毛蕊异黄酮通过JAK2/STAT3信号通路抑制大鼠动脉粥样硬化

摘要 目的：探究毛蕊异黄酮（CA）治疗动脉粥样硬化（AS）的作用及其机制。方法：将10只未建模和给药的Wistar大鼠作为对照组（Control组）,50只AS建模Wistar大鼠随机分为AS模型组（AS组）、低剂量CA组（L-CA组,10 mg/kg）、中剂量CA组（M-CA组,50 mg/kg）、高剂量CA组（H-CA组,100 mg/kg）和阳性药物辛伐他汀组（Sim组,2 mg/kg）,每组10只。每天给药1次,连续4周。通过苏木精伊红（HE）染色观察大鼠胸主动脉组织的病理变化。按照试剂盒说明书测定各组大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平。将大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）分为6组,Control组、血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）组（10-6 mmol/L Ang Ⅱ）、Ang Ⅱ+0.1 CA组（10^-6 mmol/L Ang Ⅱ+0.1 mg/L CA）、Ang Ⅱ+1 CA组（10^-6 mmol/L Ang Ⅱ+1 mg/L CA）、Ang Ⅱ+10 CA组（10^-6 mmol/L Ang Ⅱ+10 mg/L CA）、Ang Ⅱ+1 CA+AG490（10^-6 mmol/L Ang Ⅱ+50 μmol/L AG490）组。通过CCK-8法和EdU染色测定VSMC的增殖,Transwell测定VSMC的迁移。通过免疫荧光染色检测VSMC中的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达。通过Western blot检测大鼠胸主动脉组织和VSMC中的α-SMA、骨桥蛋白（OPN）、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3的蛋白表达。结果：L-CA组、M-CA组、H-CA组和Sim组大鼠胸主动脉的病变均较AS组减轻,其中H-CA组和Sim组形态改善最明显。与AS组相比,M-CA组、H-CA组和Sim组大鼠的血清中TC、TG、LDL-C和MDA水平降低（P<0.05）,血清HDL-C和SOD水平升高,胸主动脉组织中的α-SMA蛋白表达水平升高（P<0.05）,OPN的蛋白表达水平及JAK2和STAT3的蛋白磷酸化水平降低（P<0.05）。与Ang Ⅱ组相比,Ang Ⅱ+1 CA组、Ang Ⅱ+10 CA组和Ang Ⅱ+1 CA+AG490组的相对细胞活力和EdU阳性率降低（P<0.05）,迁移细胞数降低（P<0.05）,α-SMA相对荧光强度和蛋白表达水平升高（P<0.05）,OPN的蛋白表达水平及JAK2和STAT3的蛋白磷酸化水平降低（P<0.05）。结论：CA可减轻AS大鼠的胸主动脉病变、纠正血脂代谢和氧化应激失衡,其机制可能与CA对VSMC表型转化和JAK2/STAT3信号通路的抑制有关。     

萝卜硫素通过Nrf2信号通路对大鼠草酸钙肾结石形成的作用和机制研究

摘要 目的：探究萝卜硫素通过Nrf2信号通路对大鼠草酸钙肾结石形成的作用和机制。方法：选取7~8周龄Wistar健康雄性大鼠30只,随机分为空白对照组、模型组和药物干预组。空白对照组给予正常饮用水,标准饲料;模型组给予1%乙二醇饮用水+2%氯化铵2 mL/d灌胃,标准饲料;药物干预组给予1%乙二醇饮用水+2%氯化铵2 mL/d灌胃+0.2 mg萝卜硫素腹腔注射,标准饲料。灌胃给药均连续28天。于第29天收分别集各组大鼠24 h尿液及肾脏标本,使用全自动生化分析仪检测尿液中K⁺、Na⁺、Cl⁺、Ca²⁺、Mg²⁺、P⁵⁺、Fe²⁺含量,使用ELISA法测定尿液中丙二醛( malondialdehyde,MDA)与草酸水平,使用HE染色分析大鼠肾脏标本病理损伤情况,Von Kossa染色比较各组大鼠钙盐沉积情况,免疫组化法测定谷胱甘肽(glutathione,GSH)、核因子E₂相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)、8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 deoxyguanosine,8-OHDG)蛋白表达水平。结果：模型组大鼠尿液P⁵⁺、Ca²⁺、草酸、MDA含量显著高于空白对照组,HE染色示模型组肾小管较空白对照组变性严重,Von Kossa染色结果显示模型组钙盐沉积较空白对照组明显增多,模型组GSH、Nrf2免疫组化评分显著低于空白对照组,8-OHdG显著高于空白对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;药物干预组大鼠尿液P⁵⁺、Ca²⁺、草酸、MDA含量显著低于模型组,HE染色、Von Kossa染色显示肾小管较模型组损伤减轻,钙盐沉积较模型组减轻,免疫组化显示GSH、Nrf2蛋白表达显著高于模型组,8-OHdG显著低于空白对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：萝卜硫素对大鼠肾小管具有抗氧化损伤作用,可降低草酸钙晶体的释放,抑制草酸钙结石的形成,该作用可能是通过激活Nrf2蛋白及其下游信号通路实现的。     

脓毒症患者外周血T淋巴细胞PD-1表达变化及胸腺肽α-1的免疫调理作用研究

摘要 目的：探讨脓毒症患者外周血T淋巴细胞程序性细胞死亡受体1（PD-1）表达特点,分析胸腺肽?琢-1治疗对患者免疫功能的影响。方法：选择2018年3月至2020年6月我院重症医学科收治的140例脓毒症患者（脓毒症组）和同期于我院进行体检的95例健康志愿者（对照组）,根据急性生理与慢性健康评估Ⅱ（APACHE Ⅱ）、序贯器官衰竭评估（SOFA）评分结果将脓毒症患者分为APACHE Ⅱ 0~10分组（51例）、11~20分组（62例）和＞20分组（27例）;SOFA评分0~5分组（48例）、6~10分组（60例）和＞10分组（32例）。检测外周血CD4⁺T细胞上PD-1表达、CD8⁺T细胞上PD-1表达,比较组间差异性。Pearson秩相关性分析外周血CD4⁺T细胞上PD-1表达、CD8⁺T细胞上PD-1表达与APACHE Ⅱ、SOFA评分相关性。根据治疗方法将脓毒症患者分为A组（60例）和B组（80例）,A组给予常规综合治疗和乌司他丁治疗,B组在A组的基础上联合胸腺肽α-1治疗,比较两组治疗前后外周血T淋巴细胞（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺）、NK细胞（CD3-CD16⁺CD56⁺）差异。结果：脓毒症组外周血CD4⁺T细胞上PD-1表达、CD8⁺T细胞上PD-1表达高于对照组（P＜0.001）,外周血CD4⁺T细胞上PD-1表达、CD8⁺T细胞上PD-1表达随APACHE Ⅱ、SOFA评分的增加而增高,各组间差异显著（P＜0.05）。Pearson秩相关分析结果显示外周血CD4⁺T细胞上PD-1表达、CD8+T细胞上PD-1表达与APACHE Ⅱ评分、SOFA评分呈正相关（r=0.569、0.475;0.653、0.509,P均＜0.05）。B组治疗后CD3⁺、CD4⁺、CD3-CD16⁺CD56⁺高于A组（P＜0.05）,CD8⁺低于A组（P＜0.05）。结论：脓毒症患者外周血CD4⁺、CD8⁺T细胞上PD-1表达均增高,其表达与病情严重程度密切相关。给予胸腺肽α-1治疗可改善患者免疫功能。     

丁酸钠通过调节SIRT1/AMPK信号通路对慢性肾衰竭大鼠肾功能的影响

摘要 目的：探讨丁酸钠（NaB）通过调节沉默信息调节因子1（SIRT1）/单磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）信号通路对慢性肾衰竭（CRF）大鼠肾功能的影响。方法：选用SD大鼠72只,随机分为6组（12只/组）：control组、Model组、NaB低剂量组（100 mg/kg）、NaB中剂量组（200 mg/kg）、NaB高剂量组（400 mg/kg）、抑制剂组（400 mg/kg NaB+2 mg/kg SIRT1/AMPK通路抑制剂EX527）;采用饲喂0.5%腺嘌呤饲料以建立CRF大鼠模型,建模成功后,灌胃和腹腔注射相应药物。使用试剂盒检测大鼠24 h尿蛋白（24 h U-pro）、血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）水平;采用苏木精-伊红（HE）及Masson染色法观察肾脏病理改变,并计算胶原容积分数（CVF）;采用茜素红染色法与主动脉钙含量测定评估主动脉钙化情况;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠肾脏组织白细胞介素（IL）-6、IL-β、肿瘤坏死因子（TNF）-α水平;采用过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）检测试剂盒检测大鼠肾脏组织中CAT、MDA、ROS水平;采用蛋白免疫印迹法（WB）检测各组大鼠SIRT1/AMPK信号通路及骨形态发生蛋白2（BMP2）、Runt相关转录因子2（Runx2）蛋白的表达。结果：与control组比较,Model组大鼠肾脏组织损伤严重、胶原纤维沉积显著、主动脉钙化严重,CAT活性、SIRT1、p-AMPK/AMPK表达水平显著降低（P<0.05）,CVF、主动脉钙含量和SCr、BUN、24 h U-pro、IL-6、IL-β、TNF-α、MDA、ROS水平及BMP2、Runx2蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;与Model组比较,NaB低、中、高剂量组大鼠肾脏组织损伤减轻、胶原纤维沉积面积明显减少、主动脉钙化程度减轻,CVF、主动脉钙含量和SCr、BUN、24 h U-pro、IL-6、IL-β、TNF-α、MDA、ROS水平及BMP2、Runx2蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,CAT活性、SIRT1、p-AMPK/AMPK表达水平显著升高（P<0.05）;SIRT1/AMPK通路抑制剂EX527可降低高剂量NaB对CRF大鼠主动脉钙化和肾功能的改善作用（P<0.05）。结论：NaB可能通过激活SIRT1/AMPK信号通路,减轻肾脏组织炎症、氧化应激损伤、主动脉钙化和肾纤维化,从而起到改善CRF大鼠肾功能的作用。     

IGF-1联合BMP-2对糖尿病合并骨质疏松股骨骨折大鼠中的骨折愈合影响分析

摘要 目的：探讨胰岛素生长因子-1（insulin-like growth factor, IGF-1）联合骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein,BMP）-2对糖尿病合并骨质疏松股骨骨折大鼠中的骨折愈合影响。方法：8周龄雌性SD大鼠60只,饲养一周后根据随机数字表法进行分组,每组12只,之后进行造模,造模成功50只,成功率为83.33 %。将其分为5组,包括正常组（n=10）,糖尿病+卵巢切除+骨折组（n=9）,糖尿病+卵巢切除+骨折+ IGF-1组（骨折处注射IGF 30 μg/kg,n=11）,糖尿病+卵巢切除+骨折+BMP-2组（骨折处注射100 μL BMP-2基因慢病毒1×10⁸,n=10）、糖尿病+卵巢切除+骨折+IGF-1+BMP-2组（参照上述,n=10）,其余进行等剂量溶剂注射,均连续注射两天。分组处理6周后,观察5组大鼠的一般情况。对比5组大鼠的血清钙、骨钙素、碱性磷酸酶水平,对比5组的最大应力、最大载荷及刚度,检测5组大鼠组织中的IGF-1、BMP-2及TGF-β1 mRNA表达水平。结果：A组大鼠无明显异常反应,大鼠体重逐渐增加,大小便、饮食均正常,毛色光亮;B、C、D、E组大鼠精神萎靡、反应迟缓、毛色光亮性较差、体重无明显减轻或增加、大鼠的饮水量、饮食增加,多尿症状较为明显。5组大鼠的血清钙、骨钙素、碱性磷酸酶水平：B组结论：IGF-1联合BMP-2可促进糖尿病合并骨质疏松股骨骨折大鼠中的骨折愈合。     

红景天苷调节AMPK/mTOR/ULK1信号通路对结肠癌SW480细胞裸鼠的肝脏损伤的影响

摘要 目的：探讨红景天苷（Sal）调节单磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）/Unc51样激酶1（ULK1）信号通路对结肠癌SW480细胞裸鼠肝脏损伤的影响。方法：通过皮下注射SW480细胞悬浮液建立肝转移裸鼠模型,将造模后的裸鼠随机分为模型组、Sal低剂量（Sal-L,50 mg/kg Sal）组、Sal中剂量（Sal-M,100 mg/kg Sal）组、Sal高剂量（Sal-H,200 mg/kg Sal）组,Sal-H+AMPK抑制剂（Compound C,200 mg/kg Sal+10 mg/kg Compound C）组,以未接种SW480细胞悬液的裸鼠作为对照组。腹部主动脉取血,检测裸鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（AST）、天冬氨酸氨基转移酶（ALT）水平;处死裸鼠,检测肝转移瘤数目及肝脏重量;HE染色观察肝脏组织病理变化;qRT-PCR检测肝脏组织中AMPK、mTOR、ULK1 mRNA表达水平;Western blot检测肝脏组织中自噬（Beclin1、p62）蛋白及通路相关蛋白表达。结果：与对照组相比,模型组裸鼠组织中出现肝转移瘤,肝脏重量、AST、ALT水平、mTORmRNA、ULK1 mRNA、p62表达显著增加（P<0.05）;Beclin1、AMPK mRNA及蛋白表达显著降低（P<0.05）;与模型组相比,Sal-L、Sal-M、Sal-H组肝转移瘤数目、肝脏重量、AST、ALT水平、mTORmRNA、ULK1 mRNA、p62表达显著降低（P<0.05）;Beclin1、AMPK mRNA及蛋白表达显著增加（P<0.05）;与Sal-H组相比,Sal-H+Compound C组肝转移瘤数目、肝脏重量、AST、ALT水平、mTORmRNA、ULK1 mRNA、p62表达显著增加（P<0.05）;Beclin1、AMPK mRNA及蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论：Sal可通过减少裸鼠肝转移瘤形成,保护裸鼠肝脏,其机制可能与激活AMPK/mTOR/ULK1信号通路,促进肝脏自噬有关。     

北沙参对肺癌大鼠PI3K/Akt信号通路及免疫炎症反应的影响

摘要 目的：探讨北沙参对肺癌大鼠PI3K/Akt信号通路及免疫炎症反应的影响。方法：从60只Wistar大鼠中随机选取15只作为对照组,其余45只大鼠采用气管内灌注致癌碘油液建立肺癌模型,按照随机数字表法将其分为模型组（n=15）、环磷酰胺组（n=15）、北沙参组（n=15）,开展前瞻性研究。对照组、模型组给予生理盐水灌胃,环磷酰胺组给予环磷酰胺干预,北沙参组给予北沙参干预。比较各组大鼠免疫功能、炎症因子水平及PI3K/Akt表达。结果：与对照组相比,环磷酰胺组、北沙参组、模型组脾脏指数依次降低,而肺脏指数依次升高（P<0.05）。与对照组相比,环磷酰胺组、北沙参组、模型组CD3⁺、CD4⁺百分比及CD4⁺/CD8⁺依次降低,而CD8⁺百分比依次升高（P<0.05）。与对照组相比,环磷酰胺组、北沙参组、模型组白介素6（IL-6）、白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平依次升高（P<0.05）。与对照组相比,环磷酰胺组、北沙参组、模型组PI3K、Akt表达水平依次升高（P<0.05）。结论：北沙参能够有效调节肺癌大鼠的脏器指数,促进免疫功能改善,抑制炎症反应,调控PI3K/Akt信号通路可能是其发挥作用的重要机制。     

布地奈德通过干预线粒体钙单转运蛋白影响哮喘大鼠气道上皮细胞自噬和屏障功能的机制

摘要 目的：探究布地奈德通过干预线粒体钙单转运蛋白影响哮喘大鼠气道上皮细胞自噬和屏障功能的机制。方法：30只雄性SD大鼠作为研究对象,并根据实验目的分为3组：对照组（正常大鼠,生理盐水干预,n=10）,哮喘组（通过OVA诱导大鼠哮喘模型,n=10）,布地奈德组（气雾剂布地奈德用于治疗过敏性哮喘的大鼠,n=10）。通过钙测定试剂盒和蛋白印迹分析大鼠气道上皮细胞中Ca²⁺的吸收和MCU蛋白表达;TEER和TRITC 荧光分析检测大鼠气道上皮中的屏障功能;免疫组化分析分气道上皮细胞屏障功能相关因子ZO-1、E-cadherin的蛋白表达;ELISAF分析BALF上清液中炎性因子IL-4、IL-5和IL-13的水平;二氢乙锭衍生物和蛋白印迹分析BALF中ROS含量和caspase-3活性。结果：哮喘组较对照组Ca²⁺浓度降低,MCU蛋白表达升高（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组Ca²⁺浓度升高,MCU蛋白表达降低（P<0.05）。哮喘组较对照组TEER降低,TRITC升高（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组TEER升高,TRITC降低（P<0.05）。哮喘组较对照组ZO-1、E-cadherin的蛋白表达降低（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组ZO-1、E-cadherin的蛋白表达升高（P<0.05）。哮喘组较对照组IL-4、IL-5和IL-13的水平升高（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组IL-4、IL-5和IL-13的水平降低（P<0.05）。对照组组支气管和肺泡结构未见异常,与对照组相比哮喘组大鼠表现出肺泡间隔增厚,可见的肺毛细血管水肿,以及肺毛细血管和肺泡间隙中的大量炎性细胞浸润（P<0.05）,与哮喘组相比,布地奈德组显著减轻肺部病变的严重程度（P<0.05）。哮喘组较对照组LC3B II/I、ATG5、Beclin-1 和LC3II 的表达升高（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组LC3B II/I、ATG5、Beclin-1 和LC3II 的表达降低（P<0.05）。哮喘组较对照组ROS含量和caspase-3活性升高（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组ROS含量和caspase-3活性降低（P<0.05）。结论：布地奈德通过调节MCU表达介导气道上皮细胞的屏障完整性和自噬水平,缓解哮喘气道炎症,改善哮喘症状。     

补肾益气活血方及其单味药对人牙周膜干细胞增殖分化的影响

摘要 目的：探讨自拟补肾益气活血方及其单味药当归、补骨脂对体外培养的人牙周膜干细胞（hPDLSCs）增殖和相关成骨基因表达的影响。方法：分离培养得到hPDLSCs,选取第3代hPDLSCs,细胞增殖试剂盒（CCK-8）检测不同浓度（0 g/mL、1×10^-7 g/mL、1×10^-5 g/mL、1×10^-3 g/mL）补肾益气活血方和当归、补骨脂对hPDLSCs增殖的影响,并确定最佳作用浓度和最佳作用时间;通过定量聚合酶链式反应（qPCR）检测Runt相关转录因子2（Runx2）、碱性磷酸酶（ALP）、骨桥蛋白（OPN）、骨钙蛋白（OCN）相关成骨基因的表达水平,通过茜素红染色观察细胞成骨分化情况。结果：与0 g/mL相比,补肾益气活血方各浓度在第一天和第三天时均能显著促进细胞增殖（P<0.05）,且浓度为1×10^-5 g/mL在第三天、第五天时效果均最为显著（P<0.05）;当归同样在浓度为1×10^-5 g/mL、第三天及第五天时效果均最为显著（P<0.05）;补骨脂则仅在第一天时能显著促进细胞增殖（P<0.05）。与空白对照组比较,1×10^-5 g/mL的补肾益气活血方、当归、补骨脂均能显著提升成骨相关Runx2、OCN、OPN、ALP的表达（P<0.05）,且补肾益气活血方的上调效果最为显著。茜素红染色检测显示,补肾益气活血方可增加矿化结节,促进作用最为显著。结论：补肾益气活血方可促进hPDLSCs的增殖和骨向分化,在治疗慢性牙周炎中有望发挥更大作用。     

肝硬化患者的免疫功能障碍与血清壳多糖酶3样蛋白1表达的关系

摘要 目的：探究肝硬化患者的免疫功能障碍与血清壳多糖酶3样蛋白1（CHI3L1）表达关系。方法：招募2018年2月至2020年8月在我院就诊的160例肝硬化患者。通过Child-Pugh评分对肝病的严重程度进行分组,轻度组（n=73）和重度组（n=87）。在本院健康检查中心招募60例年龄相仿且无任何明显疾病或感染的人员作为对照组。并检测CHI3L1蛋白表达、CHI3L1浓度、MR浓度、CD3⁺T、CD25⁺T和CD69⁺T水平以及血浆细胞因子的浓度。结果：对照组较轻度和重度组AST、ALT浓度升高,且轻度组较重度组升高（P<0.05）。Cr血清浓度各组比较无差异（P>0.05）。轻度组中93.15 %患者为Child-Pugh A,重度组中全部为Child-Pugh B/A。重度组较轻度组肝硬化程度严重（P<0.05）。重度组和轻度组较对照组CHI3L1蛋白表达升高,重度组较轻度组升高（P<0.05）。重度组和轻度组血清CHI3L1水平较对照组升高（P<0.05）,重度组较轻度组升高（P<0.05）。重度组和轻度组血清CD163和甘露糖受体（MR）水平较对照组升高（P<0.05）,重度组较轻度组升高（P<0.05）。重度组和轻度组血清CD3⁺T、CD25⁺T和CD69⁺T水平较对照组升高,重度组血清较轻度组升高（P<0.05）。重度组和轻度组白细胞介素（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和干扰素（IFN-γ）浓度较对照组升高,重度组较轻度组升高（P<0.05）。Logistic回归分析,提示患者血清CHI3L1、MR、CD3⁺T、CD25⁺T、CD69⁺T与患者肝硬化程度相关（P<0.05）。结论：肝硬化患者中血清CHI3L1与肝硬化严重程度呈正相关,CHI3L1促进T细胞活化、增殖和炎性细胞因子的分泌,这导致加重了免疫介导的肝损伤和纤维化的发展。     

温补肾阳法治疗肾阳虚模型大鼠多尿症状的机制研究

摘要 目的：探讨温补肾阳法治疗肾阳虚模型大鼠多尿症状的作用机制。方法：90只雄性SD大鼠随机分成干预组、抑制剂组、空白组、模型组,干预组根据中药剂量分为高剂量组、中剂量组、低剂量组。模型组、干预组及抑制剂组接受肾阳虚模型制备,干预组在成模后每日接受7 g/kg、14 g/kg、28 g/kg剂量中药灌胃,连续灌胃14 d。抑制剂组大鼠接受尾静脉注射通路抑制剂H-89。干预结束后比较各组脏器指数、24 h尿量、24 h尿蛋白水平以及尿液钠离子（Na⁺）、钾离子（K⁺）、氯离子（Cl^-）浓度、肾脏病理变化、血清醛固酮（ALD）、乙醇脱氢酶（ADH）、促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）、大鼠促肾上腺皮质激素（ACTH）、大鼠皮质醇（CORT）、蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶A（cAMP）含量、肾脏组织水通道蛋白2（AQP-2）蛋白表达的变化。结果：温补肾阳法可明显减少肾阳虚模型大鼠尿量,改善临床症状,且具有一定的剂量依赖性（P<0.05）。经过中药干预后大鼠24 h尿蛋白、脏器指数、尿液Na⁺、Cl^-均下降,尿液K⁺、血清ALD、ADH、CRF、ACTH、CORT、PKA、cAMP含量、肾脏组织AQP-2蛋白表达上调（P<0.05）,且抑制剂H-89可阻断该作用。结论：温补肾阳法可明显改善肾阳虚模型大鼠多尿症状,其作用机制可能通过cAMP-PKA-AQP2通路介导。     

齐墩果酸对APP/PS-1双转基因AD小鼠的神经保护作用研究

摘要 目的：研究齐墩果酸（Oleanolic Acid，OA）对APP/PS-1双转基因阿尔茨海默病（Alzheimer''s disease，AD）小鼠模型神经保护作用及机制。方法：选取6月龄APP/PS-1雄性小鼠21只，随机分为模型组（0.5% CMC-Na）、阳性组（多奈哌齐组，0.7 mg?kg^-1）、齐墩果酸组（10 mg?kg^-1）每组7只，6月龄同背景SPF级C57BL/6小鼠7只为对照组。灌胃8周之后通过Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力的改变，HE染色观察神经元细胞形态，ELISA检测血清中Aβ1-42含量；免疫组化检测Aβ_1-42、APP、Iba1蛋白表达情况；Western blot检测APP、Iba1蛋白表达水平。结果：（1）对照组，模型组，阳性组及齐墩果酸组进入有效区域次数分别为7.00±2.09，1.00±0.89，3.67±1.97，4.33±2.50，与模型组相比，对照组，阳性组，齐墩果酸组均有统计学意义（P<0.05）；（2）血清Aβ_1-42含量按上述顺序依次为4.98±0.25，2.50±0.66，4.63±0.73，4.36±0.97，与模型组相比，对照组，阳性组，齐墩果酸组均有统计学意义（P<0.05）；（3）免疫组化结果显示与模型组相比，对照组，阳性组，齐墩果酸组Aβ_1-42、APP、Iba1蛋白阳性细胞数减少；（4）WB结果：对照组，模型组，阳性组，齐墩果酸组APP蛋白相对表达量分别为0.52±0.17，1.38±0.35，0.89±0.25，0.93±0.27；这四组的IBA1蛋白相对表达量分别为0.98±0.34，1.79±0.74，1.06±0.61，0.88±0.49，与模型组相比，野生对照组，阳性组，齐墩果酸组APP、IBA1蛋白相对含量有统计学意义（P<0.05）。结论：齐墩果酸组可以改善APP/PS-1模型小鼠记忆力及认知功能，降低海马神经元的损伤，并通过下调Aβ_1-42、APP、Iba1蛋白的表达水平来发挥保护神经作用。     

miR-19靶向PTEN并介导HMGB1影响小鼠动脉粥样硬化进程的机制研究

摘要 目的：探究miR-19靶向PTEN并介导HMGB1影响小鼠动脉粥样硬化进程的机制研究。方法：SPF级C57BL/6J ApoE^-/-雄性小鼠根据研究目的将实验小鼠分为对照组、AS模型组和miR-19抑制剂组。通过RT-PCR分析小鼠主动脉组织中miR-19的mRNA表达。通过蛋白印迹分析小鼠主动脉PTEN、HMGB1和AKT的蛋白表达。通过荧光素酶活性检测miR-19a与PTEN的靶向关系。通过组织学和红油O染色分析小鼠胸腹主动脉和主动脉窦中的AS斑块面积。通过RT-PCR分析小鼠主动脉主动脉弓内膜中促炎细胞因子和趋化因子的mRNA表达。通过蛋白印迹分析主动脉弓内膜中ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达。结果：AS模型组miR-19mRNA表达较对照组升高（P<0.05）,miR-19抑制剂组miR-19mRNA表达较AS模型组降低（P<0.05）。AS模型组PTEN蛋白表达较对照组降低,HMGB1和AKT蛋白表达较对照组升高（P<0.05）,miR-19抑制剂组PTEN蛋白表达较AS模型组升高,miR-19抑制剂组HMGB1和AKT蛋白表达较AS模型组降低（P<0.05）。AS模型组主动脉和主动脉窦的斑块面积较对照组增加（P<0.05）,miR-19抑制剂组主动脉和主动脉窦的斑块面积较AS模型组减少（P<0.05）。AS模型组TNF-α、IL-β、IL-6和CXCL2的mRNA表达较对照组升高（P<0.05）,miR-19抑制剂组TNF-α、IL-6、IL-β和CXCL2的mRNA表达较AS模型降低（P<0.05）。AS模型组ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达较对照组升高（P<0.05）,miR-19抑制剂组ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达较AS模型组降低（P<0.05）。结论：miR-19通过靶向调控PTEN表达激活HMGB1/PI3K/Akt信号通路,这可能会促进VSMCs的异常增殖、迁移和炎症反应,有助于AS的进展。     

肌注神经生长因子及血小板衍生生长因子对胫骨干闭合骨折大鼠早期骨愈合的影响及机制探究

摘要 目的：探讨肌肉注射神经生长因子（NGF）和血小板衍生生长因子（PDGF）对胫骨干闭合骨折大鼠早期骨愈合的效果及潜在机制。方法：采用随机数字表法将80只健康成年雄性SD大鼠分为模型组、NGF组、PDGF组和NGF+PDGF组,各20只。建立胫骨干闭合骨折模型后,给予NGF组大鼠肌注0.8 μg NGF;给予PDGF组大鼠肌注0.8 μg PDGF,给予NGF+PDGF组大鼠肌注0.8 μg NGF和0.8 μg PDGF;给予模型组大鼠肌注等体积生理盐水。分别在治疗第2周（T0）、第4周（T1）、第6周（T2）通过X线检查计算骨痂体积,采用酶联免疫吸附法检测血清中碱性磷酸酶（AKP）水平。颈椎脱臼法处死大鼠后采用苏木精-伊红（HE）染色观察胫骨骨折端病理学改变,采用实时荧光定量PCR法检测骨痂组织骨形态发生蛋白2（BMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）和胰岛素样生长因子-1（IGF-1）mRNA相对表达水平。结果：NGF+PDGF组大鼠在T1时骨折断端愈合,骨痂体积大于其他三组;NGF组、PDGF组大鼠在T2时骨折断端愈合,骨痂体积大小均大于模型组（P<0.05）。模型组大鼠T2时骨折断端尚未完全愈合,骨痂体积显著大于其他三组（P<0.05）。NGF+PDGF组大鼠T0~T1时血清AKP水平均显著高于其他三组,NGF组和PDGF组大鼠血清AKP水平显著高于模型组（P<0.05）。T2时4组大鼠血清AKP水平比较无显著差异（P>0.05）。T1时,NGF组、PDGF组和NGF+PDGF组大鼠均可见骨小梁形态更加粗大、致密,呈栅栏状排列,骨小梁间的间隙变小,NGF+PDGF组大鼠骨断裂处被新生骨填满,NGF组、PDGF组骨断裂处仍有少量间隙。T1时NGF+PDGF组大鼠BMP2、VEGF和IGF-1相对表达水平均显著高于其他三组（P<0.05）,NGF组和PDGF组大鼠各指标mRNA相对表达水平比较无显著差异（P>0.05）,但均显著高于模型组（P<0.05）。T2时各组大鼠骨痂组织中BMP2、VEGF和IGF-1 mRNA相对表达水平比较无显著差异（P>0.05）。结论：NGF和PDGF对胫骨干闭合骨折大鼠早期骨愈合有协同促进作用,可能与促进BMP2、VEGF和IGF-1表达上调有关。     

甜橙黄酮通过调节AMPK/mTOR信号通路改善呼吸道合胞病毒感染大鼠的肺组织损伤

摘要 目的：探讨甜橙黄酮通过AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路对呼吸道合胞病毒（RSV）感染大鼠肺组织损伤的改善作用。方法：将30只雄性Wistar大鼠分为对照组、模型组、甜橙黄酮低剂量组（14 mg/kg）、甜橙黄酮中剂量组（28 mg/kg）、甜橙黄酮高剂量组（56 mg/kg）、甜橙黄酮高剂量+AICAR组（56 mg/kg+500 mg/kg的AMPK激活剂AICAR）,计算大鼠肺指数。实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）法测定肺组织RSV病毒载量,酶联免疫吸附（ELISA）法测定大鼠肺泡灌洗液炎症因子水平,HE染色测定肺组织病理,蛋白免疫印迹（Western blot）法测定AMPK/mTOR通路蛋白表达。结果：与对照组相比,模型组大鼠肺组织存在炎性浸润,排列松散,肺指数、肺组织RSV病毒载量、肺泡灌洗液白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、炎症评分、p-AMPK/AMPK、mTORC1蛋白表达升高（P＜0.05）;与模型组相比,甜橙黄酮低剂量组、甜橙黄酮中剂量组、甜橙黄酮高剂量组大鼠肺组织损伤减轻,大鼠肺指数、肺组织RSV病毒载量、肺泡灌洗液IL-1β、IL-6、TNF-α水平、炎症评分、p-AMPK/AMPK、mTORC1蛋白表达降低（P＜0.05）;与甜橙黄酮高剂量组相比,甜橙黄酮高剂量+AICAR组大鼠肺组织损伤加重,肺指数、肺组织RSV病毒载量、肺泡灌洗液IL-1β、IL-6、TNF-α水平、炎症评分、p-AMPK/AMPK、MTORC1蛋白表达升高（P＜0.05）。结论：甜橙黄酮可能通过抑制AMPK/mTOR信号通路发挥对RSV诱导的大鼠抗炎、抗病毒、抗肺部损伤作用。     

千金藤素腹腔注射对卵巢癌模型大鼠的作用及其机制研究

摘要 目的：研究千金藤素腹腔注射对卵巢癌模型大鼠的作用及其机制。方法：选取30只SD级清洁级健康雌性大鼠,按照随机数字表法分成模型组、实验组与空白对照组,每组各10只。空白对照组不予以处理,模型组与实验组建立卵巢癌模型,且实验组在造模后予以千金藤素腹腔注射干预,使用剂量为20 mg/kg每次,1次/d,给药30d,模型组与空白对照组予以等量生理盐水干预。比较各组大鼠荷瘤重量、腹水量以及肿瘤体积,癌胚抗原（CEA）、糖类抗原153（CA153）及人附睾蛋白（HE4）表达水平,磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、张力蛋白同源缺失的染色体（PTEN）表达,免疫指标水平。结果：模型组与实验组大鼠荷瘤重量、腹水量、肿瘤体积及CEA、CA153、HE4表达水平均高于空白对照组,且实验组大鼠上述各项指标水平均低于模型组（均P＜0.05）。模型组及实验组大鼠的PI3K、p-mTOR、PTEN表达水平均低于空白对照组,且实验组大鼠的PI3K、p-mTOR、PTEN表达水平均高于模型组（均P＜0.05）。模型组及实验组大鼠的CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平均低于空白对照组,且实验组大鼠CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平均高于模型组（均P＜0.05）;模型组及实验组大鼠的CD8⁺水平均高于空白对照组,且实验组大鼠CD8⁺水平低于模型组（均P＜0.05）。结论：千金藤素腹腔注射对卵巢癌模型大鼠具有明显的抑癌作用,有利于下调肿瘤标志物水平,其主要作用机制可能与调控PI3K/mTOR信号通路、PTEN表达以及免疫功能有关。     

β-谷甾醇对创伤性脑损伤大鼠的保护作用及对铁死亡-脂质代谢途径的影响

摘要 目的：揭示β-谷甾醇（Sito）对创伤性脑损伤（TBI）大鼠的保护作用及对铁死亡-脂质代谢途径的影响。方法：将大鼠分为Sham组（n=10）、TBI组（n=11）、TBI+10Sito组（n=10）、TBI+20Sito组（n=10）、TBI+40Sito组（n=10）和TBI+40Sito+GPX4-IN-3组（n=10）。Sham组大鼠不进行造模,其他组大鼠为TBI模型大鼠。Sham组和TBI组大鼠每天灌胃1 mL0.5%羧甲基纤维素钠。TBI+10Sito组、TBI+20Sito组、TBI+40Sito组大鼠分别灌胃1 mL 10、20、40 mg/kg/d的β-谷甾醇。TBI+40Sito+GPX4-IN-3组大鼠同时灌胃0.5 mL 40 mg/kg/d的β-谷甾醇和0.5 mL 15 mg/kg/d的GPX4-IN-3（铁死亡选择性诱导剂）。各组大鼠均给药14 d。给药结束后,检测了各组大鼠的神经功能评分。通过Morris水迷宫实验评价认知功能。通过蔗糖偏好实验和旷场实验评价行为学。检测血清脂质代谢指标[总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）]水平、脑组织含水量、脑组织氧化应激指标[超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）]水平、脑组织Fe²⁺含量。通过苏木素伊红（HE）染色和尼氏染色评价脑组织损伤。通过Western blot和免疫荧光染色检测谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）蛋白表达。结果：与Sham组比较,TBI组大鼠的神经功能评分和逃避潜伏期升高,穿越平台次数、蔗糖偏好率、水平活动分数和垂直活动分数降低,TC、TG和LDL-c升高,HDL-c降低,脑组织含水量升高,神经元出现明显损伤,SOD水平降低,MDA水平升高,Fe²⁺含量升高,GPX4蛋白表达水平和GPX4相对荧光强度降低（P<0.05）。与TBI组比较,TBI+10Sito组、TBI+20Sito组和TBI+40Sito组大鼠的神经功能评分和逃避潜伏期降低,穿越平台次数、蔗糖偏好率、水平活动分数和垂直活动分数升高,TC、TG和LDL-c降低,HDL-c升高,脑组织含水量降低,神经元损伤明显减轻,SOD水平升高,MDA水平降低,Fe²⁺含量降低,GPX4蛋白表达水平和GPX4相对荧光强度升高（P<0.05）。与TBI+40Sito组比较,TBI+40Sito+GPX4-IN-3组大鼠的神经功能评分和逃避潜伏期升高,穿越平台次数、蔗糖偏好率、水平活动分数和垂直活动分数降低,TC、TG和LDL-c升高,HDL-c降低,脑组织含水量升高,神经元损伤加重,SOD水平降低,MDA水平升高,Fe²⁺含量升高,GPX4蛋白表达水平和GPX4相对荧光强度降低（P<0.05）。结论：β-谷甾醇可有效减轻TBI后的继发性损伤,其机制可能与抑制铁死亡途径介导的氧化应激和脂质代谢紊乱有关。     

手足口病合并脑炎患儿外周血T淋巴细胞亚群、血清VCAM-1及CRP的表达水平及其检测价值分析

摘要 目的：探讨与分析手足口病（HFMD）合并脑炎患儿外周血T淋巴细胞亚群、血清VCAM-1及CRP的表达水平及其检测价值。方法：2017年4月到2020年10月选择在本院诊治的手足口病合并脑炎患儿42例作为合并组,同期选择手足口病不合并脑炎患儿68例作为对照组,检测两组外周血T淋巴细胞亚群、血清血管细胞粘附分子-1（VCAM-）及C-反应蛋白（CRP）表达水平,并判断检测价值与进行相关性分析。结果：合并组的CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞相对比例都明显少于对照组（P<0.05）。合并组的血清VCAM-1及CRP含量明显高于对照组（P<0.05）。在80例患儿中,Spearsman分析显示CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞相对比例和血清VCAM-1、CRP含量都与手足口病合并脑炎的发生存在相关性（P<0.05）。二分类Logistic回归分析显示CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞相对比例和血清VCAM-1、CRP含量都为导致手足口病合并脑炎发生的重要因素（P<0.05）。结论：手足口病合并脑炎患儿多伴随有外周血T淋巴细胞亚群异常与血清VCAM-1、CRP的高表达,CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞相对比例、血清VCAM-1、CRP含量都为导致手足口病合并脑炎发生的重要因素。     

血必净注射液联合胸腺肽α1对重症肺炎合并脓毒症患者血气指标、炎症因子及免疫功能的影响

摘要 目的：探讨血必净注射液联合胸腺肽α1对重症肺炎合并脓毒症患者血气指标、炎症因子及免疫功能的影响。方法：回顾性分析2018年1月到2020年5月期间我院收治的150例重症肺炎合并脓毒症患者的临床资料,根据治疗方案的不同分为A组（血必净注射液治疗,n=75）和B组（血必净注射液联合胸腺肽α1治疗,n=75）,两组均治疗10 d。对比两组疗效、常规疗效指标、血气指标、炎症因子及免疫功能,比较两组治疗期间不良反应情况。结果：B组治疗10 d后的临床总有效率为93.33%（70/75）,高于A组的81.33%（61/75）（P<0.05）。B组28 d内机械通气时间、ICU治疗时间短于A组,急性生理学及慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）评分、快速序贯器官功能衰竭（SOFA）评分低于A组（P<0.05）。治疗10 d后,B组氧分压、血氧饱和度高于A组,二氧化碳分压低于A组（P<0.05）。治疗10 d后,B组超敏C反应蛋白（hs-CRP）、降钙素原（PCT）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）低于A组（P<0.05）。治疗10 d后,B组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺高于A组,CD8⁺低于A组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比差异无统计学意义（P>0.05）。结论：血必净注射液联合胸腺肽α1治疗重症肺炎合并脓毒症患者,疗效确切且安全性较好,能改善患者血气状况,提高免疫功能,减轻炎症反应。     

欧前胡素调节Gas6/Axl轴对膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能的影响

摘要 目的：探讨欧前胡素（IMP）调节生长停滞特异蛋白6（Gas6）/Axl轴对膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：从60只SPF级雄性C57BL/6小鼠中随机选取12只小鼠作为对照组（CON组）,其余小鼠平均分为Model组、IMP组、Gas6组、IMP+Gas6组,每组12只,往其左侧前肢皮下注射0.2 mL浓度为1×10⁷个/mL的鼠源性膀胱癌肿瘤细胞系T739细胞溶液（Model组和IMP组注射对照载体的T739稳转株细胞,Gas6组和IMP+Gas6组注射过表达Gas6的T739稳转细胞株）造模。造模成功后,IMP组及IMP+Gas6组通过腹腔注射5 mg/kg的IMP;CON组、Model组及Gas6组通过腹腔注射等量的生理盐水,2天1次,持续5次。测量小鼠肿瘤体积和重量;测定胸腺指数和脾脏指数;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清白介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）、血管内皮生长因子（VEGF）水平;苏木精-伊红（HE）染色检查肿瘤组织病理变化;流式细胞术检测T细胞亚群;TUNEL染色检测细胞凋亡;蛋白质印迹法（Western blot）检测Gas6/Axl通路相关蛋白表达。结果：Model组肿瘤细胞整体上排列松散,出现不同程度的核固缩、核碎裂现象;IMP则可以逆转该现象,使肿瘤细胞排列重新变得紧密,细胞核固缩程度提升,核碎裂现象降低;Model组较CON组肿瘤体积、肿瘤质量、CD8⁺细胞百分比、Gas6、Axl蛋白水平、VEGF水平显著增加（P<0.05）,胸腺指数和脾脏指数、IL-2、IFN-γ、CD4⁺细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺、肿瘤细胞凋亡率显著下降（P<0.05）;与Model组相比,IMP组胸腺指数和脾脏指数、IL-2、IFN-γ、CD4⁺细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺、肿瘤细胞凋亡率显著升高（P<0.05）,肿瘤体积、肿瘤质量、CD8⁺细胞百分比、Gas6、Axl蛋白水平、VEGF水平显著下降（P<0.05）;而Gas6组结果与IMP组趋势相反;而IMP+Gas6组的结果显示：IMP能逆转Gas6过表达后对膀胱癌荷瘤小鼠的促瘤作用。结论：IMP可能通过下调Gas6/Axl信号通路改善膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能,从而产生抑瘤效果。