SIK1作为miR-93新的靶基因抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移

该文探讨了SIK1作为miR-93新的靶基因对前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用。采用重组质粒pcDNA3.1-SIK1上调前列腺癌细胞中SIK1的表达后,利用CCK8和克隆形成实验检测细胞增殖;利用细胞划痕和Transwell实验检测细胞侵袭和迁移;利用Western blot检测E-cadherin和Vimentin的蛋白表达。采用生物信息学方法预测靶向SIK1 mRNA的3’UTR的miRNAs并进行筛选;双荧光素酶报告实验和Western blot验证miR-93靶向调控SIK1。结果显示,上调SIK1的表达能抑制前列腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,并增加E-cadherin和减少Vimentin蛋白表达;miR-93能够靶向负调控SIK1。总之,SIK1可作为miR-93一个新的靶基因抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移。     

miR-340通过靶向GRP78促进结直肠癌细胞凋亡并抑制其增殖、迁移和侵袭

miR-340能够促进癌细胞的增殖和侵袭,但是在结直肠癌中miR-340如何调控癌症的发生与发展鲜有报道。本研究探究miR-340在结直肠癌细胞中的生物学功能和靶基因调控机制。首先通过RT-qPCR检测不同的结直肠癌细胞株中miR-340的表达水平,再利用过表达和抑制miR-340,分别转染COLO-205细胞,以CCK-8检测细胞的增殖能力,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力,流式细胞技术检测细胞的凋亡和细胞周期分布;最后通过生物信息学预测miR-340的靶基因,荧光素酶报告基因及Western印迹分析进行验证。结果显示,miR-340在COLO-205细胞中低表达,与对照组比较,细胞的增殖、迁移和侵袭在过表达miR-340转染组显著受到抑制,在抑制miR-340组中却被促进（P<0.01）。流式细胞检测结果显示,过表达miR-340 转染组细胞凋亡比例显著升高,而抑制miR-340 组中凋亡比例却降低（P<0.01）。过表达miR-340 转染组细胞生物信息学分析结果显示,葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78 kD, GRP78）的3′UTR上有miR-340-5p的结合位点,并且荧光素酶活性在转染过表达miR-340 组中显著降低（P<0.01）;Western 印迹结果同样表明,过表达miR-340能够抑制GRP78的表达,而抑制miR-340,GRP78的表达抑制解除。综上所述,miR-340能够直接靶向GRP78来促进COLO-205细胞的凋亡,并抑制其增殖、迁移和侵袭。     

miR-96通过RECK促进结直肠癌细胞的迁移和侵袭

目的:研究miRNA-96在结直肠癌转移中的作用及其机制。方法:采用Transwell试验分析结直肠癌Lo Vo细胞的迁移和侵袭能力,采用荧光素报告基因及蛋白免疫印迹试验研究结直肠癌中miR-96的作用靶点。结果:miR-96抑制剂处理后下调miR-96的表达并抑制Lo Vo细胞的迁移和侵袭。荧光素报告基因试验显示RECK是miR-96的作用靶点,且RECK沉默能够部分阻碍miR-96抑制剂所导致的Lo Vo细胞迁移和侵袭减少。结论:miRNA-96可通过作用于RECK促进结直肠癌细胞转移,这可能成为治疗结直肠癌转移的新靶点。     

微小RNA-30e调控EMT对胃癌侵袭和迁移影响的研究

目的:探讨微小RNA-30e(miR-30e)对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响及可能的作用机制。方法:利用Transwell实验和细胞划痕实验检测胃癌细胞系BGC823侵袭和迁移的能力;以脂质体包裹合成miR-30e转染至BGC823细胞,并设空白载体作为对照组;Real-time PCR分别检测实验组和对照组细胞中miR-30e的表达。RT-PCR检测过表达miR-30e后对上皮细胞间充质转化(EMT)相关标记分子Snail、Vimentin、N-cadherin和E-cadherin表达的影响。结果:miR-30e转染至胃癌细胞后,抑制EMT通路主要因子Snail,Vimentin和N-cadherin m RNA和蛋白质表达,而增加E-cadherin的mRNA和蛋白质表达;miR-30e通过TGF-β对BGC823细胞的侵袭和迁移能力有明显的抑制作用。结论:miR-30e可能是肿瘤细胞EMT过程的关键靶标靶点,阻断EMT过程,可以抑制胃癌细胞的侵袭和迁移能力。     

MiR-150-5p靶向TP53对结直肠癌细胞侵袭和增殖的影响

摘要 目的：探索miR-150-5p靶向调控TP53基因对结直肠癌（colorectal cancer, CRC）在临床和生物学的相关性,研究miR-150-5p调控TP53基因在结直肠癌细胞增殖和侵袭病变中的作用。方法：收集临床手术切除并病理证实的结直肠癌患者的手术及血浆样本（结直肠癌和癌旁组织）60例,另选取癌旁正常粘膜10例,腺瘤30例。根据瘤体直径分为肿瘤＞5 cm（n=30）和≤5 cm（n=30）。qRT-PCR法测定样本中miR-150-5p表达,荧光素酶活性测定以确定TP53是否为miR-150-5p的靶基因。使用SW480细胞株,进行Transwell小室检测细胞侵袭能力,CCK-8检测细胞增值能力,对miR-150-5p进行生物信息学分析。结果：TP53是miR-150-5p的下游基因。癌组织及血浆中miR-150-5p表达量低于癌旁组织,直径＞5 cm瘤体中的miR-150-5p表达量显著低于直径≤5 cm瘤体,Ⅰ-Ⅱ期结直肠癌组织中的miR-150-5p表达显著高于Ⅲ-Ⅳ期（P＜0.05）。上调miR-150-5p后,细胞中TP53表达下降,下调miR-150-5p后,TP53表达升高;CCK-8增殖试验显示细胞中miR-150-5p过表达组抑制细胞增殖（P＜0.05）。结论：MiR-150-5p在结直肠癌组织和细胞中显著低表达,miR-150-5p通过靶向调节TP53抑制人CRC细胞的侵袭和增殖,有望成为结直肠癌治疗的新靶点。     

MiR-196a促进人非小细胞肺癌细胞NCI-H1299侵袭转移的研究

目的:非小细胞肺癌发生、发展的分子机制仍是目前研究的热点与难点,新近研究表明microRNA在肿瘤的发展过程中起着重要的作用.本研究旨在探讨miR-196a在人非小细胞肺癌组织及细胞系中的表达水平,以及抑制miR-196a对非小细胞肺癌细胞侵袭转移能力的影响.方法:通过real-time PCR技术检测人非小细胞肺癌及细胞系中miR-196a的表达水平,通过转染miR-196a inhibitors抑制miR-196a的表达水平,并通过定量PCR检测转染效率.利用transwell实验检测下调miR-196a对NCI-H1299细胞的迁移、侵袭能力的影响.结果:相对于正常肺组织及细胞,在非小细胞肺癌组织和细胞中miR-196a的表达水平出现了显著的上调,NCI-H1299细胞中转染miR-196a inhibitors能显著抑制miR-196a的表达水平且抑制miR-196a的表达能降低NCI-H1299细胞的迁移、侵袭能力.结论:定量PCR结果显示miR-196a在非小细胞肺癌组织及细胞中表达显著上调,而封闭其表达能影响非小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭功能,提示miR-196a的表达上调可能在非小细胞肺癌的发生、发展中起着关键的作用,并有可能作为将来非小细胞肺癌诊断、预后的分子靶标.     

miR-125a-3p调控人结肠癌细胞浸润转移的作用及机制研究

目的:探讨miR-125a-3p在结肠癌细胞浸润与转移中的作用及其可能机制。方法:通过qRT-PCR方法检测miR-125a-3p在结肠癌细胞及组织样本中的表达;在结肠癌细胞过表达或沉默miR-125a-3p后,通过平板克隆实验、MTT实验、划痕实验、Transwell实验检测结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化;采用Western blot方法检测miR-125a-3p过表达后相关标志分子的表达水平变化情况。结果:miR-125a-3p在结肠癌细胞及组织呈现异常低表达;过表达miR-125a-3p抑制结肠癌细胞HCT116及SW480的增殖能力;过表达或沉默miR-125a-3p分别抑制或增强结肠癌细胞的迁移与侵袭能力;过表达miR-125a-3p在mRNA及蛋白水平均能够显著抑制Snail、N-cadherin及Vimentin的表达,而增加E-cadherin的表达。结论:miR-125a-3p参与调节结肠癌细胞浸润与转移,其机制可能是通过调控上皮间质转化途径介导的。     

FOXG1在结直肠癌侵袭及转移中的作用及机制

构建叉头框G1(Forkhead box G1,FOXG1)的慢病毒干扰(shRNA)质粒及表达质粒,通过敲低和过表达FOXG1探讨其对结直肠癌细胞上皮-间质转化EMT的作用及其机制。应用Western blotting检测FOXG1在RKO、SW480、SW620、LOVO、DLD-1五种结直肠癌细胞中蛋白的表达水平,设计并合成FOXG1的shRNA片段(shFOXG1),运用DNA重组技术获得重组质粒,经双酶切技术及测序方法鉴定后进行慢病毒的包装、纯化及稳定转染,经筛选后获得稳定的结直肠癌细胞株,通过Western blotting和qRT-PCR技术检测FOXG1敲低和过表达效率及EMT关键因子E-cadherin、Vimentin、Fibronectin、Snail、Twist mRNA和蛋白的变化,光学显微镜观察敲低后细胞形态学变化,通过划痕实验检测迁移能力变化,Transwell检测侵袭迁移能力的变化。5种结直肠癌细胞中,FOXG1在RKO细胞中蛋白表达量最高,而在DLD-1细胞中表达量最低,与对照组相比较,在RKO细胞中敲低FOXG1,细胞形态由长梭型变成了类圆形或者多边形,细胞极性和紧密连接增加,细胞迁移距离明显降低,侵袭转移穿过小室的细胞数也明显减少,EMT关键因子E-cadherin表达增高,Vimentin、Fibronectin、Snail、Twist表达降低,过表达FOXG1组则相反。FOXG1在结直肠癌中高表达,这种基因的高表达能够促进结直肠癌细胞的侵袭和转移,对结直肠癌细胞的EMT起着重要的调控作用。     

miR-363-3p靶向 TWIST1调控上皮间质转化抑制非小细胞肺癌A549细胞迁移和侵袭

目的探讨miR-363-3p靶向TWIST1调控非小细胞肺癌A549细胞迁移和侵袭的分子机制。 方法将体外培养的A549细胞分为空白对照组（细胞未做任何处理）;模拟物对照组（转染miR-363-3p模拟物阴性对照）;模拟物组（转染miR-363-3p模拟物）;后期实验另设：模拟物+ pcDNA组（转染miR-363-3p模拟物和pcDNA3.1空载体质粒）;模拟物+ TWIST1组（转染miR-363-3p模拟物和pcDNA3.1-TWIST1过表达质粒）。采用RT-PCR检测细胞中miR-363-3p的表达,Western blot检测细胞中TWIST1蛋白和上皮间质转化（EMT）相关蛋白Vimentin、E-cadherin的表达,Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭。双荧光素酶报告基因实验检测miR-363-3p和TWIST1的靶向关系。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。 结果与空白对照组和模拟物对照组比较,模拟物组A549细胞中miR-363-3p表达水平（1.00±0.08、0.97±0.05比3.82±0.45）升高,TWIST1 mRNA （1.00±0.06、0.98±0.06比0.39±0.02）和蛋白的表达水平（0.81±0.05、0.78±0.06比0.42±0.02）降低,差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与空白对照组和模拟物对照组比较,模拟物组A549细胞Vimentin蛋白表达水平（0.58±0.04、0.55±0.05比0.36±0.03）降低,E-cadherin蛋白的表达水平（0.22±0.02、0.25±0.03比0.47±0.03）增高,迁移细胞数（85.75±5.45、83.52±6.85比53.05±4.50）和侵袭细胞数（128.26±6.15、125.95±8.05比71.64±5.75）降低,差异有统计学意义（P均< 0.05）。与模拟物对照组比较,模拟物组细胞中Vimentin蛋白的表达水平（0.55±0.05比0.36±0.03）降低,而E-cadherin蛋白表达水平（0.25±0.03比0.47±0.03）升高,迁移细胞数（83.52±6.85比53.05±4.50）和侵袭细胞数（125.95±8.05比71.64±5.75）均减少（P均< 0.05）。TWIST1是miR-363-3p潜在的靶基因。与模拟物+ pcDNA3.1组比较,模拟物+ TWIST1组A549细胞中Vimentin蛋白的表达水平（0.32±0.02比0.42±0.03）升高,而E-cadherin蛋白表达水平（0.56±0.04比0.38±0.03）降低,A549细胞的迁移数（49.45±4.22比67.52±5.05）和侵袭数（72.45±5.73比108.35±6.56）增加（P均< 0.05）。 结论miR-363-3p可通过靶向TWIST1调控EMT抑制A549细胞迁移和侵袭。     

miR-193a-5p促进人胰腺癌细胞体外迁移和侵袭作用的研究

该研究主要探讨了微小核酸mi RNA-193a-5p对人胰腺癌细胞体外迁移和侵袭的促进作用及其机制。采用miR-193a-5p模拟物及mi R-193a-5p抑制剂分别上调和下调miR-193a-5p的表达;采用细胞划痕法和Transwell小室法检测mi R-193a-5p对细胞迁移和侵袭能力的影响;采用TargetScan 7.1数据库预测miR-193a-5p的靶基因;荧光素酶报告法验证miR-193a-5p的靶基因; Western blot和实时荧光定量PCR验证其表达结果。结果表明, miR-193a-5p可显著促进细胞的迁移和侵袭能力。TargetScan 7.1软件预测, Prox1可能为mi R-193a-5p的靶基因,荧光素酶报告实验显示, miR-193a-5p靶向Prox1基因的3′UTR区。实时荧光定量PCR和Western blot结果显示, miR-193a-5p下调了Prox1的mRNA和蛋白水平的表达。研究结果揭示,在胰腺癌中高表达的miR-193a-5p通过下调Prox1,从而使胰腺癌细胞获得高的迁移和侵袭能力,促进胰腺癌的转移。     

结直肠癌组织miR-137-3p、miR-410-3p表达水平与上皮间充质转化和预后的关系分析

摘要 目的：探讨结直肠癌（CRC）组织微小RNA-137-3p（miR-137-3p）、微小RNA-410-3p（miR-410-3p）的表达与上皮间充质转化（EMT）和预后的关系。方法：选取2017年2月至2019年2月本院收治的115例接受CRC根治术治疗的患者，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测癌组织及癌旁组织中miR-137-3p、miR-410-3p表达、EMT标志物E-钙粘蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的mRNA表达并进行相关性分析，分析癌组织中miR-137-3p、miR-410-3p表达与CRC临床病理特征的关系。术后随访3年，采用Kaplan-Meier法分析miR-137-3p、miR-410-3p高表达和低表达患者的预后情况。结果：癌组织中miR-137-3p表达及E-cadherin mRNA表达水平低于癌旁组织，miR-410-3p表达及Vimentin mRNA表达水平高于癌旁组织（P＜0.05）。癌组织中miR-137-3p表达与E-cadherin mRNA表达水平、miR-410-3p表达与Vimentin mRNA表达水平分别呈正相关（P＜0.05），癌组织中miR-137-3p表达与Vimentin mRNA表达水平、miR-410-3p表达与E-cadherin mRNA表达水平分别呈负相关（P＜0.05）。miR-137-3p、miR-410-3p表达与TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移有关（P＜0.05）。Kaplan-Meier生存曲线分析显示，miR-137-3p低表达、miR-410-3p高表达患者3年累积生存率下降（P＜0.05）。结论：CRC组织中miR-137-3p表达下调、miR-410-3p表达上调，miR-137-3p、miR-410-3p表达水平与EMT密切相关，且miR-137-3p高表达、miR-410-3p低表达患者的预后更好。     

TGF-β1-induced epithelial–mesenchymal transition in lung cancer cells involves upregulation of miR-9 and downregulation of its target,E-cadherin

Background

TGF-β1 plays an important role in the epithelial–mesenchymal transition (EMT) of epithelial cancers, including non-small cell lung cancer (NSCLC). While the full underlying mechanism remains unclear, miR-9 is known to play a critical role in the regulation of NSCLC cell invasion. We tested whether miR-9 targets E-cadherin and thus affects TGF-β1-induced EMT in NSCLC cells by assessing the expression levels of miR-9 and E-cadherin for NSCLC patients and then verifying the targeting of E-cadherin by miR-9 using the dual luciferase reporter system.

Results

MiR-9 was significantly upregulated in NSCLC tissues compared with its level in adjacent normal tissues. The expression of E-cadherin in NSCLC tissues was significantly decreased. In addition, we found that TGF-β1 significantly upregulated the expression of miR-9 and downregulated the expression of E-cadherin. E-cadherin was confirmed as a direct target gene of miR-9. Using an miR-9 inhibitor reversed the TGF-β1-mediated inhibition of E-cadherin expression and upregulation of the mesenchymal marker α-SMA. TGF-β1 significantly induced cell invasion, and this effect was significantly inhibited by miR-9 inhibitors.

Conclusions

TGF-β1 induced EMT in NSCLC cells by upregulating miR-9 and downregulating miR-9’s target, E-cadherin.

     

GABAB receptor inhibits tumor progression and epithelial-mesenchymal transition via the regulation of Hippo/YAP1 pathway in colorectal cancer

Gamma-Aminobutyric Acid Type B Receptor (GABABR) plays essential roles in tumor progression. However, the function of GABABR in colorectal cancer (CRC) needs further clarification. As the main part of GABABR, GABABR1 expression was identified significantly lower in tumor tissues than those in non-tumor normal tissues and that CRC patients with high GABABR1 expression lived longer. Further studies indicated that knockdown of GABABR1 elevated CRC cell proliferation, migration, and invasion. Furthermore, knockdown of GABABR1 activated the expression of the epithelial-mesenchymal transition (EMT)-related proteins N-cadherin and Vimentin, whereas decrease the protein level of E-cadherin. In addition, activation of Hippo/YAP1 signaling contributes to the GABABR1 down-regulation promoted proliferation, migration, invasion and EMT in CRC cells. At last, we verified the contribution of Hippo/YAP1 signaling in the GABABR1 down-regulation impaired biological phenotype of colon cancer cells in vivo. In summary, these data indicate that GABABR1 impairs the migration and invasion of CRC cells by inhibiting EMT and the Hippo/YAP1 pathway, suggesting that GABABR1 could be a potential therapeutic target for CRC.     

RBP-J promotes cell growth and metastasis through regulating miR-182-5p-mediated Tiam1/Rac1/p38 MAPK axis in colorectal cancer

BackgroundRBP-J is involved in number of cellular processes. However, the potential mechanisms of RBP-J on colorectal cancer (CRC) development have not been clearly defined. In this study, we aimed to investigate the role and molecular mechanism of RBP-J in CRC.MethodsThe expression levels of RBP-J and Tiam1 in CRC tissues and cells were evaluated by RT-qPCR or western blot. RBP-J was knocked down with sh-RBP-J or overexpressed by pcDNA3.1-RBP-J in CRC cells. Cell proliferation, migration and invasion abilities were analyzed by MTT, wound healing, and transwell assay, respectively. CHIP-qPCR, RIP and dual luciferase reporter assays were performed to confirm the interaction between miR-182-5p and RBP-J or Tiam1. Expression levels of p-p38 MAPK, p38 MAPK, Slug-1, Twist1 and MMP-9 were analyzed by western blot. G-LISA test was used to detect Rac1 activity.ResultsOur results showed that the expression of RBP-J and Tiam1 was significantly up-regulated in CRC tissues and cells. RBP-J overexpression promoted proliferation, migration and invasion of CRC cells. Moreover, RBP-J was found to directly target miR-182-5p promoter and positively regulate the Tiam1/Rac1/p38 MAPK signaling pathway in CRC cells. It was also proved that miR-182-5p can bind Tiam1 directly. Furthermore, experiments revealed that RBP-J could promote CRC cell proliferation, migration and invasion via miR-182-5p-mediated Tiam1/Rac1/p38 MAPK axis. In addition, knockdown of RBP-J reduced tumor growth and metastasis in CRC mice.ConclusionRBP-J regulates CRC cell growth and metastasis through miR-182-5p mediated Tiam1/Rac1/p38 MAPK signaling pathway, implying potential novel therapeutic targets for CRC patients.     

MiR-301b抑制转录因子Klf4影响肝癌细胞迁移

目的:探讨mi R-301b对肝癌细胞迁移能力的影响及其分子机制,为肝癌的分子靶向治疗研究提供新线索。方法:体外培养人肝癌细胞株SK-Hep-1、HCC-LM3和人永生化肝细胞株L02,采用RT-PCR方法检测mi R-301b表达。通过生物信息学软件Targetscan及mi Randa预测mi R-301b的靶基因,筛选出转录因子Klf4基因为mi R-301b的下游靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验和Western Blot实验证明其调控作用。通过划痕和Transwell实验探究mi R-301b靶向Klf4基因对肝癌细胞迁移性的影响,Western Blot检测mi R-301b对上皮间质转化标记物E-cadherin、N-cadherin蛋白表达的影响。结果:与正常肝细胞相比,肝癌细胞株中mi R-301b表达水平明显升高。瞬时转染mi R-301b mimic后,实验组mi R-301b的表达显著高于对照组;瞬时转染mi R-301b inhibitor后,实验组mi R-301b的表达显著低于对照组。双荧光素酶报告基因实验显示:mi R-301b直接作用于Klf4基因的3'UTR区,并下调Klf4蛋白的表达,与软件预测结果相符合。划痕实验及Transwell迁移实验显示:mi R-301b通过下调Klf4基因,促进肝癌细胞的迁移。进一步实验显示:过表达mi R-301b显著下调E-cadherin的表达,而上调N-cadherin的表达。结论:mi R-301b在肝癌细胞SK-Hep-1、HCC-LM3中高表达,可能通过抑制靶基因Klf4的表达,促进肝癌的迁移,mi R-301b可能参与了肝癌细胞的上皮间质转化过程。     

miR-142通过靶向HMGB1对宫颈癌细胞生物学行为影响的实验研究

摘要 目的：通过实验探究miR-142靶向高迁移率族蛋白1（high-mobility group box 1 protein,HMGB1）对宫颈癌（cervical cancer,CC）细胞生物学行为的影响及其潜在的作用机制。方法：采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）和蛋白质免疫印迹法（Western Blot）检测CC组织和正常组织中miR-142和HMGB1 mRNA及蛋白表达水平,采用荧光素酶报告实验分析miR-142与HMGB1的靶向关系,CCK-8法检测CC细胞生存能力,克隆形成实验检测CC细胞增殖能力,划痕修复实验检测CC细胞迁移能力,基质胶侵袭实验检测CC细胞侵袭能力。结果：CC组miR-142 mRNA和蛋白表达水平显著低于正常组（P<0.05）,HMGB1 mRNA和蛋白表达水平显著高于正常组（P<0.05）,且CC癌组织中miR-142和HMGB1 mRNA和蛋白表达水平均呈显著负相关（r=-0.399,P=0.002;r=-0.429,P=0.001）;miR-142与HMGB1存在靶向关系;CCK-8法实验、克隆形成实验、划痕修复实验和基质胶侵袭实验结果显示,miR-142 mimic组细胞生存、增殖、迁移和侵袭能力显著低于miR-NC组（P<0.05）,miR-142 inhibitor组细胞生存、增殖、迁移和侵袭能力显著高于miR-NC组;Western Blot实验结果显示,HMGB1过表达时miR-142 mimic+plasmid组HMGB1蛋白表达水平显著高于miR-142 mimic+control plasmid组（P<0.05）,显著低于miR-NC+plasmid组（P<0.05）;CCK-8法实验、克隆形成实验、划痕修复实验和基质胶侵袭实验结果显示,HMGB1过表达时miR-142 mimic+plasmid组细胞生存、增殖、迁移和侵袭能力显著高于miR-142 mimic+control plasmid组（P<0.05）,显著低于miR-NC+plasmid组（P<0.05）。结论：miR-142可通过靶向负调控HMGB1表达,进而抑制CC细胞生存、增殖、迁移和侵袭。     

LncRNA UNC5B-AS1对肺癌细胞黏附、侵袭及迁移的影响及其机制*

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)UNC5B-AS1调控miR-218-5p的表达影响肺癌细胞黏附、侵袭和迁移及其作用机制。方法:选取2017年6月至2019年6月在重庆三峡中心医院肿瘤科经手术切除的20例肺癌患者癌组织和对应癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺癌组织和癌旁组织及其支气管上皮细胞HBE和不同肺癌细胞A549、H1437、H1975、H1299和H460中UNC5B-AS1的表达。将UNC5B-AS1 siRNA转染至肺癌A549细胞,采用黏附实验、Transwell侵袭实验及划痕实验检测下调UNC5B-AS1对A549细胞黏附、侵袭和迁移能力的影响;qRT-PCR和双荧光素酶报告基因检测实验鉴定UNC5B-AS1对miR-218-5p的靶向调控关系;Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达情况。结果:肺癌组织和细胞中UNC5B-AS1表达显著高于癌旁组织和支气管上皮细胞(P＜0.05),UNC5B-AS1在肺癌A549细胞中的表达量最高(P＜0.05)。下调UNC5B-AS1的表达能够抑制A549细胞黏附、侵袭和迁移能力(P＜0.05)。qRT-PCR和双荧光素酶报告基因检测结果表明UNC5B-AS1能靶向调控miR-218-5p的表达。下调UNC5B-AS1可抑制E-cadherin蛋白表达,促进Vimentin和Twist蛋白表达。结论:lncRNA UNC5B-AS1通过靶向调控miR-218-5p的表达促进肺癌细胞黏附、侵袭和迁移,其作用机制可能与促进EMT的发生有关。