右美托咪啶对肺缺血/再灌注损伤大鼠促炎介质IL-1β、TNF-α水平的影响及其机制

目的:评价右美托咪啶对大鼠肺缺血/再灌注损伤时促炎介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的影响及机制。方法:雄性健康SPF级SD大鼠50只,体重250~310 g,8~12周龄,采用随机数字表法分为5组(n=10):假手术组(sham组)、缺血/再灌注损伤组(I/R组)、右美托咪啶组(Dex组)、阿替美唑组(Atip组)、右美托咪啶+阿替美唑组(Dex+Atip组)。采用大鼠在体左侧肺门夹闭30 min再灌注2 h制备缺血/再灌注(I/R)模型,Dex组、Atip组、Dex+Atip组分别在肺门阻断前30 min腹腔注射右美托咪啶(20μg/kg)、阿替美唑(250μg/kg)、右美托咪啶(20μg/kg)和阿替美唑(250μg/kg),其余处理同I/R组。实验结束后留取左肺检测肺湿干重比(W/D)和肺水含量(TLW);光、电镜观察肺组织形态结构变化;ELISA检测血浆中IL-1β及TNF-α的水平。结果:与sham组相比,其余各组W/D、TLW、IL-1β和TNF-α的水平明显升高(P0.05,P0.01),光、电镜均显示肺组织结构出现明显损伤性变化;与I/R组、Atip组、Dex+Atip组相比,Dex组W/D、TLW、IL-1β及TNF-α的含量下降(P0.05,P0.01),光、电镜下肺组织损伤减轻;I/R组、Atip组、Dex+Atip组两两比较,以上各指标均无统计学差异。结论:右美托咪啶通过降低促炎介质IL-1β、TNF-α浓度减轻大鼠肺缺血/再灌注损伤,其机制可能与激动α_2-肾上腺素受体有关。     

右美托咪定对大鼠I/R损伤肺组织TLR4表达及保护作用的影响

目的：探讨右美托嘧啶对大鼠再灌注损伤肺组织Toll样受体素4（TLR4）表达的调控,并分析其对肺保护作用机制。方法：采用大鼠在体左侧肺缺血/再灌注（I/R）模型,50只健康雄性成年SD大鼠随机分为5组（n=10）：对照组（Sham组）、缺血/再灌注组（I/R组）、右美托咪定组（Dex组）、阿替美唑组（Atip组）、右美托咪定+阿替美唑组（Dex+Atip组）,实验结束后处死大鼠,留取左肺,检测肺湿干重比（W/D）和总肺水含量（TLW）;光镜下观察肺组织形态结构变化;PCR检测肺组织TLR4 mRNA表达;Western blot检测肺组织TLR4的蛋白表达。结果：与Sham组相比,其余各组W/D和TLW明显升高（P<0.05,P<0.01）,TLR4 mRNA和蛋白表达量上升（P<0.01）,光镜显示肺组织结构出现明显损伤性变化;与I/R组相比,Dex组W/D和TLW下降（P<0.05,P<0.01）,TLR4 mRNA和蛋白表达量降低（P<0.01）,光镜下肺组织损伤减轻;与Dex组比较,Dex+Atip组W/D和TLW明显升高（P<0.05,P<0.01）,TLR4 mRNA和蛋白表达量上升（P<0.01）,光镜肺组织结构损伤严重;I/R组、Atip组、Dex+Atip组两两比较,以上各指标均无统计学差异（P > 0.05）。结论：I/R可引起大鼠肺组织TLR4表达上调和肺组织损伤;右美托咪啶可减轻肺I/R损伤,抑制TLR4表达,这种作用与α2-肾上腺素能受体有关。     

右美托咪定对肺缺血/再灌注损伤小鼠内质网应激相关分子Caspase-12表达的影响

目的：探讨右美托咪定（DEX）对肺缺血/再灌注（I/R）损伤小鼠内质网应激（ERS）相关分子天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12（Caspase-12）表达的影响。方法：选用C57BL/6J小鼠复制在体左肺原位I/R损伤模型。随机将40只小鼠分为4组（n=10）：假手术组（sham组）,I/R损伤组（I/R组）,生理盐水对照组（NS组）,右美托咪定干预缺血/再灌注组（DEX组）。DEX组在夹闭小鼠左肺门30 min前经腹腔注射DEX 25 μg/kg,NS组为用同DEX组等体积的生理盐水替代DEX,其余操作同DEX组。3 h肺再灌注结束后,留取左肺。测定肺组织湿/干重比（W/D）及总肺含水量（TLW）,光镜观察肺组织形态学改变,对肺组织进行损伤评估（IQA）。原位末端标记（TUNEL）法检测组织细胞凋亡指数（AI）,蛋白免疫印迹法（Western blot）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测Caspase-12、葡萄糖调节蛋白78（grp78）蛋白和mRNA表达水平。结果：与sham组比,I/R组和NS组肺W/D、TLW、IQA、AI均明显升高（P<0.01）,肺组织形态结构破坏明显,Caspase-12、grp78蛋白和mRNA表达量增加（P<0.01）;I/R组与NS组相比,两组Caspase-12、grp78蛋白和mRNA表达量无明显差异（P>0.05）。DEX组与I/R组比,W/D、TLW、IQA和AI均有下降（P<0.01或P<0.05）,肺组织形态学改变明显减轻,Caspase-12和grp78蛋白和mRNA表达量下降（P<0.01）。结论：DEX可有效缓解小鼠肺缺血/再灌注性损伤,其机制可能与其对抗ERS中Caspase-12引起的细胞凋亡有关。     

右美托咪定预处理对小鼠肠缺血再灌注损伤的作用研究

目的:右美托咪定(Dexmedetomidine,Dex)属于α-2肾上腺素能受体激动剂具有抗焦虑、催眠、镇痛和交感神经阻滞作用。最新研究发现右美托咪定对心脏和肺的缺血再灌注损伤具有显著的保护效应,但是右美托咪定是否对肠缺血再灌注损伤具有保护作用,迄今为止还没有相关研究。因此,本研究以小鼠为模型,观察右美托咪定预处理对小鼠肠缺血再灌注损伤的影响。方法:建立肠缺血再灌注损伤小鼠模型,并分为假手术组、缺血再灌注组和右美托咪定与处理组。不同剂量(10,25,50和100μg/kg)右美托咪定预处理小鼠。提取小鼠肠组织,用不同的试剂盒分别测定超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD),丙二醛(Malondialdehyde,MDA),谷胱甘肽(Glutathione,GSH),一氧化氮(Nitric Oxide,NO)和髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)的水平变化。结果:右美托咪定预处理可以显著提高肠缺血再灌注损伤小鼠的存活率并呈剂量依赖性。右美托咪定预处理(100μg/kg)抑制由肠缺血再灌注损伤引起的不良效应,包括SOD水平降低,MDA水平升高,GSH水平降低,NO水平升高和MPO水平升高。结论:我们的研究表明右美托咪定可以提高小鼠肠缺血再灌注损伤的生存率,并且抑制氧化应激反应,炎症细胞的活化和侵润以及NO的水平,对肠缺血再灌注损伤具有显著的保护效应。本研究不仅进一步证实了右美托咪定的广泛的药理活性,而且为肠缺血再灌注损伤的治疗提供了潜在的治疗药物,其进一步的药理效应和作用机制值得进一步的研究。     

右美托咪定对大鼠不同时间脑缺血再灌注损伤保护作用

为了研究右美托咪定对大鼠不同时间脑缺血再灌注损伤的影响,探讨对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的最佳时间,本研究将7～8周的SPF级雄性SD大鼠80只(体质量(120±10) g)随机分为8组(每组10只):假手术组(Sham组)、缺血再灌注损伤(Zea-Longa法MCAO模型)对照组(IR组)、缺血再灌注损伤+生理盐水组(IR+NS组),其余5组为不同时间缺血再灌注损伤+右美托咪定(不同时间IR+Dex组),这5组分别于缺血后10 min、30min、1 h、2h、3 h恢复脑部血流,同时输注浓度为1.0μg/kg的右美托咪定,输注时间均为1 h。于缺血再灌注后分别用平衡木法测定各组大鼠的的运动功能。ELISA检测各组大鼠脑组织中的NF-κB、TNF-α以及炎症因子IL-1β。RT-qPCR检测糖基化终末产物受体(RAGE)和Toll样受体4 (TLR4) mRNA的水平。Sham组大鼠运动功能没有受影响,IR组与IR+NS组大鼠运动功能明显低于IR+Dex组,有极显著性差异(p0.01),但是IR+Dex各组的大鼠运动功能也各有差异:10 min IR+Dex组和30 min IR+Dex组与Sham组并没有统计学差异。1h、2h和3 h IR+Dex组大鼠的运动功能与严重下降。IR组与IR+NS组RAGE和TLR4mRNA表达均显著高于Sham组和IR+Dex各组(p0.05),而IR+Dex各组中,缺血再灌注损伤时间越长,表达越高(p0.05)。IR组、IR+NS组和IR+Dex各组大鼠血清NF-κB、TNF-α和IL-1β水平均显著高于Sham组,但IR+Dex各组NF-κB、TNF-α和IL-1β的水平显著低于IR组、IR+NS组(p0.05)。本研究表明,右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,但受时间限制,脑缺血再灌注损伤的时间越长,其保护作用越弱。     

不同剂量右美托咪定治疗对大鼠术后神经功能及Keap1/Nrf2/ARE信号通路的影响

摘要 目的：探讨不同剂量右美托咪定治疗对大鼠术后神经功能及Keap1/Nrf2/ARE信号通路的影响。方法：60只SD大鼠随机分为假手术组（n=12）、脑缺血再灌注组（n=12）、低剂量右美托咪定组（n=12）、中剂量右美托咪定组（n=12）、高剂量右美托咪定组（n=12）,建立脑缺血模型,开展前瞻性研究。假手术组仅接受假手术而不造成脑缺血,术中持续静脉泵注生理盐水;脑缺血再灌注组维持脑缺血片刻,缺血即刻持续静脉泵注生理盐水;低、中、高剂量右美托咪定组脑缺血即刻静脉输注右美托咪定,首次剂量分别为6 μg/kg、60 μg/kg、600 μg/kg,剩余剂量分别以0.05 μg/kg/min、0.5 μg/kg/min、5 μg/kg/min持续静脉泵注。比较各组大鼠神经功能、炎症因子水平、氧化应激指标及Keap1/Nrf2/ARE表达。结果：与假手术组相比,低剂量右美托咪定组、中剂量右美托咪定组、高剂量右美托咪定组、脑缺血再灌注组Longa评分依次升高;与脑缺血再灌注组相比,低剂量右美托咪定组、中剂量右美托咪定组、高剂量右美托咪定组脑梗死体积、脑梗死体积所占百分比依次升高（P<0.05）。与假手术组相比,低剂量右美托咪定组、中剂量右美托咪定组、高剂量右美托咪定组、脑缺血再灌注组白介素6（IL-6）、白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平依次升高（P<0.05）。与假手术组相比,低剂量右美托咪定组、中剂量右美托咪定组、高剂量右美托咪定组、脑缺血再灌注组神经元特异性烯醇化酶（NSE）、丙二醛（MDA）水平依次升高,超氧化物歧化酶（SOD）水平依次降低（P<0.05）。与假手术组相比,低剂量右美托咪定组、中剂量右美托咪定组、高剂量右美托咪定组、脑缺血再灌注组Keap1/Nrf2/ARE表达依次降低（P<0.05）。结论：低剂量右美托咪定能够保护脑缺血再灌注大鼠术后神经功能,主要通过减轻炎症反应和氧化应激来起作用,其作用机制可能与激活Keap1/Nrf2/ARE信号通路有关。     

右美托咪定神经保护作用的自噬机制研究

摘要 目的：探讨右美托咪定发挥神经保护作用的细胞自噬和线粒体自噬机制。方法：通过对SH-SY5Y细胞进行氧糖剥夺再灌注模拟全脑的缺血再灌注损伤,将细胞随机分为7组：（1）C组：对照组;（2）OGD/R组：氧糖剥夺再灌注损伤组;（3）DEX组：右美托咪定组;（4）3MA组：3-甲基腺嘌呤组;（5）D+3MA组;（6）RAPA组：雷帕霉素组;（7）D+RAPA组。结果：与OGD/R组相比,DEX组、3MA组、D+3MA组的细胞活性、电镜下完整线粒体的数量、自噬体数量明显好于OGD/R组（P<0.05）;RAPA组与OGD/R组相比上述指标无明显差异（P>0.05）;而RAPA中加入右美托咪定以后,可以部分逆转RAPA的作用,细胞活性增加,完整线粒体数量增加,自噬体数量减少（P<0.05）。免疫印迹结果显示,与OGD/R组相比,DEX组、3MA组、D+3MA组LC3II/LC3I、Beclin 1表达减少,BCL-2、P62、TOM20的表达增加,RAPA组各种自噬蛋白的表达与OGD/R组相比没有统计学意义,当应用右美托咪定之后逆转了各种蛋白的表达（P<0.05）。结论：右美托咪定通过减少过度的细胞自噬和线粒体自噬发挥神经保护作用。     

虎杖甙抗肺缺血/再灌注损伤作用及其机制初探

目的：探讨虎杖甙（PD）抗肺缺血/再灌注损伤作用及其机制。方法：采用在体兔单肺原位缺血/再灌注损伤模型。健康日本大耳白兔40只随机均分成4组（n=10）：假手术对照组（C组）;肺缺血/再灌注组（I/R组）;肺缺血/再灌注＋虎杖甙组（PD组）,缺血前20 min和再灌注即刻按2.5 mg/kg静脉注射0.2%PD溶液;肺缺血/再灌注＋PD＋多粘菌素B组（PMB组）,给PD同时按24 mg/kg静注PMB。各组分别在缺血前20 min,缺血1 h即刻,再灌注1 h、2 h、3 h各时点颈动脉抽血检测丙二醛（MDA）含量,超氧化物歧化酶（SOD）活性。实验结束时,取肺组织测湿干重比（W/D）,计算肺泡损伤率（IAR）,电镜观察细胞超微结构改变。结果：①I/R组和PMB组血清SOD活性随着缺血和再灌注时间的延长而逐渐下降,且两组间无差异;PD组则显著改善（均P〈0.01）。②I/R组、PD组、PMB组血清MDA浓度均随着缺血和再灌注时间的延长而逐渐上升,但PD组上升明显缓慢（均P〈0.01）。③I/R组、PD组和PMB组的W/D与IAR均高于C组（P〈0.05或P〈0.01）,但PD组显著低于I/R组和PMB组（均P〈0.01）。④I/R组及PMB组肺组织的超微结构损伤严重,PD组损伤程度明显较轻。结论：PD对肺缺血/再灌注损伤具有拮抗作用,其机制除抗氧化损伤外可能还有PKC参与。     

红花对兔肺缺血/再灌注损伤及环氧酶表达的影响

目的：探讨红花（safflor injection,SI）抗肺缺血/再灌注损伤作用及其机制。方法：复制在体兔肺缺血/再灌注损伤模型。30只日本大耳兔,随机均分为三组：假手术组（S组）,缺血/再灌注组（I/R组）和缺血/再灌注＋红花注射液组（SI组）。实验结束时,自颈动脉抽血检测丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和黄嘌呤氧化酶（XO）活力。取肺组织测湿干重比（W/D）,计算肺泡损伤率（IAR）,电镜观察细胞超微结构改变。免疫组化法检测肺组织COX-1、COX-2蛋白表达的变化 组织原位杂交法检测肺组织COX-1mRNA、COX-2mRNA表达的变化。结果：I/R组血清MDA、XO均显著高于S组,SOD明显低于S组（P〈0.01） I/R组和SI组的W/D与IAR均高于S组（均P〈0.05和P〈0.01）,SI组显著低于I/R组（P〈0.01） I/R组肺组织的超微结构损伤严重,SI组损伤程度明显较轻 免疫组化和原位杂交发现I/R组肺组织COX-2蛋白和COX-2mRNA表达皆显著高于SI组（均P〈0.01）,肺组织COX-1蛋白和COX-1mRNA表达三组间无明显变化。结论：肺缺血/再灌注损伤可诱导肺组织COX-2的表达,SI可能通过抗氧化应激和下调肺组织COX-2蛋白及其基因的表达而减轻肺缺血/再灌注损伤。     

右美托咪定对脑缺血/再灌注大鼠海马兴奋性氨基酸含量及NMDA受体亚单位NR1表达的影响

目的：观察右美托咪定预处理对全脑缺血/再灌注大鼠海马细胞外谷氨酸（Glu）、天门冬氨酸（Asp）含量及N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体1（NR1）表达的影响,探讨右美托咪定脑保护作用及其神经递质机制。方法：雄性Wistar大鼠54只,随机分为3组（n=18）：假手术组、脑缺血/再灌注组和右美托咪定预处理组。用四血管闭塞法建立大鼠全脑缺血模型。收集清醒、缺血15 min及再灌注0~1 h微透析标本。于全脑缺血15 min再灌注1 h后,迅速断头取脑,采用免疫组化法和蛋白免疫印迹法检测海马NMDA受体NR1亚单位的表达情况。结果：与脑缺血/再灌注组相应时点比较,右美托咪定预处理组大鼠海马微透析液中Glu、Asp含量明显降低（P<0.05, 0.01）;免疫组化和Western-blot法检测显示右美托咪定预处理组大鼠海马组织NMDA受体亚单位NR1表达明显受抑制（P<0.05, 0.01）。结论：右美托咪定预处理不仅减少脑缺血/再灌注时兴奋性氨基酸释放,还能抑制NMDA受体亚单位NR1的高表达而产生脑保护作用。     

硫化氢对糖尿病大鼠肾脏纤维化的影响及其机制

目的：观察硫化氢（H₂S）对糖尿病大鼠肾脏组织纤维化的影响并探讨其作用机制。方法：雄性SD大鼠随机分为正常对照（NC）组、糖尿病对照（DC）组、糖尿病+硫氢化钠（DM+NaHS）组和糖尿病+炔丙基甘氨酸（DM+PAG）组,每组8只。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法制备1型糖尿病大鼠模型。造模成功4周后,DM+NaHS组和DM+PAG组大鼠每天分别腹腔注射56 μmol/kg NaHS和40 mg/kg PAG溶液。处理4周后,测定各组大鼠空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）和肌酐（SCr）水平;Masson染色观察肾脏组织胶原纤维变化,计算胶原容积分数（CVF）;透射电镜观察肾脏超微结构;利用试剂盒检测肾组织白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和羟脯氨酸（Hyp）水平;Western blot测肾组织TGF-β1、Smad3、磷酸化Smad3（p-Smad3）和IV型胶原（col-IV）的蛋白表达水平。结果：与NC组比较,DC组FBG、BUN、SCr、CVF、IL-1β、IL-6、TNF-α和Hyp均明显增高,肾脏胶原纤维沉积、超微结构损伤明显加重,TGF-β1、Smad3、p-Smad3、p-Smad3/Smad3和col-IV表达均明显增加。与DC组比较,除FBG外,DM+NaHS组中上述指标均明显改善;而DM+PAG组中上述指标损伤均进一步加重。结论：H₂S可以减轻糖尿病大鼠肾脏纤维化,其机制可能与减少促炎因子释放,下调TGF-β1/Smad3通路,抑制肾脏col-IV过量生成相关。     

Effects of Dexmedetomidine and Oxycodone on Neurocognitive and Inflammatory Response After Tourniquet-Induced Ischemia–Reperfusion Injury

To evaluate the effects of dexmedetomidine (Dex) and oxycodone (Oxy) on neurocognitive and inflammatory response after tourniquet-induced ischemia–reperfusion (I/R) injury. C57/BL6 mice were used to construct the mouse model of tourniquet-induced I/R injury. Mice (n?=?48) were randomly divided into sham, I/R, Dex or Oxy group. Morris water maze test was performed to assess the spatial learning and memory function. The expression of NF-κB, TLR4, NR2B, M1 (CD68 and TNF-α) and M2 (CD206 and IL-10) polarization markers in mice hippocampus were detected by western blot or immunofluorescent staining. Spontaneous excitatory post-synaptic currents (sEPSCs) were recorded by electrophysiology. Dex treatment alleviated I/R-induced declines in learning and memory (p < 0.05), while Oxy had no significant effect on it. Compared with I/R group, Dex and Oxy treatment down-regulated the expression of NF-κB, TLR4, TNF-α and CD68 (all p < 0.05), while no significantly different was found in CD206 and IL-10. In addition, Dex treatment down-regulated the expression of NR2B and reduced the frequency and amplitude of sEPSCs in I/R model mice (all p < 0.05), while Oxy had no significant effect on them. Tourniquet-induced I/R could impair the neurocognitive function of mice. Dex treatment could alleviate I/R-induced neurocognitive disorder by inhibiting abnormal synaptic transmission in hippocampal neurons. Both Dex and Oxy could alleviate the inflammatory response likely by inhibiting the polarization of microglia toward M1 phenotype via TLR4/NF-κB pathway. Future studies are needed to further examine the effects of Dex on neurocognitive disorder after tourniquet-induced I/R injury and investigate the exact mechanism.

     

Protective effect of tea polyphenols on renal ischemia/reperfusion injury via suppressing the activation of TLR4/NF-κB p65 signal pathway

Tea polyphenols (TP) was investigated in rats for its protective effect on renal ischemia/reperfusion injury (RIRI). Rats were randomized into groups as follows: (I) sham group (n = 10); (II) RIRI group (n = 10); (III) RIRI + TP (100 mg/kg) group (n = 5); (IV) RIRI + TP (200 mg/kg) group (n = 5); (V) RIRI + TP+ Astragalus mongholicus aqueous extract (AMAE) (300 mg/kg + 100 mg/kg) group (n = 5). For the IRI + TP groups, rats were orally given with tea polyphenols (100, 200 and 300 mg/kg body weight) once daily 10 days before induction of ischemia, followed by renal IRI. For the sham group and RIRI group, rats were orally given with equal volume of saline once daily 10 days before induction of ischemia, followed by renal IRI. Results showed that tea polyphenol pretreatment significantly suppressed ROS level and MDA release. On the other hand, in rats subjected to ischemia–reperfusion, the activities of endogenous antioxidant enzymes including superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione reductase (GR) and glutathione peroxidase (GSH-Px) showed recovery, whereas the levels of urea nitrogen and serum creatinine were reduced by administration of tea polyphenols orally for 10 days prior to ischemia–reperfusion. Moreover, tea polyphenol pretreatment significantly decreased TLR4 and NF-κB p65 protein expression levels in RIRI rats. At the same time, tea polyphenol pretreatment attenuated the increased level of serum IL-1β, IL-6, ICAM-1 and TNF-α, and enhanced IL-10 production in RIRI rats. Furthermore, tea polyphenol pretreatment significantly decreased renal epithelial tubular cell apoptosis induced by renal ischemia/reperfusion, alleviating renal ischemia/reperfusion injury. These results cumulatively indicate that tea polyphenol pretreatment could suppress the TLR4/NF-κB p65 signaling pathway, protecting renal tubular epithelial cells against ischemia/reperfusion-induced apoptosis, which implies that antioxidants may be a potential and effective agent for prevention of the ischemic/reperfusion injury through the suppression extrinsic apoptotic signal pathway induced by TLR4/NF-κB p65 signal pathway. Moreover, supplement of AMAE can increased renal protection effect of TP.     

内质网过度应激在肺缺血/再灌注小鼠心肌损伤中的作用

目的：探讨内质网过度应激与肺缺血/再灌注小鼠心肌损伤的关系。方法：雄性健康SPF级C57BL/6J小鼠40只,随机将其分为4组（n=10）：假手术组（Sham组）、肺缺血/再灌注组（I/R组）、ERS通路激动剂衣霉素（TM）组、ERS通路抑制剂4-苯基丁酸（4-PBA）组。采用夹闭左侧肺门30 min再灌注180 min的方法制备肺缺血/再灌注损伤模型。Sham组仅行开胸处理,不夹闭肺门,机械通气210 min;TM组、4-PBA组分别于造模前30 min腹腔注射衣霉素1 mg/kg和4-苯基丁酸400 mg/kg。于再灌注180 min时眼眶取血行心肌酶检测,处死后取心肌组织,行光镜、TUNEL Caspase 3酶活性、RT-PCR和Western blot检测。结果：与Sham组比较,光镜下I/R组、TM组和4-PBA组心肌细胞均有损伤性变化,肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）活性及心肌细胞凋亡指数、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（Caspase 3）酶活性升高,p-Jun氨基末端激酶（p-JNK）、Caspase 12、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）及其mRNA表达上调（P<0.01）;与I/R组比较,TM组光镜下心肌细胞损伤加重,血清CK-MB、LDH活性及心肌细胞凋亡指数、Caspase 3酶活性升高,p-JNK、Caspase 12、CHOP和GRP78蛋白及mRNA表达增加（P<0.01）,4-PBA组以上指标均下降,光镜下心肌细胞损伤减轻（P<0.01）;与TM组比较,4-PBA组光镜下心肌细胞损伤减轻,血清CK-MB、LDH活性及心肌细胞凋亡指数、Caspase 3酶活性降低,p-JNK、Caspase 12、CHOP和GRP78蛋白及mRNA表达下降（P<0.01）。结论：内质网过度应激参与肺I/R诱发的心肌损伤,抑制内质网过度应激能减轻心脏损伤。     

NOTCH1信号通路介导白藜芦醇抗肝缺血/再灌注所致大鼠心脏损伤保护作用的机制研究

目的：观察Notch1信号通路在肝缺血/再灌注损伤时对心脏损伤的保护作用并探讨其相关的机制。方法：36只健康雄性SD大鼠随机分为3组,假手术组（SC组）、肝缺血/再灌注组（HIR组）、白藜芦醇预处理组（Res处理组）,每组12只。各组均与肝脏缺血40 min再灌注2 h（SC组旷置相等时间）后,记录左室血流动力学变化,测定血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）浓度,取心肌组织测定SOD活力及MDA含量,Western blot检测心肌组织反应Notch通路活化标志的NICD表达,以RT-PCR法从转录水平检测Notch1和TNF-α的表达水平。结果：与SC比较,HIR组左室收缩及舒张功能均显著降低（P<0.01）,血清CK、LDH活力,TNF-α和IL-6浓度明显升高（P<0.01）,心肌MDA含量明显升高而SOD活力明显降低（P<0.01）,且Notch1表达下降,TNF-α表达增加;与I/R组相比,Res处理组左室舒缩功能明显升高,血清CK、LDH活力及TNF-α、IL-6浓度明显降低,同时心肌SOD活力明显升高而MDA含量明显降低,Notch1表达上升TNF-α表达降低。结论：白藜芦醇对肝缺血/再灌注大鼠心脏具有保护作用,其机制可能与Notch1信号通路的激活进而调节炎症反应及氧化应激有关。     

氧化应激对磷酸三钙磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解的影响及其机制

目的：探讨氧化应激对磷酸三钙（TCP）磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解的影响及其作用机制。方法：36只雄性ICR小鼠随机分为3组（n=12）：假手术（Sham）组、TCP磨损颗粒（TCP）组和N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）组。将TCP磨损颗粒30 mg包埋于小鼠颅骨顶部构建假体周围骨溶解模型,于术后第2天颅顶骨膜局部注射NAC（1.0 mg/kg）,隔日1次,持续2周后处死动物采血、取颅骨。抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察小鼠颅骨假体周围骨溶解情况;ELISA和化学比色法检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和总抗氧化能力（T-AOC）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性;Western blot检测假体周围骨组织中内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、磷酸化PERK（p-PERK）、真核细胞翻译起始因子2α（eIF2α）和磷酸化eIF2α（p-eIF2α）的表达。结果：与Sham组比较,TCP组小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及假体周围骨溶解面积显著增加（P<0.05）,T-AOC含量和SOD活性明显降低（P<0.05）,GRP78蛋白质表达、p-PERK/PERK和p-eIF2α/eIF2α值显著升高。与TCP组比较,NAC组小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及骨溶解面积明显减少（P<0.05）,血清T-AOC含量和SOD活性明显增加（P<0.05）,GRP78蛋白质表达、p-PERK/PERK和p-eIF2α/eIF2α值明显降低。结论：抑制氧化应激可阻止TCP磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解,其机制可能与PERK/eIF2α通路的失活有关。     

复方扁咽宁对急性咽炎大鼠疗效及其机制

目的:观察复方扁咽宁对急性咽炎大鼠的治疗作用及其作用机理,为其临床应用提供依据。方法:采用氨水直接喷雾法复制大鼠急性咽炎模型,将其随机分为模型组、复方扁咽宁高、中、低剂量组,另取正常大鼠作为对照,每组10只,高、中、低剂量组剂量(g/kg)分别按28.8、14.4、7.2(生药量计)灌胃药物水提液,正常组与模型组给予等量蒸馏水,观察并记录各组大鼠的症状表现;于末次给药24 h后,腹主动脉采血,ELISA法检测血清中IL-1β及TNF-α的含量,采用HE染色法观察各组大鼠肺组织及肺支气管组织形态,透射电镜法观察气管纤毛形态。结果:模型组急性咽炎表现明显:咽部红肿、充血,气管及肺组织出现病理改变,血清中IL-1β及TNF-α的含量显著升高(与正常组比较,P＜0.05),提示造模成功;与模型组相比,复方扁咽宁低、中、高剂量组急性咽炎的症状如咽部红肿、充血等现象得到明显缓解,肺组织及肺支气管组织形态得到明显的改善,血清中IL-1β及TNF-α的含量显著下降,中剂量组和高剂量组疗效更显著。结论:复方扁咽宁可加速急性咽炎的康复进程,改善支气管及肺的组织形态,其作用机制可能与抑制血清IL-1β和 TNF-α的释放等有关。     

高糖诱导的大鼠原代心肌细胞损伤对程序性坏死的影响及其机制*

目的: 探讨程序性坏死在高糖诱导的大鼠原代心肌细胞损伤中的变化及可能机制。方法: 原代大鼠心肌细胞随机分为4组(n=9):正常对照组(Control,5.5 mmol/L葡萄糖培养心肌细胞48 h)、高糖组(HG,30 mmol/L葡萄糖培养心肌细胞48 h)、HG+Nec-1(30 mmol/L葡萄糖+100 μmol/L程序性坏死关键蛋白RIP1抑制剂Nec-1共同培养心肌细胞48 h)组、高渗组(HPG,5.5 mmol/L葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇共同培养心肌细胞48 h)。MTT法检测各组心肌细胞活力,DHE荧光染色检测细胞氧化应激水平,ELISA法检测心肌细胞TNF-α、IL-6及IL-1β水平,Real-time PCR和Western blot分别检测各组程序性坏死关键蛋白RIP1、RIP3、MLKL mRNA和蛋白水平的表达情况。结果: 与Control组相比,HG组心肌细胞活力明显降低(P＜0.01),氧化应激水平明显增高(P＜0.01),TNF-α、IL-6及IL-1β水平升高明显(P＜0.01),RIP1、RIP3、MLKL mRNA及蛋白水平表达均明显升高(P＜0.05);与HG组相比,HG+Nec-1组心肌细胞活力明显升高(P＜0.01),氧化应激水平明显下降(P＜0.01),TNF-α、IL-6及 IL-1β水平明显降低(P＜0.01), RIP1、RIP3、MLKL mRNA及蛋白水平表达均下降(P＜0.05)。结论: 高糖诱导的原代大鼠心肌细胞损伤可引起程序性坏死的发生;抑制程序性坏死可减轻细胞损伤的机制,可能与抑制氧化应激、减轻炎症反应有关。