几种同工酶与猕猴桃品种对溃疡病抗性关系的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳、同工酶分析技术分别研究了猕猴桃植株体内过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、酯酶(EST)同工酶谱带的变化,结果表明:自然感染溃疡病前后,此6种同工酶谱带特征在不同抗感品种中表现出一定的差异.未感染溃疡病菌前,抗(感)品系枝条、叶片POD同工酶均有2条酶带,PPO同工酶有3条酶带,但感病品种酶带颜色深且粗,而抗病品种酶带颜色浅且细,叶片酶带颜色深于枝条;SOD、CAT同工酶谱带均为1条,Rf值分别为0.38、0.28,感性品种较抗耐品种谱带亮度高活性强;自然发病后,抗(感)品系POD、PPO同工酶谱带数都增加,分别为4、3条和5、4条,且抗病品种新酶带出现较感病品种早且酶带粗颜色深活性强,感病品系虽也有新酶带出现,但酶带少活性弱,抗病品系枝条、叶片POD、PPO同工酶新谱带的Rf值分别为0.63、0.67和0.85、0.87;抗感病品种SOD、CAT同工酶都被诱导产生了1条新的同工酶谱带,Rf分别为0.32和0.27,新酶带现色时间迟,且酶带颜色浅活性弱,但抗耐品种较感性品种谱带亮且活性强;EST同工酶于自然发病前后变化不大,与抗病性关系不很明显.     

大蒜叶片活性氧及保护酶系对白腐病菌粗毒素胁迫的响应

以大蒜抗病品种‘汉中红皮’和感病品种‘改良蒜’为材料,研究了它们在苗期用白腐病菌毒素处理后的叶片细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及超氧阴离子(O2-.)和丙二醛(MDA)含量的动态变化。结果表明,白腐病菌粗毒素处理后,2个品种大蒜叶片的SOD、POD活性均升高,而CAT活性降低;抗病品种的SOD、POD和CAT活性均高于感病品种,且SOD、POD活性峰值出现早,并以POD对毒素胁迫最敏感。2个品种在白腐病菌粗毒素处理后的O2.-含量始终高于同期对照,而感病品种O2.-含量在毒素处理24h后均高于同期抗病品种。MDA含量变化趋势与O2.-的变化基本相似。研究认为,大蒜叶片的活性氧含量和保护酶活性与其抗病性密切相关。     

马铃薯不同品种感染早疫病菌后防御酶活性变化

通过测定抗性不同的马铃薯品种接种和未接种情况下叶片内防御酶活性,研究马铃薯品种对早疫病的抗性机制。结果表明,在接种处理后,各品种植株体内苯丙氨酸解氨酶（PAL）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和过氧化氢酶（CAT）活性均提高,抗病品种酶活性增幅高于感病品种,说明上述4种酶与品种抗性有一定的关联。     

辣椒感染疫病后生化指标的响应研究

采用生理生化分析方法研究了辣椒感染疫病后叶片中几个生化指标的变化。结果表明,染病前后感病品种叶片中可溶性总糖含量持续高于抗病品种;抗病类型品种和感病类型品种的可溶性蛋白含量变化规律均表现为先升高后下降,但接种前其叶片中可溶性蛋白含量两者间无明显差异;抗病类型和感病类型辣椒接种后保护酶活性均升高,而且感病类型的POD和ASP酶活性在接种后120h显著高于抗病类型;高抗类型叶片中PPO活性增加幅度显著大于感病类型,但抗病类型品种PPO活性上升趋势比较平缓。接种后,感病品种PAL活性上升幅度小于高抗品种,接种后96h PAL活性开始逐渐下降。可溶性总糖含量和苯丙氨酸解氨酶可以作为辣椒苗期抗疫病鉴定的生化指标。     

小麦白粉病菌对小麦幼苗光合生理特性的影响

为探讨小麦白粉病菌对不同抗性小麦品种幼苗光合生理特性的影响,本研究采用白粉病强致病力生理小种E09感染高抗小麦白粉病品种青春38、高感小麦白粉病品种龙麦33幼苗,研究接菌后0 d、1 d、2 d、4 d、6 d、8 d、10 d小麦叶片总叶绿素含量、光合速率(Pn)、叶片可溶性蛋白、叶片细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性的变化。研究数据表明,接种小麦白粉病菌后,两小麦品种青春38和龙麦33的体内相对叶绿素含量、光合速率及可溶性蛋白含量均不同程度的降低,且感病品种龙麦33降低幅度较抗病品种青春38高。接菌后,两个品种的相对SOD、POD及CAT活性均表现为先升高后降低的变化趋势,相对SOD活性表现为感病品种龙麦33的峰值高于抗病品种青春38的峰值;相对POD活性则是抗病品种青春38的增加幅度极显著高于感病品种龙麦33的增加幅度;相对CAT活性则表现为两品种出现峰值的时间不同,但峰值幅度差异不显著。     

不同品种猕猴桃的蔗糖酶及α-淀粉酶活性与抗溃疡病的关系

抗病品种猕猴桃的枝条和叶片中蔗糖酶活性始终低于感病品种.自然发病后,感、抗病品种枝条与叶片中蔗糖酶活性都呈上升趋势,但感病品种比抗病品种酶活性上升得更快,增幅较大,抗病品种蔗糖酶活性增幅不明显.α-淀粉酶活性的变化规律基本上与蔗糖酶一致.抗感病品种均有3条α-淀粉酶同工酶谱带.自然感病后,抗病品种枝条及叶片的酶带增加不明显,仅多1条极弱的酶带;感病品种没有明显变化.     

不同苹果品种对褐斑病抗性的鉴定及抗性生理研究

对42个苹果栽培品种叶片褐斑病进行了田间发病状况调查与抗性鉴定,分析了叶片气孔密度和大小与抗病性之间的关系,同时研究了不同抗性品种离体叶片接种病原菌后超氧化物歧化酶（SOD）、多酚氧化酶（vPo）、过氧化物酶（POD）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性和木质素含量的差异变化。依照抗性分级标准,供试材料中抗病品种有14个（其中高抗品种2个）,感病品种有28个（其中高感品种7个）;叶片气孔密度与病情指数之间存在显著正相关,相关系数r=0．683;叶片接种后,诱导了4种酶活性和木质素含量的升高,抗病和感病品种的SOD和PP0活性无显著差异,而抗病品种的POD和PAL活性以及木质素含量显著高于感病品种。苹果叶片的气孔密度、POD和PAL的活性以及木质素含量与褐斑病抗性有关。     

蚜虫(Aphis medicaginis Koch)危害胁迫对不同苜蓿品种体内丙二醛含量及防御性酶活性的影响

研究了蚜虫危害胁迫后不同抗蚜性苜蓿品种叶片内丙二醛含量及防御性酶活性的动态变化。结果表明：在蚜虫刺吸诱导的过程中，高感品种的MDA含量始终高于高抗品种，并且高感和高抗品种均保持上升的趋势;高感品种的SOD、POD和PAL活性始终低于高抗品种，其中高感和高抗品种的SOD和POD活性均表现先上升后下降的趋势，而PAL活性上升到高峰后均趋于稳定;CAT活性在高感和高抗品种间表现为交替的上升下降;高抗品种的PPO活性前期低于高感品种，而后期高于高感品种。由此可见，在蚜虫危害胁迫下，高感和高抗品种间MDA、SOD、POD、PAL和PPO活性的变化与苜蓿的抗蚜性密切相关，均可作为苜蓿抗蚜性鉴定的生理指标，而CAT活性变化与苜蓿抗蚜性的联系有待进一步研究。     

植物源诱导剂对甜瓜叶片防卫酶活性的影响

以甜瓜主栽品种‘银帝'(抗病)和‘卡拉克赛'(感病)幼苗为材料,通过盆栽试验研究了几种植物源诱导剂对其接种古巴假霜霉菌叶片过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶(CHI)和葡聚糖酶(GLU)活性的影响,以阐释植物源诱导剂提高甜瓜抗病性的生化机制.结果显示:苯丙噻二唑(BTH)、侧柏叶提取液(CB)和中草药制剂(ZY)处理对甜瓜霜霉菌具有显著的预防效果;诱导处理或接菌后甜瓜叶片中上述抗病相关酶活性都显著上升,抗病品种‘银帝'的PPO、PAL、CHI、GLU活性增幅大于感病品种‘卡拉克赛',‘卡拉克赛'的POD活性增幅则较‘银帝'大.研究表明,叶面喷施两种植物源诱抗剂对甜瓜叶片防卫酶活性增强具有系统诱导作用,而叶片防卫酶活性增强可能是诱导剂处理后甜瓜对霜霉抗性提高的重要生化机制.     

南美斑潜蝇为害对黄瓜体内4种防御酶活性的影响

植物对昆虫取食产生的防御反应,在昆虫与植物相互作用关系中起着重要的作用。为明确南美斑潜蝇Liriomyza huidobrensis(Blanchard)取食与植物防御之间的作用关系,本文分别测定了南美斑潜蝇幼虫持续为害1、3、5、7及9d后黄瓜叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)及超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。结果表明：在南美斑潜蝇幼虫持续取食下,PAL、PPO、POD和SOD等4种酶活性显著上升;PAL、PPO和POD等3种酶活性随受害程度的加重而上升幅度加大,即重度受害>轻度受害>系统对照>健康对照,而SOD活性变化没有规律。在系统对照黄瓜叶片中,PAL、PPO、POD和SOD等4种酶活性最大值分别在第5、1、5和5d;在轻度受害黄瓜叶片中,PAL、PPO、POD和SOD等4种酶活性最大值分别在第5、9、5和9d;在重度受害黄瓜叶片中,PAL、PPO、POD和SOD等4种酶活性最大值分别在第7、7、5和5d。黄瓜叶片受害后,POD和PPO活性上升幅度较大,PAL和SOD活性上升幅度较小,说明POD和PPO对取食胁迫响应比PAL和SOD更灵敏。     

Characterization of Kiwifruit Xyloglucan

Structural characteristics of xyloglucan are constant in the pericarp cell walls of kiwifruit (Actinidia deliciosa) throughout fruit enlargement and maturation. Most of the xyloglucan (XG) persists in the cell walls of ripe kiwifruit. XG from the pericarp tissues of 36-h ethylene-treated kiwifruit was extracted as hemicellulose Ⅱ (HC-Ⅱ) with 4.28 M KOH containing 0.02% NaBH4, and purified using iodine precipitation and subsequent anion-exchange chromatography. This purifying protocol increased XG purity from 50 mol% in HC-Ⅱ fraction to 62 mol% in the purified XG powder. The molar ratio of glucose: xylose: galactose: fucose in the purified XG was 10: 6.9: 2.1: 0.3. Gel permeation chromatography indicated that purified XG had an average molecular-mass of 161 KDa, a value that exceeds the 95 KDa M_r determined for total polymeric sugars. Sugar linkage analysis confirmed the lack of fucose in the kiwifruit XG, but a small amount of arabinoxylan and low M_r glucomannan remained associated with this fraction.     

Characterization of Kiwifruit Xyloglucan

Structural characteristics of xyloglucan are constant in the pericarp cell walls of kiwifruit ( Actinidia deliciosa ) throughout fruit enlargement and maturation. Most of the xyloglucan (XG) persists in the cell walls of ripe kiwifruit. XG from the pericarp tissues of 36-h ethylene-treated kiwifruit was extracted as hemicellulose II (HC-II) with 4.28 M KOH containing 0.02% NaBH₄, and purified using iodine precipitation and subsequent anion-exchange chromatography. This purifying protocol increased XG purity from 50 mol% in HC-II fraction to 62 mol% in the purified XG powder. The molar ratio of glucose: xylose: galactose: fucose in the purified XG was 10: 6.9: 2.1: 0.3. Gel permeation chromatography indicated that purified XG had an average molecular-mass of 161 KDa, a value that exceeds the 95 KDa M_r determined for total polymeric sugars. Sugar linkage analysis confirmed the lack of fucose in the kiwifruit XG, but a small amount of arabinoxylan and low M_r glucomannan remained associated with this fraction.     

猕猴桃SSR分析

目的:一方面为猕猴桃品种的分类、登记管理在分子标记技术方面提供有效可靠的依 据,从而避免品种资源的混乱;另一方面通过对猕猴桃的SSR分析,推测出其品种间的亲缘 关系.方法:实验通过对40对SSR引物的筛选,获得其中6对扩增带型稳定、清晰,多态性好 的引物,从而对35个猕猴桃品种进行SSR分析.结果:利用SSR指纹图谱把选用品种区分开,并进一步作聚类分析,生成系统进化树.结论:其亲缘 关系分析表明,我国这35个品种归为8大类群.     

Detection of Polygalacturonase in Kiwifruit during Ripening

Oligosaccharides produced during the course of the hydrolysis of 25% N-acetylated chitosan by Streptomyces griseus chitinase were fractionated by CM-Sephadex C-25 and Toyopearl HW-40F column chromatographies. Sugar compositions and sequences of main oligosaccharides were identified by N-acetylation, exo-splitting with β-GlcNAcase and β-GlcNase, and nitrous acid degradation. In addition to N-acetylated saccharides, GlcNAc, (GlcNAc)₂, and (GlcNAc)₃, hetero-chitooligosaccharides such as GlcN · GlcNAc, GlcN · GlcNAc · GlcNAc, GlcN · GlcN · GlcNAc, GlcN · GlcNAc · GlcNAc · GlcNAc, GlcNAc · GlcN · GlcNAc · GlcNAc, GlcN · GlcNAc · GlcN · GlcNAc, and GlcN · GlcN · GlcNAc · GlcNAc were identified. These results indicate that Streptomyces griseus chitinase specifically cleaves the N-acetyl-β-d-glucosaminidic linkages in partially N-acetylated chitosan.     

猕猴桃叶DNA的AFLP分析

以猕猴桃幼叶为材料提取基因组DNA并进行AFLP扩增。对主要实验步聚包括DNA纯化、DNA的酶切、酶切片段与接头的连接、PCR扩增、电泳、以及银染等方面的反应参数进行比较和优选,初步摸索出适合于猕猴桃叶为材料的AFLP程序,并得到较为清晰可辩的AFLP指纹图谱,为开展猕猴桃遗传多态性研究和在分子水平上开展物种生物学分析提供一个实用的手段。     

Cell Wall Autolysis During Kiwifruit Development

Cell walls prepared from developing kiwifruits showed autolyticactivity. The proteins extracted from active walls were alsoable to release carbohydrates from inactive cell walls. Analysisof the sugars released, using both procedures, showed that uronicacids were the major component, especially during the firsthours of incubation, although neutral sugars such as glucoseand galactose were also present. Most of the carbohydrates autolyticallyreleased from the cell wall eluted in the void volume on a BioGel P2 column. However, carbohydrates released from inactivecell walls by the protein extract mostly eluted in the monosaccharideuronic acid and glucose peaks. The autolytic activity of isolatedcell walls, as well as the glycosylhydrolase activity of theproteins extracted from the cell walls, showed important changesduring fruit development. The differences between autolyticactivity and the glycosylhydrolase activity against the cellwall suggest that the glycosylhydrolases ‘in muro’are subjected to some regulatory mechanism which disappearswith their extraction. Finally, the role of glycosylhydrolases,such as polygalacturonases and galactosidases, in relation tocell wall changes in fruits, is discussed.Copyright 1998 Annalsof Botany Company Actinidia deliciosa; autolysis; cell wall enzymes; fruit growth; glycosylhydrolases; kiwifruit.     

猕猴桃采后真菌病害生物防治研究进展

猕猴桃果实易受多种病原真菌的侵染,采后易发生软腐病、灰霉病、青霉病等严重危害果实品质的真菌性病害。传统的有效防治方法主要为采前使用化学杀菌剂,但其易污染环境并可能危害人类健康。目前,已有一系列生物防治方法被研究并报道,这些方法可有效防控猕猴桃采后真菌病害：第一类为天然抑菌物质,包括植物提取物和其他天然物质;第二类为拮抗微生物,包括生防酵母、生防细菌、生防木霉,生防菌也能与物理及化学方法协同发挥作用。本文概述了各类生物防治方法在猕猴桃采后真菌病害绿色防控方面的研究进展及生防机理,并提出了目前存在的问题,最后展望了这一领域今后的研究方向。     

生物技术与我国猕猴桃育种

猕猴桃是原产我国的重要果树之一。随着现代生物技术的发展,以野生和实生选优为主的传统猕猴桃育种方法与以基因组学和转基因为核心的分子育种技术相比,挑战和机遇并存。与其他果树相比,猕猴桃生物技术及其转基因研究较为滞后。就现代生物技术在猕猴桃遗传育种中的方法、应用及研究进展进行了综述,并对我国猕猴桃育种现状进行浅析,旨在为我国猕猴桃育种和产业发展提供方法参考及思路借鉴。