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石蜡包埋组织的DNA提取及其在免疫球蛋白基因重排分析中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
基因重排分析在淋巴瘤诊断中具有重要意义.文章应用改良DNA提取方法,从30例淋巴增生性病变石蜡包埋组织获得的DNA虽有不同程度的降解,但适于PCR扩增Ig重链基因重排分析;约1/3病例提出高分子量DNA,可用于DNA印迹杂交.因此,石蜡包埋组织同样可为某些疾患,如淋巴瘤疑难和罕见病例的回顾性分子病理学研究提供基因诊断的DNA来源. 相似文献
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从植物细胞核分离大分子量核DNA 总被引:5,自引:0,他引:5
研究了从植物中分离百万碱基对级大分子量核DNA的方法。该方法利用差速离心分离植物细胞核,经低熔点琼脂糖块或低熔点琼脂糖微珠包埋,蛋白酶K原位裂解后制备大分子量核DNA。结果表明,选择不同生长时期的材料和不同的包埋细胞核方式对大分子量核DNA的制备有很大的影响,由黄化苗或幼嫩的绿叶为材料分离细胞核,进行胶块包埋是制备大分子量核DNA的最佳条件。利用该法获得的DNA分子量在200kb-5.7Mb之间,主要集中在2.2~5.7Mb之间;每一胶块DNAE量为18~20μg。与包埋原生质体制备大分子量核DNA的方法相比,该方法获得的DNA纯度较高,去除了大部分细胞器DNA的污染;易于被限制性内切酶部分和完全消化,其消化结果具可重复性。该方法操作简单、适用植物种类广泛,用该方法从水稻(OryzasativaL.)、苹果(MaluspumilaMill.)、大豆(Glycinemax(L.)Merr.)、玉米(ZeamaysL.)等多种植物材料中成功地制备了大分子量核DNA。该方法制备的核DNA适用于植物的脉冲交变电泳基因组分析和构建人工细菌染色体文库和人工酵母染色体文库。 相似文献
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一种提取野生苎麻总DNA的方法 总被引:9,自引:0,他引:9
用CTAB法提取野生苎麻总DNA ,结合野生苎麻中酚类、黄酮类等次生代谢物质多的特点 ,加入一定浓度的PVP、β—巯基乙醇 ,可以获得高分子量DNA ,经实验鉴定 ,其纯度符合分子遗传实验要求。 相似文献
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水稻核基因组DNA的YAC克隆和鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
将EcoRI部分消化的水稻(Oryza sativa L.)细胞核高分子量DNA电泳分部,回收大于200kb的片段,与内切酶消化过的酵母人工染色体(YAC)双质粒载体pJs97。pJS98DNA连接,转化酵母YPH252感受态原生质球,用ura-,TrP-双选择培养基直接筛选转化子,已获得2 000多个克隆。转化子DNA的southern杂交显示插入片段在200~820kb范围。 相似文献
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本文利用免疫吸收法和免疫亲和层析法,从艾氏腹水癌患鼠腹水DNA结合蛋白中,分离得到了一种高分子量DNA结合蛋白。在免疫双扩散反应中,它与抗艾氏腹水癌患鼠血清DNA结合蛋白的兎抗血清反应形成一条沉淀线,但与正常小鼠血清DNA结合蛋白的兎抗血清不形成沉淀线。该DNA结合蛋白样品用2-巯基乙醇还原后,经SDC-PAGE分析,测得其分子量约为41000。 相似文献
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简便快速地分离高分子量DNA技术,无论对核酸分子生物学基础研究还是对重组DNA研究都是十分必需的。Blin和Stafford报道了从组织培养细胞中分离高分子量DNA的方法,此方法步骤繁杂,包括酚、氯仿等有毒溶剂抽提、RNase处理、较长时间反复透析乃至长时间氯化铯梯度离心等,所得样品经乙醇沉淀后往往溶解度偏低。但由于此法确能得到较高分子量的DNA制品,所以沿用至今。近年来由于 相似文献
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斜纹刺蛾核型多角体病毒及其核酸的限制性内切酶酶解分析 总被引:1,自引:0,他引:1
本文描述了从自然罹死的斜纹刺蛾(Oxyplax orhracea(moore))幼虫中分离出一种核型多角体病毒。用快速简便方法提取核酸,经限制性内切酶EcoRⅠ、HindⅢ酶解,获得该病毒核酸的酶解带谱。以λDNA的EcoRⅠ酸解片段在凝胶中的迁移率与相应DNA片段分子量的对数值做标准曲线求得其平均分子量为102.09×10~6道尔顿,即为147.77kb。 相似文献