三叶半夏和掌叶半夏凝集素原核表达及特性研究

通过原核表达获得大量具有生物活性的三叶半夏和掌叶半夏凝集素,比较分析两种半夏凝集素的异同,并深入探讨半夏凝集素和亚基之间凝集活性的差异。结果表明,掌叶半夏凝集素的凝集活力为三叶半夏凝集素的4倍,凝集素第三个活性位点两个氨基酸的差异可能是引起三叶半夏和掌叶半夏凝集素凝集活性不同甚至药理作用不同的主要原因。原核表达系统获得的凝集素亚基不能凝集兔血红细胞。该研究为深入探讨两种半夏凝集素的区别,及半夏凝集素和亚基之间凝集活性的差异打下了基础,也为解决半夏资源紧缺提供了一个可能的方法。     

同株异叶形半夏

半夏(Pinellia revnata)是天南星科多年生草本植物,药用具有燥湿化痰、降逆止呕功效。在生产栽培中,一年生半夏的叶为单叶,即状心形;2—3年后的叶均为3小叶的复叶,但叶形有两种:一种是椭圆形至披针形,中间小叶较大,长5—8厘米,宽3—4厘米;另一种呈线形,颇似竹叶,长14厘米、宽1.3厘米,两种皆可作正品半夏人药。最近,我们在大田观察半夏试管苗时发现,     

南京两种半夏群体水平变异式样的比较

南京东郊灵谷寺山坡有一种半夏属Pinellia植物,它外观上与半夏P.ternata相似,但无珠芽;在形态上则更近似鹞落坪半夏P.yaoluopingensis,但缺少子块茎。本文以两个半夏群体和一个鹞落坪半夏(暂名)群体为对象,从生境的调查、形态性状的测量、花粉粒电镜扫描和显微观察以及染色体的计数人手,对两种半夏的变异式样进行比较。结果表明鹞落坪半夏群体与半夏群体的区别在于：(1)营养器官绝无珠芽,佛焰苞檐部边缘决非紫红色,雄花序长度比半夏短,雌花序和附属器长度均比半夏长;(2)花粉粒比半夏小,虽都呈圆球形,但小刺状纹饰较稀疏;(3)染色体2n=26,与半夏群体2n=72不同;(4)半夏具有一定杂草特性,在不同程度人为干扰的环境中能很好地生长和开花。鹞落坪半夏则常见于落叶阔叶林下层未受人为干扰的环境中。     

半夏类药材紫外光谱聚类分析

目的：鉴别半夏及其混伪品,确立半夏各变异类型间的关系。方法：采用紫外光谱聚类分析。结果：紫外光谱聚类分析可从某溶剂提取成分的数量特征初步判别半夏与其混伪品,反映各类型之间的亲疏远近关系;结论：双生珠芽半夏、多头半夏和4-5裂叶半夏与半夏居群其它变异类型的关系较为复杂,存在居群内遗传分化,但这种遗传分化是否足以导致半夏种系分化值得进一步研究。4-5裂叶半夏是否为普通半夏与掌叶半夏的中间类型有待于研究。     

应用组织培养方法系统选育三叶半夏

天南星科三叶半夏(Pinellia ternata)是中国药 典刊载中药材半夏的原植物,野生资源日益减少,人工栽培虽屡见报道,但未形成规模生产。主要原因是费用多、种苗贵、产量低。本试验采用一代叶柄珠芽不出土的罕见半夏单株,希望培育出减少田间培土的良种半夏;采用夏季不倒苗的个别单珠,希望快速获得具有不倒苗特性的优良品系群体。试验中采用 MS 基本培养基,以地下块茎、叶柄、叶柄所生珠芽、叶片为外植体,在使用激素的条件下,都能获得试管植物。     

中国半夏属植物亲缘关系的SRAP分析

利用序列相关扩增多态性(SRAP)标记对中国半夏属植物5个种的亲缘关系进行了研究.38个引物组合在半夏属植物的5个种中共扩增出752条清晰的谱带,其中628条谱带具有多态性,多态性比率为83.51％,显示出较高的多态性比率;各物种间的遗传相似系数在0.6513～0.7312之间,聚类分析和主坐标分析结果表明,5种半夏属植物被聚为两大类:掌叶半夏单独聚为一类(Ⅱ),而其它4个种聚为一类(Ⅰ).第Ⅰ类可再分为A和B两个亚类:A亚类包括半夏和石蜘蛛;B亚类包括盾叶半夏和滴水珠.滴水珠和盾叶半夏的亲缘关系最近,其次是半夏和石蜘蛛,而掌叶半夏和其它4个种的亲缘关系都较远,这说明掌叶半夏与半夏属其它种呈姐妹群关系.本研究结果对我国半夏属植物资源的开发利用与保护具有重要意义.     

十六倍体三叶半夏品种特性的分析

利用三叶半夏悬浮细胞为材料,通过秋水仙素诱导后获得稳定的半夏多倍体株系。通过染色体鉴定、生理分析以及药典规定项目的测定,综合考察半夏多倍体株系的品种特性,评价其作为新品种的潜力。结果表明:优良半夏株系为八倍体三叶半夏,加倍后的半夏为染色体加倍的十六倍体半夏。与八倍体半夏相比,十六倍体半夏在形态学方面表现出植株矮壮,叶片变圆变厚,块茎增大的特点,细胞学方面表现出气孔密度降低,保卫细胞增大,叶绿体个数增多的现象。经过种植实验得出结论:十六倍体半夏生长期延长,抗逆性增强,夏季基本不倒苗,并且块茎个体均一,品质较好,总体产量增加。对十六倍体半夏块茎进行测定比较后发现,十六倍体半夏符合药典中规定的各项定性和定量指标规定。由此可见,通过半夏的单细胞进行多倍体的诱导是一种可行的方案,并且诱导得到的十六倍体为抗性增强、产量提高,且符合药典规定的半夏新品系。     

应用AFLP技术探讨半夏属五个种的亲缘关系

利用扩增酶切片断多态性（AFLP）方法研究半夏属内5个种之间的亲缘关系。应用POPGENE及SPSS软件对所得“1”、“0”二元矩阵进行遗传距离,遗传相似性及聚类分析。实验发现鹞落坪半夏与虎掌之间的遗传差异小,鹞落坪半夏可能是虎掌的一个特化分支群体;虎掌和鹞落坪半夏组与本属其他种之间遗传差异较大,相似性较小;盾叶半夏和滴水珠是姐妹群关系,盾叶半夏虽然叶形与同属其他种有显著差异,但遗传距离及相似性分析对比不支持其独立于半夏属其他种,而作为完全独立进化类群的结论。为半夏属分类及系统进化关系提供了分子生物学证据。     

半夏泻心汤对束缚应激小鼠免疫功能的影响

目的研究半夏泻心汤对束缚应激小鼠免疫功能的影响.方法小鼠随机分为对照组、束缚模型组、低浓度半夏泻心汤组、中浓度半夏泻心汤组和高浓度半夏泻心汤组5组,束缚7 d后测定各组巨噬细胞的吞噬指数、外周血T淋巴细胞数量和抗体生成细胞IgM的分泌量.结果束缚模型组各指标均显著低于对照组(P<0.05);半夏泻心汤各浓度组均可显著升...     

半夏居群遗传分化的同工酶和可溶性蛋白电泳的聚类分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）技术分析了安徽产7个半夏（PinelliaternataBreit）居群的4种同工酶和可溶性蛋白谱带。根据其中的PER、EST和可溶性蛋白谱带的分布特征,用Forguson和Aquado＆Avise的公式分别计算其谱带的相似性系数和遗传距离,以类平均法（UPGMA）进行了聚类分析。结果表明：半夏居群间表现出一定的遗传分化;鹞落坪半夏与半夏的黄山、九华山、大别山万佛寺居群间的遗传距离较小（D≤0.214）,结合形态变异,笔者认为鹞落坪半夏只能是半夏居群中形态上较为特殊的地方宗,而不是一新种;狭叶半夏与其它6个居群的遗传距离较大（D=0.416）,是半夏居群中种系分化较为强烈的一个居群。文中还讨论了半夏的遗传分化与形态变异、生境等的相关性。     

半夏脱毒与快繁技术研究进展

半夏是我国传统中药材，长期无性繁殖导致病毒积累对半夏产量和品质造成了严重影响。由于半夏茎尖病毒积累少，利用半夏茎尖脱毒快繁技术可有效解决病毒害严重的问题。本研究从半夏主要病毒种类、脱毒方法、组培快繁和病毒检测等方面对半夏脱毒与快繁技术进行综述，以期为半夏脱毒快繁体系的建立提供参考。     

不同光照强度下半夏化学成分含量的比较研究

利用遮荫网对卵叶型半夏（Pinellia ternata（Thunb.）Breit.）进行遮荫,秋季倒苗后,测定其化学成分含量,以研究光强对半夏化学成分含量的影响。结果显示：全光照下半夏的生物碱、鸟苷和蛋白质含量较高,55%遮荫处理半夏的块茎增重幅度较大,80%遮荫处理的还原糖和可溶性糖含量较高。不同光照强度下,半夏化学成分含量有显著的差异,全光照处理有利于半夏生物碱、鸟苷和蛋白质的积累,80%遮荫处理有利于其还原糖和可溶性糖的积累,55%遮荫处理有利于半夏的生长,但其化学成分含量低于全光照处理。     

基于炮制前后质量一致性的清半夏炮制新工艺评价

为研究半夏与清半夏的质量传递关系,并评价新工艺蒸法所得炮制品与清半夏的质量一致性,本研究检测了生半夏及3种炮制品的浸出物、有机酸、多糖、核苷、蛋白质含量,使用主成分分析等方法比较3种炮制品的差异。结果表明,与生半夏相比,浸、煮制清半夏的浸出物减少,而蒸制品浸出物增加了264.76%;总酸、多糖含量均显著增加,其中蒸制品的增幅最大;核苷、蛋白质含量均大幅降低;综合分析方法均表明蒸制品与传统方法所得清半夏存在较大的质量差异。由此可知,浸、煮制清半夏质量一致性较好,而蒸法炮制品仍需对其加工工艺、药效做进一步研究。     

旱半夏叶柄无菌接种条件的优化

以野生旱半夏的幼嫩叶柄为材料,对叶柄消毒剂的种类、浓度和灭菌时间进行分析比较,以探索叶柄作为外植体的无菌接种最佳条件,为旱半夏的快速繁殖及资源保护提供基础。结果表明:选择广安野生旱半夏叶柄为外植体,70%酒精处理45 s,2%的NaClO处理15 min,4%的NaClO处理9 min和12 min,材料没有污染、褐化和玻璃化现象,是最佳无菌条件,在此条件下培养利于旱半夏的生长。     

半夏凝集素的分离纯化和在植物中的分布

从半夏(Pinellia ternata)块根中,经95％硫酸铵沉淀和固定化猪甲状腺球蛋白柱亲和层析分离得到一种凝集素,称为半夏凝集素(PTL)。凝胶过滤、SDS-PAGE和免疫双扩散鉴定PTL是均一的样品,分子量约44kD,由四个约12kD的亚基组成。PTL主要存在于半夏的块茎中,茎中也有少量存在。     

半夏治疗不寐的机理探讨

不寐为临床常见病,中医学认为,不寐病机总属阴阳不调。治疗不寐的方剂中常用半夏,本文结合近年来关于半夏治疗不寐的文献,从作用机理、剂量两个方面探讨半夏治疗不寐的机理,提出半夏治疗不寐的机制为引阳入阴、使阴阳平衡;助中焦调气机,使水火相济;具祛痰之功善治不寐。且治疗不寐时剂量要大,用量常常在30克以上才能取效,临床应用多选用制半夏。     

半夏凝集素的分离纯化和在植物中的分布

从半夏块根中,经９５％硫酸铵沉淀和固定化猪甲状腺球蛋白柱亲和层板分离得到一种凝集素,称为半夏凝集素。凝胶过滤,ＳＤＳＰＡＧＥ和免疫双扩散鉴定ＰＴＬ是均一的样品,分子量约４４ｋＤ,由四个约１２ｋＤ的亚基组成。ＰＴＬ主要存在于半夏的块茎中,茎中也有少量存在。     

半夏倒苗前后的细胞组织结构

探讨高温胁迫下半夏倒苗前后的组织学结构的变化,为揭示半夏倒苗的生物学机理提供参考依据。在半夏植株高15cm左右时,给予(32±1)℃的高温胁迫,于不同胁迫天数取半夏叶柄,经爱氏苏木精染液染色,用石蜡切片法制片,在显微镜下观察并照相。结果表明,随着高温胁迫时间的延长,半夏叶柄的维管组织结构被破坏越来越严重,细胞壁、细胞膜破裂,原生质外渗,核膜破裂,核仁溢出,有的细胞内核仁消失。     

生物技术在半夏鉴定中的应用

随着市场上半夏混淆品的盛行及半夏本身形态学的某些改变,使传统的形态学鉴别方法难度增加,必须结合其他方法才能准确鉴定。随着生物技术的发展,其在中药鉴定中的应用日渐突显,本文就目前常用于中药鉴别的生物技术方法进行了总结,主要可概括为色谱、分子生物学和电泳三大类,以期广泛应用于半夏真伪鉴别。     

半夏多糖对希罗达干预下小鼠腺癌细胞MHC-Ⅱ分子表达的增效作用

目的:探讨半夏多糖对希罗达干预下抑制小鼠结肠腺癌的作用机制.方法:观察半夏多糖对希罗达干预下小鼠结肠腺癌的生长状态,应用流式细胞术分析瘤细胞表面MHC-Ⅱ的表达.结果:流式细胞仪检测半夏多糖对希罗达干预下可提高CD4/CD8的比值,并能增强小鼠结肠腺癌细胞表面MHC-Ⅱ表达.结论:半夏多糖可提高希罗达的抑瘤作用,其机理可能与半夏多糖提高小鼠结肠腺癌细胞表面MHC-Ⅱ表达,增强荷瘤小鼠细胞免疫的作用有关.