₂含量偏低.萃取法有效地脱去丙酮提液中的色素，且H₂O₂的回收率在95％以上.用过氧化氢酶(CAT）处理作空白对照，利用H₂O₂与Ti（Ⅳ）-PAR的显色反应，建立了一种简便、快速、准确的植物叶片内的H₂O₂含量测定方法，H₂O₂的最低检测浓度为0.25 μmol·L^－1.用该方法测得多种植物叶片中H₂O₂的含量在0.1～0.8 μmol·g^－1.     

A549/DDP细胞的抗凋亡特性与其pHi和［Ca2+］i变化相关

以临床用药剂量(30 μmol/L)的顺铂处理敏感的人肺腺癌细胞A549和抗顺铂的A549/DDP细胞,在相同条件下培养.对培养不同时间的两株细胞DNA琼脂糖凝胶电泳分析的结果表明，前者在培养12 h后即呈现DNA梯子，而后者在培养48 h后却未见凋亡特征.用流式细胞计检测其凋亡峰也获得相似的结果.当测定与凋亡相关的生物化学和生物物理变化时发现对顺铂敏感的A549细胞的线粒体膜电势显著降低，胞内更加酸化且胞内钙离子浓度升高；而抗顺铂药物的A549/DDP细胞的线粒体膜电势和pH值却维持在相对较高的水平，而其胞内钙离子浓度随培养时间的延长下降.这些结果表明，抗顺铂的人肺腺癌A549/DDP细胞的抗凋亡特性与其胞内的相对碱化和较高的线粒体膜电势,以及胞内钙离子浓度的降低相关.这些特性可能参与了A549/DDP的顺铂耐药性的调节.     

川楝素对K+、Ca2+通道活动及细胞内Ca2+浓度的调控

川楝素是我国学者从驱蛔中药中分离、鉴定的一个三萜化合物，已证明具选择地影响神经递质释放，有效地对抗肉毒中毒，促进细胞分化、凋亡，抑制肿瘤增殖，抑制昆虫发育和取食，影响K⁺、Ca²⁺通道活动等多种生物效应. 综述了证明川楝素抑制多种K⁺通道，选择地易化L型Ca²⁺通道和进而升高胞内Ca⁺浓度的研究资料，并对川楝素产生这些生物效应的机制进行了讨论.     

肺结核患者治愈后复发危险因素分析及耐药状况调查

目的:研究肺结核患者治愈后复发危险因素以及耐药状况。方法:回顾性分析我院于2015年5月～2017年12月期间收治的1000例肺结核患者的临床资料。对所有患者均进行为期2年的随访观察,统计复发情况。将所有患者按照治愈后复发与否分成复发组58例以及无复发组942例,比较两组患者基线资料情况,包括年龄、性别、耐药、吸烟、职业类型、居住情况以及空洞,并对影响肺结核患者治愈后复发的因素作多因素Logistic回归分析,对所有治愈后复发患者的耐药情况进行检验,分析其耐单药、耐2药、耐3药、耐4药人数的占比情况。结果:1000例肺结核患者治愈后复发58例,复发率为5.80%。肺结核患者治愈后是否复发与性别、年龄、吸烟无关(P0.05),复发组耐药、体力型工作、流动人口、空洞患者的比例高于未复发组(P0.05)。经多因素Logistic回归分析可得:耐药、体力型工作、流动人口、空洞均是肺结核患者治愈后复发的独立危险因素。58例患者中发生耐药例数27例,耐药率为46.55%;其中耐单药、耐2药、耐3药、耐4药人数分别为8、10、7、2例,相应占比为13.79%、17.24%、12.07%、3.45%。结论:肺结核患者治愈后复发的风险较高,尤其应注意耐药、体力型工作、流动人口、空洞的患者,以降低疾病复发,且肺结核复发患者的耐药情况不容乐观。