蛙类简单的染色体标本制备方法

进行染色体组型分析时,都要制备有丝分裂中期染色体标本。在实验工作中,我用蝌蚪尾部制备染色体标本,方法简便,且效果非常满意。现介绍如下: 1.前处理将刚出卵膜的小蝌蚪放在含有0.2％秋水仙碱的清水中,室温下(25℃左右)培养3小时。 2.低渗将前处理过的蝌蚪尾尖切下,放在蒸馏水或0.075molKCl溶液中30分钟。 3.固定将低渗处理过的尾尖置于固定液[甲醇(或乙醇):冰醋酸=3:1]中固定30分钟。 4.染色压片将经固定的尾尖放在载玻片上,加一     

念珠藻的制片方法

取材普通念珠藻(Nostoc Commune)生于潮湿的土壤或草地上,在春、夏多雨季节里很容易采到.它形似木耳,俗称“地木耳”或“地皮菜”,可食用.发状念珠藻(Nostoc flagelliforme)形如发丝,俗称发菜,是重要的食用蓝藻,可从商店购得.取其中任何一种材料泡在水中,使其胶质鞘膨胀,用小毛笔刷净泥砂杂物,剪成3毫米左右长的小块(或段).选平整的材料置于载片中央,用另一张载片将材料压薄,用棉线捆紧两张载片. 固定将捆好的两张载片投入FAA固定液中24小时,松开棉线,分开载片.由于材料本身的胶质,它能粘贴在两张或其中的一张载片上(通常两张载片各粘一部分).将此材料染色和脱水. 洗涤与初染将固定好的材料用50％酒精洗涤2—3次,每次10分钟.再经40％→30％→20％→10％酒精洗,每级10分钟.最后经蒸馏水浸洗2次,每次2分钟.媒染用4％铁明矾1小时,蒸馏水洗2次后用海氏苏木精染色1小时.蒸馏水洗去浮色,1％铁明矾分色.边分色边显微镜检,至细胞内含物呈黑色,其它部分浅灰色或无色时为止.立即倒掉分色液,蒸馏水洗2—3次后,将材料浸泡于自来水中,使其变蓝     

小鼠骨髓细胞的染色体制备

在实验教学中,我们借鉴有关方法,经过多次实践,证明用小鼠骨髓细胞作动物染色体的制备实验,方法简便可靠,结果明显.现介绍如下,供高等院校或中学生物学实验参考. 1.前处理实验用小白鼠(重25克左右),腹腔注射0.1毫升0.1％的秋水仙素溶液. 2.取材注射后2.5—3小时,用乙醚将小鼠麻醉(或直接处死小鼠),立即取出股骨,剔净肌肉. 3.低渗用剪刀将股骨两端剪开,用注射器吸入1毫升0.05M氯化钾低渗液,插入一端,冲洗出骨髓细胞,滴于培养皿中的载玻片上(载玻片置于二根玻棒之上).再加入适量的低渗液,并用滴管展开.盖上培养皿,在37℃下低渗处理20分钟. 4.固定低渗后,往培养皿中缓缓注入甲醇、冰醋酸固定液(3:1),盖上培养皿,固定100分钟.换入无     

小型昆虫整体玻片标本的简便制法

1.处死固定将蚊、蚜等置于70%酒精中杀死固定. 2.脱脂将材料装人试管中注入适量70%的氢氧化钾或氢氧化钠溶液加热脱脂,待水开后,再用文火维持15分钟左右. 3.清水漂洗:脱脂后用纱布过滤碱液,用蒸馏水或清水漂洗2-3次,再用蒸馏水将材料浸泡半小时左右. 4.染色用75%酒精、酸性品红饱和液染     

从小白鼠血液制备染色体的快速方法

每只小白鼠注射(I.P)0.1毫升秋水仙素(0.6毫升/毫升),四小时后杀死。从心脏取血,用肝素抗凝。取10滴左右血液置于一刻度离心管中,管内预先装好3—5毫升0.7％柠檬酸钠,放在37℃下温浴,摇匀后加一滴稳定的玻璃酸酶(150N.F.单位/毫升)。在37℃下温浴20分钟。用温浴的最后五分钟配制3∶1甲醇-醋酸固定液。温浴完毕时加2滴固定剂并温和地摇匀。600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升左右)再加3毫升固定剂,加塞后放置冰箱30分钟。在600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升),再加预冷固定液3毫升,用吸管来回搅匀。离心弃去上清液。再加2毫升冷固定剂,并在冰箱中过夜。第二天离心后弃去上清液,用甲醇洗,吸去甲醇,取一     

做减数分裂实验的几种好材料

1.大葱花序在地里越冬的大葱(2n=16),第二年春天三四月便可长出花序,待花序长到象枣大小时,颜色呈绿色(呈黄色时已晚),采摘花序,置于卡诺固定液中(3份酒精:1份冰醋酸),固定24小时,然后取出花序,挑取小花即可制片。如不及时制片,可将固定后的花序,用95％酒精冲洗后(直至闻不到醋酸味为止),放入70％酒精中,存于冰箱内,可随时取用。     

鱼类染色体的观察

在早春到市场上买性成熟的活雄鲤一条,取其精巢(性腺已发育到第Ⅳ期),做染色体的观察。 1.固定将精巢放入Carnoy固定液(无水酒精3份,冰醋酸1份),固定3小时,再换入70％酒精中。 2.染色用镊子和解剖针仔细取出精巢内的精细小管(细如白发),一小段,放手掌上剔去周围异物之后,放置载玻片上,加醋酸洋红(45％醋酸100毫升加洋红1克煮沸、冷却、过滤即成),染色2-3小时。     

一种用于染色体观察的改良绒毛细胞直接制备法

为弥补羊水检查时间过晚之不足,1984年 Simoni利用绒毛标本直接制备法观察染色体获 得成功,此后,即日益为人们所注目。我们改良 了绒毛细胞直接制备方法,以胶原酶代替乙酸 处理,对绒毛细胞直接制备法（简称乙酸法）和 改良法（简称胶原酶法）进行了比较。大致过程 如下： 取妊娠6-7周人流绒毛组织50mg左 右,严格挑选后,生理盐水洗净,移人含最终浓 度0.5,ug/ ml秋水仙素的RPMI 1640培养液中 孵育1小时（pH7.2, 370C),然后分成两份。一 份按乙酸处理法进行制片：(1)去除培养液,加 3m11.5外拘椽酸钠溶液低渗15分钟;(2）加人 数滴3:1的甲醇：冰乙酸预固定10分钟;(3）吸 弃固定液,重复固定巧分钟;(4)吸弃固定液, 加入1m160并乙酸水溶液,处理2分钟,即追加 纯甲醇2ml; (5)吸取细胞悬液于离心管内离心 (1500-1800rpm); (6）冰水滴片,风干,Giemsa 染色。另一份按改良的胶原酶法制备染色体,大 致如下：(1)弃培养液加人15ng/ml胶原酶4ml, 孵育15-20分钟（370C); (2）加人4m1生理盐 水,离心（1000rpm),分钟,弃上清液,经0.75% 氯化钾4 ml低渗20分钟（370C),用甲醇冰醋 酸固定液lml预固定后,依上法离心,弃上清 液;(3）甲醇冰醋酸（3:1)重复固定15分钟,混 匀后自然沉降,吸上层细胞悬液离心,如此重复 二次后,再固定15分钟,气干法制片。28例实 验结果见表1,无论是可数分裂相,还是完整分 裂相出现率,胶原酶法均比乙酸法为高,二者间 有显著差异。     

导管和管胞的观察

取较老的南瓜或丝瓜或其他瓜茎,剪成1寸左右小段并纵劈成火柴梗粗细,置于铬酸-硝酸离析液中沸煮,直至酥软止(一般15分钟左右).用清水反复冲洗干净,制成临时装片显微镜检,即可见许多纤维和各型导管.取裸子植物的薄创花制片镜检,则可见纤     

食品上的应用

923091经粘着作用表面固定与食品有关的微生物细胞〔会,英〕/D,Souza,5.F.了Food Bioteehnol一1991,透(1)一373一382仁译自DBA,1992,11 (3),92一01748〕 用面包酵母(酿酒酵母)验证了一种在多种聚合物表面上固定细胞的新方法。将酿酒酵母细胞与一2%聚乙烯亚胺(PEI)(P H7)悬于水中温育 2小时,并与玻璃片、丙烯酸片、棉布或棉丝载体共同深温。还可将载体置于。.2%PEI中浸饱2小时使之具聚阳离子特性,再与天然细胞一起温育20分钟。PEI处理的细胞在玻璃表面(模型系统)单层粘着。处理细胞或用PEI处理棉布后细胞粘着在棉布上。在PEI处理的…     

观测叶面气孔的好方法

植物叶面的气孔仅占叶面积的1％左右,但在生命活动中起着重要作用。作者在研究人参光合特性时,偶然发现了一种好的观测方法。 将要统计的人参置于适宜的光合条件下,进行3天以上的光合作用,然后进行暗处理。可将盆栽人参放入暗室或部分叶片套暗袋,时间为48—72小时后,摘下叶片用95%的水溶酒精脱色30秒—1分钟,至绿色退尽。再用完全     

微小昆虫整体玻片标本的简便制法

我多年来对微小而柔软昆虫整体标本的制作摸索出几点简便方法,现介绍如下。一、几个优点 1.省去繁琐的脱水过程;2.节省时间,容易做成功;3.标本清晰,层次分明,不易变形;4、便于保存,适于鉴定、观察用。二、制作方法 1.处死固定:将蚊、蚜等置于70％酒精中杀死固定。 2.脱脂:将材料装入试管中注入适量70％的氢氧化钾或氢氧化钠溶液加热脱脂,待水开后,再用文火维持15分钟左右。     

制作洋葱表皮装片的小经验

在洋葱表皮的表面含有一种类脂物质,它与水的亲和力较低,所以制作临时装片时很容易产生气泡,影响观察。为了解决这一矛盾,可在取下洋葱表皮后,先置于75%的酒精中浸泡1分钟,然后水洗,再     

刺玫蔷薇茎尖的组织培养

植物名称:刺玫蔷薇(Rosa davurica Pall)。材料类别:茎尖。培养条件:取带顶芽或侧芽的茎段,在自来水下冲洗20分钟,70％乙醇消毒1分钟,0.2％HgCl_2溶液消毒10分钟,再用无菌水洗5次,在无菌条件下,剥除外围组织,切取茎尖3～4mm。诱导茎尖分化培养基组合如下:(1)MS BA2mg/L(单位下同) NAA0.4;(2)MS BA3 NAA0.4;(3)MS BA3 2,4-D2 NAA0.4:(4)MS KT3 2,4-D2 NAA0.4。生根培养基(5)1/2MS IBA1;     

人参种胚培养中再生植株

植物名称:人参Panax ginseng 材料类别:种胚。取低温沙藏后熟的裂口种子,剥去外亮,先用5％安替福民溶液消毒二十分钟,而后用0.1％升汞溶液灭菌二十分钟,无菌水冲洗3—4次,在超净台上从胚乳中剥出胚,接种在琼脂培养基上培养。培养条件:MS或B_5基本培养基,蔗糖3％,琼脂0.7％,蛋白陈500mg/1。附加激素有BA、NAA和GA。其中赤霉素直接加入培养基,灭菌三十分钟。一般室内培养,温度20—28℃左右,每天光照16小时。生长和分化情况:开始将种胚接种在每升附加2mg BA和 0.5mg NAA的培养基上,一周左右,     

观察有丝分裂方法的改进

在观察植物细胞的有丝分裂实验中,通常的步骤为:将取下的根尖在固定液中固定15—30分钟,然后用95％酒精洗净醋酸,移入70％酒精中,再水洗后转入1N盐酸中60℃下水解10分钟,之后水洗1—2次,压片,用醋酸洋红染色10分钟。整个过程约需35—50分钟,耗时长,且操作繁琐。近年来,我们采用了一种较为简便的方法,具体如下:     

番木瓜茎尖和侧芽的离体培养

植物名称:番木瓜(Carica papaya)。材料类别:茎尖、侧芽。培养条件:取自大田1.4～1.7m高植株上的外植体经10％漂白粉或0.1％升汞(其中加1～2滴Tweon-20)表面消毒8～10分钟,再用灭菌水洗3～4次,切成2～3mm的楔形片。诱导丛芽分化的MS培养基,大量元素提高0.5倍,附加NAA0.1～     

一种简易的聚丙烯酰胺凝胶脱色方法

PAGE是蛋白质分析、比较和特性鉴定的有效方法,常规SDS-PAGE分析蛋白过程中考马斯亮蓝色素脱除过程耗时低效。改变脱色液配方,使用20%的乙醇和10％冰醋酸作为脱色剂,在脱色液中放置3-5片纸巾吸附色素,并在脱色过程中换纸1-2次,可缩短脱色时间3-4h,减少脱色液用量2-3倍。     

温热磁场治疗脑外伤综合症24例

临床资料1　一般资料脑外伤后综合症患者 2 4例 ,男 1 4例、女 1 0例。年龄最小 6岁、最大 63岁、其中 6- 2 5岁 4例 ,2 6- 35岁 1 3例 ,36- 5 0岁 5例 ,5 1 - 63岁 2例 ,其中以 2 0 - 5 0岁为多见。病程最短 3个月 ,最长2 0年 ,其中 3个月 - 1年 2 0例 ,1 - 5年 2例 ,6- 1 0年 1例 ,1 1 - 2 0年 1例。2　治疗方法采用日本伊藤公司产HM - 2SC -A型电脑温热磁场治疗仪 ,温度 40°- 70°可调节 ,电极 30 0cm2 XⅡ一电极置于枕部及颈肩背部 ,另一电极置于太阳神经丛区或胃部。每日一次 ,每次 2 0分钟 ,2 0次一疗程。治疗期间不配合其它治疗…     

制作眼球切片标本方法的改进

我们经过几年的实践,对制作眼球切片标本的方法作了一些改进,其制备过程如下: 取材固定取下狗、猫或兔的眼球并立即置于复方甲醛固定液中。配方是: 丙酮:50毫升,冰醋酸:2毫升,甲醛液:4毫升,蒸馏水:3毫升。固定一周后,将原液倒出一半,再加等量丙酮固定5天,再直接放入95％酒精中。