黄芪对镉致大鼠睾丸支持细胞超微结构及波形蛋白、E-钙粘蛋白表达改变的保护作用

目的 探讨黄芪对镉致大鼠睾丸支持细胞损伤的保护作用.方法 21只成年雄性SD大鼠随机分成镉组(0.1％氯化镉腹腔内注射,1mg/Kg体重/天,5天/周,处理后1、2、3、4周取材)、镉加黄芪组(注射氯化镉的同时注射黄芪,10g/Kg体重/天,5天/周,处理后2、4周取材)和对照组(腹腔内注射等量生理盐水).睾丸取材作光镜、免疫组织化学染色和图像分析及超微结构观察.结果 光镜H.E染色对照组支持细胞核不规则,染色浅,核仁明显,镉处理后胞浆内有空泡形成,镉加黄芪组支持细胞未见明显改变.对照组波形蛋白阳性产物在支持细胞靠近基室腔的胞浆中表达,E-钙粘蛋白阳性产物则主要定位于生精上皮近腔室的支持细胞和部分生精细胞胞浆中.镉处理后支持细胞胞浆中波形蛋白和E-钙粘蛋白阳性产物表达的平均光密度值均明显降低(P＜0.05),镉加黄芪组阳性产物表达虽较对照组减弱但明显高于相应镉组(P＜0.05).镉处理组支持细胞胞质特化区和紧密连接破坏,镉加黄芪组支持细胞超微病变较相应镉组为轻.结论 镉降低大鼠睾丸支持细胞波形蛋白和E-钙粘蛋白的表达并造成支持细胞的超微结构损伤,黄芪具有较好的保护效果.     

活体冷冻固定及冷冻置换的小鼠睾丸组织内血清白蛋白和IgG的免疫组织化学定位

目的了解小鼠睾丸组织内血清白蛋白和IgG渗透性的时相性变化,揭示支持细胞间紧密连接的屏障功能。方法运用活体内冷冻固定技术对小鼠睾丸进行快速冷冻固定和冷冻置换,并作石蜡包埋。5μm厚连续切片用于抗鼠血清白蛋白和IgG的免疫组化染色和H．E染色。结果H．E染色切片显示距冷冻组织表面300-400μm深度范围内的精曲小管结构保存完好,无明显冰晶形成所致的人工损伤。血清白蛋白和IgG免疫反应产物主要定位于精曲小管管周肌样细胞周围,以及间质细胞之间和毛细血管内,部分免疫反应产物呈拱型出现在精曲小管上皮内,并严格限定在基底室,沿精原细胞表面分布。拱型免疫反应产物的数量与精曲小管上皮周期的发育时相密切相关。结论活体内快速冷冻固定和冷冻置换结合血清白蛋白和IgG的免疫组化方法,可很好地保存精曲小管组织结构并清楚地揭示支持细胞间紧密连接结构的时相变化。     

雄性大鼠颌下腺雄激素受体表达及镉和丙酸睾酮对其的影响

目的探测雄性大鼠颌下腺内雄激素受体(AR)表达及细胞分布特征,了解氯化镉和丙酸睾酮对AR表达的影响。方法35只雄性Wistar大鼠分为3组:对照(C)组、镉(Cd)组和镉加丙酸睾酮(Cd T)组。利用免疫组化SABC法和图像分析系统作AR表达检测及平均光密度(AOD)值定量分析。结果AR在浆液性腺泡(AC)、颗粒曲管(GCT)、纹状管(SD)和排泄管等细胞内均有不同程度的表达,定位以细胞质为主。其中GCT细胞内AR的AOD值最高,SD次之,AC细胞最低。Cd处理24h后,三种细胞内AR的AOD值均见下降,7d时达最低水平,此后有所增加,但到30d时仍低于对照组(P<0.05)。Cd T处理后,GCT细胞内AR的AOD值明显增加。与3、7、15d时Cd组相比,差别均有显著性。AC和SD细胞内AR的AOD值虽高于相应时间点的Cd组,但两者比较仅在7d时差别有显著性。结论雄性大鼠颌下腺内广泛存在AR,镉可致颌下腺GCT、AC、SD细胞AR表达减少,补充雄激素可明显增加GCT细胞AR表达,但对AC和SD细胞AR表达的影响较小。