微生物培养基质量控制技术和标准*

微生物培养基的酸碱度、凝胶强度和选择性等直接影响到培养基的质量,在理化试验方法中采用连接可渗透陶器型液体接头的电极和平头电极或者连接微型探头的电极可分别测定液体和固体培养基的pH值,而采用Gelometer和theLFRATextureAnalyser可测定固体培养基的凝胶强度。在微生物学方法中固体培养基采用倾注平板法、涂布法、划线法(半定量法)、改良的Miles-Misra法等测定生长情况,液体培养基采用稀释法测定生长率,用目标菌和杂菌的混合菌株评价选择性增菌培养基的选择性,利用OD值评价液体培养基生长     

高山红景天细胞悬浮培养中pH值对红景天甙胞外释放及细胞活性的影响

高山红景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor.)细胞悬浮培养中,通过降低培养基pH值能有效地诱导培养细胞中红景天甙的胞外释放。红景天甙的跨膜运输是一个与H~ 对运的动态过程,培养基pH值决定了红景天甙在胞内外含量的分布。细胞组织在pH值大于3的培养基中处理3h以内,对细胞活性的影响不大。将诱导释放处理过的细胞组织转入到新鲜的生产培养基中,细胞仍具有合成红景天甙的能力。     

碱蓬茎段培养再生植株的研究

将碱蓬(Suaeda Forsk)种子经消毒后分别接种在4种不同pH值的培养基上,两天后观察发现以pH 7培养基上的种子出苗最快,出苗率最高。6d时观察,在pH9的培养基上也有较高的出苗率。用上述无菌苗茎段为外植体,分别接种在4种不同生长素的培养基上均能产生愈伤组织,除含有2,4-D的培养基外,其它3组愈伤组织的诱导频率均达到100％。把愈伤组织移到添加BAP与IAA的分化培养基上,三个星期后由愈伤组织分化出不定芽,分化频率为12.5％。当不定芽长至1.5cm~2cm时转入生根培养基,两个星期后长出白色的根,获得完整植株。     

组织培养条件下喜树叶片细胞壁酸性降解的pH值观察

喜树叶片外植体经组织培养第13 d和23 d后进行解剖学观察,同时比较正常叶片的解剖学特征,发现在pH值为5.8的酸性培养基中,喜树叶片外植体中的海绵组织和栅栏组织等薄壁细胞相继发生明显的细胞壁降解,而表皮细胞发生较微弱的细胞壁降解现象;进行组织培养前,正常叶片的各类细胞未观察到细胞壁降解现象发生。应用BCECF-AM pH荧光探标记并采用激光共聚焦在480 nm波长下进行pH值测定发现,喜树叶片外植体经组织培养第13 d和第23 d后的海绵组织和栅栏组织等薄壁细胞部位的pH值均为5.2,但表皮细胞部位的pH值则为5.7~5.8,而正常叶片各类细胞的pH值平均为5.7。这说明, pH值为5.8的酸性培养基和喜树叶片薄壁细胞内的酸性成分自泌可能共同诱导了其细胞壁的酸性降解。     

环境保护上的应用

<正>鉴于某些工业废水中硝化作用阶殷II的抑止,研究了在用乙醇为有机碳源的培养基中,硝酸盐和亚硝酸盐的反硝化途径。在恒化器(保持培养基成分不变)或填料层反应器中,培养基含有硝酸盐并辅以乙醇,对连续培养的反硝化率进行了观察,并研究了氮浓度和pH的影响。用亚硝酸盐进行同样实验,两步填充层反应器调整了pH,并运用到用     

应用变色法筛选斑玉蕈优良杂交子

【目的】将变色检测方法应用于斑玉蕈优良杂交菌株的选育,缩短育种过程。【方法】采用分光光度计检测变色培养基的颜色变化,计算脱色率(D值)。【结果】变色检测培养基的颜色变化和脱色率(D值)是一致的,即培养基显示黄色时D值是正值,培养基显示蓝色时D值是负值。D值与斑玉蕈主要农艺性状具有紧密联系,D值是正值的菌株平均吃料速度比D值是负值的菌株快,单瓶产量和正常子实体数与D值呈正相关性,畸形菇数与D值呈负相关性。【结论】应用变色检测法可以快速简单地筛选出优良菌株,缩短斑玉蕈育种进程。     

微生物培养基质量控制技术和标准

微生物培养基的酸碱度、凝胶强度和选择性等直接影响到培养基的质量,在理化试验方法中采用连接可渗透陶器型液体接头的电极和平头电极或者连接微型探头的电极可分别测定液体和固体培养基的pH值,而采用Gelometer和the LFRA Texture Analyser可测定固体培养基的凝胶强度。在微生物学方法中固体培养基采用倾注平板法、涂布法、划线法（半定量法）、改良的Miles-Misra法等测定生长情况,液体培养基采用稀释法测定生长率,用目标菌和杂菌的混合菌株评价选择性增菌培养基的选择性,利用OD值评价液体培养基生长率等。ICFMH（国际食品微生物学和卫生学委员会培养基工作组）、ISO、FDA以及我国卫生部等相继制定了培养基质量控制的标准,但目前还没有一个系统的适合我国国情的培养基质量控制国家标准,以致各相关单位采用的标准不一致,所以制定培养基质量控制国家标准非常关键。     

验证细菌分布广泛性的实验

在《植物学》细菌一节中讲到,细菌的分布极广。但是,由于细菌的个体很小(一般只有1微米左右),学生不易看到,为了使学生能明确理解到细菌分布的广泛性,并养成爱清洁的习惯,设计了这个实验。现将实验过程及结果介绍如下: 实验用品培养皿、滤纸条、天平、量简、烧杯、电炉、pH试纸、蛋白胨、牛肉膏、琼脂、0.1N NaOH、0.1N HCl实验方法 1.做培养基称取蛋白陈2克、牛肉膏1克、琼脂4克,放入盛有200毫升水的烧杯中煮溶,用0.1N NaOH或0.1N HCl将pH值调至7.2,分装于五套培养皿中,高     

一株芦荟抗菌内生细菌的分离鉴定及生物学性质研究

从药用植物中华芦荟组织中分离出一株抗菌内生细菌A11#,该菌产生广谱抗菌活性物质,对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等革兰氏阳性细菌和植物病原真菌均有较强的抑制作用;通过形态学观察及生理生化特征测定,初步鉴定归属于芽孢杆菌属(Bacillus)。该菌在初始pH值为5．0～10．0的PDA培养基上生长旺盛,生长最适pH为5～7,培养液初始pH为6～10时发酵产生大量粘性物质;生长温度范围在10～45℃,最适温度28～37oc;在初始pH5．0和30．5℃条件下发酵,其发酵液抑菌作用最强;该菌所产抗菌物质能耐121℃处理30min而不影响其活性。在阿须贝无氮培养基上生长良好,在不加葡萄糖、蔗糖或淀粉的LB和牛肉膏蛋白胨培养基上不生长;同时还产生对高岭土有絮凝活性的物质。     

悬浮培养中不同理化因子对烟草发状根生长及烟碱合成的影响

悬浮培养中烟草(Nicotiana tabacum)发状根的生长及烟碱合成受到基本培养基浓度、初始pH值、激素种类和浓度等因素的影响。一个5 cm长的根尖, 悬浮在40 mL、pH值为6.0、附加1.0 mg.L－1IAA的1/2 MS液体培养基中, 28 ℃、散光条件下培养30天, 烟碱产量可达0.241 mg.mL－1。     

pH值检测器

目前,测定pH值是化学实验室最常用的分析方法。然而,pH值的测定往往会因为选用的物质材料不对或保养方法不当而受到影响,下面介绍一种测定pH值的简便方法:此种pH值的测定系统由4个部分组成:一个pH值自动检测电极;一个放大器,它可以将信号译为可供仪器操作者阅读的符号;一个参考电极;以及需要测定其pH值的样品。用玻璃材料制成的检测电极实际上是一个小电池,它随着浸泡它的溶液pH值的不同而     

测定根系溢泌H~+(HCO_3~-)的原位显色方法

植物在生长过程中通过溢泌质子和有机物质而引起根周围介质酸碱度的变化。本方法是利用pH指示剂在不同酸碱条件下变色的特点,测试根系溢泌H~+(HCO_3~-)引起的介质pH值的变化。指示剂为溴甲酚紫,变色范围为pH5.2～6.8,黄色～紫色,加入到琼脂溶胶中组成琼脂—指示剂,既可直接用作植物根系的生长介质,也可作用于生长着根系的土壤上,显示出根际土壤的pH变化。     

某些外界因子对真姬菇菌丝体生长的影响

本文报道了不周培养基、温度、pH值和碳,氮源对真姬菇菌丝体生长影响的研究。结果表明:真姬菇能在多种培养基上生长,其中在麦芽膏蛋白胨培养基上生长最好,在PDA综合培养基上生长较差:菌丝体生长最适温度为20—25℃,10℃或30℃生长缓慢,35℃不生长;pH5—8均能生长,其中pH6.5—7.0最适宜;对不同碳、氮源的同化吸收各异,其中碳源以麦芽糖、氮源以蛋白胨最佳。     

三种根瘤菌诱变菌株的形态特征及其与抗性的关系

用紫外线照射四季豆根瘤菌(R.Phaseoli)、豌豆根瘤菌(R.Leguminosarm)和花生根瘤菌(R.Peanut),然后观察其形态特征,并将不同形态特征菌落的菌株接种于不同pH值YEM培养基和不同NaCl浓度的YEM培养基上培养。结果表明,突变株的抗酸碱性和抗盐性随根瘤菌不同而异,并与其菌落形态有关。     

从水稻根切段直接发生体细胞胚（简报）

培养于含有生长素的MS培养基上的水稻无菌幼苗（7d龄）根切段可直接发生体细胞胚。在含2，4D2．2mg·L－1和NAA1．8mg·L－1或含2，4D3．1mg·L－1的MS培养基上，8d后就可观察到附着于根切段上的胚。2，4 D0．55mg·L－1＋KT0．2mg·L－1的培养基可促使体细胞胚的成熟和萌动，再转入含IAA1mg·L－1和6－BA2mg·L－1的1／2MS培养基上可再生小植株，并在盆栽后长成能育植株。早期体细胞胚的过氧化物酶活性较高，后随体胚成熟而下降，到萌动时又提高。     

嗜线虫致病杆菌产生抗生素的培养基及条件

本对嗜线虫致病杆菌（Xenorhadbus nematophilus）产生抗生素的发酵培养基和发酵条件进行了研究,同时对该菌代谢过程pH值、还原糖、总糖、氨基氮与抗生素产量的关系进行了分析,通过筛选该菌对碳源和氮源的要求,用正交试验初步确定了该菌产素的最佳发酵培养基和条件为：玉米粉1％,大豆粉3％,蔗糖1％,蛋白胨1.5％,KH2PO40.02％,MgSO40.2％,活化剂T0.1％;发酵培养基的起始pH值在6.0－8.0,种龄16h,接种量4％,500mL摇瓶装量15－150mL的条件下培养72h可获得较高的抗生素产量;产素量与菌代谢过程中pH、还原糖、总糖和氨基氮的变化有一定关系,通过培养基和培养条件的研究使该菌的产抗生素能力提高了56.3％。     

高温高压灭菌对MS培养基pH的影响

常规蒸气高温高压灭菌明显改变MS培养基的pH值。灭菌前营养液pH在5～7范围时,其平均降低值（-△pH）约为0．56。灭菌前pH为7～8或8～9时,则-△pH分别为0．87和1．13。文中还比较了灭菌时间、培养基体积、琼脂、脱脂棉、PVP、NaCl、CaCl2、蔗糖、活性炭等因素对灭菌过程中MS培养基pH改变的效应。     

橡胶炭疽病病原菌生物学特性初步研究

测试了7个来自云南省版纳地区的橡胶树炭疽病菌的菌株在不同培养基、温度及pH条件下的生长速率,观察了这些菌株在PDA上的菌落和分生孢子形态,测定了这些菌株的致病力。发现这些菌株的最适生长的培养基、温度、pH和对橡胶树的致病力存在明显的差异,对橡胶树的致病力有明显不同,菌落和分生孢子形态也存在可观察到的差异。     

屎肠球菌产生有机酸降低琼脂胶凝作用

目的探讨细菌破坏琼脂凝胶形成的原因和机制。方法利用细菌培养技术培养细菌;高压灭菌再融化琼脂-酵母培养基,室温下观察其是否凝固;利用硬度测量仪测量培养基硬度;pH测量仪测量pH值。结果首先,固体琼脂培养基在培养屎肠球菌之后再融化出现室温条件下不凝固现象;其次,pH是一个影响琼脂凝固性的主要因素;最后,屎肠球菌通过发酵产酸而降低pH,当pH值小于4时就破坏了琼脂的凝固性。结论细菌发酵产生酸性物质,降低了培养基pH,引起琼脂凝固点降低。     

细菌生化反应简易快速检验法

为了便于基层开展细菌检验工作,我们参考有关资料,设计了一种多用途的培养基和含各种不同糖(醇)类以及尿素、醋酸铅和吲(口朶)的干滤纸片(以下简称试纸片)。在一个平皿内用一种培养基就可以得出7—8种或更多的生化反应结果。各种试纸片在保存14年后,除吲(口朶)试纸片失效外,其余试纸片均与制备时的效果相同。现将试验结果作一初步报道。