脱卤酶化学修饰的研究

脱卤酶是催化α-卤酸转化为α-羟基酸的酶。本文用各种化学修饰剂对脱卤酶YL、109和H-2进行化学修饰。实验结果表明作用于丝氨酸、赖氨酸、色氨酸残基的试剂对酶活无明显影响,而作用于组氨酸、精氨酸和带羧基氨基酸残基的试剂使酶活降低。底物对化学修饰剂有保护作用。组氨酸、精氨酸和带羧基氨基酸(答氨酸或天冬氨酸)残基为脱卤酶活力所必需。     

磷酸化组氨酸研究进展

蛋白质磷酸化是生物体内一种广泛存在的蛋白质翻译后修饰形式,这种氨基酸与磷酸基团共价连接的修饰模式对蛋白质结构和功能起到了重要调节作用.目前天然蛋白质中发现的可磷酸化位点主要有9种氨基酸残基,其中包括以磷酰胺连接的磷酸化组氨酸.虽然该磷酸化形式在原核生物与真核生物中都起到了重要的调节作用,但对于其生物学功能的研究长期存在技术困难.由于磷酸化组氨酸本身不同于其他磷酸化氨基酸的化学性质,如存在异构体、化学不稳定等,其在传统的研究方法中容易发生水解去磷酸化.随着现代生物化学与分子生物学技术的不断进步,人们针对含有磷酸化组氨酸的蛋白质构建了新的制备、分离与表征策略,本领域也因此开始迅速发展.本文从磷酸化组氨酸的化学结构入手,分析其两种异构体的主要理化性质与化学反应特性,并概述了基于此发展的新型化学生物学研究手段以及对于磷酸化组氨酸生物功能的研究进展.     

蛋白组氨酸磷酸酶研究进展

主要概括磷酸酶的种类,原核细胞磷酸组氨酸生物功能及调控,哺乳动物组氨酸残基磷酸化、去磷酸化,以及组氨酸磷酸酶及其底物的最新研究进展. 信号转导在生长发育及细胞功能中起极其重要的作用. 无论在原核还是真核细胞,蛋白质磷酸化是细胞内信号转导的关键机制. 研究最多的可逆的真核蛋白磷酸化,主要发生在含有羟基的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基上. 不同的激酶和磷酸酶受不同机制的调节,而调节过程中出现的差异是人类很多疾病的潜在基础. 与大量有关羟基磷酸化氨基酸的报道相比,有关氨基磷酸化氨基酸的报道甚少. 据估计,自然界中存在的磷酸组氨酸比磷酸酪氨酸多10 ~ 100倍,但不如磷酸丝氨酸丰富. 虽然对脊椎动物蛋白质中存在磷酸组氨酸的认识可以追溯到20世纪60年代初, 但由于研究手段的限制,至今对脊椎动物蛋白组氨酸激酶及组氨酸磷酸酶的结构及功能知之甚少. 但是,近几年的研究有突破性的发现,克隆和重组表达哺乳动物组氨酸磷酸酶为研究氨基磷酸化氨基酸的生物功能翻开新的一章.     

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的化学修饰

 蛋白酶是嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)的重要致病因子 .为研究其结构与功能之间的关系 ,用DEPC、EDC、PMSF、N AI等 9种化学修饰剂处理嗜水气单胞菌J 1株胞外蛋白酶ECPase54,然后检测残余酶活力 ,借以研究酶分子中氨基酸侧链基团与酶活性中心的关系 .结果表明 ,羧基、丝氨酸、ε 氨基、胍基等残基与酶活性无关 ;半胱氨酸残基与酶活性也无直接关系 ;而色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基侧链以及二硫键的化学修饰引起酶活性的大幅度的下降 ,说明色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基以及二硫键是酶活力所必需的基团     

含硫氨基酸的抗氧化作用

抗氧化剂是维持动物体内自由基平衡和稳定的重要物质。甲硫氨酸(Met)和半胱氨酸(Cys) 是组成蛋白质的2种含硫氨基酸,基于其独特的结构,在动物体内起着与动物营养与免疫相关的重要生理功能,而其抗氧化能力越来越受关注。综述了蛋白质Met残基的氧化还原作用和含硫氨基酸的代谢产物谷胱甘肽(GSH)的抗氧化作用。     

WW结构域——蛋白质-蛋白质相互作用的一种模式

WW结构域是由38～40个氨基酸残基严密组织形成一个连贯、紧凑的结构域;它以包含两个色氨酸残基为主要特征,能专一地与含有XPPXY保守序列的蛋白质相互作用.这种相互作用涉及许多细胞内事件,如非受体信号传导、转录调节、蛋白质降解等等,并且这种相互作用的变化会直接或间接影响到人体的正常生理代谢功能而引起疾病.     

猪心线粒体F_1-ATP酶的水解活性与色、酪氨酸残基相关的构象的关系

线粒体H~ -ATP酶具有双向功能,即ATP的合成与ATP的水解。H~ -ATP酶的头部F_1具有催化这二种功能的活性部位,F_1的活性表现位与它结合核苷酸的类型、数目以及亲和力有关。至于F_1分子活性部位中什么结构与这两种功能有关,目前尚不肯定。自1960年以来关于线粒体F_1的水解功能与其结构中氨基酸残基关系的研究,多采用特异的化学试剂去修饰某些氨基酸残基,然后测其水解活力被抑制的情况。Senior认为不是含—SH基的半胱氨酸而是酪氨酸残基,还可能包括色氨酸残基与ATP的水解有关。也有报道认为是与组氨酸、谷氨酸或精氨酸残基有关。现在蛋白质结构     

赖氨酸乙酰化在代谢相关疾病中的调控机制

赖氨酸乙酰化是把来自于乙酰CoA的乙酰基团转移到靶蛋白赖氨酸的ε-NH3＋上,是蛋白质翻译后的一种可逆修饰过程,受乙酰基转移酶（HAT／KAT）和去乙酰化酶（HDAC／KDAC）的共同调节。赖氨酸乙酰化通过对细胞内多种蛋白质的修饰调节,可以控制体内多种代谢过程,如调节糖类、脂类、氨基酸、核苷酸及次级代谢物的代谢等.因而,细胞内赖氨酸乙酰化失调,可影响与代谢相关的多种疾病,如肥胖症、糖尿病和心血管疾病等。随着对蛋白质乙酰化研究的深入,发现赖氨酸乙酰化与细胞免疫状态及神经退行性疾病,如阿尔茨海默氏症和亨廷顿综合征等也有关。对近年来赖氨酸乙酰化在代谢调控及与代谢相关疾病如心血管疾病和免疫代谢疾病中的分子调控机制进行综述。     

虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ中组氨酸残基的修饰与活性的关系

用焦碳酸二乙酯 (DEPC)对虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ (HWTX Ⅰ )分子中的组氨酸残基进行了修饰 .修饰后的产物用高压液相色谱分离后采用质谱及氨基酸组成分析等相关技术进行鉴定 ,结果表明 ,DEPC对HWTX Ⅰ的修饰产生了咪唑环的单取代和咪唑环的双取代两种产物 .对修饰后的两种产物测定了对小鼠膈神经膈肌接头传递的影响 ,与天然的HWTX Ⅰ比较 ,组氨酸修饰后的HWTX Ⅰ其活性下降了 92 % ,证明组氨酸残基是HWTX Ⅰ活性相关残基     

NLRP3炎性体与代谢性疾病的研究进展

代谢性疾病是由体内氨基酸、葡萄糖和脂质代谢紊乱引起的一类疾病,慢性炎症反应是其重要特征之一.Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎性体是位于细胞内的一种蛋白质复合体,主要功能为活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)以间接调控白介素1β(IL-1β)、IL-18和IL-33等的成熟和分泌.NLRP3炎性体是炎性体相关研究的热点,多种内源性或外源性危险信号通过激活这一蛋白质复合体上调炎性因子的表达水平,从而促进多种代谢性疾病的发生发展.本文对NLRP3炎性体的结构、功能、调节以及在代谢性疾病中的作用做一综述,以期为代谢性疾病的防治提供新靶点.     

双杂合系统及其应用

蛋白质与蛋白质的相互作用是生物体内包括复制、转录、分泌、信号传导、代谢等生命活动得以进行的物质基础．以基因工程技术为基础的双杂合系统可以在体内检测蛋白质与蛋白质的相互作用,并推广应用到寻找同某已知蛋白质相互作用的未知蛋白质,直接克隆未知蛋白质的基因,鉴别同已知蛋白质相互作用的关键氨基酸残基,绘制蛋白质联系图谱等．双杂合系统在药物设计中的应用使其具有更重大的实用价值．     

枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶活性中心氨基酸的化学修饰

运用化学修饰方法对枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶活性中心的结构进行了研究。结果表明,除了色氨酸和巯基(Cys)外,羧基(Asp/Glu)和丝氨酸残基亦是该酶活性必需氨基酸残基;尽管组氨酸残基对酶活性的维持有重要作用,但不位于酶的活性中心。     

人血清中游离色氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸的微量测定——附我国健康成人测定值报告

测定人血清中游离氨基酸、特别是某些特殊氨基酸含量的变化,作为研究蛋白质代谢的指标,在临床医学研究方面已有很多报道。目前从测定生物体液和组织中,个别或某些氨基酸浓度的变化,已能诊断六十余种先天性氨基酸代谢缺陷的疾病,从而指导治疗。如患苯酮尿症的婴儿,血清中游离苯丙氨酸浓度可高出常人数倍,游离酪氨酸浓度则减低,如能在出生后短期内作出诊断并限制食物中苯丙氨酸含量,     

卫星电视教学辅导

蛋白质是细胞内含量最丰富,具有极其重要功能的生物大分子。本章着重介绍蛋白质及其基本组成单位氨基酸的分解与合成代谢。生物体内具有各种蛋白酶,可以把蛋白质降解为氨基酸。以人和动物消化道中的蛋白酶为例,按其作用方式不同可以分为肽链外切酶,肽链内切酶及二肽酶。在这些酶的综合作用下,蛋白质水解成氨基酸,进入细胞内代谢。各种氨基酸虽侧链基团各不相同,但都具有氨基和羧基,因而具有共同的分解代谢途径——脱氨基作用与脱羧基作用。本章仅介绍氨基酸的共同的分解代     

我国各名茶和茶类中游离氨基酸含量与组成

<正> 茶树中的氨基酸不但是体内合成与代谢产物的先质,而且也是构成茶叶色香味重要生化成份。目前从茶叶中发现并鉴定的25种氨基酸中,就有18种对茶叶品质有较大影响。如谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸、组氨基、丙氨酸、赖氨酸等氨基酸能增进茶叶的鲜爽味。此外,一些氨基酸在茶叶加工中还可脱羧氧化生成相应的醛类,构成茶叶香气。经分析测定,氨基酸与茶叶品质的相关系数达0.7—0.8,呈显著水平,故有“茶叶等级因子”     

浅谈蛋白质资源的开发与利用

蛋白质是一类重要的高分子化合物 ,是细胞的主要成分 ,其结构复杂 ,种类繁多 ,且功能各异 ,如酶的生物催化作用、激素的代谢调节作用、球蛋白的免疫保护作用、血红蛋白对 O2 和 CO2 的运输作用和核蛋白的遗传和变异作用等。总之蛋白质是生命活动的物质基础 ,为生命活动所必需。实验证明人体蛋白质的 2 0种氨基酸中 ,有 8种是体内需要 ,但又不能合成必须由食物供给的氨基酸 ,称营养必需氨基酸。从现代营养学的观点看 :确定食物蛋白质的营养价值 ,不仅要看蛋白质的含量是否高 ,还要看必需氨基酸的配比是否协调 ,是数量与质量的双重指标 ,随…     

氨基酸调控肝脏糖脂代谢的作用与机制

氨基酸是人必需的营养物质,具有广泛的生物学功能,它是蛋白质的组成单位,能量代谢物质。此外,它还作为信号分子广泛参与对多种生理功能的维持与调控,并在转录、翻译、翻译后修饰等多个层面上发挥作用。肝脏是关键的代谢器官,它充当连接各种组织代谢的枢纽。氨基酸感应在肝脏糖脂代谢的调控中起到十分重要的作用。因此准确地感应细胞内和细胞外氨基酸的水平,成为维持细胞内稳态的关键。真核细胞中存在一些众所周知的氨基酸感应因子,即一般性调控阻遏蛋白激酶2 (general control non-derepressible-2, GCN2)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)以及味觉受体等,在维持机体代谢稳态中发挥重要作用。本文对氨基酸调控肝脏糖脂代谢的作用与机制做了详细介绍,为进一步探究氨基酸感应机制以及治疗肝脏糖脂代谢紊乱疾病奠定了基础。     

硫酸类肝素中的N－非取代葡糖胺残基的功能、结构与生物合成

硫酸类肝素在人类的某些重大疾病如癌症、艾滋病、老年痴呆症中扮演着一些 重要的角色,因而是现今糖类化合物中研究的热门焦点之一.近年的研究表明, 硫酸 类肝素中所含的微量结构,即N－非取代葡萄糖胺残基有着重要的生物学与病理生理学 作用.它与病毒的侵入、脑组织损伤、蛋白聚糖的体内循环等作用密切相关.对硫酸类 肝素中N－非取代葡糖胺残基的结构、功能及其生物体内合成途径的研究将有助于揭 示某些疾病的发病机制,为改善诊断方法和发展药物提供可能.本文综述近10多年来 国内外在该领域的最新研究进展.     

关于食品中必需氨基酸的营养评价

<正> 蛋白质是人体重要组成部分,是生命的物质基础。人体中一些重要的生理物质都是由蛋白质构成的,如:血浆蛋白、血红蛋白、激素、维生素、酶和抗体等。而组成蛋白质的基本单位是氨基酸。在人体和自然界中常见的氨基酸约有20多种。组成蛋白质的各种氨基酸,虽然对人体来说是不可缺少的,但并非都需要直接从食物中供给。有些氨基酸可以在人体内合成,但有8种氨基酸在人体内不能按需要合成,必须从每日膳食     

鳗弧菌胞外金属蛋白酶的化学修饰研究

用DEPC、EDC、DTNB、PMSF等8种化学修饰剂对鳗弧菌胞外金属蛋白酶进行了化学修饰。结果表明化学修饰后酶的活力发生了改变,其中组氨酸、酸性氨基酸、半胱氨酸残基的化学修饰引起酶活性的明显降低,说明组氨酸残基、酸性氨基酸、半胱氨酸残基及其二硫键在维持酶活力中发挥重要作用,是酶活力所必需;而对精氨酸、丝氨酸、ε-氨基等修饰后酶活性影响较小,表明不是酶的活性所必须的基团。