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高浓度钾抑制杜氏盐藻生长的生理机制 总被引:5,自引:0,他引:5
在含1mol/LNaCl的杜氏盐藻(Dunalielasalina(Dunal)Teod.)培养液中加入50mmol/L以上的KCl可观察到K+对杜氏盐藻生长有明显的抑制作用,而当KCl达100mmol/L时,杜氏盐藻的生长被完全抑制。另一方面,当培养液中缺乏K+时,杜氏盐藻的生长也被显著抑制。在正常培养条件下,伴随着杜氏盐藻的生长,培养液的pH由8左右升高至10左右,而高浓度K+则显著抑制杜氏盐藻培养液pH的升高;而在培养液pH为7.0至10.0的范围内,不同pH对杜氏盐藻的生长无明显影响。将杜氏盐藻在高浓度K+条件下预处理12h以上,杜氏盐藻的光合放氧速率显著下降,光合速率下降的程度与K+浓度的高低和预处理的时间长短呈正相关。高浓度K+处理也引起杜氏盐藻叶绿素含量的显著下降。对经高浓度K+预处理的杜氏盐藻的光合放氧速率与培养液中pH变化同时进行测定的结果表明,K+抑制杜氏盐藻光合速率的同时也显著抑制了光照条件引起的培养液pH的上升。实验结果表明,K+抑制杜氏盐藻光合作用以及抑制杜氏盐藻生长与K+影响跨盐藻质膜的质子运输之间可能存在一定关系。 相似文献
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通过重叠区扩增基因拼接法(Gene splicing by overlap extension,SOEing)构建含有杜氏盐藻(Dunaliella salina)硝酸盐还原酶(NR)基因5′-上游序列(Pnr)and 3′-端序列(Tnr)的EGFP真核表达载体,并将其转化杜氏盐藻。利用改进的SOEing法,将杜氏盐藻NR基因Pnr与报告基因EGFP cDNA融合,并与pEGM-7zf克隆载体连接,顺序将盐藻NR基因Tnr序列与融合片段相连,构建含Pnr-EGFP-Tnr表达盒的盐藻真核表达载体p7NET。电击法转化杜氏盐藻,在盐藻转化株中观察到了EGFP的瞬时表达。此研究为转基因杜氏盐藻研究和成功建立杜氏盐藻生物反应器奠定了实验基础。 相似文献
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渗透震扰对杜氏盐藻细胞蛋白质磷酸化的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
杜氏盐藻(Dunalielasalina(Dunal)Teod.)细胞可溶性蛋白提取液中含有对Ca2+有一定依赖性的蛋白激酶。体内磷酸化实验进一步说明细胞质Ca2+浓度对蛋白磷酸化有影响。加入Ca2+和MoO-4显著促进低渗震扰细胞蛋白质磷酸化,而高渗震扰细胞中蛋白磷酸化程度仍低于对照;在没有Ca2+和MoO-4存在时,观察不到渗透震扰对蛋白磷酸化的刺激作用。低渗震扰信号的传导机制可能不同于高渗震扰信号,它很可能通过蛋白磷酸化进一步将信号放大,24kD蛋白是杜氏盐藻细胞蛋白激酶最有潜力的作用底物。 相似文献
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杜氏盐藻分子生物学最新进展及展望 总被引:1,自引:0,他引:1
杜氏盐藻是一种无细胞壁的单细胞双鞭毛真核藻类,是一种十分重要的藻类资源。过去对杜氏盐藻的研究多集中在形态学、耐盐机理及β-胡萝卜素等方面,近年来,随着藻类基因工程的快速发展,本研究课题组及国内外在杜藻盐藻分子生物学方面做了大量工作,现就杜氏盐藻在这一领域的研究进展进行综述,主要是重要功能基因的克隆与分析、杜氏盐藻调控序列的研究以及杜氏盐藻作为宿主表达外源基因等。 相似文献
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杜氏盐藻两种碳酸酐酶基因启动子的克隆和功能研究 总被引:12,自引:0,他引:12
将克隆得到的杜氏盐藻DCA7和CA基因的启动子区与bar基因和NOS polyA终止子片段融合,分别构建成pMDDC-B和pMDC-B转基因杜氏盐藻表达载体。用基因枪法将两种表达载体转化人杜氏盐藻细胞,通过除草剂草丁膦筛选培养获得转化藻株,对转化藻株进行分析。对转化杜氏盐藻藻株的筛选培养结果表明:pMDDC-B和pMDC-B载体中的外源bar基因能在杜氏盐藻细胞中稳定或瞬时表达。同时在氦气压力为690kPa条件下,微弹轰击2次比微弹轰击1次或3次的效果更好。对pMDDC-B转化杜氏盐藻得到的稳定表达的转化藻株进行的PCR和Southern印迹分析的结果表明:外源的bar基因确已整合到杜氏盐藻基因组中。Northern印迹分析表明:DCA7基因启动子驱动bar基因在杜氏盐藻细胞中的表达效率受氯化钠浓度梯度调控。推测首次克隆得到的DCA7基因启动子可能是一种活性高、安全性好的高渗诱导性启动子;杜氏盐藻DCA7和CA基因启动子区的GT高度重复序列,可能与杜氏盐藻高度耐盐的分子机制有关。 相似文献
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盐生杜氏藻和青岛大扁藻的超低温保存 总被引:18,自引:0,他引:18
采用两步法冷冻技术超低浊保存盐生杜氏藻(Dunaliella salinu(Dunal)Teod.)和青岛大扁藻(Platymonas helgolandica Kylin var.tsigtaoensis)。当二甲基亚砚(DMSO)浓度分别为5%和20%,平衡时间均为min,预冻温度及保持时间分别为-40℃,60min和-30℃,30min;化冻后分别在0℃和到温下采用慢速稀释法去除DMSO时, 相似文献
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吉兰泰杜氏盐藻中类胡萝卜素的分析和鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
利用高压液相色谱(HPLC)技术及IR、^1H NMR、MS、UV等现代测试手段,对吉兰泰杜氏盐藻中的类胡萝卜素等色素及胡萝卜素异构体进行了分析与鉴定。研究结果表明,吉兰泰杜氏盐藻中含有11种类胡萝卜素,其中β-胡萝卜素包含7-顺式、9-顺式、15-顺式、全反式等4种异构体。吉兰泰杜氏盐藻中的这些类胡萝卜素对人体十分有益,具有开发利用的价值。 相似文献
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目的:探讨在不同NaCl浓度下,杜氏盐藻(Dunaliella salina)的3-磷酸甘油脱氢酶(Glycerol 3-phosphate dehydrogen-ase,GPDH)同工酶的活性与其渗透调节相关性。方法:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)技术对在不同NaCl浓度生长的杜氏盐藻的GPDH进行同工酶电泳检测。结果:在0.5mol/LNaCl低盐的条件下,杜氏盐藻具有4种NAD+-GPDH同工酶,分别为GPDH1、GPDH2、GPDH3、GPDH4。当NaCl逐渐分别增高为2.0、3.0、4.0、5.0mol/L时,只有1种NAD+-GPDH同工酶即GPDH1。结论:GPDH1具有较高活性,这与高盐胁迫时细胞大量合成甘油进行渗透调节密切相关。 相似文献
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【目的】通过对杜氏盐藻的转录组进行测序和基因功能分析,阐明不同浓度盐胁迫对杜氏盐藻生长发育以及不同信号途径的影响。【方法】分别获取9%NaCl浓度和24%NaCl浓度培养下的杜氏盐藻转录组并通过Illumina平台进行测序。将所得的序列进行拼接、去冗余处理。【结果】获得40682个unigenes,其中注释到NR数据库的10905个,注释到NT数据库的2768个,注释到SWISS-PROT数据库的7261个,注释到COG/KOG数据库的6499个。受到高盐胁迫的杜氏盐藻细胞相比低盐环境下,有717个基因表达上调,1012个基因表达下调。进一步对60个显著差异基因进行了功能聚类,发现盐胁迫诱导了光合作用途径的基因表达。【结论】杜氏盐藻通过提高光合作用基因表达增强耐盐性。该研究最大范围上挖掘了杜氏盐藻在高盐和低盐环境的基因转录水平,为深入揭示杜氏盐藻盐胁迫下基因差异表达提供了平台,并为进一步研究杜氏盐藻耐盐机理提供理论依据。 相似文献
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杜氏盐藻细胞质膜氧化还原系统与K^+吸收 总被引:3,自引:0,他引:3
杜氏盐藻(Dunaliella salina)细胞表面存在氧化NADH 与还原Fe(CN)3-6 的氧化还原系统(redoxsystem )。该系统在氧化NADH 时,抑制K+ 的吸收,在还原Fe(CN)3-6 时, 促进K+ 的吸收,当NADH 同时存在时, 促进效应最显著, 高达735% 。外源NADH 促进藻细胞的氧吸收达165% ,而使胞质pH 下降; 当NADH 存在时, Fe(CN)3-6 被快速地还原, 同时藻细胞膜外酸化程度增加。质膜H+ -ATPase和氧化还原系统的典型抑制剂都不同程度地抑制K+ 吸收; 并且钒酸盐对K+ 吸收的抑制可以被加入NADH 和Fe(CN)3-6 而部分恢复, 表明质膜H+ -ATPase和氧化还原系统共同参与了细胞K+ 的吸收过程 相似文献
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杜氏盐藻(Dunaliella salina)基因工程的研究现状及应用前景 总被引:2,自引:0,他引:2
杜氏盐藻(简称盐藻)作为新型的生物反应器,成为藻类基因工程的研究热点之一。利用基因工程手段对盐藻进行遗传改造以生产外源物质是目前研究的重要领域。本文从盐藻相关基因的克隆、cDNA文库的建立、基因组文库的构建、筛选标记的确立和外源基因的表达等五个方面全面概述了国内外盐藻基因工程的研究进展,特别是对最新的研究结果进行了综述,并对基因工程技术在盐藻深入研究中的应用做了前景展望。 相似文献
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为探究不同食物及食物密度对盐蚕豆虫(Fabrea salina)种群动力学的影响。本文采用商业酵母和杜氏藻(Dunaliella salina)两种不同类型的饲料喂食盐蚕豆虫,探究其种群动力学特征。结果表明,杜氏藻组的盐蚕豆虫具有较高的生长率[(0.78 ± 0.019)/d]、较低的世代时间[(0.89 ± 0.021)d],内禀生长率为1.49/d,米氏常数值为1 121.32;商业酵母组生长率较低[(0.36 ± 0.001)/d],世代时间较长[(1.93 ± 0.007)d],内禀生长率为0.51/d,米氏常数值为2.68。One-way ANOVA检验结果表明,食物及食物密度对盐蚕豆虫的种群生长均有极显著影响(P < 0.01)。以密度为10 × 109 cells/L的杜氏藻投喂,可在短时间内实现盐蚕豆虫的高密度培养和利用,而酵母适用于实验室中盐蚕豆虫的保种工作。 相似文献
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拟通过探究藻际微生物对微藻生长及代谢产物积累的影响,筛选出促进微藻生长的促生菌株。以杜氏盐藻(Dunaliella salina)Ds-SXYC-2为试材,分离鉴定盐藻藻际环境中的共生菌株,进一步构建藻菌(1∶1)共培养体系、测试盐藻生长及代谢产物积累等表型。结果显示,从杜氏盐藻藻际环境分离获得5株共生菌株,经16S rDNA分子鉴定,属于3个菌属。菌株B1与B2为涅斯捷连科氏菌(Nesterenkonia),菌株B3与B4为盐单胞菌(Halomonas),菌株B5为海杆菌(Marinobacter)。5株共生菌株对杜氏盐藻的生长均有促进作用,菌株B3能显著促进杜氏盐藻生长及代谢产物的积累。共培养15 d后,杜氏盐藻生物量达到2.3 g/L,比对照组增加了28.9%,叶绿素a的含量达到4.61 mg/L,比对照组增加了36.3%,β-胡萝卜素比对照组提高了56.4%。盐藻多糖、蛋白质、总脂含量分别比对照组增加了34.8%、71.2%和37.6%。菌株B3盐单胞菌可以作为促进杜氏盐藻生长及代谢产物累积的优势菌株,进一步构建共培养体系可应用于杜氏盐藻的商业生产。 相似文献
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杜氏盐藻细胞质膜具的氧化NAD(P)H,还原Fe(CN)^3-6和O2的氧化还原系统。当Fe(CN)^3-6浓度为0.6mmol/L,氧化NADH的Km为96μmol/L,Vmax为159nmol10^-8cellsmin^-1,最适pH为8.5。TritonX-100可促进NADH和Fe(CN)^3-6的氧化还原活性。NADH能促进藻细胞的氧吸收,最适pH为8.5。在无外源电子供体存在时,细胞质 相似文献
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杜氏盐藻光系统Ⅰ反应中心psaB基因cDNA克隆及系统进化分析 总被引:2,自引:1,他引:1
杜氏盐藻是一种抗逆性很强的单细胞真核绿藻,能在010525mol/L 的盐水中生长,繁殖1。杜氏盐藻的突出优点在于培养条件简单,光合自养,抗逆性极佳,这些特性为利用其进行实验提供了便利。本研究通过比较现有已知物种的psaB 基因的氨基酸序列,利用 psaB 基因的氨基酸高度保守序列设计一对简并引物,采用 RT2PCR 从杜氏盐藻中克隆了psaB cDNA 片段,为进一步研究杜氏盐藻A2 亚基的结构与功能以及它的光合机理打下基础,同时通过 psaB 基因的进化分析可以更加深刻地了解杜氏盐藻与其他高等植物以及真核藻类之间的亲缘关系.
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