氧自由基与脑胶质瘤瘤周水肿关系的实验研究

目的：探讨自由基和脑胶质瘤瘤周水肿的关系。方法：体外培养大鼠C6脑胶质瘤细胞株,采用立体定向技术将细胞株接种在右侧尾状核,建立大鼠脑胶质瘤模型,共60只,术后5天将荷瘤大鼠随机分为3组（EDA高剂量组,EDA低剂量组和对照组）,每组各20只,每组10只用来测定荷瘤大鼠瘤周脑组织含水量、SOD活性及MDA含量,剩余10只用来观察荷瘤大鼠生存时间。结果：EDA干预组荷瘤大鼠瘤周脑组织含水量下降,SOD活性增高,MDA含量下降,以EDA高剂量组更为显著。各组荷瘤大鼠瘤周脑组织含水量与SOD活性呈负相关,而与MDA含量呈正相关。且EDA组荷瘤大鼠生存时间延长。结论：由基参与大鼠脑胶质瘤瘤周水肿的形成,自由基清除剂能够减轻大鼠脑胶质瘤瘤周脑组织水肿。     

氧自由基与脑胶质瘤瘤周水肿关系的实验研究

目的:探讨自由基和脑胶质瘤瘤周水肿的关系。方法:体外培养大鼠C6脑胶质瘤细胞株,采用立体定向技术将细胞株接种在右侧尾状核,建立大鼠脑胶质瘤模型,共60只,术后5天将荷瘤大鼠随机分为3组(EDA高剂量组,EDA低剂量组和对照组),每组各20只,每组10只用来测定荷瘤大鼠瘤周脑组织含水量、SOD活性及MDA含量,剩余10只用来观察荷瘤大鼠生存时间。结果:EDA干预组荷瘤大鼠瘤周脑组织含水量下降,SOD活性增高,MDA含量下降,以EDA高剂量组更为显著。各组荷瘤大鼠瘤周脑组织含水量与SOD活性呈负相关,而与MDA含量呈正相关。且EDA组荷瘤大鼠生存时间延长。结论:由基参与大鼠脑胶质瘤瘤周水肿的形成,自由基清除剂能够减轻大鼠脑胶质瘤瘤周脑组织水肿。     

二氮嗪对大鼠脑缺血再灌注后ZO-1和Claudin-5蛋白表达的影响

目的观察二氮嗪对大鼠脑缺血再灌注后紧密连接相关蛋白ZO-1和Claudin-5蛋白表达的影响,研究其对血脑屏障紧密连接是否具有保护作用。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为3组:假手术组、缺血再灌注组及二氮嗪预处理组,采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,分别应用免疫组化染色和Western blot检测各组大鼠ZO-1和Claudin-5蛋白的表达水平。结果 1.假手术组ZO-1、Claudin-5在血管上的染色连续、丰富,缺血再灌注组ZO-1、Claudin-5的染色稀少、断续,二氮嗪预处理组染色较缺血再灌注组有所改善;2.Western blot定量测定与假手术组相比,缺血再灌注组大鼠脑组织中ZO-1和Claudin-5蛋白表达均明显下降(P0.01),与缺血再灌注组相比,二氮嗪预处理组ZO-1和Claudin-5的蛋白表达明显增多(P0.05)。结论二氮嗪对血脑屏障紧密连接具有保护作用,其机制可能与增加紧密连接相关蛋白ZO-1和Claudin-5的表达有关。     

3.0T 1H-MRS对脑胶质瘤及脑转移瘤的鉴别诊断

目的：利用3.0T氢质子磁共振波谱对胶质瘤和转移瘤的肿瘤组织区、瘤周水肿区进行细胞代谢物水平的检测,试图找出胶质瘤和脑转移瘤的鉴别诊断的依据,以及胶质瘤高、低级别组间的差别。方法：对经病理证实的20例高级别胶质瘤组、16例低级别胶质瘤组和19例脑转移瘤组患者,先行MRI平扫及增强扫描,波谱均在增强扫描的基础上获得,使用MR点分辨波谱序列,检测肿瘤组织区、瘤周水肿组织区NAA/Cr、Cho/Cr、NAA/Cho、NAA、Cho、Cr、Lip/Lac等值,进行比较。结果：（1）高级别胶质瘤与转移瘤在肿瘤组织区NAA/Cr代谢物浓度的比值有统计学意义。（2）高、低级别胶质瘤肿瘤组织内Cho/Cr比值有统计学意义。（3）转移瘤与高、低级别胶质瘤在瘤周水肿区NAA/Cr,以及低级别胶质瘤与转移瘤Cho/Cr代谢物浓度的比值有统计学意义;高级别胶质瘤与转移瘤瘤周区NAA代谢物浓度有明显差异。（4）胶质瘤高、低级别组间在肿瘤周围区NAA峰、Cho峰及NAA/Cho Cho/Cr代谢物浓度比值有统计学意义。（5）高级别胶质瘤和转移瘤分别与低级别胶质瘤在肿瘤组织区及瘤周水肿区Lip/Lac有显著性差异（P〈0.01）。结论：利用氢质子波谱可对胶质瘤和转移瘤进行鉴别诊断;Cho/Cr及NAA/Cho比值可对胶质瘤进行分级;Lip/Lac峰的出现与肿瘤的恶性度呈正相关,但不特异。     

携带CD基因骨髓间充质干细胞对C6大鼠胶质瘤体内抑制作用研究

为了研究自杀基因——胞嘧啶脱氨酶基因(cytosine deaminase gene,CD基因)对大鼠脑胶质瘤的体内治疗效果,采用基因转导系统将慢病毒包装的CD基因转染骨髓间充质干细胞(MSC)并使其长时间、高效表达,然后移植到使用颅内立体定向接种法制作的40只SD大鼠胶质瘤模型中．按接种细胞类型将实验SD大鼠分为5组, 每组8只：① C6胶质瘤; ②C6+MSCs细胞(1∶1);③ C6+MSCs细胞(1∶2);④ C6+MSC-codA/eGFP细胞(1∶1);⑤ C6+MSC-codA/eGFP细胞(1∶2)．瘤龄7天后腹腔注射500 mg/(kg·d) 5-氟胞嘧啶(5-flucytosine,5-FC),共14天．用磁共振成像(MRI)动态监测肿瘤的体积并进行了大鼠存活期观察、常规病理分析、RT-PCR检测、HE 染色．结果显示,第①组瘤龄14天时病灶呈圆形,中心见坏死区,肿瘤平均246 mm³,均存活期15.3天,第②组平均生存期16.0天,第③组平均生存期16.6天,第④⑤组自然存活期均大于30天,14天时病灶平均体积分别为55 mm³、40 mm³,28天时肿瘤抑制率分别为77.24%、83.28%．MRI扫描可清楚显示肿瘤的大小、形态和内部结构,与病理结果高度相关;MRI动态观察可证实携带CD基因的骨髓间充质干细胞及5-FC治疗系统治疗C6颅内胶质瘤有效;RT-PCR检测结果证实肿瘤组织内有胞嘧啶脱氨酶表达．     

糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障结构的损伤及其机制

目的：研究糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障结构关键蛋白紧密连接蛋白（ZO-1）、基底膜蛋白（CoIV）、周细胞蛋白（a-SMA）的表达情况及其损伤机制。方法：采用高脂灌胃14 d后,再尾静脉注射链脲佐菌素（STZ,38mg/kg）,随机分为2组（n=15）：糖尿病组和糖尿病并发抑郁症组;正常大鼠随机分为2组（n=15）：空白对照组和抑郁症组。糖尿病组与空白对照组正常饲养,糖尿病并发抑郁症组和抑郁症组慢性不可预知性应激28 d。检测各组大鼠血糖值的变化,Open-field及Morris实验评价大鼠行为学变化,透射电子显微镜观察大鼠海马血脑屏障形态学改变,免疫组化法检测大鼠海马血脑屏障关键蛋白ZO-1、CoIV、a-SMA表达情况。结果：与空白对照组比较,糖尿病并发抑郁症组大鼠血糖异常升高,自主活动次数减少,逃避潜伏期延长,空间探索时间减少（P < 0.05,P < 0. 01）;海马血脑屏障内皮模糊,毛细血管管腔狭窄,周边胶质细胞终足水肿,ZO-1、α-SMA表达显著减少（P < 0. 05）,CoIV的表达显著增加（P < 0.05）;与糖尿病组比较,糖尿病并发抑郁症组大鼠自主活动次数显著减少（P < 0. 01）,逃避潜伏期延长（P < 0.05）,海马血脑屏障毛细血管管腔更为狭窄、胶质细胞终足水肿更为明显,a-SMA表达显著下降（P< 0.05）。结论：糖尿病并发抑郁症血脑屏障关键蛋白ZO-1、CoIV、α-SMA表达紊乱可能是其结构损伤发生机制之一。     

SD大鼠与Wistar大鼠脑胶质瘤动物模型的建立及比较

目的比较利用SD大鼠、Wistar大鼠建立脑胶质瘤动物模型的不同,为研究脑胶质瘤的发病机制及治疗方法提供操作平台。方法利用立体定向仪建立SD大鼠、Wistar大鼠大脑皮层接种C6细胞（2.5×105个细胞/只）,建立脑胶质瘤动物模型,利用组织病理学、免疫组织化学以及核磁共振成像等技术,比较两种动物模型在成瘤率、肿瘤生长状况、死亡率以及动物一般情况等方面的异同。结果SD大鼠组、Wistar大鼠组的成瘤率均为100%,两组均未见转移;但SD大鼠组肿瘤成瘤时间较长,且部分肿瘤有自愈倾向,而Wistar大鼠组则未出现类似情况。结论Wistar大鼠大脑皮层脑胶质瘤动物模型的肿瘤性状更接近于人的脑胶质瘤,因此更适合探索和研究脑胶质瘤的发病机制和治疗方法;而SD大鼠的肿瘤由于性状类似转移瘤,且有自愈倾向,不适合作为上述相关研究的动物模型。     

立体定向建立大鼠C6脑胶质瘤模型

目的应用不同C6细胞数量接种大鼠脑内建立大鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性,比较各种接种量的优劣。方法分别取1·0×105个/10μl,1·0×106个/10μl,1·0×107个/10μl体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞单细胞悬液,立体定向接种于Wistar大鼠脑右侧尾状核区,在整体、组织、细胞、蛋白4个水平对各种接种量进行比较。结果各种接种量的实验组成瘤率均为100%,未见颅外转移病灶,在组织病理学上接近人脑胶质瘤,瘤细胞病理性核分裂像多见,C-erbB1和S-100B等神经胶质瘤常见蛋白强阳性表达,瘤组织内有丰富的微血管以及出血和坏死。结论C6细胞接种Wistar大鼠建立脑胶质瘤动物模型,成瘤率高,颅内生长稳定,肿瘤组织病理学及形态学特性与人脑胶质瘤相似。可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型。实验过程部分时段各种接种剂量肿瘤生长速度差异有显著性,可根据病因学、实验治疗或药效学等不同研究需要选择不同接种量。     

柔肝固肠方改善慢性酒精性肝损伤大鼠肠道通透性的机制研究

目的：从肠道紧密连接及黏附连接角度探讨柔肝固肠方改善慢性酒精性肝损伤大鼠肠道通透性的作用机制。方法：Lieber-DeCarli酒精液体饲料饲养6周诱导大鼠慢性酒精性肝损伤模型。30只SD雄性大鼠,随机分无酒精液体饲料对照组（对照组,n＝10）和酒精液体饲料造模组（n＝20）,造模第4周将造模组大鼠随机分模型组（n＝10）,柔肝固肠方组（n＝10）,并开始灌胃给柔肝固肠方或蒸馏水直至6周末,取材前3．5 h各组以10 mg／kg的内毒素（LPS）灌胃。取材后检测：1）血清AST、ALT活性变化;2）通过门脉血浆内毒素含量测定判断小肠通透性变化;3）小肠组织电镜超微结构观察;4）小肠紧密连接蛋白ZO-1、Occludin蛋白与mRNA表达变化;5）小肠黏附连接蛋白β-Catenin和E-Cadherin蛋白表达。结果：1）柔肝固肠方可显著降低模型大鼠显著升高的AST水平（P＜0．05）;2）柔肝固肠方可降低模型大鼠显著升高的小肠通透性,柔肝固肠方组血浆内毒素含量显著低于模型组;3）电镜结果显示柔肝固肠方可显著改善Lieber-DeCarli酒精饲料喂养大鼠小肠黏膜表面微绒毛局灶性减少、变短、稀疏,排列不规则,同微绒毛相连的细胞终末网变性模糊等病理改变;4）柔肝固肠方可显著升高酒精饲料喂养肝损伤大鼠小肠组织紧密连接蛋白ZO-1、Occludin蛋白与mRNA表达及黏附连接蛋白β-Catenin和E-Cadherin蛋白表达。结论：柔肝固肠方通过改善肠上皮紧密连接及黏附连接改善慢性酒精性肝损伤大鼠肠道通透性改变。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肠粘膜紧密连接蛋白ZO-1及肌球蛋白轻链激酶的变化

目的:研究不同阶段非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肠粘膜紧密连接蛋白ZO-1及肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的变化。方法:将60只雄性清洁级SD大鼠随机分为两组:正常饮食组(NDG)和高脂饮食组(FDG)。于4周、8周、12周时观察各组大鼠肝脏病理学改变;应用ELISA方法测定各阶段大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)的变化;应用鲎实验测定各阶段大鼠门静脉血中内毒素(ET)水平;应用免疫组化方法检测肠道粘膜肌球蛋白轻链激酶(MLCK)及紧密连接蛋白(ZO-1)的表达及分布情况。结果:随着高脂饮食时间增长,高脂饮食组大鼠肝脏脂肪变性程度逐渐加重;血清ALT、AST、TG、CHOL水平逐渐升高(4周时,P0.05,8周和12周时P0.05);大鼠血浆内毒素的水平逐渐上升(0.11±0.01比0.11±0.01,P0.05;0.36±0.01比0.11±0.01,P0.05;0.44±0.15比0.18±0.03,P0.05);高质饮食组较正常饮食组大鼠紧密连接蛋白ZO-1表达逐渐下降(3.6±0.7比3.9±0.32,P0.05;2.8±0.63比3.8±0.42,P0.05;1.8±0.79比3.7±0.48,P0.05),MLCK表达逐渐增多(0.5±0.53比0.3±0.48,P0.05;1.3±0.48比0.4±0.52,P0.05;1.9±0.74比0.5±0.53,P0.05)。结论:肠粘膜紧密连接蛋白ZO-1及MLCK可通过影响肠粘膜屏障功能,改变肠粘膜的通透性,促进非酒精性脂肪肝病发生发展。     

贝伐单抗对ALA—PDT诱导的新生血管形成和胶质瘤生长的影响

探讨贝伐单抗对低剂量5-氨基乙酰丙酸（5-Aminolevulinicacid,ALA）介导的光动力学疗法（photodynamic therapy,PDT）诱导的脑组织新生血管形成和U87脑胶质瘤生长的影响。通过将裸小鼠随机分为对照组、ALA．PDT预处置组（ALA：2．3×10-3mol／kg,能量密度：10J／cm2）、贝伐单抗预处置组（1．6×10-5mol／kg）和联合预处置组（ALA—PDT＋贝伐单抗）,并接受相应处置。第10d,检测PDT照射及相应区域内新生血管形成和VEGF表达并种植U87脑胶质瘤细胞,21d后观察肿瘤体积。与对照组比较,低剂量ALA-PDT预处置后新生血管增多、VEGF表达增高,肿瘤体积增大,这些变化在联合预处置组被抑制;贝伐单抗预处置组的血管形态和VEGF表达虽无明显变化,但肿瘤体积减小。研究结果表明低剂量ALA-PDT可通过刺激VEGF表达诱导照射区新生血管形成,这种微环境的改变有利于U87胶质瘤细胞生长,但这些作用可被贝伐单抗所抑制。     

磁感应热疗联合放疗对小鼠4T1移植瘤的杀伤作用

目的:探讨磁感应热疗联合放疗在小鼠4T1乳腺癌细胞株皮下移植瘤模型中的治疗作用.方法:小鼠经皮下移植4T1乳腺癌细胞株,建立皮下移植瘤模型,待肿瘤直径达到10mm左右,然后将其分为以下4组进行处理:标准对照组(未做任何特殊处理,C组)、单纯热疗组(48±2℃10min,MIH组)、单纯放疗组(10Gyx2次,R组)、热放联合组(10Gyx1次+48±2℃10min,MIH+R组).观察各治疗组和对照组的肿瘤体积的大小、肿瘤体积抑制率.每组分别在实验处理后24小时处死小鼠应用免疫组化检测肿瘤组织中Bcl-2和Caspase-3的表达情况.结果:热疗后的第1-4周MIH+R组的肿瘤体积抑制率分别为(64.38±17.97)％、(73.90± 9.48)％、(77.43±0.71)％、(73.17±8.58)％;MIH组的分别为(40.66+ 21.46)％、(54.60±10.20)％、(51.22+ 5.05)％、(39.53±5.49)％;R组的肿瘤体积抑制率分别为(51.60±18.93)％、(57.53±9.76)％、(52.34±7.42)％、(35.42±4.14)％.与对照组相比,各治疗组均能抑制肿瘤的生长(P＜0.05).其中以MIH+R组抑瘤作用最显著.与其它组相比,Bcl-2在MIH+R组的表达显著下降,而Caspase-3的表达显著上升,差异具有显著性(P＜0.05).结论:磁感应热疗与放疗均能诱导肿瘤细胞凋亡,有效地抑制小鼠4T1乳腺癌细胞株皮下移植瘤的生长,而磁感应热疗与放疗的联合治疗的抑瘤作用最显著,而且降低了放疗剂量.     

Asparaginyl endopeptidase induces endothelial permeability and tumor metastasis via downregulating zonula occludens protein ZO-1

Zona occludens-1 (ZO-1) is a key component of tight junctions that govern the function of the endothelial barrier against tumor metastasis. Factors secreted by tumor cells contribute to the maintenance of tumor vascular networks. How tumor cell-derived protein signals regulate ZO-1 expression is unclear. Here, we explored the effect of tumor cell-secreted asparaginyl endopeptidase (AEP) on the permeability of endothelial cells in the tumor microenvironment. First, we confirmed the existence of AEP in conditioned medium (CM) from AEP-overexpressing MDA-MB-231 and 4T1 cells. Treatment with CM from AEP-overexpressing tumor cells increased the permeability and tumor cell transversal of an endothelial monolayer. Furthermore, CM from AEP-overexpressing tumor cells suppressed endothelial ZO-1 expression, as well as ZO-1-associated nucleic acid binding protein ZONAB. In addition, the level of phosphorylated STAT3 was increased by treatment with AEP-containing CM. A mutation of RGD or blocking integrin αvβ3 with antibody recovered the ZO-1 downregulation induced by AEP. In vivo, a lung metastatic mouse model showed increased endothelial permeability in the AEP-overexpressing group compared with the control group. An orthotopic tumor transplantation model was established using AEP-overexpression and compared with mice receiving control 4T1 cells. Compared with controls, overexpression of AEP increased lung metastatic foci and area, as well as vascular instability in primary tumors or lung metastatic sites. Moreover, endothelial ZO-1 was decreased in the AEP-overexpressing group. Taken together, our data show that tumor cell-derived AEP increases the permeability of endothelial barriers. Interactions between RGD and endothelial integrin αvβ3 mediate this effect by downregulating ZO-1.     

VEGF increases BMEC monolayer permeability by affecting occludin expression and tight junction assembly

Tight junctions between brain microvessel endothelial cells (BMECs) maintain the blood-brain barrier. Barrier breakdown is associated with brain tumors and central nervous system diseases. Tumor cell-secreted vascular endothelial growth factor (VEGF) increases microvasculature permeability in vivo and is correlated with the induction of clinically severe brain tumor edema. Here we investigated the permeability-increasing effect and tight junction formation of VEGF. By measuring [(14)C]sucrose flux and transendothelial electrical resistance (TER) across BMEC monolayer cultures, we found that VEGF increased sucrose permeability and decreased TER. VEGF also caused a loss of occludin and ZO-1 from the endothelial cell junctions and changed the staining pattern of the cell boundary. Western blot analysis of BMEC lysates revealed that the level of occludin but not of ZO-1 was lowered by VEGF treatment. These results suggest that VEGF increases BMEC monolayer permeability by reducing occludin expression and disrupting ZO-1 and occludin organization, which leads to tight junction disassembly. Occludin and ZO-1 appear to be downstream effectors of the VEGF signaling pathway.     

家兔迟发性面瘫模型建立及药物干预研究

目的：优化迟发性面瘫的建模方法,并对药物的神经保护作用进行观察。方法：家兔48只共96侧面神经,分A、B、C、D4个实验组,以一侧面神经进行实验处理,另一侧为自身对照。A组：直视下钳夹损伤桥池段面神经;B组：直视下向桥小脑角注射动脉血,以诱导血管痉挛;C组：处理因素=A组＋B组;D组：在C组基础上,应用药物（强的松＋丹参＋维生素BI＋维生素B12）干预。观察家兔面瘫,并做面神经病理切片,比较各组间迟发性面瘫发生率、面瘫持续时间及预后。结果：面瘫发生情况：A组6只家兔（6／11,54．5％）出现迟发性面瘫;平均面瘫持续时间为13．2天。B组有2只（2／12,16．7％）出现迟发性面瘫,平均持续8天。C组6只（6／12,50％）家兔出现迟发性面瘫,平均持续14.3天。D组4只（4／12,33．33％）出现迟发性面瘫,平均持续6天。所有自身对照侧均无面瘫发生。病理：各组均见神经纤维水肿;A、c两组呈高度水肿改变,神经束周围结构紊乱;B组见神经内血管细小,而水肿较A、C两组轻微;D组呈轻度水肿改变。结论：C组出现迟发性面瘫几率高,是较好的模型;联合应用强的松、丹参、维生素B1、维生素B12虽不能防止迟发性面瘫发生,但可使迟发性面瘫病程明显缩短。     

大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因启动子Ⅰ区组蛋白高乙酰化可能参与了其高转录调控过程

目的:探讨大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因高转录与其启动子Ⅰ区组蛋白乙酰化的关系。方法:应用Real-time PCR和ChIP-PCR技术分别检测了大鼠正常星形胶质细胞和C6胶质瘤细胞中gdnf基因mRNA的表达水平以及其启动子Ⅰ区组蛋白H3K9的乙酰化程度;利用Real-time PCR技术,检测了不同浓度的组蛋白乙酰基转移酶抑制剂姜黄素(Curcumin)或去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)处理对C6胶质瘤细胞中gdnf基因mRNA表达的影响。结果:较之正常星形胶质细胞,C6胶质瘤细胞中gdnf基因mRNA的表达量极显著增高(P0.01),并且其启动子Ⅰ区H3K9的乙酰化水平也显著升高(P0.05)。C6胶质瘤细胞经Curcumin处理24 h后,gdnf基因mRNA的表达量随药物浓度的升高而降低,且100μmol/L作用浓度时其表达量下降了74.17%(P0.001);相反,TSA处理后gdnf基因mRNA的表达量呈上升趋势,且200nmol/L组其表达量约上升145.35%(P0.05)。结论:在大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因启动子Ⅰ区H3K9发生了高乙酰化修饰,这种修饰可能是其高转录的原因。     

全反式维甲酸联合替莫唑胺对胶质瘤U251细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究全反式维甲酸（ATRA）联合替莫唑胺（TMZ）对胶质瘤细胞株U251增殖及凋亡的影响。方法：体外培养胶质瘤细胞株U251,分为ATRA组、TMZ组、ATRA＋TMZ组和空白对照4组,应用MTT法测定U251细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,westernblot法检测细胞维甲酸受体β（RARβ）蛋白和凋亡相关蛋白Caspase．3蛋白的表达情况。结果：对照组、ATRA组、TMZ组及ATRA＋TMZ组的细胞生长抑制率分别为（1．72±0．12）％、（9．87±0．87）％、（23．87＋1．32）％及（35．74±1．44）％,ATRA＋TMZ组的细胞生长抑制率显著高于单独应用TMZ（P〈0．01）。对照组、ATRA组、TMZ组及ATRA＋TMZ组的细胞凋亡率分别为（1．32±0．11）％、（4．16±0．35）％、（8．44±0149）％、（15．27±1．03）％,ATRA＋TMZ组的凋亡率显著高于单独应用TMZ有更高的凋亡率（P〈0．01）。对照组、ATRA组、TMZ组及ATRA＋TMZ组RARp蛋白相对表达量分别0．452±0．054、0．837±0．068、0．195±0．021、0．376±0．039,ATRA＋TMZ组RARβ蛋白相对表达量显著高于TMZ组（P〈0．01）。ATRA＋TMZ组Caspase．的3蛋白表达相对水平为（0．832±0．059）,明显高于ATRA组（0．334±0．041）及TMZ组（0．521＋0．032）,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：全反式维甲酸联合替莫唑胺能更有效抑制U251细胞的增殖,增加其凋亡率,这可能与其增加RARβ和Caspase-3蛋白的表达抑制U251细胞增殖、诱导细胞凋亡有关。     

雌孕激素对ALI大鼠α-ENaC、BNP、TNF-α表达的影响

目的:研究雌孕激素对ALI大鼠II型肺泡上皮细胞钠通道(epithelial Na+channel,ENaC)α亚基,血清脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响,探讨肺泡内液体清除的机制。方法:雌性未成年SD大鼠30只,随机分为3组:对照组(静脉注入生理盐水8 mL/kg)、ALI模型组(静脉注入油酸0.1 mL/kg)、雌孕激素联合组(在油酸注入前12 h、36 h皮下注射1∶1 000雌孕激素混合液0.1 mL)。建模后6 h处死大鼠,观察肺组织病理改变,测定肺湿重/干重比值、肺系数,肺组织匀浆中α-ENaC mRNA及蛋白的表达及血清BNP、TNF-α的表达。结果:与对照组比较,模型组出现明显肺水肿、出血及炎性细胞浸润,肺湿重/干重比值、肺系数及血清中BNP、TNF-α表达增加,而α-ENaC mRNA及蛋白明显降低(P<0.01);雌孕激素联合组与ALI模型组比较,肺水肿、出血及炎性细胞浸润要轻,肺湿重/干重比值、肺系数、BNP下降,α-ENaC mRNA及蛋白增加(P<0.05)。结论:雌孕激素联合治疗可上调α-ENaC mRNA及蛋白的表达,减少BNP表达,促进肺泡内液体的清除,为ALI/急性呼吸窘迫综合症(ARDS)的治疗和监控提供新的方法。     

TKI治疗晚期tPd,细胞肺癌患者免疫功能的变化及意义

目的：通过观察晚期非小细胞肺癌患者TKI治疗前后外周血IgG、[gM、IgA、C3、c4、C-反应蛋白及CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋细胞的表达变化,探讨TKI治疗对晚期非小细胞肺癌患者免疫功能的影响及意义。方法：检测TKI组30例非小细胞肺癌患者TKI治疗前、治疗一个月后外周血IgG、IgM、IgA、C3、C4、C-反应蛋白及CD3＋、CD4＋,CD8＋、CD4＋／CD8＋细胞表达水平,分析表达变化及与疗效的关系。30例非小细胞肺癌患者作为对照组。结果：治疗前,TKI组与对照组IgG、IgM、IgA、C3、C4、c＋反应蛋白水平基本正常,但CD4＋细胞数量减低、CD4＋／CD8＋比值较低、CD8＋细胞数量增高,两组相比IgG、IgM、IgA、C3、C4、C-反应蛋白、CD3＋、CD4＋．CD8＋、CD4＋／CD8‘差异均无统计学意义（P〉0．05）;TKI治疗一个月后,TKI组与对照组IgG、IgM、IgA、C3、C4、C-反应蛋白水平无明显变化,而CD4＋细胞数量增多、CD4＋／CD8＋较前增高,CD8＋细胞数量较前减低,两组相比CD3＋、IgG、IgM、IgA、C3、C4、c-反应蛋白差异无统计学意义（P〉0．05）,而CD4＋．CD4＋／CD8＋、CD8＋差异有统计学意义（P〈O．01）。结论：TKI治疗后,晚期非小细胞肺癌患者细胞免疫功能得到改善,体现在CD4＋,CD8＋细胞数量的变化上,且TKI治疗的疗效可通过比较外周血CD4＋、CD4＋／CD8＋、cD8＋细胞表达变化体现。