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本文介绍一个不是雌激素受体(ER)却能专一地结合雌激素效应元件(ERE)编码单链的单链结合蛋白,对此蛋白在细胞中的定位、组织中的分布、热稳定性、同二价金属离子的关系作一初步研究。发现其受雌激素负调控。此蛋白在人病理样品29例乳癌中同ER的含量似有一定的负相关关系,讨论了上述结果的意义。 相似文献
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研究证明在许多生物大分子之间的相互作用中都有水分子的参与,但水分子理否参与真核基因转录调控中反式作用因子和顺式作用元件之间的结合尚未报道。本文以雌激素受体(ER)同32bp雌激素效应元件(ERE)体外结合为模型,对结合水分子的参与进行探索性研究。在凝胶阻滞分析反应系统中加入不同浓度的渗透剂甘油、蔗糖、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜,以调节反应系统的渗透压,随着渗透剂浓度的增大,ER-ERE的结合也随着增 相似文献
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利用体外翻译系统,翻译了能与雌激素效应元件(ERE)结合的全长的人雌激素受体(hER)。制备了切除卵巢的雌性大鼠子宫核抽提物,在雌激素存在下,此核抽提物能增强hER与ERE的结合。此核抽提物在50℃保温15min后,明显减弱了增强hER-ERE结合的作用。提示了核抽提物中存在着能增强hER-ERE结合的雌激素依赖的热敏感性的辅助因子。在大肠杆菌中表达了谷胱甘肽转硫酶(GST)融合的雌激素受体的DN 相似文献
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人的雌激素受体根据其氨基酸顺序的保守性可以分成6个区,其中最富于保守性的是DNA结合区和激素结合区。DNA结合区负责与专一的DNA顺序结合。激素结合区不仅能与配体(雌激素)结合,参与形成二聚体,而且具有激活靶基因转录活动等重要动能。雌激素受体蛋白-激素复合物可以被认为是一个受配体诱导的转录因子,它与具有增强子功能的DNA顺序结合后调节靶基因的转录活动。 相似文献
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核糖核酸酶A具有DNA结合蛋白的作用。本文报道,核糖核酸酶A经枯草杆菌蛋白酶作用后,被切断而形成一个20肽和s-蛋白。分离纯化后的s-蛋白完全丧失了水解RNA的酶活性,却完全保持着作为DNA结合蛋白的活性。这个结果说明核糖核酸酶A表现RNA水解酶活力与其同DNA的结合作用对结构的要求有所不同。对s-蛋白与双链及单链DNA结合作用的研究还表明,在这种结合过程中s-蛋白分子中的酪氨酸和苯丙氨酸残基的萤光发生淬灭作用,可能系因s-蛋白中的这些氨基酸残基直接参与了与DNA的结合,RNaseA经枯草杆菌蛋白酶作用切除s-肽后产生的s-蛋白的α-螺旋含量由RNaseA的17.5%增加到23.7%。 相似文献
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核糖核酸酶A具有DNA结合蛋白的作用。本文报道,核糖核酸酶A经枯草杆菌蛋白酶作用后,被切断而形成一个20肽和s-蛋白。分离纯化后的s-蛋白完全丧失了水解RNA的酶活性,却完全保持着作为DNA结合蛋白的活性。这个结果说明核糖核酸酶A表现RNA水解酶活力与其同DNA的结合作用对结构的要求有所不同。对s-蛋白与双链及单链DNA结合作用的研究还表明,在这种结合过程中s-蛋白分子中的酪氨酸和苯丙氨酸残基的萤光发生淬灭作用,可能系因s-蛋白中的这些氨基酸残基直接参与了与DNA的结合,RNaseA经枯草杆菌蛋白酶作用切除s-肽后产生的s-蛋白的α-螺旋含量由RNaseA的17.5%增加到23.7%。 相似文献
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雌激素受体α和β在不同雌激素干预大鼠骨代谢中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
应用雌性大鼠的骨质疏松模型,通过骨密度(BMD)检测、RT-PCR和Westernblot等技术观察去卵巢(Ovariectomy,OVX)、结合性雌激素(ConjugatedEquineEstrogens,CEE)和戊酸雌二醇(EstradiolValerate,EV)对大鼠松质骨骨量以及松质骨中雌激素受体(ER)α和βmRNA和蛋白表达的影响,探讨两受体亚型在介导雌激素参与松质骨代谢的不同作用机制以及不同来源雌激素对ERα和ERβ表达的差异性调节。40只7-8周龄的雌性Sprague-Dawley大鼠,在观察动情周期后随机分成四组:对照组(Control,n=10)、去卵巢组(Ovariectomy,OVX,n=10)、去卵巢后结合性雌激素治疗组(CEE,n=10)和去卵巢后戊酸雌二醇治疗组(EV,n=10)。对照组大鼠行假手术,其余三组行去卵巢手术。术后48天(12个动情周期),对照组和OVX组用生理盐水喂养12天(3个动情周期),CEE组和EV组分别用药物的生理盐水溶液喂养12天。结果显示:在对照组中,大鼠松质骨ERα的蛋白表达水平显著性高于ERβ蛋白表达水平,而ERα的mRNA表达水平显著性低于ERβmRNA水平。与对照组相比,OVX组大鼠松质骨中ERα的蛋白表达水平显著性降低,ERαmRNA表达水平显著性增加,而ERβ蛋白和mRNA的表达水平均显著性增加。与OVX组相比,CEE组大鼠松质骨中ERβ蛋白和mRNA的表达水平均显著性下降,而EV组大鼠松质骨中ERα蛋白表达显著性上升,ERαmRNA表达显著性下降,ERβ蛋白表达显著性下降。此外,OVX大鼠松质骨的骨密度下降均可通过应用CEE和EV得到显著性改善。上述结果提示:⑴ERα可能是大鼠松质骨中优势表达的受体亚型,在介导雌激素参与松质骨代谢中起着主导作用。⑵不同来源雌激素可能侧重不同的ER亚型途径产生骨保护效应。 相似文献
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目的:研究雌激素受体阳性乳腺癌中m TOR蛋白的表达以及与内分泌辅助治疗预后的关系。方法:选取2010年6月到2011年8月我院收治的雌激素受体阳性乳腺癌且接受内分泌辅助治疗的患者110例,应用免疫组化法检测患者乳腺癌组织中的m TOR蛋白的表达,观察其与临床特征和预后的关系。结果:m TOR蛋白表达阳性者68例,m TOR蛋白表达阴性者42例,m TOR蛋白表达阳性者存在较多的组织学特征;m TOR蛋白表达阴性者无病中位生存期为(56.8±1.1)个月,显著优于m TOR蛋白表达阳性者的(32.8±2.1)个月,比较差异具有统计学意义(P<0.05);多因素分析显示,m TOR蛋白表达阳性者出现肿瘤复发转移的风险是m TOR蛋白表达阴性者的3.21倍,且是影响预后的独立性影响因子。结论:m TOR蛋白的表达阳性是雌激素受体阳性乳腺癌复发转移的独立因素,在临床上可以联合m TOR抑制剂来治疗。 相似文献
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目的从人源化噬菌体抗体库(human single fold scFv libraries I+J)中筛选到能高亲和性、特异结合人禽流感病毒H5N1的单链抗体,为建立H5N1快速筛查试剂和人源化治疗单抗奠定基础。方法以H5N1病毒的血凝素(hemagglutitin,HA)蛋白和核蛋白(nucleoprotein,NP)为目的蛋白,对上述单抗噬菌体文库以亲和性为原理进行筛选,经过3轮筛选富集后,随机挑选了96个噬菌体克隆扩增培养,ELISA法挑选能特异性、高亲和性结合目的蛋白的噬菌体克隆,并换用HB2151宿主菌对阳性单链抗体克隆进行可溶性表达,ELISA法鉴定可溶性单链抗体的结合活性,PCR扩增阳性克隆的轻、重链基因片段,并对阳性单链抗体分子测序和序列分析。结果经过3轮筛选,分别从96个噬菌体克隆中挑选到了两株能特异结合NP蛋白、3株能特异结合HA蛋白的单链抗体,PCR扩增都得到了长为300、302和935bp的轻链、重链和轻链-连接片段-重链的基因片段,测序结果分析发现上述5条单链抗体片段在轻链的47、49、50、51、53、54、56、96、97、98和99位的氨基酸组成不同,而特异结合NP蛋白的单链在重链区域氨基酸组成完全相同,而特异结合HA蛋白的单链在重链的44、47、85、86、87、88和89位氨基酸组成不同。结论从噬菌体抗体库中筛选到的特异结合HA和NP蛋白的单链抗体片段,可为进一步研发H5N1快速筛选试剂和人源性治疗抗体奠定基础,也可为鉴定HA和NP蛋白中的抗原决定簇提供结构信息。 相似文献
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雌激素(Estrogen)是人体内常见的类固醇激素,它不仅仅在生殖系统中发挥重要作用,在神经保护方面也扮演重要角色。目前研究发现雌激素发挥作用的途径主要有两种:受体依赖途径及非受体依赖途径。可以协同表达神经营养因子,调节突触及轴突长度,上调抗细胞凋亡蛋白,舒张血管增加血流量,抗氧化应激,抗兴奋性氨基酸的毒性作用等发挥保护作用。近年来的研究发现雌激素还与线粒体的关系密切,线粒体功能在神经退行性病变的发生发展中有着举足轻重的作用,雌激素可以抑制线粒体内活性氧的生成,稳定线粒体膜电位及细胞内Ca2+稳态,减轻细胞的损伤。本文主要从以上几方面对雌激素神经保护作用进行讨论。 相似文献
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雌激素β受体研究进展 总被引:25,自引:1,他引:24
雌激素是由芳香化酶催化雄激素转化而来的。脑组织局部产生的雌激素不仅作用于生殖系统,也深刻影响着脑发育、学习记忆和认知等功能。雌激素的信号是由雌激素受体介导的,以前只发现了一种雌激素受体,这面临着许多无法解释的现象,新克隆的雌激素受体即β受体加深了人们对雌激素信号途径的认识,为全面阐明雌激素在不同组织中的作用机制提供了新的线索。 相似文献
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高通量筛选雌激素类化合物重组绿色荧光蛋白酵母细胞测评体系 总被引:2,自引:0,他引:2
以载体双表达的方式构建重组酵母环境雌激素的评价体系, 用于快速筛选雌激素类化合物。在表达载体中, 用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子驱动a人雌激素受体基因(hERa)的表达; 在报告载体中, 用雌激素效应元件(ERE)调控的绿色荧光蛋白(yEGFP)作为报告基因。将两者转化于酵母细胞(W303-1A)中, 构建成重组绿色荧光蛋白酵母细胞。该酵母细胞经不同浓度的雌激素类化合物作用后, 发现GFP的表达量与此类受试物具有明显的剂量效应关系。与其他环境雌激素酵母评价体系相比, 该重组酵母评价细胞, 在应用时不需要破坏细胞壁, 也不需要底物和相关试剂, 可直接在96孔板中操作完成, 具有快速、高通量、敏感性高、重现性好及廉价等特点。 相似文献
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MiyabenolC和KobophenolA与雌激素受体的结合位点 总被引:1,自引:0,他引:1
iyabenolC (MiyC)和kobophenolA (KobA)是两种新型的植物雌激素。为了探讨MiyC和KobA与雌激素受体 (ER)的结合部位 ,运用计算机辅助分子模拟构建它们与ER结合的空间模型 ,找出结合位点 ,设计ER的两个突变体M1ER(ERM517AG52 1D)和M2ER(ERE353GR394 G) ;运用PCR技术将ER与MiyC或KobA的结合位点进行突变 ;运用报告基因检测实验 ,检测MiyC和KobA对突变的ER是否具有激活功能。结果显示MiyC激活M1ER使之促下游基因转录的作用下降 ,KobA对M1ER无激活作用 ;MiyC和KobA对M2ER无激活作用。以上结果显示MiyC和KobA与ER的结合位点可能为ER的Glu353 、Arg394 、Met517和Gly52 1。 相似文献
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雌激素在生殖系统、认知记忆系统、骨骼和神经的发育及其功能维持等多种生理功能中扮演了重要的作用。雌激素可以通过结合到核雌激素受体Erα、Erβ来完成其生理功能。最近通过ER敲除鼠和选择性的抑制剂研究表明Erα在海马中具有重要作用。Erα在海马中的表达是否具有年龄和性别差异的研究较少,该文研究了Erα在不同年龄、不同性别的小鼠海马中的表达,并进一步比较了Erα在卵巢去除小鼠和对照小鼠中的表达差异。研究结果揭示了Erα在海马中的表达具有年龄和性别差异,暗示了Erα的表达受到外周雌激素水平的调控。这些结果为进一步研究雌激素和Erα在海马组织中基因表达的调控过程以及相关疾病的临床治疗提供参考。 相似文献
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总结植物雌激素(phytoestrogen,PE)在乳腺癌发病、发展过程中的研究进展。应用Medline、Embase、CNKI及VIP数据库检索"植物雌激素、乳腺癌"相关基础临床试验流行病学调查。PE作为非甾体结构的雌激素类似物,能够与雌激素受体结合产生作用。目前研究主要集中于PE通过雌激素受体对乳腺癌细胞的增殖、凋亡、自噬、周期的影响和信号传导通路的研究,体外实验PE有抑制乳腺癌细胞增殖、促进凋亡、自噬的作用,但是对转移的作用不明确,可通过PI3K/AKT和ROS/p38MAPK途径诱导凋亡,PE与ER结合或调整ERα/ERβ达到抑制乳腺癌细胞的作用,流行病学调查未发现PE对人体有害,鲜有临床报道。因此,本文对PE对乳腺癌的研究进展进行总结分析,旨在为乳腺肿瘤患者治疗提供新方向。植物雌激素有希望成为乳腺肿瘤患者治疗的新方向。 相似文献
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朱明华 《中国组织化学与细胞化学杂志》1995,(1)
应用免疫组化方法,对32例乳腺癌组织中肿瘤抑制基因p53蛋白的表达和雌激素受体的状态分别进行了检测。结果32例中p53蛋白阳性18例,阳性率56.3%,18例伴有同侧腋下淋巴结转移者阳性13例(72.2%)3而14例无转移者阳性5例(35.7%)二组阳性率差异显著(PMO.05)。32例中雌激素受体阳性17例,18例伴转移者阳性8例(44.4%);14例无转移者阳性9例(64.3%)。结果表明,p53蛋白的异常表达与乳腺癌的浸润转移有关,结合雌激素受体的检查,可作为临床预后判断一个有价值的标志。 相似文献