下丘脑室旁核胃动素对胃运动影响的探讨

目的 :研究下丘脑室旁核 (paraventricularnucleus,PVN)胃动素对胃运动调节的参与作用及机制。 方法 :应用免疫组织化学的方法检测室旁核内胃动素神经元的表达情况及室旁核与延髓迷走复合体 (dorsalvagalcomplex ,DVC)间的神经联系 ,应用室旁核内微量注入胃动素的方法观察清醒大鼠胃运动的变化。结果 :①下丘脑室旁核有胃动素免疫阳性细胞 ,在饥饿组和十二指肠灌酸组 ,阳性细胞数有明显增加 (P <0 .0 1)。②迷走背核注入辣根过氧化物酶 (horseradishperoxidase ,HRP) ,在室旁核发现HRP标记细胞 ,证实室旁核与DVC间的纤维联系。③清醒大鼠室旁核内微量注射胃动素可使胃运动的幅度和频率明显增加 (P <0 .0 5 ) ,切断双侧膈下迷走神经后 ,胃动素对胃运动的作用消失。结论 :下丘脑室旁核内胃动素可增强胃运动 ,其作用可能是通过下丘脑 延髓迷走复合体 迷走神经实现的     

大鼠脑室注射高渗氯化钠和蔗糖诱导饮水行为和脑内c—fos的表达

用ＳＤ种系清醒大鼠,观察脑室注射高渗物质引起的饮水及ｃ－ｆｏｓ在脑内的表达部位。实验结果表明,脑室内微量注射１．５ｍｏｌ／Ｌ、３ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ或３ｍｏｌ／Ｌ蔗糖均可诱导饮水反应,并在前脑的终板血管器官、正中视前核和下丘脑视上核与室旁核中见到Ｆｏｓ样免疫反应阳性细胞,同样在后脑的最后区、臂旁外侧核与孤束核中也能见到Ｆｏｓ样免疫反应阳性细胞,同样在后脑的最后区、臂旁外侧核与孤束核中也能见到Ｆｏｓ     

刺激大鼠穹窿下器官诱发饮水和脑内c—fos表达的胆碱能机制

实验以饮水行为脑内c-fos表达为指标,,观察刺激大鼠穹窿下器官（SFO）的效应,结果显示,刺激SFO能诱发明显的饮水行为,与此同时,前脑8个部位（终板血管器官,正中视前核,室旁核,视上核,下丘脑外侧区,穹窿周核背侧区,丘脑联合核和无名质）和后脑3个部位（最后区,孤束核和壁旁外侧核）的Fos蛋白表达明显增强,免疫组化双重染色结果显示,刺激SFO能诱导视上核和室旁核中部分神经元呈Fos蛋白和加压素共同表达。脑室注射阿托品能部分阻断刺激SFO诱发的饮水行为,脑内上述各部位所诱导的Fos蛋白表达也明显减弱,以上结果提示,M胆碱能机制参与 刺激SFO诱发的饮水行为和脑内Fos蛋白的表达。     

侧脑室注射肾上腺髓质素增加大鼠心血管相关核团中c-fos的表达并激活脑内一氧化氮神经元

本研究利用Fos蛋白和一氧化氮合酶(nNOS)双重免疫组化方法,观察侧腑脑室注射肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)对大鼠心血管相关核中c-fos表达及一氧化氮神经元的影响,以探讨ADM在中枢的作用部位并研究其在中枢的作用是否有NO神经元参与。侧脑室注射ADM(1nmol／kg,3nmol／kg)诱发脑干的孤束核、最后区、蓝斑核、臂旁核和外侧巨细胞旁核,下丘脑的室旁核、视上核才腹内侧核以及前脑的中央杏仁核和外侧缰核等多个部位的心血管中枢出现大量Fos样免疫反应神经元。侧脑室注射ADM(3nmol／kg),引起脑干的孤束核、外侧巨细胞旁核,下丘脑的室旁核、视上核内的Fos-nNOS双标神经元增加;ADM(1nmol／kg)亦可引起室旁核、视上核内的Fos-nNOS双标神经元增加,而对孤束核、外侧巨细胞旁核内的Fos-nNOS双标神经元无影响。降钙素基因相关肽(calcitonin gene—related peptide,CGRP)受体拈抗剂CGRP8-37(30nmol／kg)可明显减弱此效应。以上结果表明,ADM可兴奋脑内多个心血管相关核闭的神经元并激活室旁核、视上核、孤束核及外侧巨细胞核内一氧化氮神经元,此效应可能部分山CGRP受体介导。     

氨甲酰胆碱引起的促钠排泄与下丘脑TH—IR神经元活性的变化

目的：我们最近的实验发现大鼠侧脑室注射氨甲酰胆碱引起显著的促钠排泄作用,本工作同时还观察了下丘脑内不同脑区的儿茶酚胺能神经元活性的变化。方法和结果：氨甲酰胆碱注射后４０ｍｉｎ,下丘脑室旁核的腹侧和内侧小细胞部、内侧视前区、尾核、苍白球的酪氨酸羟化酶免疫反应（ｔｈｙｒｏｓｉｎｅｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ,ＴＨＩＲ）阳性细胞数减少,免疫反应染色强度降低;下丘脑室旁核的后部,下丘脑前区的后部、下丘脑室周核、弓状核、下丘脑外侧区的ＴＨＩＲ阳性细胞数增多,免疫反应染色强度增强。结论：侧脑室注射氨甲酰胆碱对脑内不同脑区的内源性儿茶酚胺能神经元分别有兴奋或抑制作用,其与促钠排泄的关系将在本文中讨论     

烫伤对大鼠下丘脑视上核、室旁核、垂体和血浆内皮素—1含量的影响

内皮素 (ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ,ＥＴ)在下丘脑含量很高 ,大鼠下丘脑ＥＴ主要形式是ＥＴ 1,也含有ＥＴ 3。Ｙｏｓｈｉｚａｗａ及蒋应明等报道下丘脑神经元能自身合成和表达ＥＴ 1,主要集中在视上核 (Ｓｕｐｒａｏｐｔｉｃｎｕｃｌｅｕｓ,ＳＯＮ)和室旁核 (ｐａｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｎｕｃｌｅｕｓ ,ＰＶＮ)部位 ,但其功能意义尚不清楚。ＥＴ对下丘脑—垂体—肾上腺轴具有调节作用 ,可促进应激情况下ＡＶＰ的释放。烫伤是一种强烈的应激刺激 ,同时又可引起体内渗透压的升高 ,因此推测重度烫伤可能影响下丘脑ＥＴ 1合成和分泌。本实验应…     

下丘脑室旁核微量注射DAGO或β-FNA对大鼠烫伤休克的影响

内源性阿片肽与烧伤休克有密切的关系。动物实验与临床研究均证实 ,烧伤后血浆及脑内内源性阿片肽含量显著升高 ,特异性阿片受体拮抗剂纳洛酮可抗烧伤性休克。我们以往的工作也证实 ,脑内一些区域烫伤后内源性阿片肽含量有明显变化 ,特别是下丘脑室旁核β 内啡肽含量在烫伤后有明显的升高。下丘脑室旁核是中枢神经系统调控心血管功能的重要部位 ,内源性阿片肽所起的作用及其机制 ,成为人们关注的课题。本工作在大鼠烫伤后 ,立即向下丘脑室旁核注射阿片 μ受体激动剂ＤＡＧＯ或其拮抗剂 β ＦＮＡ(β Ｆｕｎａｌｔｒｅｘａｍｉｎｅ) ,观察其…     

中国树鼩下丘脑视上核和室旁核内加压素和催产素能神经元的比较分布

应用PAP-PAAP双重免疫组化染色程序在同一切片上进行两种肽能物质的定位,观察了中国树鼩下丘脑视上核和室旁核内VP能和OT能神经元的比较解剖学分布,发现:视上核被视束分成主部和交叉后部。在视上核主部,其头侧部几乎仅含OT能神经元胞体,中间部VP能胞体出现并逐渐增多,尾侧部VP能胞体数目明显超过OT能胞体。在明显含有两种胞体的中间部和尾侧部,OT能胞体多位于背内侧,VP能胞体多位于腹外侧;在视上核交叉后部,其头侧部以VP能胞体为主,且多位于背外侧,OT能胞体多位于腹内侧。中间部OT能胞体多位于内侧,VP能胞体多位于外侧。尾侧部OT能胞体多位于背、腹两侧,VP能胞体则多位于中间;在室旁核,其头侧部几乎全由OT能胞体构成。中间部,VP能胞体出现并逐渐增多,OT和VP能胞体分别主要位于内、外侧。尾侧部两种神经元胞体较明显地分为内、外两群,内侧群主要为OT能胞体,外侧群几乎全为VP能胞体,该群的头侧半又可分为背腹两个亚群,至尾侧半,此二亚群渐合并。本文讨论了OT和VP能神经元在中国树鼩和大鼠视上核和室旁核内的比较分布。     

下丘脑室旁核orexin-A对大鼠摄食和胃动力影响及调控机制

目的:探讨下丘脑室旁核orexin-A对大鼠摄食和胃动力影响及调控机制。方法:采用免疫组化观察下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN)orexin受体表达情况;PVN注射orexin-A观察大鼠摄食、胃运动、胃酸分泌和胃排空的改变。结果:免疫组化实验显示大鼠PVN中存在orexin受体免疫阳性细胞。PVN注射orexin-A后,大鼠前三小时摄食增加,6 h和24 h摄食无显著改变。PVN微量注射orexin-A后,大鼠胃运动幅度和频率增加、胃排空增快并且胃酸分泌增多。[D-Lys-3]-GHRP-6可部分阻断orexin-A对摄食、胃运动、胃排空和胃酸分泌的促进作用,SB334867可完全阻断orexin-A对胃运动、胃排空和胃酸分泌的促进作用。结论:下丘脑室旁核orexin-A可能通过生长激素促泌素GHSR受体信号通路调控大鼠摄食及胃功能。     

膈下迷走神经切断降低LPS所致大鼠发热及室旁核神经元放电频率

目的：探讨迷走神经是否可以作为LPS信息由外周组织传入中枢神经系统的桥梁。方法：将Wistar大鼠随机分组,实验组为膈下迷走神经切断并给予LPS组,三个对照组为假手术生理盐水组,假手术LPS组,膈下迷走神经切断生理盐水组。用数字体温检测仪测定大鼠体温,用玻璃微电极记录正常大鼠和膈下迷走神经切断大鼠给予LPS前后下丘脑室旁核的单位放电。结果：体温变化：实验组大鼠体温变化值与假手术LPS组相比明显降低（P＜0．05）。单位放电变化：正常大鼠给予LPS后室旁核单位放电放电频率明显增加,膈下迷走神经切断大鼠给予LPS后室旁核单位放电频率无明显变化,结论：外周LPS信息可能通过迷走神经传递到脑组织。     

经脂多糖(LPS)处理免疫应答大鼠离体脑片视上核神经元对细胞因子敏感性的变化

实验采用离体脑片全细胞膜片箝记录方法 ,观察了细胞因子白介素 1β(IL 1β)和IL 2对大鼠离体脑片视上核神经元膜电位及自发放电的影响 ,以期探明免疫应答大鼠视上核神经元对细胞因子敏感性的变化。结果显示 ,用 10 0U/mlIL 1β灌流脑片 ,正常对照的 (n =15 )和脂多糖 (lipopolysaccharideLPS)腹腔注射 9d的大鼠视上核神经元 (n =2 0 )超极化 ,同时伴有自发放电频率的下降 ;应用 10 0U/mlIL 2 ,大部分正常对照视上核神经元 (n =14)表现为超极化 ,自发放电减少 ,剩余部分 (n =3)变化不明显 ;在LPS免疫 9d大鼠离体脑片上的 45个视上核神经元中 ,10 0U/ml的IL 2使其中 19个表现为去极化并伴有自发放电频率增加 ,16个变化不明显 ,其余 10个表现为超极化伴放电频率下降。以上结果表明 ,在免疫应答中 ,视上核神经元对细胞因子IL 2的敏感性 ,在一定的程度上发生了改变 ,细胞因子IL 2可能参与了视上核神经元的功能调节 ,进而在免疫应答过程中发挥了调节作用。     

孤束核参与刺激下丘脑室旁核的镇痛作用

本实验用电刺激鼠尾-嘶叫法测痛,观察电刺激下丘脑室旁核的镇痛效应,并采用核团损毁和核团内微量注射药物等方法分析其镇痛通路。实验结果如下:(1)电刺激下丘脑室旁核能产生明显的镇痛效应。同时,放射免疫测定发现脑干加压素含量升高。(2)损毁孤束核能取消刺激下丘脑室旁核的镇痛效应,但对基础痛阈无影响。(3)孤束核内微量注射加压素拮抗剂[d(CH_2)_5 TYr(Me)-AVP]60ng/0.6μl 和加压素抗血清0.6μl 都可明显对抗刺激下丘脑室旁核的镇痛效应。(4)直接在孤束核内微量注射加压素60ng/0.6μl,能模拟刺激下丘脑室旁核的镇痛效应。实验结果表明:电刺激下丘脑室旁核能产生镇痛效应,其机理之一可能是兴奋了下丘脑室旁核中加压素能神经元胞体,后者通过下行投射纤维在孤束核中释放加压素,影响孤束核神经元的活动,从而产生镇痛。     

化学刺激或电刺激大鼠穹窿下器官诱发的饮水行为和脑内c-fos表达

目的对化学刺激和电刺激穹窿下器官(subfornical organ, SFO)诱发的饮水量和脑内c-fos表达的结果是否不同进行比较. 方法向大鼠SFO内微量注射L-谷氨酸作为化学刺激,用恒流刺激SFO作为电刺激,记录诱发的1 h内饮水量,用免疫组化方法检测脑内Fos蛋白表达.结果电刺激和化学刺激SFO均能诱导相似的饮水行为,其诱饮率分别为75%和85.7%,1 h平均饮水量分别为(0.28±0.22) ml 和(0.31±0.15) ml ,明显高于各自的对照组(P<0.05),并均能使前脑的 11个脑区(终板血管器官, 正中视前核,室旁核,视上核,下丘脑外侧区,丘脑室旁核,联合核和中央内侧核,终纹床核,穹窿周背区和无名质)和后脑的4个脑区(最后区,孤束核,臂旁外侧核和中缝背核)相似的Fos蛋白表达.结论刺激SFO所诱导的饮水行为和脑内Fos蛋白表达是激活其神经元胞体的结果.     

寒冷对大鼠下丘脑核团癌基因c-fos及垂体ACTH细胞表达的变化

本实验用寒冷刺激大鼠,观察垂体ＡＣＴＨ细胞及下丘脑核团ｃ－ｆｏｓ癌基因表达蛋白出现的变化。发现寒冷能促使垂体前叶ＡＣＴＨ细胞数目增多,体积胀大,且具有粗大突起伸到扩张的血窦旁。在视交叉腹外侧的视上核（ＳＯ）神经元及视交叉上核（Ｓｃｈ）周围部神经元皆出现ｃ－ｆｏｓ强阳性反应。第三脑室侧壁室管膜上皮及少数室周核（ｐｅ）神经元为ｃ－ｆｏｓ阳性。视前内侧区（ＭＰＡ）可见分散的阳性神经元。位于室旁核内的外侧,出现ｃ－ｆｏｓ反应较浅的小神经元。本文最后探讨有关ＡＣＴＨ释放的调节。     

AVP免疫阳性反应在无蹼壁虎全脑的分布

目的为研究精氨酸加压素（Arginine Vasopressin）免疫阳性反应在无蹼壁虎全脑的分布。方法我们采用苏木素染色和免疫组织化学ABC法。结果发现AVP免疫阳性细胞在无蹼壁虎脑部的鲁卡斜角带核（nucleus of thedi—agonalband of Broca）、视上核（supraopticnucleus）、室旁核（paraventricular nucleus）分布较多,在室周视前区（periventricular preoptic area）、终纹床核（bed nucleusof the stria terminalis）、下丘脑外侧区（area lateralis hypothalami）、前脑外侧束（1ateral forebrain bundle）、室周核（periventricular nucleus）分布较少;AVP免疫阳性纤维除在嗅球、嗅束、大脑皮层、视叶、小脑皮层未见外,其它脑区均可见或多或少的阳性纤维;AVP阳性纤维在全脑投射广泛,且均与哺乳动物相似;AVP免疫阳性细胞数在PVN的6个部位呈中间阳性细胞数较多,两侧阳性细胞数较少（F=58．02,P〈O．001）。结论上述结果显示AVP免疫阳性反应在无蹼壁虎与哺乳动物脑区间存在相似性,提示AVP在无蹼壁虎脑区执行着类似于哺乳动物的生理功能。     

脑干去甲肾上腺素能神经元与室旁核、视上核的解剖及功能联系

由室旁核、视上核的传出径路分三条:大细胞部—神经垂体通路;室旁核—垂体门脉系统通路;室旁核—下丘脑以外脑脊髓区通路。脑干 A_1,A_2,A_6三群去甲肾上腺能神经元对三条通路的支配各具特异性,从而对室旁核、视上核的三大调节功能发挥整合作用。     

AT1受体在脑内胆碱能刺激引起的钠水排泄反应中的作用

目的和方法 :本工作通过整体实验和免疫组化的方法 ,观察脑血管紧张素能AT1受体在侧脑室注射氨甲酰胆碱引起的促钠排泄反应中的作用和下丘脑室旁核TH IR的变化。结果 :用脑血管紧张素能AT1受体阻断剂Losar tan( 2 0 μg)预处理 ,可部分阻断侧脑室注射氨甲酰胆碱引起的促钠排泄反应和利尿作用 (P <0 .0 5)。免疫组化实验显示侧脑室给予氨甲酰胆碱后 40min ,下丘脑室旁核 (PVH)、室周核 (Pe)、弓状核 (Arc)和下丘脑前区后部 (AHP)的酪氨酸羟化酶 (TH )免疫反应活性明显增强。Losartan预处理后侧脑室再注射氨甲酰胆碱 ,除PaPo的免疫反应活性未发生明显变化外 ,上述其余神经核团的TH免疫反应活性明显下降。结论 :在脑胆碱能刺激引起的钠水排泄反应中有AT1受体的参与 ;阻断脑血管紧张素能AT1受体对胆碱能刺激引起Arc、Pe和AHP的儿茶酚胺能神经元兴奋性有下调作用。提示脑血管紧张素能和儿茶酚胺能神经通路在下丘脑室旁核等脑区共同参与介导了脑内胆碱能刺激引起的促钠排泄反应 ,同时血管紧张素能神经元还影响儿茶酚胺能神经元的功能活动     

生后雌性小鼠下丘脑室旁核内ER-β表达的免疫组化研究

研究发现小鼠下丘脑室旁核(PVN)内雌激素β受体(ER-β)的表达与在大鼠等一些实验动物脑PVN的表达有差异,提示其在小鼠PVN内的表达可能有特定的生理意义。为了深入探讨ER-β在小鼠PVN内的功能,本文采用硫酸镍铵增强显色的免疫组化SP法研究了ER-β在生后雌性小鼠PVN内的表达。结果发现ER-β免疫阳性物质主要见于PVN的大细胞部,在小细胞部和背侧帽部免疫阳性细胞数目较少。免疫阳性物质主要位于细胞核内,未发现明显的胞浆或突起阳性,但在发育的某些时期可见免疫阳性细胞核局部呈现阴性反应。最高表达见于生后早期(第1-9天),随后表达降低,生后一个月即达到成年水平。PVN内ER-β的表达模式表现为生后早期表达高、随后降低,提示在该部位ER-β可能主要参与了对生后早期PVN的神经内分泌活动以及神经结构的发育与完善的调控,并可能与生后早期动物的应激、体重增加和脂肪代谢等有关。     

大鼠下丘脑内一氧化氮合酶阳性神经元的分布

用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法观察了大白鼠下丘脑内一氧化氮合酶（ＮＤＳ）阳性神经元的分布及形态特征。结果显示：在视上核、室旁核的大细胞部、环状核、穹窿周核、下丘脑外侧区、下丘脑腹内侧核、下丘脑背内侧核、乳头体区大部分核团均可见一氧化氮合酶阳性神经元聚集成团。在视前内侧区、视前外侧区、下丘脑前区、下丘脑背侧区、下丘脑后区、室周核、室旁核小细胞部及穹窿内可见散在的一氧化氮合酶阳性神经元。室周核内可见呈阳性反应的接触脑脊液神经元的胞体及突起。一氧化氮合酶阳性神经元大多可见突起,有的突起上可见１～２级分支,并可见膨体。下丘脑大部分区域内可见阳性神经纤维。弓状核内可见许多弧形纤维连于第三脑室室管膜和正中隆起。     

眼镜蛇毒对大鼠下丘脑视上核NOS表达的影响

目的观察眼镜蛇毒对大鼠视上核NOS表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、生理盐水组和眼镜蛇毒组,采用免疫组织化学染色法,观察并比较NOS阳性神经元在各组大鼠下丘脑视上核的分布情况。结果眼镜蛇毒组大鼠视上核NOS阳性神经元比生理盐水组、正常对照组表达明显增强(P0.01)。结论眼镜蛇毒对大鼠下丘脑视上核NOS的表达有上调作用。