基质金属蛋白酶-9 表达与胰腺癌生物学行为及预后的相关性研究

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达与胰腺癌生物学特性及对患者预后的影响。方法:采用免疫组织化学法检测63例原发性胰腺癌及11例癌旁正常组织中MMP-9的表达.比较MMP-9的表达与胰腺癌患者生物学特性及预后的关系。结果:MMP-9阳性表达率为68.3%(43/63),而11例癌旁正常组织无MMP-9表达。MMP-9的表达与肿瘤大小(P=0.014)、分化程度(P=0.039)、TNM分期(P=0.001)、远处转移(P=0.011)及淋巴结转移(P=0.009)显著相关。MMP-9表达阳性者生存时间明显低于阴性表达者(Log-rank检验,x2=32.70,P=0.000)。Cox回归分析表明:分化程度(P=0.000)、TNM分期(P=0.006)、淋巴结转移(P=0.035)及MMP-9过表达(P=0.000)是胰腺癌预后的独立影响因素。结论:MMP-9过表达在胰腺癌的浸润转移中发挥重要作用,过表达提示预后不良.对MMP-9的检测可有效的评估胰腺癌患者的预后。     

基质金属蛋白酶-9 与脑出血的关系

基质金属蛋白酶(MMPs)是一族锌离子依赖性内肽酶,具有降解细胞外基质的作用,而后者是构成血管基底膜的主要成分。MMPs参与了伤口愈合、动脉硬化发生、肿瘤细胞扩散等过程。MMP-9是MMPs中的重要成员,与脑血管病关系密切,在脑出血的发生、发展过程中起到了重要的作用。因此,监测MMP-9表达水平的变化可能对脑出血的发生、发展及预后产生重要影响;而降低MMP-9表达水平,则可能成为治疗脑出血的新途径。     

慢性肾小球肾炎患者血清MMP-9和TIMP-1的浓度及意义

目的:观察慢性肾小球肾炎血清基质金属蛋白酶9(matrix metalo protein-ase-9,MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMP-1)的浓度与肾组织中MMP-9、TIMP-1表达的相关性,探讨慢性肾小球肾炎血清MMP-9、TIMP-1对肾脏纤维化的判断价值。方法:通过肾组织活检病理检查,将入选慢性肾炎的病例分增生组(A组)15例,纤维化组(B组)15例,另选10例志愿者作为健康对照组C组。应用免疫组化法观察A、B两组MMP-9、TIMP-1在肾组织中的表达情况,并且进行半定量分析,比较它们之间有无差别。应用ELISA双抗体夹心法检测A、B、C三组MMP-9、TIMP-1在血清中的浓度,比较它们之间有无差别。观察A、B两组MMP-9、TIMP-1在肾组织中的表达水平与在血清的浓度有无相关性。结果:A、B两组MMP-9在肾小球和肾间质少见表达,主要在肾小管上皮细胞浆中表达增高,两组之间表达的强度有显著差异性;A组TIMP-1在肾小球中少见表达,在肾小管上皮细胞增强。B组TIMP-1在肾小球中有少量表达,在肾小管上皮细胞较A组进一步增强,两组之间表达的强度有显著差异性(P0.05)。血清中MMP-9、TIMP-1浓度在A、B组显著高于C组,血清中MMP-9在A、B两组之间无显著差异性,血清中TIMP-1在A、B、C三组间两两比较有显著差别(P0.05)。结论:慢性肾炎患者血清中MMP-9、TIMP-1浓度与肾脏组织中MMP-9、TIMP-1的表达呈正相关。MMP-9、TIMP-1的相关性分析P值小于0.01。血清MMP-9、TIMP-1参与了肾脏纤维化的进展,慢性肾小球肾炎血清中MMP-9、TIMP-1的浓度可在一定程度上反映肾脏纤维化程度。     

MMP-2、MMP-7、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶及其抑制剂在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤浸润转移的关系,为乳腺癌的临床治疗及预后预测提供基础。方法:选择我院2012年5月至2014年5月收治的乳腺癌患者80例,对所选病例的乳腺癌组织、癌旁组织及正常乳腺组织样本进行检测。观察并比较不同乳腺组织中MMP-2,MMP-7、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2 m RNA的表达水平。结果:与正常乳腺组织相比较,乳腺癌组织和癌旁组织中MMP-2、MMP-7、MMP-9,TIMP-1及TIMP-2 m RNA的表达显著增加,差异具有统计学意义(P0.05)。乳腺癌组织中MMP-2、MMP-7、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2 m RNA的表达显著高于癌旁组织和正常组织,差异具有统计学意义(P0.05)。随着肿瘤范围扩大,MMP-2、MMP-7和MMP-9 m RNA的表达水平显著增加(P0.05),而TIMP-1和TIMP-2 m RNA表达无显著变化(P0.05)。随着淋巴结转移进展,MMP-2、MMP-7和MMP-9 m RNA的表达显著增加(P0.05),而TIMP-1和TIMP-2 m RNA无显著变化(P0.05)。结论:MMP-2、MMP-7、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的m RNA在乳腺癌组织中呈高表达,这可能与乳腺癌的发生和发展有关,而MMP-2、MMP-7和MMP-9可能有助于预测乳腺癌的侵袭行为。     

非小细胞肺癌组织MMP-2、MMP-9的表达与组织学类型及临床分期的关系

目的:探究非小细胞肺癌组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及其与患者组织学类型及其临床分期的关系。方法:选取2014年1月至2017年1月于我院进行就诊并确诊为非小细胞肺癌的96例患者为实验组,另选取30例肺良性病变患者为对照组,使用免疫组织化学的方法检测患者肺癌组织或肺良性病变组织中MMP-2、MMP-9的表达,并分析MMP-2、MMP-9的表达与患者组织学类型及临床分期之间的关系。结果:非小细胞肺癌组织MMP-2及MMP-9表达水平显著高于肺良性病变组织(P0.05)。非小细胞肺癌鳞癌组织MMP-2、MMP-9表达明显高于腺癌和腺鳞癌(P0.05),而鳞癌与腺鳞癌组织MMP-2、MMP-9表达相比差异无统计学意义(P0.05)。随着非小细胞肺癌临床分期的增加,癌组织MMP-2及MMP-9表达逐渐上升,各分期比较差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:MMP-2、MMP-9在非小细胞肺癌组织中的表达水平明显上调,以鳞癌最高,且与临床分期显著相关,提示其对组织学类型、临床分期、病情评估和预后判断均具有一定的参考意义。     

磷脂酶C抑制剂U73122对COPD大鼠肺组织内MMP-9,MMP-12表达影响的实验研究

目的:探讨磷脂酶C抑制剂U73122对COPD大鼠肺组织内MMP-9,MMP-12表达的影响.方法:通过烟熏及气管内注入脂多糖(LPS)建立COPD大鼠模型,从第1d起通过尾静脉注射磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122(以U73343为阴性对照),持续28天.第28d,观察各组大鼠肺组织病理变化,western blot法检测肺组织中MMP-9、MMP-12表达水平.结果:模型组和干预组大鼠MMP-9、MMP-12蛋白表达高于对照组(P＜0.05),干预组低于模型组(P＜0.05).干预组肺组织形态学改变较模型组改善(P＜0.05).结论:U73122通过抑制磷脂酶C(PLC)信号途径减少了COPD中MMP9、MMP12的表达,减轻肺组织结构破坏.     

基质金属蛋白酶-9表达与胰腺癌生物学行为及预后的相关性研究

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）的表达与胰腺癌生物学特性及对患者预后的影响。方法：采用免疫组织化学法检测63例原发性胰腺癌及11例癌旁正常组织中MMP-9的表达.比较MMP-9的表达与胰腺癌患者生物学特性及预后的关系。结果：MMP-9阳性表达率为68.3%（43/63）,而11例癌旁正常组织无MMP-9表达。MMP-9的表达与肿瘤大小（P=0.014）、分化程度（P=0.039）、TNM分期（P=0.001）、远处转移（P=0.011）及淋巴结转移（P=0.009）显著相关。MMP-9表达阳性者生存时间明显低于阴性表达者（Log-rank检验,x2=32.70,P=0.000）。Cox回归分析表明：分化程度（P=0.000）、TNM分期（P=0.006）、淋巴结转移（P=0.035）及MMP-9过表达（P=0.000）是胰腺癌预后的独立影响因素。结论：MMP-9过表达在胰腺癌的浸润转移中发挥重要作用,过表达提示预后不良.对MMP-9的检测可有效的评估胰腺癌患者的预后。     

不同严重程度缺氧缺血性脑病患儿血清MMP-9、MMP-2、UA水平的表达及临床意义

目的:研究不同严重程度缺氧缺血性脑病患儿血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、尿酸(UA)水平的表达及临床意义。方法:选取2015年4月-2017年4月本院收治的缺氧缺血性脑病患儿50例记为研究组,另取同期本院健康新生儿50例记为对照组,分别比较两组新生儿血清MMP-9、MMP-2及UA水平,对比研究组不同时期不同严重程度患儿血清MMP-9、MMP-2及UA水平,采用Preason相关性分析缺氧缺血性脑病病情严重程度与血清MMP-9、MMP-2、UA水平的关系。结果:研究组患儿发病后1d、发病后3d、发病后7d血清MMP-9、MMP-2及UA水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),且MMP-9水平先升高后降低,MMP-2、UA水平呈逐渐升高的趋势(P0.05)。轻度组、中度组、重度组患儿发病后3d的MMP-9、MMP-2、UA水平高于发病后1d,且随着病情的加重,呈逐渐上升的趋势,差异有统计学意义(P0.05)。经Preason相关性分析可得:缺氧缺血性脑病病情严重程度与血清MMP-9、MMP-2、UA水平均呈正相关(P0.05)。结论:缺氧缺血性脑病患儿随着病情的逐渐加重,其血清MMP-9、MMP-2及UA水平不断升高,呈正相关关系。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂在乳腺癌中的表达

目的:研究基质金属蛋白酶2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2),基质金属蛋白酶7(MMP-7),基质金属蛋白酶9(MMP-9),膜型基质金属蛋白酶(Membrane Type-1 Matrix Metalloproteinase,MT1-MMP),金属蛋白酶组织抑制剂1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase,TIMP-1),金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP-2)在乳腺癌组织中mRNA的表达,及与临床病理变量之间的关联。方法:采用150例乳腺癌患者的组织样本。使用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法来测定肿瘤组织和正常乳腺组织中MMP-2,MMP-7,MMP-9,MT1-MMP,TIMP-1和TIMP-2的mRNA表达。结果:MMP-2,MMP-7,MMP-9,MT1-MMP,TIMP-1和TIMP-2在乳腺癌中的mRNA表达显著高于正常组织。结论:MMP-2,MMP-7,MMP-9,和MTI-MMP的表达增加和临床病理参数之间的关联,可以用来预测乳腺癌的侵害行为。     

Exendin-4 对糖尿病脑缺血再灌注大鼠脑组织中MMP-9 表达的影响

目的:通过观察Exendin-4对糖尿病大鼠脑缺血再灌注后脑梗死体积百分比及脑组织中金属基质蛋白酶-9及基质金属蛋白酶抑制剂-1的变化,探讨Exendin-4对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:选用SD大鼠,给予链脲佐菌素(streptozocin,STZ)建立糖尿病大鼠模型后,随机分为A组:糖尿病对照组(n=6);B组:模型组(n=6);C组:Exendin-4低剂量组(n=6);D组:Exendin-4中剂量组(n=6);E组:Exendin-4高剂量组(n=6)。常规喂养6周后,A组给予假手术处理,B、C、D及E组采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血90 min再灌注模型,24 h后处死大鼠取脑组织,采用2,3,5一氯化三苯四唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色测算脑梗死体积百分比;同时分别采用Western Blot法及RT-PCR测量脑组织中的MMP-9及TIMP-1表达量。结果:脑缺血再灌注能致脑组织中MMP-9及TIMP-1表达量增高,各组与A组比较,有显著差异(P<0.05);给予Exendin-4处理后脑组织中MMP-9及TIMP-1表达增高程度及脑梗死体积百分比明显降低,与B组比较有显著差异(P<0.05)。结论:Exendin-4对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抑制MMP-9及TIMP-1的表达有关。     

Polyherbal formulation exerts wound healing,anti-inflammatory,angiogenic and antimicrobial properties: Potential role in the treatment of diabetic foot ulcers

Diabetic foot ulcer (DFU) is a common and devastating complication in diabetic patients and is associated with an elevated risk of amputation and mortality. DFU remains a major therapeutic challenge due to poor understanding of its underlying pathogenesis. This complication is characterized by impaired wound healing; however, mechanisms causing this impairment are complicated and involve interactions between many different cell types and infections. In addition to other conventional DFU treatments, herbal foot baths are also common, although little is known about their mechanisms of action, and they contain a wide variety of herbal ingredients. In this study, we aimed to examine the effects of three polyherbal formulations consisting of medicinal plants used in traditional Thai herbal foot baths on wound healing, anti-inflammation, angiogenesis, and extracellular matrix modulation using high-concentration glucose-treated human keratinocytes, in addition to antibacterial evaluation. Our results showed that formulation 3 (F3) possessed the greatest potential to restore the impairment of keratinocytes caused by high glucose concentrations. We found that F3 could inhibit the growth of Staphylococcus aureus, accelerate wound healing, and upregulate the expression of TIMP-1, VEGF, and TGF-β, and downregulate the expression of TNF-α, IL-6, and MMP-9. Collectively, these data support the potential of F3 for therapeutic development in the treatment of DFU.     

胫骨横向骨搬移术联合封闭引流技术治疗糖尿病足溃疡的临床比较研究

摘要 目的：观察胫骨横向骨搬移术联合封闭引流技术（VSD）治疗糖尿病足溃疡（DFU）的治疗效果。方法：选取2018年4月~2020年7月我院收治的65例DFU患者。根据治疗方式的不同将患者分为A组（32例,VSD治疗）和B组（33例,胫骨横向骨搬移术联合VSD治疗）。对比两组围术期指标、患足皮温、视觉模拟评分法（VAS）评分、踝肱指数（ABI）和血清相关指标变化,记录两组并发症发生率。结果：两组术后1个月,患足皮温、ABI升高,VAS评分下降,且B组的变化幅度明显大于A组（P<0.05）。两组完全负重时间、下地行走时间组间对比无差异（P>0.05）。B组的溃疡愈合时间、去除外固定架时间明显短于A组（P<0.05）。两组术后1个月血管内皮生长因子（VEGF）水平升高,白细胞计数（WBC）、C反应蛋白（CRP）水平下降,且B组的变化幅度明显大于A组（P<0.05）。两组并发症发生率组间对比无统计学差异（P>0.05）。结论：胫骨横向骨搬移术联合VSD治疗DFU,可促进创面愈合,效果显著。     

Metformin Induces Cell Cycle Arrest,Reduced Proliferation,Wound Healing Impairment In Vivo and Is Associated to Clinical Outcomes in Diabetic Foot Ulcer Patients

BackgroundSeveral epidemiological studies in diabetic patients have demonstrated a protective effect of metformin to the development of several types of cancer. The underlying mechanisms of such phenomenon is related to the effect of metformin on cell proliferation among which, mTOR, AMPK and other targets have been identified. However, little is known about the role that metformin treatment have on other cell types such as keratinocytes and whether exposure to metformin of these cells might have serious repercussions in wound healing delay and in the development of complications in diabetic patients with foot ulcers or in their exacerbation.ResultsMetformin treatment significantly reduces cell proliferation; colony formation and alterations of the cell cycle are observed also in the metformin treated cells, particularly in the S phase. There is a significant increase in the area of the wound of the metformin treated animals at different time points (P<0.05). There is also a significant increase in the size and wound area of the patients with diabetic foot ulcers at the time of hospitalization. A protective effect of metformin was observed for amputation, probably associated with the anti inflammatory effects reported of metformin.ConclusionsMetformin treatment reduces cell proliferation and reduces wound healing in an animal model and affects clinical outcomes in diabetic foot ulcer patients. Chronic use of this drug should be further investigated to provide evidence of their security in association with DFU.     

Interaction of keratinocytes and fibroblasts modulates the expression of matrix metalloproteinases-2 and -9 and their inhibitors

Disruption of epidermal-mesenchymal communication due to a delay in epithelialization, increases the frequency of developing fibrotic conditions in skin. As matrix metalloproteinases-2 (MMP-2) and -9 (MMP-9) are two key enzymes involved in wound healing and tissue remodeling, here we examined the efficacy of keratinocyte-fibroblast interaction on modulation of these enzymes and their inhibitors. The conditioned media derived from keratinocytes and fibroblasts grown in upper and lower chambers of a co-culture system, respectively, were analyzed for MMP-2 and -9. Keratinocyte or fibroblast conditioned medium (FCM) was used as a control. Gelatinolytic activity analyzed by zymography showed that keratinocytes mainly express MMP-9 and to a lesser extent MMP-2; while fibroblasts express only MMP-2. In a co-culture system, the activities of both MMP-2 and MMP-9 markedly increased in conditioned media collected from bottom chambers. These findings were consistent with the level of MMP-2 and MMP-9 measured by Western blot. Using the same experimental setting, the levels of tissue inhibitors of MMPs (TIMPs) secreted by keratinocytes and fibroblasts grown in the same co-culture system were also evaluated. Western blot showed that fibroblasts secrete only TIMP-1 and TIMP-2 whose levels were increased by co-culturing fibroblasts with keratinocytes. In contrary the level of TIMP-3, which was mainly expressed by keratinocytes, increased by co-culturing these cells with fibroblasts. In conclusion, interaction of fibroblast-keratinocyte modulates the levels of MMP-2 and -9 and their inhibitors produced by these cells and this interaction may be critical for a better healing quality at a late stage of the wound healing process. (Mol Cell Biochem 269: 209–216, 2005)     

自体富血小板凝胶联合冷沉淀制剂对糖尿病足溃疡患者创面愈合、血管生成因子及生活质量的影响

目的:探讨自体富血小板凝胶联合冷沉淀制剂对糖尿病足溃疡患者创面愈合、血管生成因子及生活质量的影响。方法:选取西宁市第一人民医院于2016年8月～2018年8月间收治的糖尿病足溃疡患者54例,依据数表法将患者随机分为对照组(n=27)和观察组(n=27)。对照组采用常规基础治疗,观察组在对照组基础上序贯使用自体富血小板凝胶联合冷沉淀制剂治疗。比较两组疗效、溃疡愈合时间、住院时间,比较两组患者治疗前及治疗20d后的肉芽组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平以及糖尿病患者生存质量特异性量表评分。结果:观察组总有效率高于对照组(P0.05)。观察组溃疡愈合时间和住院时间均明显短于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗20d后,两组患者肉芽组织bFGF、VEGF表达水平均明显升高(P0.05),且观察组肉芽组织bFGF、VEGF表达水平均明显高于对照组(P0.05)。治疗20d后,两组患者生理功能、社会关系、心理或精神以及治疗影响四个维度评分均明显下降(P0.05),且观察组低于对照组(P0.05)。结论:自体富血小板凝胶联合冷沉淀制剂治疗糖尿病足溃疡疗效确切,可提高患者生活质量,可促进肉芽组织中血管生成和创面愈合。     

湿润烧伤膏联合封闭负压引流术对糖尿病足溃疡患者神经传导速度、溃疡创面血管新生及氧化应激水平的影响

摘要 目的：探讨湿润烧伤膏联合封闭负压引流术（VSD）对糖尿病足溃疡（DFU）患者神经传导速度、溃疡创面血管新生及氧化应激水平的影响。方法：选取我院2021年1月~2022年5月间收治的80例DFU患者,根据信封抽签法分为对照组（n=40）和研究组（n=40）。两组患者在住院期间均接受基础治疗,在此基础上,对照组接受VSD治疗,研究组在对照组的基础上接受湿润烧伤膏治疗。观察两组临床指标、生活质量、神经传导速度、溃疡创面血管新生及氧化应激水平的变化情况。结果：研究组的创面愈合率高于对照组,创面愈合时间短于对照组（P<0.05）。研究组治疗后踝肱指数（ABI）高于对照组（P<0.05）。研究组治疗后简明健康调查量表（SF-36）各维度评分高于对照组（P<0.05）。研究组治疗后腓总神经感觉神经传导速度（SCV）、腓总神经运动神经传导速度（MCV）、正中神经MCV、正中神经SCV高于对照组（P<0.05）。研究组治疗后内皮抑素（ES）低于对照组,血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）高于对照组（P<0.05）。研究组治疗后丙二醛（MDA）、晚期蛋白氧化产物（AOPP）低于对照组,超氧化物歧化酶 （SOD）高于对照组（P<0.05）。结论：湿润烧伤膏联合VSD应用于DFU患者,可促进其创面愈合,提高神经传导速度和生活质量,可能与调节氧化应激水平、促进溃疡创面血管新生相关。