石蜡包埋组织芯片制作的探讨

组织芯片(tissue chip)技术是将数十个到上百个的组织样本整齐有序地排列在同一张载玻片上而形成的微缩组织切片,又称组织微阵列(tissue microarray)技术.     

手工制作组织芯片方法的改良及其在肝细胞癌研究中的应用

组织芯片（tissue chip）,又称组织微阵列（Tissue microarray,TMA）,是指通过构建组织阵列蜡块将数十至数千个小组织排列在一张载玻片上而制成的组织阵列切片。作为生物芯片的新成员,具有体积小、信息量大、简便快捷的特点,并能将分子生物学和组织形态学相结合,满足基础和临床研究工作者的需要,具有广泛的应用前景。然而自动组织芯片制备仪价格昂贵,尚不能普及。[第一段]     

微波辐射在制做冰冻切片的应用

微波辐射在制做冰冻切片的应用胡海霞,熊正文,李春光,谷化平（中国人解放军第２５１医院病理科,张家口０７５０００）近年来微波辐射（ｍｉｃｒｏｒｗａｖｅｉｒｒａｄｉａｔｉｏｒ,ＭＷＩ）技术已广泛应用于常规石蜡切片的制做和组织化学及免疫组织化学染色等领域,...     

改良的石蜡切片技术在基础生物学实验教学中的应用

石蜡切片技术是一项在生物组织学及病理学研究中常用的实验技术。设计“斑马鱼性腺组织石蜡切片”实验,并将改良的技术转化为适合本科基础生物学实验教学的内容。该实验分为组织样本的处理和切片的制备两部分,每部分2~3个学时。通过该实验,学生可以掌握石蜡切片技术的实验原理、实验方法及光学显微镜的使用,并为后续免疫组织化学以及原位杂交等一系列实验的开展奠定了基础。     

果蝇胚胎石蜡切片制作方法的改良

探索一种不用在卵壳上手工打孔、适用于果蝇胚胎石蜡切片制作的方法。实验前期对果蝇胚胎进行渗透化处理,后期用琼脂糖、明胶、石蜡3种包埋辅佐剂对胚胎进行聚集、包埋、切片,最后进行HE及PASM染色。渗透化处理后的胚胎用琼脂糖或石蜡聚集并包埋后所制切片HE染色均显示胚胎形态结构正常,背景干净,而琼脂糖聚集法所制切片PASM染色背景呈灰色,明胶聚集法所制切片HE染色和PASM染色背景均显杂色且胚胎出现形变。3种包埋辅佐剂中,琼脂糖和石蜡均适于果蝇胚胎结构的保存,石蜡聚集法所制切片2种染色背景均无杂色,因此最适合做包埋辅佐剂。渗透化处理和石蜡聚集法结合后的改良方法适合于大样本且高脂含量的果蝇胚胎石蜡切片的制备。     

树轮生态学研究中微树芯石蜡切片制作的方法探讨北大核心CSCD

树轮气候学及树轮生态学研究在国内外取得了长足进展,但对树轮与气候的响应机制缺乏深入的了解,迫切需要进行以微树芯石蜡切片为基础的树轮生态学研究。形成层活动监测从生理生态学角度出发,广泛用于树轮对气候变化响应的机制探讨研究中,然而目前还没有对微树芯石蜡切片制作的方法作详细的论述和探讨。该文通过对祁连圆柏(Sabina przewalskii)等5个不同树种微树芯石蜡切片的制作实践,对已有的植物石蜡切片技术进行改进,增加组织软化的步骤,并对其他步骤作了相应的调整,详细介绍了微树芯石蜡切片制作的方法,为树轮生态学、解剖学,以及木材解剖学关于木质化材料石蜡切片的制作方法提供参考。     

Improved method of obtaining micro-core paraffin sections in dendroecological research

树轮气候学及树轮生态学研究在国内外取得了长足进展, 但对树轮与气候的响应机制缺乏深入的了解, 迫切需要进行以微树芯石蜡切片为基础的树轮生态学研究。形成层活动监测从生理生态学角度出发, 广泛用于树轮对气候变化响应的机制探讨研究中, 然而目前还没有对微树芯石蜡切片制作的方法作详细的论述和探讨。该文通过对祁连圆柏(Sabina przewalskii)等5个不同树种微树芯石蜡切片的制作实践, 对已有的植物石蜡切片技术进行改进, 增加组织软化的步骤, 并对其他步骤作了相应的调整, 详细介绍了微树芯石蜡切片制作的方法, 为树轮生态学、解剖学, 以及木材解剖学关于木质化材料石蜡切片的制作方法提供参考。     

形态学实验教学中正常与病理混合标本对照法的应用

石蜡切片是形态学实验教学微观部分的主要手段,传统的石蜡切片是在每块载玻片上仅有一个组织切片。为了更好地实现形态学实验课程的融合,不断更新实验内容,我们创新实验课内容,采用混合切片对照法,即在同一载玻片上放置同种组织器官的正常和异常组织混合切片标本块,其中一张为正常组织切片作为对照,其它一张或若干张标本则为同一器官相对应的异常组织切片。混合切片标本在实验教学的优势是,同一张载玻片上观察多个标本,既可节省实验操作时间和操作环节,还可以锻炼学生动手操作和熟练使用显微镜的技能。     

两种脱钙法植被鼠尾病理切片的比较

目的探讨制作大鼠尾巴标本石蜡切片的方法。方法采用盐酸脱钙液运用两种脱钙方法制作大鼠尾巴标本石蜡切片。结果两种方法制作的石蜡切片完整、无破碎,HE染色观察组织结构细胞形态完整,核浆分明,红蓝适度。结论两种方法都能制作理想大鼠尾巴标本石蜡切片,可保证病理诊断质量。     

两种切片方法检测肝糖原染色效果的比较

目的比较石蜡和冰冻两种不同切片用于检测牛蛙肝糖原的效果。方法采用石蜡和冰冻两种切片方法制作牛蛙肝脏切片,高碘酸希夫氏（periodicacid-Schiff＇s,PAS）染色法对肝糖原进行组织化学染色,光密度分析糖原含量。结果PAS染色显示肝糖原为紫红色或红色颗粒,冰冻切片中糖原颗粒明显大于石蜡切片,光密度分析显示,石蜡切片中糖原流失明显,与冰冻切片相比,糖原流失了约28％。结论两种切片均可用于糖原检测,冰冻切片制作环节较少、耗时短且染色过程中糖原不易流失。     

薄切片的放射自显影术

薄切片是指厚度为0．5～1μm的树脂类切片。文献中称它为厚切片（thicksection）或半薄切片（semithinsectio）,籍以与电镜观察用的薄切片（thinsection）区别。我国已习惯称电镜用的切片为超薄切片,因此,把这类切片称薄切片就能说明其比超薄切片厚,比普通石蜡切片薄的特性。用薄切片作放射自显影具有下列优点：（1）改善分辨力：放射自显影象的分辨力与样品的厚度成反比,薄切片的厚度低于普通石蜡切片,所以其分辨力高于用石蜡切片制作的放射自显影象的。（2）减少人工假象：用薄切片作放射自显影,不需去除包埋剂,因此,提供了平正…     

组织芯片技术的初步应用

制作组织芯片并初步应用 ,探讨组织芯片技术的优缺点。应用组织芯片技术制成 12 0例胃粘膜疾病组织芯片 ,采用免疫组织化学技术检测胃粘膜病组织芯片中 13种细胞周期调控因子 (Ubipuitin、p16、p2 1、p2 7、p5 3、p5 7、cy clinA、cyclinB、cyclinD1、cyclinE、CDK2、CDK4、CDK6)的表达。胃粘膜疾病组织芯片包含了慢性浅表性胃炎、肠化生、异型增生、肠型胃癌 4种病变 ,每张组织芯片上12 0个样品 ,排列整齐 ,外形为圆形。仅用 13张芯片即完成了全部实验 ,获得了胃粘膜疾病中 13种细胞周期调控因子 (Ubipuitin、p16、p2 1、p2 7、p5 3…     

动物组织徒手切片技术

本文说明一种新的动物切片法,通过十个基本步骤实现的徒手切片法,其特点是用一种高分子聚合物作材料包埋剂制成包埋块,用剃刀切成薄膜状切片。不用大型贵重仪器,优于石蜡切片法。是动物组织光学显微镜切片技术的革新。     

不同组织在石蜡包埋中的方法和体会

在石蜡切片制作过程中,组织包埋是一重要环节,不同组织和病变的包埋则有所不同,包埋位置直接影响切片和对病变的观察,现将我们在工作中的包埋方法和体会介绍如下：     

高压消毒蒸锅在石蜡切片免疫组织化学反应抗原恢复中的应用

将石蜡切片浸泡于１ｍｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ缓冲液（ｐＨ８．０）中,置入高压消毒蒸锅处理（１２０℃,１０３ｋＰａ）１０ｍｉｎ,以恢复组织中因甲醛固定而被封闭的抗原。结果表明,一些常规免疫组织化学反应呈阴性的组织抗原,经本法处理后呈阳性反应;对不经本法处理即呈阳性的组织抗原,可大大提高第一抗体的稀释度或缩短孵育时间。同微波方法相比,本法可一次处理数百张切片,且对切片和组织的形态无明显损害。因此是石蜡切片免疫组织化学反应组织抗原恢复的理想方法     

不同处理方式及试剂盒对石蜡包埋组织提取DNA影响

目的:比较石蜡包埋组织三种不同的前处理方式用不同试剂盒提取DNA效果,以期达到能根据各自实验室条件差异,选择合适的样本处理方式及相应的试剂盒,获得高质量DNA。方法:在提取DNA前,对石蜡块包埋的组织分别进行三种前处理,形成三种组织形式:切片机连续切片,手动刮取石蜡组织块后获得手刮片和切片后烤片制成的玻片,用Qiagen和Tiangen试剂盒提取DNA,并用琼脂糖电泳,PCR扩增和测序进行鉴定。结论:如果样本是玻片形式的石蜡包埋组织,可以选择改良过的Qiagen试剂盒提取DNA;样本如果是石蜡块包埋的组织,有切片机的,切片之后用Tiangen试剂盒提取DNA;而没有切片机的实验室可以选择用刀片刮取石蜡块组织,用Tiangen试剂盒提取DNA。     

石蜡切片的无胶贴片法

在石蜡切片制作中,为了防止切片脱落,一般采用梅氏(Mayer)蛋白、0.5％的明胶或白乳胶水溶液等作贴附剂来贴附切片,但贴附剂中的有机物在染色过程中会或多或少地吸附染料而着色,使背底和切片周围出现色斑,影响切片的质量。笔者探索了行之有效的无胶贴片法,现简介如下。以四孔恒温水浴锅作为石蜡切片伸展器,用5毫米厚的玻璃板取代铝片,将水浴锅盖严使水蒸汽无法外溢,将水温调至60—70℃,以切片展开后石蜡不熔化为度。贴附时,将干净的干燥载玻片放于水浴锅上的玻璃     

淋巴结组织切片HE染色的体会

目前,组织化学、免疫组织化学、电镜和ＰＣＲ等先进技术虽已用于淋巴系统疾病,尤其是淋巴系统肿瘤的诊断、鉴别诊断和研究,但是,石蜡切片ＨＥ染色仍然是临床病理诊断最常用的有效方法。由于淋巴组织结构复杂,组织处理不当时,常常难以获得理想的切片质量,给准确诊断带来许多困难,有时甚至造成误诊。影响淋巴结石蜡切片质量的因素较多,但我们认为关键应注意以下几个环节。１　淋巴结活检石蜡切片的应用淋巴结石蜡切片主要用于活检和穿刺组织的制片,为了获得准确的病理诊断、疗效判断和某些研究工作,需要高质量的ＨＥ染色切片。诊断…     

线粒体的两种染色方法比较

取材与制作：制做光镜下线粒体的显微标本,材料可来自动、植物的不同组织,但相同的材料用不同的方法染色其效果大不相同。笔者在制作该切片过程中,取材于小鼠空肠段和肾脏器官,用Ｒｅｇａｕｄ液固定,常规石腊包埋并切片３微米。将两种不同材料的切片分别用两种方法染...     

成熟玉米秆组织结构切片方法的比较研究

于玉米成熟期选择健壮茎秆的基部第三节间为材料,采用徒手切片法、冰冻切片法、石蜡切片法、薄切片法等4种方法,比较不同方法的玉米茎秆组织结构切片质量,为研究玉米茎秆结构与其倒伏的关系奠定技术基础。结果表明:徒手切片法是获得成熟玉米秆组织结构切片较为方便、快速的方法,切片面积较大,适合大范围观察统计;冰冻切片法是获得成熟玉米秆组织结构较快的方法,切片面积较小,适合小范围观察;薄切片是获得高质量成熟玉米秆组织结构切片的最好方法,但切片面积太小,适合高倍数显微观察和小范围电镜扫描观察组织结构;石蜡切片不适合作为成熟玉米秆的组织切片方法。研究认为,徒手切片法是最适合成熟玉米秆组织结构观察研究的制片方法。