胰岛素对糖尿病大鼠下颌下腺Bcl-2和Caspase-3表达的影响及意义

目的观察胰岛素对糖尿病大鼠下颌下腺内凋亡相关蛋白Bcl-2和Caspase-3表达的影响。方法 SD大鼠30只,随机分为3组,10只大鼠作为对照组(C);10只大鼠用链尿佐菌素复制糖尿病模型作为DM组;10只大鼠用链尿佐菌素复制糖尿病模型,予以胰岛素治疗作为INS组。2个月后取血检测血糖、血脂;取大鼠下颌下腺,分别进行免疫组织化学显色(SP法)和计算机图像分析系统测平均光密度。结果①血糖检测结果:C组和INS组的血糖分别与DM组血糖比较,均有差异(P0.05);②血脂检测结果:C组和INS组的TG分别与DM组TG比较,均有显著性差异(P0.05);DM组TC分别与C组和INS组TC比较,均有显著性差异(P0.05)。③免疫组化结果:与C组比较,DM组大鼠下颌下腺导管上皮细胞内Bcl-2表达显著下降(P0.05),Caspase-3表达显著增加(P0.05);与DM组比较,胰岛素组Bcl-2表达显著增加(P0.05),Caspase-3表达显著下降(P0.05)。结论 DM大鼠下颌下腺内Bcl-2表达降低和Caspase-3表达增加,可能在糖尿病时下颌下腺细胞凋亡过程中发挥重要作用,而胰岛素具有对抗糖尿病下颌下腺细胞凋亡的作用。     

雄性大鼠颌下腺雄激素受体表达及镉和丙酸睾酮对其的影响

目的探测雄性大鼠颌下腺内雄激素受体(AR)表达及细胞分布特征,了解氯化镉和丙酸睾酮对AR表达的影响。方法35只雄性Wistar大鼠分为3组:对照(C)组、镉(Cd)组和镉加丙酸睾酮(Cd T)组。利用免疫组化SABC法和图像分析系统作AR表达检测及平均光密度(AOD)值定量分析。结果AR在浆液性腺泡(AC)、颗粒曲管(GCT)、纹状管(SD)和排泄管等细胞内均有不同程度的表达,定位以细胞质为主。其中GCT细胞内AR的AOD值最高,SD次之,AC细胞最低。Cd处理24h后,三种细胞内AR的AOD值均见下降,7d时达最低水平,此后有所增加,但到30d时仍低于对照组(P<0.05)。Cd T处理后,GCT细胞内AR的AOD值明显增加。与3、7、15d时Cd组相比,差别均有显著性。AC和SD细胞内AR的AOD值虽高于相应时间点的Cd组,但两者比较仅在7d时差别有显著性。结论雄性大鼠颌下腺内广泛存在AR,镉可致颌下腺GCT、AC、SD细胞AR表达减少,补充雄激素可明显增加GCT细胞AR表达,但对AC和SD细胞AR表达的影响较小。     

单唾液酸神经节苷脂对体外循环大鼠海马神经元的影响

目的:探讨单唾液酸神经节苷脂(GM1)对体外循环大鼠海马神经元凋亡的影响及机制。方法:18只健康成年雄性SD大鼠,随机分为3组:正常对照组、CPB组和GM1组。经右颈静脉插管引流,右颈动脉插管灌注建立CPB,转流时间60 min,建立CPB动物模型。CPB后3 h时处死大鼠,4%多聚甲醛灌注固定后取左侧大脑组织,利用TUNEL法观察海马神经元凋亡,免疫组化法检测海马神经元Caspase-3蛋白表达,并用电子显微镜观察神经元超微结构变化。结果:与正常组比较,GM1组和CPB组海马神经元凋亡细胞平均积分光密度(IA)、Caspase-3蛋白表达均增强(P<0.01)。GM1组海马神经元凋亡细胞平均积分光密度(IA)为8.94±0.42,与CPB组(14.87±0.70)相比明显降低(P<0.01);GM1组海马Caspase-3阳性神经细胞平均积分光密度比CPB组降低了38.84%(P<0.01)。电镜下CPB组海马可见异染色质明显边集、凝聚,线粒体嵴减少或空泡变性,细胞器消失等不可逆性的损伤改变;GM1组神经元细胞核圆形,线粒体嵴少量减少,细胞器仍可见。结论:单唾液酸神经节苷脂对体外循环大鼠海马神经元凋亡具有明显的抑制作用,其机制与抑制Caspase-3的表达有关。     

高脂血症大鼠下颌下腺内AQP1和AQP5表达及意义

目的 观察高脂血症大鼠下颌下腺内AQP1和AQP5表达的变化.方法雄性 S D大鼠 20只,随机分为 2组,对照组(C组)给予全价颗粒饲料喂养;高脂饮食组(H组)给予高脂饮食 (饲料成分为胆固醇 2%、猪油10%、基础饲料 88% )连续喂养2个月,各组动物均不限制饮水.2个月成模后,取血检测血脂;取大鼠下颌下腺组织,进行免疫组织化学染色(SP法) 和计算机图像分析.结果 ①血脂检测结果:C组TG与H组TG比较有显著性差异(P<0.05);C组TC和H组TC比较有显著性差异(P<0.05).②免疫组化结果:C组大鼠下颌下腺AQP1平均光密度值与 H组AQP1平均光密度值比较有差异性(P<0.05);C组大鼠下颌下腺AQP5平均光密度值与 H组AQP5平均光密度值比较有差异性(P<0.05).结论 高脂血症大鼠下颌下腺导管上皮细胞内AQP1和AQP5的表达减少,为探讨高脂血症导致下颌下腺分泌功能降低的病理机制提供了形态学依据.     

成肌纤维细胞在大鼠低氧性肺动脉高压发病中的作用

目的探讨低氧性肺动脉高压(HPH)无肌性肺动脉肌化的细胞来源.方法雄性Wistar大鼠40只,分为对照组和低氧(3、7、14、21d组),每组8只,低氧组复制HPH大鼠模型.测定各组平均肺动脉压(mPAP),右心室肥大指数(RVHI),肺小动脉病理及其形态计量学;免疫组化测定各组肺微血管α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;透射电镜观察微血管的超微结构改变.结果 (1)低氧7d起大鼠mPAP、管壁面积/管总面积(WA%)、管腔面积/管总面积(LA%)分别为(18.41±0.37)mmHg、(52.2±0.8)%、(47.8±0.8)%与对照组(14.02±0.41)mmHg、(64.5±1.3)%、(35.5±1.3)%比较差异有显著性(P<0.05),低氧14天起稳定于高水平;低氧14d RVHI为(25.0±1.8)%与对照组(23.6±0.5)%比较差异也有显著性(P<0.05).(2)从低氧7d开始无肌型动脉、部分肌型动脉、肌型动脉的构成比分别是39%、46%、15%与对照组60%、35%、5%比较差异有显著性(P＜0.005).(3)免疫组化发现,腺泡内肺动脉管壁α-SMA的表达随着低氧时间的延长,α-SMA表达量逐渐增多.(4)透射电镜观察21d组增厚的重塑血管壁,位于内外弹性膜之间的细胞为成肌纤维细胞表型,外层具有与它紧密联系的成纤维细胞.结论在低氧性肺动脉高压时,成纤维细胞转化为成肌纤维细胞是腺泡内肺动脉重塑的重要原因之一.     

胰岛素对糖尿病大鼠下颌下腺内NGF及VEGF表达的影响

目的观察神经生长因子(NGF)及血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病大鼠下颌下腺内表达变化,探讨胰岛素对其表达影响及可能机制。方法 SD大鼠30只,随机分为:对照组、糖尿病组、胰岛素治疗组。大鼠2个月成模后,取血检测血糖;取下颌下腺组织,分别进行HE染色、免疫组织化学染色和计算机图像分析。结果①对照组血糖与糖尿病组比较差异有统计学意义;胰岛素治疗组血糖与糖尿病组比较差异有统计学意义。②糖尿病组腺泡轻度萎缩,排列不规则,颗粒曲管数目减少,直径变小;胰岛素治疗组较对照组变化不明显。③与对照组相比较,糖尿病组NGF表达下调,VEGF表达上调。与糖尿病组相比较,胰岛素治疗组NGF表达上调,VEGF表达下调。结论糖尿病大鼠下颌下腺内NGF表达减少、VEGF表达增高,可能是糖尿病患者神经病变与血管病变的重要原因之一;胰岛素治疗可能与NGF和VEGF的表达改变有内在联系。     

急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白XIP的表达

目的:研究急性胰腺炎(AP)大鼠腺泡细胞凋亡,X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达及其与疾病严重程度的关系。方法:通过胰胆管逆行注射不同浓度的牛黄胆酸钠,制备急性水肿型胰腺炎(AEP)和急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠模型,同时设假手术(SO)组为对照。收集各模型组3,6和12h标本,对胰腺组织进行病理学评分,并测定血清淀粉酶和腹水量;用TUNEL染色检测胰腺腺泡细胞的凋亡,分别RT-PCR和Western Blotting法测定大鼠胰腺组织XIAP mRNA及蛋白的表达。结果:成功建立了大鼠AP模型。同SO组相比,ANP和AEP组胰腺组织在各时间点均有不同程度的病理损害,血清淀粉酶也显著增高(P均<0.01)。且ANP组显著高于AEP组(P均<0.01)。造模成功3h后,各组大鼠胰腺腺泡细胞均出现少量凋亡,但ANP和AEP组凋亡显著多于SO组(P<0.05),ANP和AEP组间没有差别(P>0.05)。同SO组相比,ANP和AEP组在6h和12h时凋亡均增多(P<0.01),且AEP组显著高于ANP组(P<0.01)。造模成功3h后,各模型组XIAP mRNA表达没有差异(P>0.05);6h和12h时AEP组XIAP mRNA表达明显下降,而ANP组明显升高,两组间差异有显著性(P<0.01)。XIAP蛋白表达水平与mRNA表达水平相一致。结论:急性胰腺炎大鼠胰腺组织XIAP表达与腺泡细胞凋亡情况相反,且与疾病严重程度平行。XIAP可能负性调控AP大鼠胰腺腺泡细胞的凋亡。     

胃溃疡对大鼠胃中HAP1表达的影响

建立冰乙酸性大鼠胃溃疡模型,采用ABC法进行免疫组织化学染色,观察并探讨胃溃疡对胃壁中HAP1(huntingtin as-soc iated protein 1,HAP1)表达的影响。结果溃疡组大鼠胃壁中HAP1阳性细胞数目及光密度与正常进食的大鼠相比显著增多。     

健胃愈疡颗粒剂对大鼠胃溃疡模型溃疡愈合及胃组织IL-1β蛋白表达的影响

目的:探讨健胃愈疡颗粒对大鼠胃溃疡模型溃疡愈合及胃组织IL-1β蛋白表达的影响.方法:用Okabe改良法复制SD大鼠胃溃疡模型,观察溃疡指数,采用免疫组织化学法观察胃粘膜组织形态及IL-1β蛋白表达的变化.结果:①健胃愈疡组的溃疡指数明显低于模型组和法莫替丁组;②HE染色法显示健胃愈疡组较模型组及法莫替丁组黏膜厚度增加,溃疡床及溃疡周围炎性细胞浸润明显减少,纤维排列较为整齐.③IL-1β在正常胃组织呈阴性或偶有阳性信号表达,造模型7d后表达显著增加,健胃愈疡组和法莫替丁组低于模型组(P＜0.01);14 d后各组的阳性信号表达均降至接近正常.结论:健胃愈疡颗粒能保护大鼠胃粘膜组织,降低胃溃疡大鼠模型溃疡指数,改善溃疡愈合质量,减少胃组织IL-1β蛋白的表达,促进溃疡愈合.     

水黄皮根总黄酮对大鼠乙酸型胃溃疡胃黏膜EGF及TGF-α表达的影响

目的:观察水黄皮根总黄酮(PRF)对胃溃疡大鼠乙酸型胃溃疡的作用,探讨该药促进溃疡愈合的可能机制。方法:采用乙酸注射至大鼠浆膜下形成胃溃疡模型,观察水黄皮根总黄酮对胃溃疡大鼠乙酸型胃溃疡愈合质量的影响,用放免法检测血清表皮生长因子(EGF)含量,用免疫组化法检测胃黏膜组织EGF、转化生长因子-α(TGF-α)的表达。结果:PRF能显著降低溃疡指数(P<0.05,P<0.01),提高血清中EGF含量(P<0.05,P<0.01),增强溃疡边缘胃黏膜EGF、TGF-α的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:PRF能提高溃疡愈合质量,增强溃疡瘢痕处EGF、TGF-α的表达可能是其作用机制之一。     

幽门螺杆菌感染对延缓乙酸诱导大鼠胃溃疡愈合的实验研究

本工作旨在观察幽门螺秆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,ＨＰ）感染对大鼠乙酸性胃溃疡愈合的影响。实验发现,大鼠发生乙酸性溃疡后,一次性接种ＨＰ几乎使所有大鼠感染,并引起胃溃疡的自然愈合明显减慢;组织学和生化检测观察到ＨＰ组大鼠胃溃疡病灶处有更多炎症细胞浸润,以中性粒细胞为主,未受溃疡累及的胃窦和胃后壁粘膜也有炎症细胞浸润;免疫组化研究发现ＨＰ组胃粘膜出现较多的ＩＬ－８阳性细胞;此外发现ＨＰ组胃粘膜ＢｒｄＵ标记细胞显著减少,既粘膜上皮的再生减慢。结果提示,ＨＰ感染延缓乙酸性溃疡的愈合,后者与ＨＰ感染后增加ＩＬ－８表达所诱导更强的炎症反应和粘膜细胞再生减慢有关。     

TFF2在胃癌中的表达及与幽门螺杆菌感染关系的研究

目的探讨三叶因子Ⅱ(Trefoil factors2,TFF2)在胃癌和癌前病变中的表达及与幽门螺杆菌感染(Helicobacter pylori,H.pylori)的关系。方法选取经病理证实的慢性浅表性胃炎、胃溃疡、慢性萎缩性胃炎和胃癌4种不同胃黏膜病变的标本140例,用免疫组化法检测标本中TFF2的表达及H.pylori的感染情况,并分析TFF2的表达与H.pylori的感染的关系。结果在慢性浅表性胃炎、胃溃疡、慢性萎缩性胃炎和胃癌中,TFF2和H.pylori的表达率依序呈逐渐增加的趋势,但TFF2在胃癌组织中表达降低。H.pylori阳性组TFF2的表达率低于阴性组,TFF2的阳性率与H.pylori感染率之间呈负相关(r=-0.335,P<0.05)。结论 TFF2的表达和H.pylori的感染与肿瘤的发生密切相关,检测该指标可为胃癌诊断、判断预后和指导治疗提供理论依据。     

巯基物质在消炎痛诱发大鼠胃粘膜损伤中的作用

本工作研究了巯基物质在消炎痛引起大鼠胃粘膜损伤中的可能作用。在胃粘膜损伤发生过程中、胃粘膜内非蛋白及蛋白结合的巯基物质含量均无明显降低。虽然半胱胺灌胃(132或264μmol)或皮下注射(132μmol)后均明显抑制消炎痛溃疡的发生,其抑制率分别为82％,92％和75％,但同样具有巯基的半胱氨酸却无保护作用。半胱胺(132μmol)皮下注射可使消炎痛大鼠胃酸分泌抑制46％,而灌胃则无此作用。两种途径给予的半胱胺均不影响胃壁结合粘液的分泌。这些结果表明,胃粘膜内巯基物质似不参与消炎痛的致溃疡过程。半胱胺在此种模型上虽有强烈的细胞保护作用,但似乎不是由于其分子上所带的巯基所致。因此,巯基物质在消炎痛引起的胃粘膜损伤模型上没有细胞保护作用。     

TACC1及TFF3在胃癌组织中的表达及其临床意义(英文)

目的:探讨转化酸性卷曲螺旋蛋白1(TACC1)和肠三叶因子(TFF3)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测胃癌组织中TACC1及TFF3的表达情况。采用x2检验、乘积极限法及单因素、多因素生存分析等统计学方法,分析胃癌组织中TACC1及TFF3的表达与患者临床病理参数及预后的关系。结果:TACC1和TFF3在进展期胃癌、有淋巴结转移及复发的胃癌组织中的表达率较高。此外,TFF3在较大肿瘤(肿瘤大小4 cm)的胃癌组织中的表达较高。单因素生存分析显示年龄、淋巴结转移、TACC1和TFF3表达与低生存期显著相关(P0.05)。多因素分析结果表明,TACC1和TFF3的表达是独立的预后预测因子。结论:TACC1和TFF3的表达可以作为胃癌的独立不良预后因子,而且在胃癌组织中TACC1和TFF3共同表达的患者生存时间更短。     

胃溃疡模型大鼠颌下腺的5-HT及其受体与胃溃疡自愈的关系

为观察胃溃疡模型大鼠颌下腺５－ＨＴ及其受体相对含量的变化,探讨二者与胃溃疡自愈的关系。采用免疫组织化学ＡＢＣ法和原位定量测定法。结果显示：胃溃疡模型大鼠颌下腺５－ＨＴ相对含量于手术后１０天已有升高,２０天达到高峰,３０天已显示出下降,分别与盐水对照组的同一时间点的相比较,均有显著性差异（Ｐ值分别小于０．０１）。５－ＨＴＲ的相对含量也呈现出类似的变化。推测颌下腺的５－ＨＴ可能参与了胃溃疡的愈合过程,其受体在颌下腺的含量的增多,提示前者可能对后者的合成与释放起着重要的作用。     

Biosynthesis of gastrokine-2 in the human gastric mucosa: restricted spatial expression along the antral gland axis and differential interaction with TFF1, TFF2 and mucins.

Gastrokine-2 (GKN2) is a secretory peptide of human gastric surface mucous cells (SMCs). It forms disulfide-linked heterodimers with the trefoil factor family (TFF) peptide TFF1. Binding with TFF2 was also reported. Antral SMCs differ from those of the corpus by their TFF3 expression. The aim of this study was to localize GKN2 expression along the antral gland axis, to characterize the continuous regeneration of antral glands, and to investigate the interactions of GKN2 with TFF1, TFF2 and mucins. Methods: The spatial expression of GKN1, GKN2, TFF1-3, MUC5AC and MUC6 was determined using laser microdissection and RT-PCR analysis. Furthermore, antral extracts were separated by gel chromatography and the association of GKN2 with TFF1, TFF2, and mucins was investigated. Results: Differential GKN2 expression was localized along the rostro-caudal axis of the stomach. Laser microdissection revealed characteristic differential expression profiles of GKN1, GKN2, TFF1-3, MUC5AC and MUC6 along the antral gland axis. Both GKN2 and TFF1 were expressed in superficial SMCs. Surprisingly, the TFF1-GKN2 heterodimer did not associate with the mucin fraction; whereas TFF2 showed exclusive association with mucins. Conclusions: Maturation of antral SMCs occurs stepwise via trans-differentiation of TFF3 expressing progenitor cells. The TFF1-GKN2 heterodimer and TFF2 differ characteristically by their binding to gastric mucins. This points to different physiological functions of TFF1 and TFF2, the latter maybe acting as a 'link peptide' for stabilization of the gastric mucus.     

颌下腺表皮生长因子促进大鼠胃粘膜损伤的愈合

用免疫组织化学方法观察到雄性大鼠颌下腺有非常丰富的表皮生长因子样免疫活性物质,并且主要位于导管细胞中,颌下腺摘除使血清尤其是胃液ＥＧＦ水平显著降低,直至手术后第２８天仍然维持在较低水平。利用颌下腺摘除术清内源性ＥＧＦ后,冰乙酸涂抹造成的慢性胃溃疡愈合速度较假手术大鼠明显减慢,而补充相应剂量的外源性ＥＧＦ可使颌下腺摘除大鼠的溃疡愈合速度恢复到与假手术组引当水平。上述结果显示,颌下腺及其分泌的ＥＧＦ对