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1.
用^32P标记cDNA探针进行核酸斑点杂交检测马铃薯卷叶病毒(PLRV) 总被引:2,自引:0,他引:2
利用克隆的马铃薯卷叶病毒(PLRV)外壳蛋白(CP)基因cDNA,用切口平移法制成^32P标记探针,通过核酸斑点杂交,对马铃薯卷叶病毒RNA,提纯的马铃薯卷法病毒和感染PLRV的马铃薯茎、叶、声 相似文献
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双价外壳蛋白基因植物表达载体的构建及马铃薯转基因植株的鉴定 总被引:10,自引:0,他引:10
在克隆了马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y 病毒(PVY)和马铃薯卷叶病毒(PLRV)的外壳蛋白基因的基础上,构建同时包含PVX和PVY 与PVY 和PLRV 两个外壳蛋白基因植物表达框架的表达载体,通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化烟草(Nicotianatabacum )和生产上常用的几个马铃薯(Solanum tuberosum )优良品种:“Favorita”、“虎头”、“克4”。经PCR检测证明外源基因已整合到植物的染色体上,得到批量转基因植株。在转PVX+PVY 外壳蛋白基因的烟草上接种PVX (5 μg/m L)、PVY(20 μg/m L)病毒,得到有一定抗性的植株 相似文献
3.
马铃薯卷叶病毒复制酶基因5端克隆及序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
马铃薯卷叶病毒(Potatoleafrolvirus,PLRV)是正链RNA病毒,属黄化病毒组(Luteovirus)〔1〕,严格虫传,分布广泛,难以控制,侵染马铃薯能引起大面积减产,给马铃薯生产造成巨大损失。PLRV基因组全长6.0kb,有6个读... 相似文献
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将本室合成、克隆的马铃薯卷叶病毒(PotatoLeafrolVirus,PLRV)中国分离株的基因间隔区(intergenicsequence,IS)双链cDNA以正、反向两种方式分别构建于转化载体pROK2中,通过致瘤农杆菌介导,以马铃薯叶圆片为转化材料,转化马铃薯栽培品种Desire,获得了转基因植株。卡那霉素抗性分析和PCR检测目的基因,证明PLRVIS双链cDNA已经整合到转基因马铃薯的染色体基因组中。将转基因植株移栽网棚用蚜虫接种PLRV,观察症状并用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测转基因植株中PLRV含量。结果表明,表达PLRVIS正意和反意RNA的转基因植株,接种病毒后表现无症状或症状轻微,PLRV平均滴度均较未转基因对照植株低。表达正意RNA的转基因植株PLRV滴度降低43%~72%,表达反意RNA的转基因植株PLRV滴度降低72%~86%,由此可见,表达PLRVIS反意RNA的转基因马铃薯对PLRV抗性较强。 相似文献
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《日经生物技术》1998年12月21日号第15页报道:美国孟山都公司12月8日宣布,具有抗病毒和抗病虫害两种性状的马铃薯“NewLeafPlus”通过了为了在美国商业化的必要的规定。马铃薯“NewLeafPlus”是对马铃薯卷叶病毒(PLRV)和马铃... 相似文献
6.
马铃薯卷叶病毒基因间隔区的克隆及序列分析 总被引:6,自引:0,他引:6
根据已报道的马铃薯卷叶病毒基因组序列.设计合成一对特异性引物,以马铃薯卷叶病毒中国分离株(PLRV-Ch)的RNA为模板,反转录合成cDNA第一条链,经PCR扩增后克隆于pUC19质粒中,进一步用PCR鉴定、限制酶切分析和序列分析,结果表明:PLRV-Ch基因间隔区由197个核苷酸组成,与国外报道的荷兰PLRV-N加拿大PLRV-C,澳大利亚PLRV-A,苏格兰PLRV-S各株系核苷酸序列具有很高的同源性,同源率依次为99%、98%、93%、98%。 相似文献
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转PVY外壳蛋白基因马铃薯及其田间实验 总被引:10,自引:0,他引:10
报道了将马铃薯Y 病毒(PVY)中国分离株的外壳蛋白基因通过农杆菌(Agrobacterium tum efa-ciens)介导转入马铃薯(Solanum tuberosum L.)的生产品种“Favorita”、“虎头”和“克4”,在获得大量再生植株的基础上经过PCR检测和Southern 杂交证明,大部分株系中PVY 外壳蛋白基因的表达框架已完整整合到马铃薯的染色体上。人工接种PVY 病毒(20 m g/L)后一些转基因株系对PVY 病毒的侵染表现较强的抗性,同时其单株结薯数和平均薯重有所增加。在田间实验中,转基因马铃薯植株生长良好而且部分转基因株系产量高于未转基因的脱毒马铃薯,从这些株系中有希望得到抗病性好而且高产的马铃薯品系 相似文献
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马铃薯Y病毒复制酶基因的克隆和序列分析 总被引:6,自引:0,他引:6
马铃薯Y病毒复制酶基因的克隆和序列分析彭学贤,项瑜,刘俊君,莽克强(中国科学院微生物研究所,北京1000080)MolecularcloningandsequenceanalysisofPVYNIbgene¥PenXuexian;XiangYu;Li... 相似文献
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真核藻类的病毒和病毒类粒子(VLPs) 总被引:12,自引:0,他引:12
真核藻类的病毒和病毒类粒子(VLPs)赵以军石正丽(中国科学院水生生物研究所,武汉430072)(中国科学院武汉病毒研究所,武汉430071)VirusesandVirus-likePearticlesofEukaryoticAlgaeZhaoYij... 相似文献
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昆虫杆状病毒增效蛋白(enhancin)曾被称为病毒促进因子(synergisticfactor,SyF)或病毒增效因子(viralenhancingfactor,VEF),它长期以来被认为只存在于昆虫颗粒体病毒(Granulosisvirus,GV)中的一类蛋白质,已知有8种GV中含有增效蛋白。自Tanada[1~4]1959年从美洲一星粘虫(Pseudaletiaunipuncta,Pu)GV中分离出增效蛋白并证实它有增强PuMNPV的感染力后,一直很受人们关注。从它的作用机理到氨基酸序列… 相似文献
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斜纹夜蛾核多角体病毒几丁质酶基因的克隆及序列分析 总被引:5,自引:2,他引:3
以苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa calitirnica multinucleocapsid nuclear polyhedrosis virus,AcMN-PV)基因组含几丁质酶基因(chiA)的pstI M片段为探针,通过Southern杂交将斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura nuclear polyhedrosis virus,SpltNPV)的chi 相似文献
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马铃薯卷叶病毒56kD蛋白基因及3‘端非编码区克隆和序列分析 总被引:4,自引:0,他引:4
根据已报道的马铃薯卷叶病毒基因组序列,设计合成一对特异性引物,以马铃薯卷叶病毒中国分离株的RNA为模板,反转录合成了cDNA第一条链,经PCR扩增后克隆于pUC19质粒中,进一步用PCR鉴定,限制酶切分析用序列分析。结果表明,PLRV-Ch56kD蛋白基因由1527个核苷酸组成,编码508个氨基酸,3‘端非编码区由141个核苷酸组成,与国外报道的苏格兰PLRV-S,荷兰PLRV-N,加拿大PLRV 相似文献
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苜蓿尺蠖核型多角体病毒( Autographa californica nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)在细胞质中合成其囊膜蛋白,但在细胞核内组装并包埋病毒粒子,这些蛋白的核定向转运机制是人们甚感兴趣的课题。以AcMNPV多角体衍生型病毒ODV(occlusion-derived virus,ODV)的一种囊膜蛋白ODV-E18为对象,通过E18与一个标记短肽F 相似文献
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用细胞病变阳性(positive cytopathogenic effect,CPE+ )病毒马立克氏病毒(Marek'sdisease virus, MDV)血清1,2,3 型以及细胞病变阴性(negative cytopathogenic effect,CPE- )病毒猪瘟病毒(Hog cholera virus,HCV)强毒与弱毒和鸡新城疫病毒(New castle diseasevirus. NDV)Lasota 毒株及其对应的异硫氢酸荧光素(FITC)标记的特异抗体为试验材料,以免疫荧光抗体技术(FA)为基础、并加以改进,建立了标记抗体染色病毒空斑计数技术. 该技术不仅能克服常规病毒空斑计数技术不能计数细胞病变阴性病毒和一种样品含有两种或两种以上病毒的各自空斑数的缺点,能迅速准确计数出CPE- 病毒和多病毒样品中病毒各自空斑数及其空斑总数,具较高敏感性、良好的可重复性. 相似文献
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猴免疫缺陷病毒和艾滋病王用楫(卫生部北京生物制品研究所,北京100024)1前言猴免疫缺陷病毒(simianimmunodeficie-ncyvirus,SIV)与艾滋病(AIDS)的病原体人免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyv... 相似文献
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HcNPV半胱氨酸蛋白酶,几丁质酶基因失活分析 总被引:2,自引:1,他引:1
将含有美国白蛾核型多角体病毒(Hyphantria cumea nuclear polyhedrosis virus,HcNPV)半胱氨酸蛋白酶基因(CP)的自然和几丁质酶基因(ChiA)的片段克隆进PCRⅡ,构建了转移载体pHcCVdel;将含有HcNPV多角体蛋白全基因(polh)序列的片段插入到pHcCVdel的EcoRI位点,得到重组转移载体pHcCVpolh。通过重组转移载体与含有家蚕促 相似文献
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猪瘟病毒及其疫苗研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
猪瘟病毒及其疫苗研究进展陆宇,陈建国,丁明孝(北京大学生命科学学院,北京100871)ResearchProgressonHogCholeraVirusanditsVaccineLuYu;ChenJianguo;DingMingxiao(Colleg... 相似文献
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