新加良附方对移植性小鼠肝癌抑制率及其凋亡影响研究

目的:观察新加良附方对移植性小鼠肝癌(H22)生长抑制作用及其对肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达影响。方法:建立移植型H22动物模型,并将动物模型随机分模型对照、环磷酰胺(CTX)与新加良附方大、中、小剂量5组。新加良附大、中、小剂量组给药量分别为10g/kg、5g/kg和2.5g/kg;CTX组给药计量为17mg/kg;模型组给予等量无菌生理盐水。连续给药、给水12天处死模型小鼠分离肿瘤,检测肿瘤大小、称重计算肿瘤抑制率,并将肿瘤组织切片,免疫组化法检测Bcl-2和Bax基因。结果:新加良附大剂量组肿瘤抑制率为48.5%,与模型对照组比较,有统计学意义(P<0.01);新加良附大、中剂量可降低肿瘤组织中Bcl-2蛋白基因表达,升高Bax蛋白基因表达,与模型组比较,有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。结论:新加良附方可抑制H22瘤体生长,且下调Bcl-2蛋白基因表达,上调Bax基因,提示新加良附方在抗肿瘤方面具有进一步深入研究价值。     

EGCG对Tca8113细胞移植瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用研究

为了探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对Tca8113鳞状细胞癌细胞移植裸鼠肿瘤的抑制作用及其机制。本研究选取采用Tca8113鳞状细胞癌细胞建立的裸鼠肿瘤模型48只,采用随机数字表法分为空白组(等量生理盐水灌胃)、低剂量组(ECGC 10 mg/kg灌胃)、中剂量组(ECGC 20 mg/kg灌胃)、高剂量组(ECGC 40 mg/kg灌胃)各12只,连续灌胃治疗16 d,测量各组小鼠肿瘤重量及体积、计算抑瘤率,采用流式细胞仪技术测定各组瘤体组织中细胞生长周期的分布,采用免疫组化染色技术测定各组肿瘤组织中Caspase8、Caspase3、Ki-67蛋白的表达。研究显示,低剂量组、中剂量组和高剂量组的瘤体质量和体积均显著的小于空白组(p0.05),且随着EGCG剂量的加大,裸鼠移植瘤体积和质量逐渐减小,而抑瘤率显著增加(p0.05);低剂量组、中剂量组和高剂量组的G0/G1期细胞比例显著高于空白组(p0.05),而S期及G2/M期细胞比例显著降低(p0.05);随着EGCG剂量的增加,各组G0/G1期细胞比例显著增加,而S期及G2/M期细胞比例显著降低(p0.05);低剂量组、中剂量组和高剂量组的肿瘤组织中Caspase8和Caspase3表达显著高于空白组(p0.05),而Ki-67蛋白表达显著低于空白组(p0.05);随着EGCG剂量的增加,各组肿瘤组织中Caspase8和Caspase3蛋白表达显著增加,而Ki-67显著降低(p0.05)。EGCG对Tca8113鳞状细胞癌细胞移植裸鼠肿瘤生长具有明显的抑制作用,其机制可能是通过调节细胞周期及Caspase8、Caspase3和Ki-67蛋白的表达来实现。     

海藻色素糖蛋白对肝癌细胞Caspase-3和Bax蛋白表达的影响

目的：研究麒麟菜海藻色素糖蛋白（SPG）对肝癌细胞Caspase-3和Bax蛋白表达的影响。方法：将50只皮下接种H22肝癌细胞株的小鼠随机分为5组,每组10只。高、中、低剂量组分别每天经口灌胃给予100、50、10mg/kg的SPG,肿瘤对照组灌胃生理盐水,连续10d。环磷酰胺组隔天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg.bw。取肝癌组织用MTT法测定各组肝癌细胞增殖活性,免疫组化法检测各组肝癌组织Caspase-3和Bax蛋白表达水平。结果：高剂量组Caspase-3和Bax蛋白表达率分别为40.20%和38.10%,而肿瘤对照组分别为5.00%和4.68%,差异均有显著性（P〈0.05）。高剂量SPG组和肿瘤对照组的肝癌细胞增殖活性分别为0.711±0.028和1.135±0.032,差别有显著性（P〈0.05）。结论：SPG可促进肝癌细胞Caspase-3和Bax蛋白表达,诱发肝癌细胞凋亡。     

海藻色素糖蛋白对肝癌细胞Caspase-3 和Bax 蛋白表达的影响

目的:研究麒麟菜海藻色素糖蛋白(SPG)对肝癌细胞Caspase-3和Bax蛋白表达的影响。方法:将50只皮下接种H22肝癌细胞株的小鼠随机分为5组,每组10只。高、中、低剂量组分别每天经口灌胃给予100、50、10mg/kg的SPG,肿瘤对照组灌胃生理盐水,连续10d。环磷酰胺组隔天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg.bw。取肝癌组织用MTT法测定各组肝癌细胞增殖活性,免疫组化法检测各组肝癌组织Caspase-3和Bax蛋白表达水平。结果:高剂量组Caspase-3和Bax蛋白表达率分别为40.20%和38.10%,而肿瘤对照组分别为5.00%和4.68%,差异均有显著性(P<0.05)。高剂量SPG组和肿瘤对照组的肝癌细胞增殖活性分别为0.711±0.028和1.135±0.032,差别有显著性(P<0.05)。结论:SPG可促进肝癌细胞Caspase-3和Bax蛋白表达,诱发肝癌细胞凋亡。     

苦参碱对小鼠S_(180)肉瘤细胞凋亡及对FAS/FASL信号途径的影响

本研究探讨苦参碱对肉瘤小鼠肿瘤生长和凋亡的影响,及其对FAS/FASL信号途径的影响。建立S_(180)肉瘤小鼠模型,30只小鼠分为5组,每组6只,分为对照组,10 mg/kg苦参碱、25 mg/kg苦参碱、50 mg/kg苦参碱和5 mg/kg顺铂,对照组采用生理盐水灌胃,苦参碱组采用不同浓度苦参碱灌胃,顺铂组顺铂腹腔注射3天,饲养12天后取出瘤体,测定瘤体重量。TUNEL法检测肿瘤组织凋亡,测定Caspase-8活性,免疫组化检测FAS/FASL,Western blot检测FAS/FASL和Caspase-8蛋白表达。与对照组相比,10、25、50 mg/kg苦参碱组瘤体重量显著减小,瘤体细胞凋亡率显著增加,均具有显著统计学差异(P0.01),且具有浓度依赖性。与对照组相比,10、25、50 mg/kg苦参碱组瘤体组织Caspase-8活性显著增加,FAS/FASL及Caspase-8蛋白表达增加,均具有显著统计学差异(P0.01),且这些作用与苦参碱浓度呈现正相关趋势。与顺铂组相比,25和50 mg/kg苦参碱组瘤体重量显著减小,瘤体细胞凋亡率显著增加,FAS/FASL及Caspase-8蛋白表达和Caspase-8活性显著增加,均具有显著统计学差异(P0.01)。苦参碱能够促进肉瘤小鼠肿瘤组织的凋亡,并且该作用与上调FAS/FASL表达及活化Caspase-8有关。     

丹参酮ⅡA对大鼠移植性肝癌的抑制作用

目的:观察丹参酮Ⅱ A对大鼠移植性肝癌的抑制作用.方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参酮ⅡA高、低剂量组.各组动物于移植术后12d处死.分离肿瘤测量其体积,realtime RT-PCR法和western blot法检测肿瘤组织中HMGB1、VEGFmRNA和蛋白的表达.结果:丹参酮ⅡA能明显降低肿瘤体积,降低肿瘤组织中HMGB1、VEGFmRNA和蛋白的表达.结论:丹参酮ⅡA能抑制大鼠移植性肝癌的生长,其机制可能与抑制HMGB1、VEGF表达有关.     

大蒜素对大鼠实验性大肠癌的作用及其机制研究

本研究旨在探讨大蒜素对实验性结肠癌大鼠的治疗作用及其作用机制。运用二甲肼30 mg/kg腹腔注射,每周注射1次,连续应用20周,成功建立实验性大鼠大肠癌模型,造模同时给予大蒜素注射液治疗。观察各组大鼠一般状态、脾脏指数、胸腺指数和组织病理学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中CD44V6和VEGF水平变化。Western blot法检测大肠组织中survivin、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-7的蛋白水平变化。实验结果显示第32周实验结束时,模型组大鼠平均体重与正常组相比显著降低(P0.05)。大蒜素高、低剂量组大鼠体重与模型组相比显著增加(P0.05)。大蒜素高、低剂量组大鼠平均胸腺指数、平均脾脏指数与模型组相比显著增高(P0.05)。而大蒜素高剂量组胸腺指数、脾指数显著高于大蒜素低剂量组(P0.05)。模型组肿瘤发生率、荷瘤数及肿瘤转移率均显著高于各给药组(P0.05)。模型组大鼠血清CD44V6和VEGF水平显著高于正常组(P0.05)。大蒜素高、低剂量组血清CD44V6和VEGF水平与模型组相比显著降低(P0.05)。而与低剂量组相比,大蒜素高剂量组二项指标水平增加更为显著(P0.05)。模型组大鼠大肠组织survivin、Caspase-3和Caspase-7表达水平显著高于正常组(P0.05)。但与模型组相比,大蒜素高、低剂量组survivin表达水平显著降低,而Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-7表达水平显著升高(P0.05)。提示大蒜素对二甲肼诱导的实验性大鼠大肠癌具有良好的防治作用,可有效抑制大肠癌的发展及转移,其机制可能通过一方面增强大鼠体质,提高大鼠免疫功能,另一方面调节CD44V6和VEGF的水平来抑制肿瘤内血管的生成和浸润转移,同时抑制survivn基因的表达,上调Caspase-3和Caspase-7水平,从而促进癌细胞的凋亡。     

淫羊藿苷调控NLRP3炎症小体抗脑缺血再灌注损伤机制

目的 探讨淫羊藿苷调控NLRP3炎症小体治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法 采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。术后24 h将大鼠随机分为假手术组,模型组,丁苯酞组(70 mg/kg),ICA低剂量组(20 mg/kg)、ICA中剂量组(40 mg/kg)、ICA高剂量组(80 mg/kg),灌胃相应药物10 mL/kg,每天给药1次,连续给药13 d。末次给药1 h后进行神经功能评分,苏木素-伊红(HE)染色法对大鼠大脑皮层进行病理学观察,免疫组化法测定大鼠大脑皮层白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定大鼠大脑皮层NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分显著增加;缺血周围区大脑皮层可见神经元不同程度坏死或胶质细胞增生,完整神经元数量显著减少;IL-1β、IL-18阳性细胞表达明显升高;NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达显著增加(P<0.01,P<0.05)。经淫羊藿苷治疗后,大鼠神经功能评分明显降低;缺血周围区神经元坏死程度明显减...     

褪黑素对胃癌小鼠Survivin表达的影响

目的探讨褪黑素对胃癌小鼠Survivin表达的影响。方法选用6-8周龄SPF级615近交系小鼠,接种胃癌MFC细胞,建立荷瘤小鼠模型并给予不同剂量的褪黑素处理,用Real-time PCR法和Western blot法检测肿瘤组织中Survivin mRNA和蛋白的表达。结果 Real-time PCR和Western-blot检测显示褪黑素各干预组小鼠胃癌组织中Survivin基因的表达水平下降且随褪黑素剂量增大而降低。结论褪黑素具有下调survivin的作用。褪黑素降低survivin的表达,可能是褪黑素抑制肿瘤的作用机制之一。     

丹参酮IIA对大鼠移植性肝癌的抑制作用

目的：观察丹参酮IIA对大鼠移植性肝癌的抑制作用。方法：将sD大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参酮[IA高、低剂量组。各组动物于移植术后12d处死。分离肿瘤测量其体积,reahimeRT．PCR法和western blot法检测肿瘤组织中HMGB1、VEGFmRNA和蛋白的表达。结果：丹参酮IIA能明显降低肿瘤体积,降低肿瘤组织中HMGBl、VEGFmRNA和蛋白的表达。结论：丹参酮IIA能抑制大鼠移植性肝癌的生长,其机制可能与抑制HMGB1、VEGF表达有关。     

Investigation of the mechanism of temperature sensitivity of the electroreceptors of ampullae of lorenzini

In experiments on Black Sea skates (Raja clavata), the potential of the receptor epithelium of the ampullae of Lorenzini and spike activity of single nerve fibers connected to them were investigated during electrical and temperature stimulation. Usually the potential within the canal was between 0 and –2 mV, and the input resistance of the ampulla 250–400 k. Heating of the region of the receptor epithelium was accompanied by a negative wave of potential, an increase in input resistance, and inhibition of spike activity. With worsening of the animal's condition the transepithelial potential became positive (up to +10 mV) but the input resistance of the ampulla during stimulation with a positive current was nonlinear in some cases: a regenerative spike of positive polarity appeared in the channel. During heating, the spike response was sometimes reversed in sign. It is suggested that fluctuations of the transepithelial potential and spike responses to temperature stimulation reflect changes in the potential difference on the basal membrane of the receptor cells, which is described by a relationship of the Nernst's or Goldman's equation type.I. P. Pavlov Institute of Physiology, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. I. M. Sechenov, Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. Pacific Institute of Oceanology, Far Eastern Scientific Center, Academy of Sciences of the USSR, Vladivostok. Translated from Neirofiziologiya, Vol. 12, No. 1, pp. 67–74, January–February, 1980.     

Determination of stoichiometry of radioiodination of proteins

A sensitive method for the detection of small quantities of hydrophobic antioxidant free radical scavengers such as butylatedhydroxytoluene (BHT) and butylatedhydroxyanisole (BHA) in aqueous samples is described. The procedure involves extraction of the hydrophobic free radical scavenger into an organic solvent phase, followed by the subsequent reaction of an aliquot of this extract with the stable cation radical tris(p-bromophenyl)amminium hexachloroantimonate (TBACA). In experiments with BHT and BHA, the loss of TBACA absorbance at 730 nm was found to be linearly proportional to the amount of antioxidant added, with quantities of BHT as small as 200 pmol being easily detectable. In aqueous suspensions of dimyristoylphosphatidylcholine vesicles, assays of the aqueous BHT concentration showed that BHT partitioned strongly into the membrane phase, achieving very high BHT/phospholipid ratios. For a given concentration of BHT, partitioning into the membrane phase was greater in large, multilamellar liposomes than in either small, single-walled vesicles or in purified rat brain synaptic vesicle membranes. Direct assay of BHT and BHA in phospholipid membranes, however, was complicated by a nonspecific interaction between TBACA and the phospholipid.