藤稔葡萄花发育相关基因启动子的克隆及功能分析

采用基于热不对称交错式PCR的基因组步移法,从藤稔葡萄(Vitis vinifera×V.labrusca‘Fujiminori’)的基因组总DNA中扩增花发育相关基因FT、FLC、AP3和AG的启动子上游序列片段,并通过序列分析及PlantCARE在线预测对FT、FLC和AP3启动子片段的序列及顺式调控作用元件和功能进行了分析.扩增结果表明:AG的第1轮扩增产物无明显条带,第2轮扩增产物条带弥散,不能用于序列分析及顺式调控作用元件和功能分析;FT、FLC和AP3基因2轮扩增产物均有特异条带,FT、FLC和AP3启动子序列的实际长度分别为1 470、1 698和1 061 bp,GenBank登录号分别为HM192806、HM192805和HM192804.PlantCARE在线预测结果表明:FT、FLC和AP3启动子片段中均含有TATA-box、CAAT-box等启动子的特异表达元件及光响应元件、真菌刺激响应元件、MYB结合位点等多个顺式调控作用元件,共同受真菌刺激、MYB和光等因素的调控;FT、FLC和AP3均可能在花的分生组织中表达,且FT和AP3还可能在胚乳中表达.根据研究结果推测:FT、FLC和AP3基因的启动子序列片段中均存在多种诱导响应元件,可能均为诱导型启动子.     

随机SNP在全基因组关联研究人群分层分析中的应用

在复杂疾病的全基因组关联研究中,人群分层现象会增加结果的假阳性率,因此考虑人群遗传结构、控制人群分层是很有必要的。而在人群分层研究中,使用随机选择的SNP的效果还有待进一步探讨。文章利用HapMap Phase2人群中无关个体的Affymetrix SNP 6.0芯片分型数据,在全基因组上随机均匀选择不同数量的SNP,同时利用f值和Fisher精确检验方法筛选祖先信息标记（Ancestry Informative Markers,AIMs）。然后利用HapMap Phase3中的无关个体的数据,以F-statistics和STRUCTURE分析两种方法评估所选出的不同SNP组合对人群的区分效果。研究发现,随机均匀分布于全基因组的SNP可用于识别人群内部存在的遗传结构。文章进一步提示,在全基因组关联研究中,当没有针对特定人群的AIMs时,可在全基因组上随机选择3000以上均匀分布的SNP来控制人群分层。     

甘蓝型油菜中一类AP2/ERF转录因子的克隆和生物信息学分析

AP2/ERF转录因子家族是植物中广泛存在的一类转录因子,AP2/ERF这类转录因子主要参与植物的细胞周期、生长发育以及生物和非生物胁迫相关基因的表达调控。由于拟南芥和油菜同属于芸薹属,具有相似的基因信息,利用油菜UniGene数据库,以拟南芥ERF转录因子保守序列为探针,通过电子克隆从一个UniGene Cluster中分离得到三个同类的AP2/ERF转录因子,从cDNA序列、氨基酸序列的相似性、组成成分、理化性质、疏水性/亲水性分析、序列比对、进化树、功能域、二级结构、三级结构、无序化特性进行了预测和较为全面的分析。结果显示油菜来源的BnaERF1、BnaERF2和BnaERF3属于AP2/ERF转录因子的B-2亚族,是亲水性蛋白,在蛋白质的三级结构上与AtERF1相似。蛋白质无序化分析发现,油菜BnaERF1、BnaERF2和BnaERF3无序化程度小于拟南芥AtERF1。设计引物通过PCR和RT-PCR方法分别从甘蓝型双低油菜沪油15幼苗的DNA和cDNA中扩增了上述基因,初步分析BnaERF2没有内含子,BnaERF1和BnaERF3有内含子。另外,通过EST丰度分析显示,该类转录因子的表达最高峰在种子中,其次为花,在芽、茎和分生组织中没有检测出表达的存在。     

三种抗生素对丰水梨叶片不定芽再生的影响及其对根癌农杆菌的抑菌效果

以丰水梨(Pyrus pyrifolia‘Hosui')离体叶片为实验材料,研究了氨苄青霉素(Amp)、羧苄青霉素(Carb)和头孢霉素(Cef)对丰水梨叶片不定芽再生的影响及其对根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的抑菌效果.结果表明,在100～500 mg·L-1浓度范围内,3种抗生素对丰水梨叶片愈伤组织诱导均无显著影响.Amp、Carb和Cef抑制丰水梨叶片不定芽再生的起始浓度分别为100、200和200 mg·L-1;当浓度高达500 mg·L-1时,Amp、Carb和Cef均极显著地抑制叶片不定芽再生.除500 mg·L-1Cef处理组外,不同浓度Amp、Carb和Cef对丰水梨每个外植体的再生不定芽数没有显著影响.与对照相比,在100～500 mg·L-1浓度范围内,3种抗生素均对根癌农杆菌菌株LBA4404和EHA105有显著的抑制作用,且对菌株EHA105的抑制效果强于菌株LBA4404.研究结果显示,在丰水梨遗传转化体系中,可以选择300 mg·L-1的Amp和Cef作为理想的杀菌剂.     

蓝浆果叶片高效再生体系的建立

以高丛蓝浆果(V accin ium corym bosum)叶片为外植体,研究了影响离体再生的多个因素,建立了高效的再生体系。结果表明:改良1/2 M S ZR 5 m g.L-1培养基最适合不定芽分化,再生率达100%。不同节位叶片对蓝浆果叶片不定芽的分化具显著效应,以幼嫩的1~2节位的叶片比较容易分化不定芽;叶片远轴面接触培养基、叶片创造伤口和不经暗处理或短时间处理有利于不定芽分化。低浓度IBA有利于叶片再生茎段的生根,在改良1/2 M S IBA 0.1 m g.L-1培养基上蓝丰(B luecrop)生根率为66.7%,而伯克利(B erk ly)仅为33.3%。     

微信小程序辅助的过程考核评价体系在生物工程专业“无机化学实验”课程中的应用与实践

微信小程序“无需安装,触手可及”的便捷性使其在移动端辅助实验教学的应用中独具优势。为优化考核评价体系,提高实验教学质量与效果,利用自制微信小程序辅助构建过程考核评价体系,并创新性地应用于2019级生物工程2班“无机化学实验”的教学实践中,以“评”促“教” “学”。结果表明,2019级生物工程2班学生的课程成绩显著优于对照组;过程评价考核环节与期末考试成绩相关性显著。说明小程序辅助的过程考核评价体系能较好地反映学生的学习效果,并有效提高课程成绩,使学生更好地掌握无机化学实验相关知识。问卷调查结果也表明师生对小程序辅助教学认可度较高。     

千金藤素腹腔注射对卵巢癌模型大鼠的作用及其机制研究

摘要 目的：研究千金藤素腹腔注射对卵巢癌模型大鼠的作用及其机制。方法：选取30只SD级清洁级健康雌性大鼠,按照随机数字表法分成模型组、实验组与空白对照组,每组各10只。空白对照组不予以处理,模型组与实验组建立卵巢癌模型,且实验组在造模后予以千金藤素腹腔注射干预,使用剂量为20 mg/kg每次,1次/d,给药30d,模型组与空白对照组予以等量生理盐水干预。比较各组大鼠荷瘤重量、腹水量以及肿瘤体积,癌胚抗原（CEA）、糖类抗原153（CA153）及人附睾蛋白（HE4）表达水平,磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、张力蛋白同源缺失的染色体（PTEN）表达,免疫指标水平。结果：模型组与实验组大鼠荷瘤重量、腹水量、肿瘤体积及CEA、CA153、HE4表达水平均高于空白对照组,且实验组大鼠上述各项指标水平均低于模型组（均P＜0.05）。模型组及实验组大鼠的PI3K、p-mTOR、PTEN表达水平均低于空白对照组,且实验组大鼠的PI3K、p-mTOR、PTEN表达水平均高于模型组（均P＜0.05）。模型组及实验组大鼠的CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平均低于空白对照组,且实验组大鼠CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平均高于模型组（均P＜0.05）;模型组及实验组大鼠的CD8⁺水平均高于空白对照组,且实验组大鼠CD8⁺水平低于模型组（均P＜0.05）。结论：千金藤素腹腔注射对卵巢癌模型大鼠具有明显的抑癌作用,有利于下调肿瘤标志物水平,其主要作用机制可能与调控PI3K/mTOR信号通路、PTEN表达以及免疫功能有关。     

沿海拔梯度武夷山3种典型森林凋落物及养分归还动态

为了解武夷山森林凋落物量和养分归还特征,对武夷山3个海拔典型森林的凋落物量和养分动态开展连续3年的监测。结果表明,常绿阔叶林(645 m)、针阔混交林(1 028 m)和针叶林(1 442 m)的凋落物总量分别为471.25、453.77和409.84 g/m~2,森林凋落物总量随海拔升高呈减少的趋势。武夷山3种典型森林的凋落物总量具有明显的季节变化,均呈双峰型,但常绿阔叶林与针阔混交林和针叶林的凋落物总量峰值和次峰值出现时间近似相反。3种典型森林凋落物中落叶占绝对优势(78.1%～87.6%),落枝和其他组分较少。武夷山3种典型森林凋落物的养分年归还量均表现为C N K P,且养分归还总量随海拔升高而减少。常绿阔叶林的凋落物量和养分归还量较高,可能与环境条件和植被特征相关。这为中亚热带森林生态系统养分循环和森林碳循环机理研究提供了理论依据。     

后外侧与后内侧入路内固定术治疗旋后外旋型Ⅳ度踝关节骨折的回顾性对照研究

摘要 目的：对比后外侧与后内侧入路内固定术治疗旋后外旋型Ⅳ度踝关节骨折治疗效果。方法：回顾性分析2019年5月-2021年5月于本院治疗的89例旋后外旋型Ⅳ度踝关节骨折患者的临床资料,按照钢板螺钉内固定术入路不同手术入路分组,其中41例手术入路为后内侧入路（对照组）,48例手术入路为后外侧入路（观察组）。对照组中男24例,女17例,年龄23～65岁,平均（39.88±9.36）岁;患侧：左侧23例,右侧18例,受伤原因：交通事故26例,高处坠落15例。观察组中男27例,女21例,年龄22～67岁,平均（41.47±9.27）岁,患侧：左侧28例,右侧20例,受伤原因：交通事故32例,高处坠落16例。对比术后6个月两组骨折愈合情况、手术指标、踝关节功能、生活质量以及并发症情况。结果：观察组骨折愈合优良率为95.83%,明显高于对照组80.49%（P＜0.05）;与对照组比较,观察组术中出血量较少,手术时间、骨折愈合时间及住院时间均较短（P＜0.05）;术前两组踝关节功能及健康状况调查简表（SF-36）无差异（P>0.05）,术后踝关节功能、生活质量均提高,而观察组术后踝-后足功能、Mazur（踝关节症状和功能）评分、SF-36评分均高于对照组（P＜0.05）;观察组并发症总发生率为4.16%,明显低于对照组17.07%（P＜0.05）。结论：后外侧入路较后内侧入路钢板螺钉内固定术治疗旋后外旋型Ⅳ度踝关节骨折的疗效更佳,可提高骨折愈合率、踝关节功能和生活质量,并有助于降低术后并发症发生率。     

滇水金凤SAUR基因的克隆及表达分析北大核心CSCD

SAUR(small auxin up RNA)作为植物主要生长素诱导基因之一,其在促进植物细胞分裂和细胞伸长方面发挥重要的调节作用。该研究以滇水金凤(Impatiens uliginosa Franch.)为材料,采用RT-PCR等技术克隆SAUR基因,并进行生物信息学分析及基因表达分析。结果表明:(1)成功获得6个SAUR基因,其cDNA序列全长分别为351、534、396、333、309和411 bp,分别编码116、177、131、110、102和136个氨基酸。(2)生物信息学分析显示,除SAUR3为稳定蛋白外,其余5个均为不稳定蛋白;除SAUR5为疏水性蛋白外,其余均为亲水性蛋白;所有蛋白均为非分泌蛋白;6个SAUR基因编码的氨基酸序列与其他植物比对有较高的相似性,并具有一定的种属保守特征;推测SAUR4和SAUR5为旁系同缘,同时SAUR1、SAUR2、SAUR3和SAUR6为直系同缘。(3)RT-PCR分析发现,随着滇水金凤花的开放,6个SAUR基因表达量在花发育不同时期的檐部中均呈先上升后下降的趋势,始花期相对表达量最高,其次是盛花期,花苞期相对表达量均最低;各基因在花距的檐部和距部存在很大差异,其中SAUR3基因在2个部位均有非常高的表达;SAUR4、SAUR5和SAUR6基因在滇水金凤花距的基部和檐部具有相对高的表达,而其余3个SAUR基因在花距的尖部和弯部表达不明显。该研究结果为凤仙花属植物花距的生长发育调控机理、花型改良及新品种培育提供了一定的基础数据和科学依据。