豚鼠高脂血症模型的建立及机制探讨

目的建立豚鼠高脂血症模型,探讨模型形成机制并与大鼠模型进行比较。方法豚鼠模型和大鼠模型1组用低胆固醇（0.1%）饲料诱导,大鼠模型2组用高胆固醇（1%）饲料诱导,连续诱导4周。第3、4周分别取血测定血清脂质水平及CETP表达,4周末剖取肝脏检测肝脏FC、TG、ACAT、CYP7A1等指标。动态观察两种动物形成高脂血症状况。结果与对照组比较,豚鼠模型组于第3周血清TC、LDL-C、TG分别升高3.92倍、3.75倍和1.24倍,4周末血清CETP表达、肝脏ACAT活性明显增加,但肝CYP7A1水平变化不大。大鼠模型1组经低胆固醇饲料诱导4周,血脂水平变化不明显,模型2组经高胆固醇饲料诱导于第3周血清TC、LDL-C分别升高1.24倍和1.54倍,明显低于同期豚鼠模型组,4周末大鼠两个模型组肝CYP7A1活性显著增强,血清TG、CETP水平、肝ACAT活性均未见明显变化。结论豚鼠对高脂饲料较大鼠敏感,是一种比大鼠更理想的高血脂模型动物,模型形成机制与血清CETP表达、肝ACAT及CYP7A1活性变化密切相关。     

银灵通胶囊调节实验性高脂饮食大鼠血脂的研究

目的:探究银灵通胶囊对脂质代谢的影响及其机制。方法:建立大鼠高脂模型,用药后检测其血脂、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,检测肝脏组织的高密度脂蛋白受体SR-BI、低密度脂蛋白受体(LDLR)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDH)受体CD36蛋白表达的mRNA表达水平,检测血管组织学变化。结果:高脂饮食明显升高大鼠血清中总胆固醇(CH)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和动脉硬化指数(AI值),银灵通胶囊组可降低上述指标,且呈一定的浓度依赖;高脂饮食可增加肝脏中SR-BI及CD36表达,降低LDLR表达,银灵通胶囊引起SR-BI的过度表达,使LDLR表达增加,CD36表达下降。高脂饮食使血清中MDA的含量增加,给予银灵通胶囊后,明显降低血清MDA的含量。结论:银灵通胶囊具有调节脂质代谢,抗动脉粥样硬化(AS)及抗脂质过氧化作用。其机制与银灵通胶囊能引起肝脏中SR-BI的过度表达及LDLR表达增加,降低肝脏中CD36表达和血清MDA含量有关。     

基于肠道菌群和短链脂肪酸代谢探讨不同饮食条件下高脂血症大鼠发病机制

目的 本研究拟对比两种不同高脂饮食方式诱导的高脂血症大鼠肠道菌群变化与短链脂肪酸代谢特征,以宿主-肠道菌群-代谢角度探讨高脂血症可能的微观机制。方法 SPF级SD大鼠分为：正常饮食组(CG组):饲喂大鼠维持饲料;高脂饮食组(HFD1组):每天足量饲喂高脂饲料;限饲高脂饮食组(HFD2组):每天限量饲喂高脂饲料80 g,不限量饲喂维持饲料。8周后检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肝组织和肾周脂肪病理学变化;取结肠内容物进行16S rDNA高通量测序,观察肠道菌群结构与功能的变化,并检测结肠内容物中短链脂肪酸的含量。结果 与CG组相比,HFD1组和HFD2组大鼠摄食量下降,体重升高;血清中TC、TG、LDL-C均显著升高;肝组织发生明显脂肪变性,肾周脂肪出现炎性病变;高脂干预后大鼠肠道菌群相对丰度显著变化,其中乳杆菌属相对丰度明显降低,菌群结构和功能变化明显,总短链脂肪酸、乙酸、丁酸、异丁酸下降显著。结论 两种高脂饮食方式均能引起大鼠高脂血症,且发病机制基本一致,均与脂质代谢以...     

游泳运动对大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇水平的影响

本文观察了游泳运动对摄取高脂饲料大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇/总胆固醇(HDL—C/TC)百分比值的影响。52头雄性成年大鼠分为四组:对照组(高脂饲料)、运动1组(高脂饲料 强制游泳0.5小时/天)、运动2组(高脂饲料 强制游泳2小时/天)和运动8组(高脂饲料 强制游泳4小时/天),每周游5天,连续3周。实验高脂饲料配方为:基础饲料93％,椰子油5％、胆固醇1.5％和胆盐0.5％。结果表明,高饱和脂肪和高胆固醇饲料引起血清TC升高,HDL-C和HDL-C/TC百分比值降低。游泳运动则可减轻体重,降低血清TC水平,显著地升高HDL-C和HDL-C/TC百分比值(P<0.001)。显示HDL-C的升高幅度与一定的运动时间延长有关。可见适宜的运动能改善高脂饲料所致的血脂异常。     

双歧杆菌三联活菌肠溶胶囊对高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪肝的疗效及机制探讨

目的 观察微生态制剂贝飞达(双歧杆菌三联活菌肠溶胶囊)治疗高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪肝的疗效并探讨其可能的作用机制.方法 雄性SD大鼠32只,适应性饲养1周后,随机分为3组,正常组:12只给予普通饲料喂养;模型组:12只,贝飞达治疗组:8只,均给予高脂饲料喂养;于喂养12周末正常组及模型组各处死4只,经肝组织HE染色确定造模成功后,贝飞达治疗组给予贝飞达[0.113 g/(kg·d)]灌胃,于16周末全部处死.检测大鼠血清AST、ALT、TC、TG、LDL、HDL、血清内毒素水平,观察其肝组织学变化.结果 模型组于高脂饲料喂养12周末出现脂肪肝,与正常组比较,模型组大鼠血清AST、ALT、TG、TC、LDL、HDL及血清内毒素水平均明显升高(P＜0.01).贝飞达治疗组大鼠各项指标较模型组均有显著改善,肝脏脂肪变性程度减轻.结论 微生态制剂贝飞达可能通过改善肠道菌群紊乱,减轻内毒素血症,从而调节肝脏脂质代谢紊乱,对非酒精性单纯性脂肪肝起到治疗作用.     

持续性全身炎症抑制动脉粥样硬化大鼠LPL活性的研究

目的:观察持续性炎症对动脉粥样硬化大鼠肝素后脂蛋白脂酶活性及相关代谢物的影响.方法:试验动物分为4组:对照组、单纯高脂饮食组、炎症组和抗炎组.单纯高脂饮食组给予高脂饮食;炎症组除高脂饮食外,用酵母多糖腹腔注射(20 mg/kg,1次/3天)进行炎症刺激;抗炎组动物除按炎症组处理外,用阿司匹林进行抗炎治疗;对照组为正常饮食.动物饲养8周.第4、8周时测血清肝素后脂蛋白脂酶的活性,并用ELISA法检测TNF-α和CRP水平以及酶法测定TG、LDL和HDL含量.结果:与单纯高脂动脉粥样硬化大鼠相比,叠加的炎症刺激能明显升高血清中TNF-α和CRP水平,并显著降低肝素后脂蛋白脂酶活性,TNF-α和CRP水平的变化与肝素后脂蛋白脂酶活性的变化均呈显著负相关;同时,血清TG、LDL含量显著升高,而HDL含量显著降低;阿司匹林(12mg/kg,1次/日)能明显降低大鼠血清中TNF-α和CRP的水平,升高肝素后脂蛋白脂酶活性,降低TG和LDL的含量,并升高HDL含量.结论:持续性全身炎症刺激可以明显降低动脉粥样硬化大鼠模型血清肝素后脂蛋白脂酶活性,从而加重TG、LDL和HDL的代谢紊乱.     

脂负荷性饵食对家兔脂代谢的影响

目的探讨建立兔饵食性高脂血症模型的方法,观察高脂饮食对兔体重、死亡率及血脂变化情况。方法取普通级雄性新西兰大耳白兔,其中随机抽取10只作为普通饮食组,喂以普通饮食;其他动物给予高脂饮食,4周后,根据血清TC水平分为高脂饮食敏感组和高脂饮食非敏感组,继续喂养9周,观察三组间兔血清总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的变化。结果与普通饮食组相比,高脂饮食敏感组在第4～13周时血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平显著升高（P〈0.01）,高脂饮食非敏感组在第7～13周时,动物血清TC、HDL-C、LDL-C水平显著升高（P〈0.01）,而高脂饮食非敏感组血清TG水平的改变无统计学意义（P〉0.05）。与高脂饮食敏感组相比,高脂饮食非敏感组家兔血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平的上升程度均显著低于高脂饮食敏感组动物（P〈0.01）。结论首次发现兔对高脂饮食敏感性存在差异,高脂饮食非敏感组家兔抗病能力、对环境的适应能力和耐受性均高于高脂饮食敏感组兔。与高脂饮食敏感组家兔相比,高脂饮食非敏感组家兔对高脂饮食耐受性强。     

豚鼠动脉粥样硬化模型形成机制:LDL-C代谢异常

目的建立豚鼠动脉粥样硬化模型并探讨其形成机制,同时与大鼠进行比较,阐明模型特点及优势。方法应用高脂饲料诱导方法,观察豚鼠和大鼠动脉粥样硬化病变的形成情况。HE染色法分析主动脉内膜-中膜厚度、内膜炎性细胞浸润和内膜表层斑块的形成情况;酶法检测血脂,酶联免疫吸附法测定血清Ox-LDL浓度,实时定量PCR检测肝脏LDL-R mRNA表达的变化,免疫组化检测血管内膜CD36蛋白表达的变化。结果与对照组比较,豚鼠模型组动脉内膜明显增厚,单核细胞、巨噬细胞浸润与聚集增加,大量的泡沫细胞聚集形成斑块,而大鼠模型组未出现类似动脉粥样硬化病理改变。机制研究表明豚鼠较大鼠易于诱发形成动脉粥样硬化原因主要在于豚鼠血清Ox-LDL水平明显升高,肝脏LDL-R mRNA表达下调,动脉内膜CD36蛋白表达明显增强等。结论与大鼠不同,经高脂饲料诱导10周后,豚鼠可形成典型动脉粥样硬化病变,其机制主要在于LDL-C代谢异常。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏PPAR-γ的表达

目的：研究PPAR-γ在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝脏组织中的表达,探讨非酒精脂肪性肝病可能的发病机制。方法：雄性SD大鼠30只,随机分为A（正常组）15只普通饮食,B（高脂组）15只高脂饮食。8周后,自两组各随机抽取2只大鼠处死,光镜观察证实脂肪肝造模成功,继续喂养4周后处死所有大鼠,取血清做免疫生化检查,取肝组织标本,分别以光镜观察做出NAS评分,免疫组化和PCR法检测肝组织PPAR-γ蛋白的表达。结果：1.高脂饮食可以成功的复制NAFLD的大鼠模型;2.血清GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C在高脂组表达量较正常组明显升高,差异具有统计学意义（P〈0.05）;3.免疫组化显示：高脂组PPAR-γ表达量较正常组升高;结论：1.高脂饮食可成功复制NAFLD模型;2.PPAR-γ在NAFLD大鼠肝脏成脂性改变中具有重要作用。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏PPAR-γ的表达

目的:研究PPAR-Y在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脏组织中的表达,探讨非酒精脂肪性肝病可能的发病机制.方法:雄性SD大鼠30只,随机分为A(正常组)15只普通饮食,B(高脂组)15只高脂饮食.8周后,自两组各随机抽取2只大鼠处死,光镜观察证实脂肪肝造模成功,继续喂养4周后处死所有大鼠,取血清做免疫生化检查,取肝组织标本,分别以光镜观察做出NAS评分,免疫组化和PCR法检测肝组织PPAR-Y蛋白的表达.结果:1.高脂饮食可以成功的复制NAFLD的大鼠模型;2.血清GLU、TC、TG、HDL-C、LDLC在高脂组表达量较正常组明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);3.免疫组化显示:高脂组PPAR-Y表达量较正常组升高;结论:1.高脂饮食可成功复制NAFLD模型;2.PPAR-Y在NAFLD大鼠肝脏成脂性改变中具有重要作用.     

富硒大豆多肽对高脂致大鼠脂肪肝和抗氧化功能的影响

目的：探讨富硒大豆多肽改善高脂所致脂肪肝大鼠肝抗氧化功能的影响及机制。方法：将40只Wistar大鼠分成4组（n=10）,分别饲喂标准饲料＋水（NC）、标准饲料＋富硒大豆多肽液（SeN）、高脂饲料＋水（HC）、高脂饲料＋富硒大豆多肽液（SeH）,10周后处死,用苏丹Ⅲ染色肝脏组织切片观察脂肪变性程度,免疫组织化学方法测定肝组织葡萄糖调节蛋白78（GRP78）表达情况,并分析其肝功能、血脂及血清和肝匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量的变化情况。结果：HC组在血清TC、TG水平、肝脏脂肪化程度、GRP78表达情况都明显高于NC、SeN、SeH组（P〈0.01）。SeH组血清和肝组织中MDA含量较HC组降低（P〈0.01）,GSH-Px、SOD活性升高。NC和SeN两组各项指标之间无明显差异。结论：富硒大豆多肽能有效提高脂肪肝大鼠肝内抗氧化酶活性,抑制脂质过氧化反应,降低肝组织内GRP78表达。     

Remodeling of HDL by CETP in vivo and by CETP and hepatic lipase in vitro results in enhanced uptake of HDL CE by cells expressing scavenger receptor B-I.

The transport of HDL cholesteryl esters (CE) from plasma to the liver involves a direct uptake pathway, mediated by hepatic scavenger receptor B-I (SR-BI), and an indirect pathway, involving the exchange of HDL CE for triglycerides (TG) of TG-rich lipoproteins by cholesteryl ester transfer protein (CETP). We carried out HDL CE turnover studies in mice expressing human CETP and/or human lecithin:cholesterol acyltransferase (LCAT) transgenes on a background of human apoA-I expression. The fractional clearance of HDL CE by the liver was delayed by LCAT transgene, while the CETP transgene increased it. However, there was no incremental transfer of HDL CE radioactivity to the TG-rich lipoprotein fraction in mice expressing CETP, suggesting increased direct removal of HDL CE in the liver. To evaluate the possibility that this might be mediated by SR-BI, HDL isolated from plasma of the different groups of transgenic mice was incubated with SR-BI transfected or control CHO cells. HDL isolated from mice expressing CETP showed a 2- to 4-fold increase in SR-BI-mediated HDL CE uptake, compared to HDL from mice lacking CETP. The addition of pure CETP to HDL in cell culture did not lead to increased selective uptake of HDL CE by cells. However, when human HDL was enriched with TG by incubation with TG-rich lipoproteins in the presence of CETP, then treated with hepatic lipase, there was a significant enhancement of HDL CE uptake. Thus, the remodeling of human HDL by CETP, involving CE;-TG interchange, followed by the action of hepatic lipase (HL), leads to the enhanced uptake of HDL CE by cellular SR-BI.These observations suggest that in animals such as humans in which both the selective uptake and CETP pathways are active, the two pathways could operate in a synergistic fashion to enhance reverse cholesterol transport.     

饮食诱导代谢综合征小鼠模型的建立

目的建立以高脂纯化饲料诱导的、遗传背景和环境因素共同起作用的C57BL/6J小鼠代谢综合征（MS）模型,为研究营养因素与代谢综合征的关系提供周期较短、稳定性好、可重复性、与人类发病可比性高的动物模型。方法雄性3周龄C57BL/6J小鼠30只适应性喂养10d后随机分为2组,其中一组（10只）给予普通生长饲料（对照组）,另一组（20只）给予高脂纯化饲料（模型组）。喂养期间对空腹血糖（FBG）、体重进行连续监测,同时监测体重指数（BMI）、血清胰岛素（FINS）、血清甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）,实验期10周。实验结束时取内脏脂肪和肝脏称重,取肝胰做病理分析。结果分组喂养1周时,模型组小鼠体重出现显著性升高（P〈0.001）,并表现为中心型肥胖。4周时FBG显著性升高（P〈0.05）,5周时FINS开始升高但无显著性差异。8周时血清TC、HDL-C显著性升高（P〈0.001）,10周时TG、TC、HDL-C、LDL-C均升高（P〈0.01）。HE染色显示肝脏中度脂肪变,胰岛细胞无明显改变。结论单纯施以高脂饲料10周即可建立MS小鼠模型。并且该模型造模方法简单易行、周期较短、稳定性好、可重复性高,与人类MS自然发病过程类似,是MS较理想的动物模型。     

Cholesteryl ester transfer protein expression partially attenuates the adverse effects of SR-BI receptor deficiency on cholesterol metabolism and atherosclerosis

Scavenger receptor SR-BI significantly contributes to HDL cholesterol metabolism and atherogenesis in mice. However, the role of SR-BI may not be as pronounced in humans due to cholesteryl ester transfer protein (CETP) activity. To address the impact of CETP expression on the adverse effects associated with SR-BI deficiency, we cross-bred our SR-BI conditional knock-out mouse model with CETP transgenic mice. CETP almost completely restored the abnormal HDL-C distribution in SR-BI-deficient mice. However, it did not normalize the elevated plasma free to total cholesterol ratio characteristic of hepatic SR-BI deficiency. Red blood cell and platelet count abnormalities observed in mice liver deficient for SR-BI were partially restored by CETP, but the elevated erythrocyte cholesterol to phospholipid ratio remained unchanged. Complete deletion of SR-BI was associated with diminished adrenal cholesterol stores, whereas hepatic SR-BI deficiency resulted in a significant increase in adrenal gland cholesterol content. In both mouse models, CETP had no impact on adrenal cholesterol metabolism. In diet-induced atherosclerosis studies, hepatic SR-BI deficiency accelerated aortic lipid lesion formation in both CETP-expressing (4-fold) and non-CETP-expressing (8-fold) mice when compared with controls. Impaired macrophage to feces reverse cholesterol transport in mice deficient for SR-BI in liver, which was not corrected by CETP, most likely contributed by such an increase in atherosclerosis susceptibility. Finally, comparison of the atherosclerosis burden in SR-BI liver-deficient and fully deficient mice demonstrated that SR-BI exerted an atheroprotective activity in extra-hepatic tissues whether CETP was present or not. These findings support the contention that the SR-BI pathway contributes in unique ways to cholesterol metabolism and atherosclerosis susceptibility even in the presence of CETP.     

东方田鼠非酒精性脂肪肝模型的建立

目的建立东方田鼠非酒精性脂肪肝模型,并观察测定其肝指数、病理、血清生化指标的动态变化。方法选取6周龄湖南洞庭湖种群雄性东方田鼠70只,随机分为2组,模型组饲喂高脂肪料,对照组饲喂高纤维料,分别于第2、4、6、8、12周处死,称量体重及肝重,计算肝指数,采血检测东方田鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰转移酶(r-GT)、胆碱酯酶(CHE)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、葡萄糖(GLU)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL),并取肝脏HE染色后做病理学观察。结果与对照组相比,模型组6周时肝脏出现了典型的脂肪肝特征,肝重和肝指数都明显升高(P<0.05),血清ALT、AST、r-GT、CHE、TC、FFA、GLU和LDL都明显升高(P<0.05),HDL和TG均明显降低(P<0.05)。镜检观察到模型组田鼠肝细胞逐渐呈现弥漫性脂肪变性,6周时大范围出现脂滴,8周时肝内出现弥漫性大脂肪滴,12周后出现炎细胞的浸润。结论采用高脂饲料成功诱发东方田鼠非酒精性脂肪肝,可为研究非酒精性脂肪肝的发病机制和药物干预提供新的模型。     

Cholesteryl ester transfer protein corrects dysfunctional high density lipoproteins and reduces aortic atherosclerosis in lecithin cholesterol acyltransferase transgenic mice

Expression of human lecithin cholesterol acyltransferase (LCAT) in mice (LCAT-Tg) leads to increased high density lipoprotein (HDL) cholesterol levels but paradoxically, enhanced atherosclerosis. We have hypothesized that the absence of cholesteryl ester transfer protein (CETP) in LCAT-Tg mice facilitates the accumulation of dysfunctional HDL leading to impaired reverse cholesterol transport and the development of a pro-atherogenic state. To test this hypothesis we cross-bred LCAT-Tg with CETP-Tg mice. On both regular chow and high fat, high cholesterol diets, expression of CETP in LCAT-Tg mice reduced total cholesterol (-39% and -13%, respectively; p < 0.05), reflecting a decrease in HDL cholesterol levels. CETP normalized both the plasma clearance of [(3)H]cholesteryl esters ([(3)H]CE) from HDL (fractional catabolic rate in days(-1): LCAT-Tg = 3.7 +/- 0.34, LCATxCETP-Tg = 6.1 +/- 0.16, and controls = 6.4 +/- 0.16) as well as the liver uptake of [(3)H]CE from HDL (LCAT-Tg = 36%, LCATxCETP-Tg = 65%, and controls = 63%) in LCAT-Tg mice. On the pro-atherogenic diet the mean aortic lesion area was reduced by 41% in LCATxCETP-Tg (21.2 +/- 2.0 micrometer(2) x 10(3)) compared with LCAT-Tg mice (35.7 +/- 2.0 micrometer(2) x 10(3); p < 0.001). Adenovirus-mediated expression of scavenger receptor class B (SR-BI) failed to normalize the plasma clearance and liver uptake of [(3)H]CE from LCAT-Tg HDL. Thus, the ability of SR-BI to facilitate the selective uptake of CE from LCAT-Tg HDL is impaired, indicating a potential mechanism leading to impaired reverse cholesterol transport and atherosclerosis in these animals. We conclude that CETP expression reduces atherosclerosis in LCAT-Tg mice by restoring the functional properties of LCAT-Tg mouse HDL and promoting the hepatic uptake of HDL-CE. These findings provide definitive in vivo evidence supporting the proposed anti-atherogenic role of CETP in facilitating HDL-mediated reverse cholesterol transport and demonstrate that CETP expression is beneficial in pro-atherogenic states that result from impaired reverse cholesterol transport.     

高脂喂养大鼠肝脏的NF-κBp65表达与胰岛素抵抗的相关性

目的探讨高脂饲料喂养大鼠肝脏NF-κBp65蛋白的表达与胰岛素抵抗的关系。方法采用高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型,并用正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术评估。应用Western blotting方法检测大鼠肝脏中NF-κBp65蛋白的表达。结果①高脂饲料组大鼠的葡萄糖输注率明显低于基础饲料组[GIR60~120（0.76±0.28vs4.26±0.70）mg/（kg.min）,P〈0.01]。②高脂饲料组大鼠肝脏NF-κBp65蛋白的表达明显高于基础饲料组（A值118.48±1.45vs68.13±4.84,P〈0.01）。③高脂胰岛素抵抗大鼠肝脏NF-κBp65蛋白表达与GIR60-120（r=-0.993,P=0.000）和ISI（r=-0.773,P=0.009）负相关。结论高脂诱导的胰岛素抵抗大鼠肝脏NF-κB的激活可能是产生肝脏和全身胰岛素抵抗的根源。