天麻素对CUS大鼠抑郁样行为和海马BDNF/GDNF水平的影响

目的:探讨天麻素对慢性不可预见应激(CUS)大鼠抑郁样行为的改善作用及对海马脑源性神经营养因子(BDNF)及胶质原纤维酸性蛋白(GDNF)表达的影响。方法:将64只SD大鼠随机分为对照组(Sham),Sham+天麻素低、中、高剂量组,模型组(CUS),模型(CUS)+天麻素低、中、高剂量组,每组8只。对照组每天腹腔注射生理盐水(1 m L/kg),连续14天;Sham+天麻素低、中、高剂量组每天腹腔注射不同剂量的天麻素(50、100或者200 mg/kg),连续14天;模型组接受CUS造模,并且在造模结束后每天腹腔注射生理盐水(1 m L/kg),连续14天;模型+天麻素低、中、高剂量组在CUS造模结束后每天腹腔注射不同剂量的天麻素(50、100或者200 mg/kg),持续14天。随后,通过糖水偏好实验和强迫游泳实验检测各组大鼠的抑郁样行为,在行为学检测结束后处死大鼠,通过Elisa检测海马GFAP和BDNF的表达情况。结果:(1)慢性不可预见应激(CUS)可以导致明显的抑郁样行为,包括糖水偏好减少(P0.05)和强迫游泳不动时间增加(P0.01),CUS组大鼠海马GFAP和BDNF水平下降(P0.01)。(2)一定剂量(100和200 mg/Kg)天麻素干预可以缓解CUS大鼠的抑郁行为,CUS与CUS+GAS(M)组(P0.05)以及CUS与CUS+GAS(H)组之间(P0.01)存在显著性差异。(3)中高剂量的天麻素可以恢复CUS大鼠海马的BDNF和GDNF水平,CUS与CUS+GAS(M)组(P0.05)以及CUS与CUS+GAS(H)组之间(P0.05)的BDNF和GDNF水平存在显著性差异。结论:天麻素可以缓解CUS模型大鼠抑郁样行为,恢复CUS模型大鼠海马的BDNF和GDNF水平。     

布洛芬辅助治疗下调氟西汀疗效不佳小鼠海马炎症因子表达改善抑郁样行为

目的:探讨布洛芬辅助治疗对氟西汀疗效不佳抑郁小鼠海马炎症因子表达及抑郁样行为的影响。方法:采用慢性不可预见性温和刺激制备抑郁模型,通过糖水偏爱试验、强迫游泳试验以及新奇环境抑制摄食试验等筛查氟西汀疗效不佳抑郁小鼠,将该小鼠随机分为2组,一组继续氟西汀治疗,另一组给予布洛芬辅助治疗,2周后评价2组小鼠抑郁样行为的变化及海马白细胞介素1β(Interleukin 1β,IL-1β)、前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)的表达情况。结果:大约20-30%的抑郁小鼠氟西汀治疗效果不佳,其海马IL-1β、PGE2水平明显高于对照组以及氟西汀治疗有效小鼠(P0.05)。布洛芬辅助治疗下调氟西汀疗效不佳抑郁小鼠海马IL-1β、PGE2水平,小鼠的糖水消耗及糖耗比值均较单纯氟西汀治疗组明显提高(P0.05);小鼠强迫游泳的不动时间明显缩短(P0.05)。并且在新奇环境中的摄食行为增强,摄食潜伏期缩短(P0.05)。结论:布洛芬对氟西汀治疗效果不佳(难治性)抑郁小鼠具有辅助抗抑郁治疗作用,能够下调炎症因子表达,改善其抑郁样行为。     

加味逍遥散对LPS诱导的抑郁模型大鼠海马小胶质细胞TLR4/NF-κB通路的影响*

目的: 观察加味逍遥散对LPS诱导的抑郁模型大鼠海马小胶质细胞TLR4/NF-κB通路的影响,探讨其抗抑郁机制。方法: 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组(10.8 mg·kg^-1)、加味逍遥散低、高剂量组(3.64、7.28 g·kg^-1)。采用慢性LPS注射(ip,0.5 mg·kg^-1)的方法建立抑郁大鼠模型,于造模同时灌胃给药,共14 d。采用旷场和强迫游泳实验评价大鼠的抑郁样行为,免疫组化法检测海马小胶质细胞标志蛋白Iba-1的表达,ELISA法检测海马匀浆液中TNF-α、IL-6的含量,Western blot法检测海马TLR4、NF-κB蛋白的表达。结果: 与对照组比较,模型组大鼠抑郁样行为显著(P＜0.01),海马小胶质细胞明显激活(P＜0.01),TNF-α、IL-6含量增加(P＜0.01),TLR4、NF-κB蛋白明显上调(P＜0.01);与模型组比较,氟西汀和高剂量加味逍遥散组大鼠抑郁样行为明显缓解(P＜ 0.05),小胶质细胞Iba-1表达恢复正常(P＜0.01),TNF-α、IL-6含量下降(P＜0.01),TLR4、NF-κB蛋白表达下调(P＜0.05);与氟西汀组比较,高剂量加味逍遥散组各指标无统计学差异,提示两者抗抑郁功效无显著区别。结论: 加味逍遥散能明显改善大鼠的抑郁样行为,其机制可能与抑制小胶质细胞TLR4/NF-κB通路,进而下调炎症因子的表达有关。     

推拿对慢性应激大鼠抑郁行为的影响及其机制

目的: 探讨推拿对慢性应激大鼠抑郁行为的影响及其作用机制。方法: 制备慢性轻度不可预见性的应激大鼠模型^[1-2],造模21 d后,进行推拿治疗14 d。分组:空白对照组、模型组、推拿组、氟西汀组,每组10只。每日推拿膀胱经重要穴位10 min(间隔2 min,共2次)。通过体质量检测、旷场、糖水消耗实验和水迷宫实验评价抑郁模型大鼠行为学改变情况;蛋白质免疫印迹法(Western blot)法检测大鼠海马及前额叶皮质组织中ERK/P-ERK、BDNF蛋白表达情况。结果: 模型组与空白组比较,大鼠的体质量、旷场、糖水消耗实验和水迷宫数据均显著下降(P＜0.01),P-ERK、BDNF蛋白含量均显著降低(P＜0.01);推拿组和氟西汀组与模型组比较,大鼠的体质量、旷场实验、糖水消耗实验和水迷宫实验数据均显著上升(P＜0.01),推拿组和氟西汀组大鼠海马及前额叶皮质组织中P-ERK、BDNF蛋白含量均显著升高(P＜0.05,P＜0.01),氟西汀组升高更为显著(P＜0.01)。结论: 推拿可上调大鼠海马及前额叶皮质组织中ERK蛋白的磷酸化水平,激活ERK信号通路,促进效应蛋白BDNF的表达,改善慢性应激大鼠的抑郁行为。     

异氟醚对小鼠神经干细胞活力及内大麻素系统相关基因表达的影响

目的:探讨异氟醚对小鼠神经干细胞活力及内大麻素系统相关基因表达的影响。方法:给予体外培养的小鼠海马神经干细胞不同浓度异氟醚处理,实验分为对照组和异氟醚处理组(0.5ISO,1.0ISO),其中异氟醚组细胞分别给予0.5 MAC和1.0 MAC两个浓度的异氟醚处理2小时,对照组给予O_2处理2小时,随后检测细胞活力并提取细胞RNA检测其内源性大麻素受体1(Cannabinoid receptor1,CB1)、脂肪酰胺水解酶(Fatty acid amide hydrolase,FAAH)、单酰甘油脂肪酶(Monoacylglycerol lipase,MAGL)及二酰基甘油脂肪酶(Diacylglycerol lipase alpha,DAGLα)的mRNA表达的变化。结果:与对照组相比,(1)异氟醚处理明显抑制了体外培养神经干细胞的活力,且高浓度异氟醚抑制作用强于低浓度异氟醚;(2)异氟醚上调神经干细胞的内大麻素受体CB1 mRNA水平,且高浓度异氟醚作用强于低浓度异氟醚;(3)异氟醚促进神经干细胞FAAH和MAGL的mRNA表达而抑制DAGLα的mRNA表达,且高浓度异氟醚作用强于低浓度异氟醚。结论:异氟醚可能通过影响小鼠神经干细胞的内大麻素系统影响神经干细胞的活力。     

氟西汀对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠记忆能力的改善作用及其机制

本研究初步探讨氟西汀(Fluoxetine)改善淀粉样蛋白前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)/早老素1(presenilin 1,PS1)双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠的学习记忆能力及可能机制。采用APP/PS1双转基因AD模型雄性小鼠,随机分成氟西汀处理组(FLU)和生理盐水组(NS),分别给予氟西汀10 mg·kg-1·d-1和等量生理盐水腹腔注射60 d。药物处理后行水迷宫检测小鼠学习记忆能力,采用尼氏染色观察海马神经元数量的变化,用免疫组化检测海马的Ach E的变化。水迷宫定位航行实验结果显示氟西汀组较生理盐水组的逃避潜伏期、总路程明显缩短(p0.05),游泳速度无明显差异;空间探索实验氟西汀组穿台次数较生理盐水组明显增加(p0.05)。尼氏染色结果显示氟西汀组在CA1区神经元数量和生理盐水组无显著性差异(p0.05),氟西汀组在DG区神经元数量比生理盐水组明显增多(p0.05)。乙酰胆碱酯酶(Ach E)免疫组化染色结果显示氟西汀组在海马CA1、DG区乙酰胆碱酯酶表达量较生理盐水组明显减少(p0.05)。穿台次数与CA1和DG区Ach E的表达量之间的有显著性的相关性(CA1区r=-0.791,p=0.002,DG区r=-0.839,p=0.001)。本研究结果提示氟西汀可通过减少AD小鼠海马DG区神经元的数量丢失和下调AD小鼠海马区Ach E表达量而改善AD模型小鼠的空间学习记忆能力。     

氟西汀对慢性不可预见应激模型大鼠海马磷脂酰乙醇胺的影响

摘要 目的：探讨氟西汀对慢性不可预见应激（Chronic Unpredictable Mild Stress,CUS）模型大鼠海马内磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine,PE）组成的影响。方法：（1）将24只SD大鼠随机分为对照组（Sham）、模型组（CUS）和氟西汀组（Flx）。CUS组和Flx组均接受CUS造模,并且在造模后接受生理盐水（1 mL/kg）或氟西汀（10 mg/kg）腹腔注射,连续14天;Sham不进行CUS造模,但是每天接受腹腔注射生理盐水。随后处死大鼠,取海马进行脂质组学分析,比较各处理组海马总的PE和PE小分子相对丰度、不同碳链长度和含不同不饱和键PE的相对丰度差异。结果：（1）与CUS组相比,Sham组PE相对丰度明显减低,而Flx组明显增高（P<0.05）;（2）与Sham组相比,CUS组9个PE小分子相对丰度发生变化,PE（34:1e）、PE（36:1p）、PE（36:2）、PE（36:2p）、PE（36:4）、PE（38:2）、PE（38:4）和PE（40:7）共8个上调（P<0.05或0.01）,PE（34:0p）下调（P<0.05）,CUS组碳链长度为36的PE丰度上升（P<0.05）,碳链长度为38的PE丰度下降（P<0.01）,CUS组含0个不饱和键、4个不饱和键的PE丰度下调（P<0.01, P<0.05）,而1个不饱和键的PE丰度上升（P<0.05）;（3）与CUS组相比,Flx组6个PE分子相对丰度减少,包括PE（34:1e）、PE（36:2）、PE（36:4）、PE（38:1p）、PE（38:6e）和PE（40:5p）（P<0.05或0.01）,Flx组碳链长度为34的PE丰度下降（P<0.05）,碳链长度为36的PE水平升高（P<0.05）,Flx组含1个不饱和键的PE丰度下调（P<0.05）,差异具有统计学意义。结论：氟西汀可以调节CUS模型大鼠海马的PE水平。     

甘麦大枣汤对抑郁模型大鼠海马神经元突触结构及结构蛋白表达的影响*

目的: 观察甘麦大枣汤对抑郁模型大鼠行为学及单胺递质的影响,并从突触结构及结构蛋白MAP-2与GAP-43表达改变探讨其潜在作用机制。方法: 60只SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、氟西汀组(10.8 mg/kg)、甘麦大枣汤高、低剂量组(9.72、4.86 g/kg),每组12只。除对照组外,其余各组大鼠均采用慢性不可预见性温和应激(CUMS)建立抑郁模型,并于造模同时给药组灌胃给药,连续21 d。采用糖水消耗实验和旷场测试评价大鼠抑郁样行为,ELISA法检测海马单胺递质5-HT、NE含量,Golgi染色观察神经元突触损伤情况,免疫组化法和Western blot法检测海马突触结构蛋白MAP-2和GAP-43的表达。结果: 与对照组比较,抑郁模型大鼠糖水偏好度及自主活动评分均显著下降(P＜0.01),海马5-HT、NE含量显著下降(P＜0.01),树突棘缺失明显,同时MAP-2和GAP-43表达均显著下调(P＜0.01);甘麦大枣汤干预后,模型大鼠抑郁样行为明显缓解(P＜0.01),5-HT、NE含量显著升高(P＜0.05),树突棘密度、长度及分枝增加,MAP-2和GAP-43表达显著回升(P＜0.01)。结论: 甘麦大枣汤能改善抑郁模型大鼠的抑郁样行为,升高海马单胺递质含量,其作用可能与上调突触结构蛋白、缓解神经元突触损伤有关。     

不同电针方法对慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑TRH表达的影响

目的:研究分析两种不同电针方法对慢性应激抑郁模型大鼠(CUMS)下丘脑中促甲状腺激素释放激素(TRH)表达的影响。方法:选取60只健康雄性SPF级SD大鼠编号后采用随机数字表法分为对照组(正常喂养)、模型组(仅建立CUMS模型,不予治疗)、观察组A(建立CUMS模型后,脉冲电针治疗)、观察组B(建立CUMS模型后,音乐电针治疗)、氟西汀组(建立CUMS模型后,氟西汀治疗)各12只,对除对照组之外的其他各组大鼠进行1只/笼的孤养结合方式建造CUMS模型,利用开野实验观察各组大鼠行为学改变,采用实时荧光定量(PCR)法测定各组大鼠下丘脑组织中TRH m RNA的表达,采用免疫组化法测定TRH蛋白的表达。结果:在刺激21 d后,模型组大鼠的水平运动次数、垂直运动次数显著的低于对照组、实验组A、实验组B、氟西汀组,且差异均具有统计学意义(P0.05),实验组A、实验组B、氟西汀组大鼠的水平运动次数、垂直运动次数显著低于对照组,且差异均具有统计学意义(P0.05),实验组A、实验组B、氟西汀组大鼠的水平运动次数、垂直运动次数差异无统计学意义(P0.05);模型组大鼠的下丘脑TRH m RNA、TRH蛋白水平低于对照组、实验组A、实验组B、氟西汀组,且差异均具有统计学意义(P0.05),实验组A、实验组B、氟西汀组大鼠的大鼠的下丘脑TRH m RNA、TRH蛋白水平显著低于对照组,且差异均具有统计学意义(P0.05);实验组A、实验组B、氟西汀组大鼠的大鼠的下丘脑TRH m RNA、TRH蛋白水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:CUMS大鼠下丘脑中促甲状腺激素释放激素表达水平降低,脉冲电针与音乐电针能有效逆转这一现象,效果相当。     

抑郁症CUS模型大鼠海马CA1区及CA3区内树突棘数目减少

目的采用慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)模型建立抑郁症大鼠模型,对抑郁症CUS模型大鼠海马CA1及CA3区体积及其内树突棘素阳性(spinophilin~+)树突棘的密度、数目进行精确定量研究,探讨海马CA1及CA3区内树突棘的改变在抑郁症中的作用。方法雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,糖水适应性训练后剔除糖水偏好不稳定的大鼠,将剩余大鼠随机分为空白对照组和抑郁模型组,采用孤养结合CUS的模式建立抑郁症大鼠模型,为期4周。筛选出成模大鼠后每组随机选取5只大鼠,利用免疫组织化学方法结合体视学方法进行定量分析。结果应激第4周末,抑郁模型组大鼠的体质量、糖水偏好百分比以及旷场总评分均显著低于空白对照组;抑郁模型组大鼠海马CA1及CA3区体积无明显改变;抑郁模型组大鼠海马CA1和CA3区内树突棘的密度及总数目显著少于空白对照组。结论抑郁症CUS模型大鼠海马CA1和CA3区内树突棘的密度、总数目显著减少,提示抑郁模型组大鼠海马CA1和CA3区内树突棘数量上的改变可能是抑郁症病理改变的重要的神经生物学基础之一,由此为将来寻找治疗抑郁症的新靶点提供了理论依据。     

Characteristics of the membranes of the pellicle of the ciliatePseudomicrothorax dubius

Summary The membranes of the pellicle of the ciliatePseudomicrothorax dubius are investigated using thin section electron microscopy and freeze-fracture replicas. The plasma membrane is covered by a surface coat and is connected to the outer alveolar membrane by short, sometimes branched, bridges. The inner alveolar membrane is coated on both sides. The epiplasm lies in intimate contact with the cytoplasmic surface of this membrane, and there is a corresponding deposit on the other surface. This deposit is regularly striated.The epiplasmic layer and the alveoli are interrupted at sites of cytotic activity,e.g., the attachment sites of trichocysts, the cytoproct, and the parasomal sacs. The striated deposit ends where the epiplasm ends, indicating a direct relationship between these two epimembranous layers.There is a deposit along the sides of the first part of the tip of the trichocysts, and in this region the trichocyst membrane is free of intramembranous particles.The membrane of the parasomal sacs has a coat on both surfaces. That on the extraplasmic surface is similar to the surface coat of the plasma membrane. The origin of the cytoplasmic coat is unknown. The cytotic activity of these sacs is indicated by their highly irregular profiles.     

The early development of the tail and the transformation of the shape of the nucleus of the spermatid of the domestic fowl,Gallus gallus

Summary The differentiation of the spermatid, especially in reference to the formation of the flagellum, and transformation of the shape of the nucleus was investigated in the domestic fowl.In the early stage of the spermatid, a prominent Golgi apparatus appears around the centrioles. The Golgi vesicles then surround the axial-filament complex which develops from the distal centriole. These vesicles fuse to form continuous membrane at the earliest stage of flagellar formation, and in the succeeding stage Golgi lamellae are attached to the plasma membrane of the developing flagellum. From these observations, it is assumed that Golgi apparatus may be a source of the membrane system of the flagellum.The microtubules distributed around the nucleus form the circular manchette. The anterior region of the nucleus with the manchette is cylindrical in shape and the posterior region without it remains irregular in shape. When the circular manchette has been completed, the whole nucleus acquires a slender cylindrical shape. The circular manchette then changes into the longitudinal manchette. The nuclei of spermatids without a longitudinal manchette are abnormal in shape. In view of these observations it is assumed that the nuclear shaping of the spermatid may be accomplished by circular manchette and the maintenance of shape of the elongated nucleus by longitudinal manchette.The authors wish to thank Mr. Takayuki Mori for his helpful suggestions and technical advices     

Characterization of the composition of the aqueous humor and the vitreous body of the eye of the frog Rana temporaria L

This study aimed to analyze the aqueous humor (AH) and the vitreous body (VB) of the eye of the adult frog Rana temporaria L. as a representative species of amphibians, which lead a semi-terrestrial life. The presence of collagen, albumin, uric acid and electron donors was shown in both media; however, there are slight differences in their concentrations. To determine collagen, a spectral-fluorescent probe, cyanine dye, was used. The presence of collagen in AH of the frog was found at the first time. The total content of electron donors (ascorbic and uric acids, tryptophan, and tyrosine) in VB and HA was roughly estimated at ~ 1.5 × 10^− 4 mol/L. Both VB and AH absorb light in similar UV regions. The total protein and albumin contents in AH were found to be somewhat higher than those in VB. The uric acid content was at an equally low level in both intraocular media. It is supposed that the similarity of VB and AH compositions shown in this work is due to some exchange between VB and AH contents in the course of accommodation. The role of intraocular fluids in physiological functions of the eye and in protecting the retina against UV light is discussed.