羌活属一新种

本文记载了中国伞形科特有属羌活属１新种细叶羌活     

羌活挥发油成分分析

从羌活、宽叶羌活的根茎及根中提取了挥发油,用气相色谱-质谱联用法分析挥发油的化学成分,共鉴定了136个成分(羌活78个成分、宽叶羌活58个成分),用气相色谱法测定了挥发油各成分的相对百分含量,其鉴定率分别达到94.90％和91.41％。     

中药羌活的研究

本文对中药羌活进行了本草考证,概括了羌活的化学成分、药理等方面的研究成果,并对羌活原植物的根进行了显微观察、薄层层析分析等,为正确鉴定药用羌活提供了资料。     

羌活与宽叶羌活的群体遗传结构和种间分化研究

为了合理利用羌活和宽叶羌活的药用植物资源,同时保护其物种多样性,该研究利用SSR分子标记技术对羌活与宽叶羌活邻域及异域分布的23个自然种群,共计227个个体进行多样性和种间分化研究。结果显示:(1)两个物种具有中等水平的遗传多样性;羌活的平均等位基因数(N_a)、有效等位基因数(N_e)和期望杂合度(H_e)分别为2.603、1.777和0.313,均高于宽叶羌活(分别为2.200、1.641和0.308)。(2)分子方差分析表明,两个物种的遗传变异主要存在于群体内,羌活和宽叶羌活群体间分化系数分别为0.181和0.191。(3)Structure聚类分析和主坐标分析(PCoA)将所有取样个体分为两大遗传组分,分别对应于羌活和宽叶羌活两个物种,二者间存在着有限的基因交流。研究表明,羌活与宽叶羌活物种间存在较高程度的遗传分化,并且遗传变异主要源自群体内,应各自划分为不同的地理单元进行多样性保护。     

中国特有属——羌活属的系统分类研究

对伞形疠羌活属Ｎｏｔｏｐｔｅｒｙｇｉｕｍ Ｂｏｉｓｓｉｅｕ植物进行综合研究,包括花粉形态,叶气孔类型以及叶柄、果实的解剖观察,在此基础上讨论了羌活属的系统位置,并对该属的特征、种类分布作了修订,文中列出该属的分种检索表。其中叶柄、果实的形态解剖以及气孔类型均为首次报道。     

伞形科3个种5个居群的核型分析

对伞形科前胡属(PeucedanumL.)2个种以及羌活属(NotopterygiumH.Boiss.)1个种3个居群的染色体数目和核型进行了研究。研究表明,它们的染色体数目均为2n=22,核型公式可分别表示为长前胡:2n=2x=22=22 m(1 SAT),属1A型;松潘前胡:2n=2x=22=20 m 2 sm,属2A型;宽叶羌活的3个居群分别是:马边大风顶居群1为2n=2x=22=6 m 12 sm 4 st,属2A型;马边大风顶居群2为2n=2x=22=12 m 4 sm 6 st,属2B型;屏山老君山居群为2n=2x=22=4 m 14 sm 4 st,属2A型。其中长前胡和松潘前胡的染色体数目和核型为首次报道。     

宽叶羌活不同部位有效成分的分布特征

采用HPLC-DAD法测定了青海省门源县和乐都县产宽叶羌活不同部位(根、茎、叶片、叶柄和种子)中绿原酸、阿魏酸、紫花前胡苷、补骨脂素、香柑内酯、欧前胡素、羌活醇和异欧前胡素的含量,探究有效成分在不同部位中的分布特征。结果表明,门源产宽叶羌活不同部位中活性成分总含量由高到低依次为根(52.812 mg·g-1)>种子(10.870 mg·g-1)>叶柄(6.607 mg·g-1)>茎(5.909 mg·g-1)>叶片(5.051 mg·g-1),乐都产宽叶羌活不同部位中活性成分总含量由高到低依次为根(80.104 mg·g-1)>种子(17.761 mg·g-1)>叶片(4.542mg·g-1)>叶柄(3.801 mg·g-1)>茎(3.632 mg·g-1),根部活性成分总含量均明显高于其他部位,与传统上以其根茎及根入药相符。地上部分各部位中,种子中活性成分总含量最高,羌活醇和异欧前胡素的含量之和也达到药典要求。紫花前胡苷、异欧前胡素主要富集于根部,绿原酸在全草中广泛分布,其他成分在全草中含量均较低。     

不同采收期栽培宽叶羌活挥发性成分的研究

采用水蒸气蒸馏法提取不同采收时间(5、6、7、8和9月)栽培宽叶羌活药材中的挥发油,测定其含量;通过GC-MS对挥发油成分进行了分析鉴定,并采用面积归一化法计算各组分的相对含量。实验结果表明,不同采收时间,栽培宽叶羌活挥发油含量存在差异,以8月份采收的药材挥发油含量最高;挥发油经GC-MS分析,共鉴定出39个化合物,有31种共有成分;对共有组分进行主成分分析显示,香桧烯、α-蒎烯、莰烯、β-蒎烯、γ-萜品烯、乙酸龙脑酯、α-红没药醇等15种成分可作为挥发油季节变化的特征组分。不同季节采集的羌活生药材,其挥发油含量和成分具有一定的差别,在一定程度上反映了其药用价值的微妙差异,可为羌活药材药理药用价值的进一步开发利用提供一定的参考。     

羌活药材活性成分的提取工艺研究

选择提取次数、溶剂倍数、提取时间为考察因素,以提取浸膏量及三种主要活性物质(紫花前胡苷、异欧前胡素、羌活醇)含量为考察指标,探讨羌活药材活性成分的乙醇加热回流提取工艺。在首先考察单因素对提取效果影响的基础上采用正交试验法,优选出羌活药材活性成分的最佳提取工艺参数:加6倍量95%乙醇,加热回流提取3次,每次提取时间为1 h。     

青海省不同地区羌活脂溶性化学成分的研究

采用毛细管气相-质谱法对青海省不同地区羌活脂溶性化学成分进行分析和鉴定,共分离出80余个成分,鉴定了60个,并用面积归一法确定其相对含量。结果表明,其化学成分以亚油酸、水菖蒲酮、十六烷酸及3,5-豆甾二烯为主,不同地区间羌活脂溶性化学成分种类和含量均有明显的差异。     

羌活地黄汤含药血清对兔关节软骨细胞增值及RANKL mRNA的影响

目的:观察羌活地黄汤含药血清对软骨细胞增值及RANKL mRNA(receptor activator nuclear factor kappa B ligand)表达的影响.方法:采用血清药理学和体外培养兔关节软骨细胞的方法,通过MTS/PMS系统检测羌活地黄汤含药血清对软骨细胞增殖的影响以及采用实时荧光定量PCR检测软骨细胞RANKL mRNA表达变化.结果:羌活地黄汤含药血清对体外培养的兔关节软骨细胞有促进增殖的作用,与实验对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05),羌活地黄汤含药血清组RANKL mRNA表达量低于同一时间节点的实验时照组.结论:羌活地黄汤含药血清能促进体外培养的软骨细胞增殖,同时能抑制软骨细胞RANKLmRNA的表达.     

重订羌活属的分类

在野外实地观察和标本整理的基础上,检查了羌活属各个分类群的分类问题,考证了它们的名称。通过性状分析,主要以小总苞片的形状及其相关特征作为属下分类的依据,将卵叶羌活N．oviforme 改隶于宽叶羌活之下作为亚种处理,支持张盍曾在1975年将 N.franchetii 与N.forbesii合并为1种。如此,该属共5种,其中1种含1亚种。描述了两个新组,对属的特征和地理分布作了补充。近年该属新增加2种,因此分种检索表也作了相应的修改。     

宽叶羌活和青海当归叶绿体全基因组序列比较分析和系统发育关系

以青藏高原两种特有药用伞形科植物为材料，对其叶绿体基因组进行比较研究，结果显示：宽叶羌活和青海当归的叶绿体基因组长度分别为142 184 bp、146 952 bp, GC含量分别为37.4%、37.60%，共有基因123、127个，SSR位点208、219个。系统发育分析显示青海当归与其他当归属植物同属一支且自展值为100，与宽叶羌活支持率不高。研究结果充实了药用植物的叶绿体基因组数据库，对伞形科属间水平关系提供了更多的系统发育数据。     

羌活光合作用日变化及其与生理生态因子的关系

以大田引种栽培的羌活植株为材料,用Li-6400便携式光合作用测定系统原位测定自然条件下生长的羌活孕蕾期叶片的光合速率光响应、净光合速率及生理生态因子日变化,并通过相关分析、通径分析和逐步回归分析探讨净光合速率与生理生态因子的关系.结果表明:(1)羌活净光合速率(P_n)、 蒸腾速率(T_r)、气孔导度(G_s)日变化均呈双峰曲线,其净光合速率具有典型的"午休"现象,并主要由非气孔限制因素造成;(2)影响羌活叶片Pn日变化的主要决定生理因子是G_s,主要限制因子是胞间CO_2浓度(C_i);主要决定生态因子是空气相对湿度(RH),限制因子是气温(T_a); G_s是影响净光合速率最重要的生理生态因子.研究发现,羌活有较强的适应弱光环境的能力,属于阳性耐荫植物,宜选择海拔和荫蔽度均较高的环境进行引种驯化栽培,以利于其生长和存活.     

濒危植物宽叶羌活天然居群cpDNA非编码区多态性分析

采用叶绿体DNA非编码区直接测序的方法,对青海、甘肃、四川3个省区内濒危植物宽叶羌活14个天然居群的遗传多样性和遗传结构进行了研究,以明确其遗传背景,为宽叶羌活的保护提供理论依据。结果表明:(1)14个居群138个个体的序列长度介于509~515bp;碱基组成A+T含量较高(平均67.6%)。(2)根据序列的核苷酸变异共鉴定出31个单倍型,其中9种单倍型(H5、H1、H9、H10、H16、H17、H19、H20、H22)为居群所共享,而且单倍型H5分布最广、在10个群体的67个个体中检测到,占总样品数的48.56%。(3)14个居群宽叶羌活具有高水平单倍型多样性(Hd=0.750 3)和较高水平核苷酸多样性(Pi=0.007 11),但31个单倍型没有按地理分布形成明显的族群,各地理单元中的单倍型相互混杂,没有明显的地理分化模式。(4)AMOVA分析、居群间分化度(FST=0.602 4)分析和基因流(Nm=0.330)分析的结果一致,表明宽叶羌活大部分遗传变异(60.24%)发生在居群间,居群间的基因流较低,群体间变异是宽叶羌活的主要变异来源。(5)14个居群的遗传距离在0.000~0.007,平均为0.003,表明居群间的亲缘关系较远,且居群间的遗传距离与地理距离之间无显著相关关系(P=0.143),说明宽叶羌活居群遗传变异的分布没有明显的地理趋势。研究认为,宽叶羌活居群间高的遗传变异可能是由基因流受阻、遗传漂变、地理隔离造成的,并提出了对该物种遗传多样性的保护策略。     

羌活本草考证及炮制历史沿革分析

通过历代本草、方书、医籍的收集整理并结合现代书籍、文献资料,对羌活的名称、基原、产地分布、性味、毒性和功能主治进行本草考证,对其古今炮制沿革进行梳理,为羌活的临床应用、炮制规范及基础研究提供参考.经考证可知,羌活入药记载于《神农本草经》,是作为独活的异名出现的.梁时期独活、羌活药材开始区分并非一物.羌活与独活在临床上开...     

地锦草脂溶性成分研究

采用硅胶柱层析的方法,从地锦草（Euphorbia humifusa Wild．）中分离得到5个化合物,经理化鉴别及波谱分析,鉴定为羽扇豆醇（1upeol,1）．cycloart-23E-en-3β,25-diol（2）．cycloart-23E-en-3β,25-diol（3）、cycloart-25-ene-3β,24-diol（4）、正十六碳酸α-甘油酯（1-glycerin hexadecylate,5）。化合物1～5均为首次从该植物中分离得到。     

4-羟基苯乙酸-3-羟化酶A重组表达菌株的构建及其对羟基酪醇的生物转化研究

目的:构建表达4-羟基苯乙酸-3-羟化酶A(4-hydroxyphenylacetate-3-hydroxylase A,HHA)的重组菌株,进而以酪醇为底物,利用重组菌株转化生产羟基酪醇。方法:选择大肠杆菌BL21(DE3)为模板来扩增HHA基因,经酶切后连接到表达载体p ET-28a中,获得重组表达载体p ET28a-HHA,将重组载体转化到感受态细胞BL21(DE3),在重组菌液中加入适量酪醇,利用胞内的重组酶对酪醇加羟基合成羟基酪醇,细胞离心后,分别采用薄层层析法和气质联用法检测上清液中羟基酪醇的转化结果。结果:IPTG诱导表达后,经SDS-PAGE分析获得分子质量分别为58.8k Da和18.5k Da的两条蛋白质条带。薄层层析法和气质联用法均检测到催化产物羟基酪醇的生成。结论:成功构建了表达HHA的重组菌株,该菌株可有效将酪醇转化为羟基酪醇。     

鞘氨醇激酶活性测定方法的建立及其初步应用

目的:建立生物样品中鞘氨醇激酶(SPK)活性和1-磷酸鞘氨醇(S1P)含量的测定方法.方法:用Flag标记的SPK基因表达载体转染ECV304细胞,用Western blot方法检测转染后SPK基因的表达,用酶促反应、同住素掺入和薄层层析的方法检测SPK的活性.提取细胞或组织的S1P,碱性磷酸酶消化去除磷酸根,然后利用SPK的催化活性和同位素标记的方法对S1P进行定量.结果:转染基因后细胞的SPK表达明显升高,活性显著增强,细胞内S1P的含量也明显增多.肝细胞生长因子(HGF)刺激能增强ECV304细胞SPK的活性和细胞内S1P水平.结论:建立了SPK活性和S1P含量的测定方法.