凝胶过滤法及其应用

一种含有溶质分子大小不同的混合溶液,通过某种多孔性凝胶介质进行层析,从而使混合溶液中的多种成份依其分子量大小的先后顺序,加以分离和分级的方法,叫做凝胶过滤,或称凝胶层析,分子筛层析。凝胶介质的这种性能,称为分子筛效应。 凝胶过滤是六十年代兴起的一种生物化学分离技术。早在1926年,人们在石油化学工业中应用沸石时,就已提出了“分子筛”这个概念。1955年Lathe和Lindqvist都对淀粉凝胶的分子筛性能进行了研究。1959年Flodin和Porath详细报导了葡聚糖凝胶用     

也谈“分子筛”的提法问题

编辑同志:读贵刊1983年第2期龚划时同志“关于‘分子筛’提法的一点意见”一文深有同感。过去我们也曾就此进行过讨论,认为这一提法似乎不够确切,不利于人们(尤其是初学者)学习和掌握。或许有人会说,“分子筛”概念的内涵和外延都远远超出了机械之“筛”的概念。诚然,新近出版的《辞海》对“分子筛”释义道:它“泛指具有均一微孔而能选择性地吸附直径小于其孔径的分子的那些吸附剂。”从这个定义来看,凝胶层析中的葡聚糖等凝胶和电泳中的聚丙烯酰胺凝胶都是“分子筛”,但是,无论是从分离大分     

凝胶过滤

一九二六年MCBain在石油化学中应用沸石已经介绍了“分子筛”的名词。一九五五年Lathe和Ruthken对具有分子筛性能的淀粉作了详细的研究,同年Lindguise氏使用淀粉胶分离了肽和氨基酸。一九五九年Flodin和Porath报导了葡聚糖凝胶(dext-ran gel)在生化中的应用。     

关于“分子筛”提法的一点意见

凝胶层析(又称为凝胶过滤或分子排阻层析)是近年来发展起来的一种研究生物大分子的相当普遍的技术。它是根据被研究物质的分子量的不同,因而从凝胶柱上流出的先后次序不同的原理,来分离由不同分子量的物质组成的混合物,所以人们又称之为“分子筛层析”,把凝胶介质在层析中的物理作用称为“分子筛作用”。在涉及到凝胶层析技术的一些文献中,“分子筛”的提法是比较普遍的,但是从凝胶层析分离大分子物质的过程看,“分子筛”这一提法似乎不够确切。     

细胞膜表面钙受体

细胞膜表面受体一直是一个针对有机大分子的概念，近年许多研究表明在多种细胞表面存在钙受体，并发现此类受本不但在细胞外游离钙离子浓度的调节中起重要作用，而且与许多生理病理现象密切相关。本简要介绍其概念，分布，结构功能以及生理病理。     

一种改进的蛋白质超薄凝胶电泳方法

介绍了一种将聚丙烯酰胺凝胶固定在电泳夹板上的蛋白质电泳方法.通过此方法蛋白质电泳可以在0.4 mm厚的聚丙烯酰胺凝胶上进行.实验证明,经此方法处理的玻板结合凝胶非常牢固,在电泳后的所有处理步骤中都不会发生凝胶脱落现象.     

细胞骨架结构及其功能(续)

(二) 肌动蛋白纤维的相互作用 Kane于1975年发现将在低温下制备的海胆卵抽提物加温至正常生理温度时,会在体外形成一种结实的凝胶。此后发现从许多种细胞(例如变形虫、组织培养细胞、巨噬细胞和卵     

介绍一种蛋白、配体快速分离的方法——离心柱法

在我们的实验工作中,将生物大分子与配体分离或除去盐份,改变蛋白的缓冲体系的工作,可以说是每天都离不开。透析和分子筛层析等是常用的好方法。但透析方法的缺点是需要时间较长,对于不够稳定的样品也不适用。用分子筛柱可以较快分离,但普通柱层析方法往往导致样品的稀释而不可避免地造成损失。这里介绍一种快速、回收率高且不稀释样品的凝胶柱分离方法。由于这个方法首先由美国纽约城公共     

平板凝胶干燥方法的一些改进

最近国内介绍了一些子板凝胶干燥的方祛,其中蒋健箴等介绍一种真空干燥简易方法,干燥效果好,时间亦短,但操作较为烦琐,每次只能干燥凝胶一片。吴克佐等介绍的干燥方法,不需要抽真空,设备简单,干燥时间虽然稍长,但可以多片凝胶同时进行处理,适合一般试验室应用。使用该方法干燥时,温度和湿度的控制以及凝胶的处理等要求严格,不容易掌握,凝胶薄膜出现龟裂现象,成功率很低。作者经过多次试验,     

用高效液相色谱法鉴定细菌夹膜多糖菌苗的分子大小

<正>现已证明细菌夹膜多糖的免疫学性质与其分子大小直接相关。因此,在鉴定多糖菌苗的效力及稳定性时,分子筛分离的分子大小是主要的判定标准。 一种适宜的方法已用于脑膜炎双球菌及肺炎双球菌菌苗的测定。此法采用软凝胶如SepharoseCL—4B或Sepharose CL—2B作凝胶色谱基质。按待测多糖体分子大小选用适宜的凝胶型号,例如从     

凝胶干板的简易制备法

聚丙烯酰胺凝胶干板的制备方法,国内外已有许多介绍,但由于条件限制和操作复杂,总不尽如意。本文介绍三种较为简易的凝胶平板干燥制板方法,以供大家参考。     

聚乙二醇修饰重组溶葡球菌酶的初步研究

目的:探讨聚乙二醇(PEG)修饰重组溶葡球菌酶(lysostaphin)的反应条件以及修饰后产物的纯化方法.方法:采用超声波细胞粉碎机进行菌体破碎,阳离子交换层析、疏水层析进行蛋白纯化;在不同条件下,将活化的单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丙酸酯(mPEG-SPA)与纯化后的lysostaphin反应,以单个PEG-Lysostaphin的比例为指标,用SDS-PAGE、MALDI-TOF-MS方法确定其在修饰产物中的所占比例;采用Sephacryl S-200分子筛凝胶层析法对修饰产物进行分离纯化.结果:mPEG-SPA修饰lysostaphin的反应条件为pH 8.0,温度4℃,lysostaphin与mPEG-SPA的质量比为1∶5,反应时间2.0h;反应产物经一步Sephacryl S-200分子筛凝胶层析纯化后,初步实现分离.结论:初步确定了聚乙二醇修饰lysostaphin的反应条件及修饰产物的纯化方法.     

陕西蓝田地区旧石器的若干特征

1963-1965年期间,在陕西蓝田地区进行新生代地层调查工作中,发现了很多旧石器地点,采集了很多旧石器材料。关于这个地区的旧石器,曾有过一些报道,但只限于介绍个别的材料和地点。我们曾整理了在该区所积累的全部石器标本,查对了这些标本的地理和地层记录。在工作过程中,把全部资料联系起来进行分析,我们发现同一个时代的各个地点的石器材料,在打制技术上和类型上具有许多共同特征,而不同时代的石器材料各有其特色,彼此之间有所区别。蓝田地区旧石器材料上所反映出来的这许多现象看来是具有时代意义     

遗传信息调节的新机制—RNA校订

RNA校订(RNA editing)是近几年才被发现的新现象,它是指基因所转录的RNA有着与DNA模板不相应的顺序,从而导致遗传信息在从DNA到RNA传递过程中发生了改变。RNA校订可能与转录同时发生,也可能在转录后进行。1986年Benne等首先报道在一种原生动物锥形虫的线粒体中存在RNA校订,随后这一现象在其它许多生物中也被发现(见表1)。目前已经发现RNA校订大多有重要的生物学功能,有些RNA校订还有种属和组织特异性,受     

鱼糜凝胶劣化现象相关蛋白水解酶

鱼糜凝胶劣化现象发生在鱼糜凝胶化过程中,导致鱼糜制品凝胶弹性下降,品质降低。研究表明,引起鱼糜凝胶劣化现象的原因是鱼糜内含的蛋白水解酶的作用。与该现象相关的蛋白水解酶类有肌浆型和肌原纤维结合型之分。大部分肌浆型蛋白水解酶为水溶性的,可以在鱼糜制备过程中漂洗去除。肌原纤维结合型蛋白酶不能通过漂洗有效去除,是引发鱼糜凝胶劣化现象的重要相关酶类。已证实的凝胶劣化相关肌原纤维结合型酶类包括丝氨酸型蛋白酶和溶酶体型组织蛋白酶。     

玉米中的副突变系统

副突变是指一个特定等位基因被另一等位基因在转录水平上沉默的表观遗传现象,玉米是副突变研究的模式植物.结合玉米副突变研究成果,对涉及副突变的有关概念进行了介绍,系统描述了玉米中发现的副突变基因位点,并简要概括了副突变的发生机制及其模型.     

植物根部的水分倒流现象

介绍植物根部水倒流现象的概念及其在植物生理学、生态学和干旱地区农业生产中的重要性,以及近１０年来这一领域的研究进展。     

海马突触传递长时程增强效应中的逆行信使

海马突触传递长时程增强现象的突触机制研究取得了许多重要进展,其中特别是发展了突触前膜与突触后膜功能双向调控的概念,即观察了逆行信使的存在和作用,这对于理解和阐明学习、记忆的机制具有重要的理论意义。本文结合笔者的工作,重点介绍一氧化氮等所谓的逆行信使在突触传递长时程增强中的功能。     

球孢白僵菌转录因子BbMSN2与其结合基序变体的结合特性分析

球孢白僵菌是一种广谱性杀虫真菌,为了探索其转录因子BbMSN2识别启动子核心序列的能力,本研究外源表达并纯化了BbMSN2蛋白,合成了3个含有不同数量核心序列(AGGGG/ CCCCT)的核酸探针和6个核心序列点突变的核酸探针,将BbMSN2蛋白和核酸探针体外结合,通过凝胶迁移实验检测核酸探针及结合蛋白的迁移情况。研究发现,目的蛋白与含有核心序列的核酸探针结合时,核酸探针发生了凝胶迁移现象,其中核心序列数量对凝胶迁移的协同效益不显著。但目的蛋白与核心序列点突变核酸探针结合时,凝胶迁移现象明显减弱。上述结果表明,转录因子BbMSN2可以和含有核心序列核酸探针结合并发生相互作用,且对识别序列具有很强的特异性。本研究为深入探索BbMSN2转录调控机制奠定了试验基础。     

反义技术的研究进展及其应用

反义技术(antisense technology)是近年来发展起来的一项新技术,它从反向遗传学的角度发现了许多基因调控的新现象,在生命科学研究上带有革命性的意义。